运动状态下白细胞介素6介导骨保护素相关因子信号通路对骨代谢的调节

背景：骨保护素-核因子κB受体活化因子配体-核因子κB受体活化因子信号通路是调节骨代谢的经典通路,白细胞介素6和该信号通路存在相关性,运动对骨代谢的影响机制与二者的调节作用密切相关。 目的：研究运动状态下白细胞介素6介导骨保护素-核因子κB受体活化因子配体-核因子κB受体活化因子信号通路对骨代谢活动的调节,揭示运动状态下此信号通路的内在联系。 方法：检索CNKI、EBSCO和Elsevier数据库中有关运动应激、白细胞介素6、骨保护素-核因子κB受体活化因子配体-核因子κB受体活化因子信号通路的论文,选取其中39篇具有代表性和最新研究进展的论文为参考文献进行分析整合,揭示运动、白细胞介素6及信号通路之间的关系。 结果与结论：目前研究表明白细胞介素6和骨保护素-核因子κB受体活化因子配体-核因子κB受体活化因子信号通路在骨代谢过程中密切相关,在不同运动负荷和强度状态下白细胞介素6和该信号通路的表达,呈现出特异性的运动应激的反应与适应。研究结果不仅有助于揭示运动健骨机制,而且可应用于骨关节病的预防与治疗领域。     

骨代谢中甲状旁腺激素对相关蛋白和核因子κB受体活化因子的调节

背景：甲状旁腺激素是影响骨代谢功能轴最主要的因素。同时也是调控骨保护素和核因子κB受体活化因子配基表达的重要激素。 目的：通过查阅甲状旁腺激素对骨保护素、核因子κB受体活化因子配基调控作用的相关文章,并对其进行综述。 方法：以“甲状旁腺激素,骨保护蛋白,核因子κB受体活化因子”或“Parathyroid hormone, osteoprotegerin, receptor activator of nuclear factor κB ligand”为检索词,由第一作者通过计算机检索 CNKI、HighWire数据库中关于“甲状旁腺激素与骨保护素/核因子κB受体活化因子配基/核因子κB受体活化剂”的相关的论文报告。选择的文章内容与甲状旁腺激素对信号通路的影响有关、近期发表的文献,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入31篇文章。 结果与结论：甲状旁腺激素是调节骨代谢最主要的因素,通过增强破骨细胞活动增强而实现的。核因子κB受体活化因子配基是调节骨吸收的关键因子,它通过与核因子κB受体活化剂结合发挥功能。核因子κB受体活化因子配基与核因子κB受体活化剂结合后,启动核因子κB受体活化因子配基信号转导,骨保护素则与核因子κB受体活化因子配基竞争性结合核因子κB受体活化剂,核因子κB受体活化因子配基/骨保护素比值决定破骨细胞分化、成熟及功能。长时间、大强度的运动条件下,机体内甲状旁腺激素的变化是否对于骨保护素、核因子κB受体活化因子配基有影响,进而调节骨代谢的吸收与合成？还有待进一步的研究。     

小分子肽对成骨前体细胞MC3T3-E1骨保护素和核转录因子κB受体活化因子配体表达的影响

背景：体内实验显示,小分子肽能明显增加去卵巢大鼠的骨钙含量,使其骨密度增加,能很好地预防骨质疏松。同时体外实验显示,小分子肽能促进小鼠成骨细胞和成骨前体细胞MC3T3-E1增殖、分化、矿化,并且可能是通过抑制核转录因子 p50和p65的表达来起作用。而小分子肽对骨保护素/核转录因子κB受体活化因子配体的影响尚不明确。 目的：观察小分子肽对MC3T3-E1在增殖、分化、矿化过程中骨保护素和RANKL表达的影响。 方法：以体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液为空白对照组,50,100 mg/L质量浓度小分子肽作用小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1,分别于作用3,6,12,18,24,30 d后,收集细胞提取蛋白,Western Blot检测骨保护素和核转录因子κB受体活化因子配体蛋白的表达。 结果与结论：50,100 mg/L小分子肽作用MC3T3-E1后能明显促进作用骨保护素的表达(P < 0.01),而对核转录因子κB受体活化因子配体无明显影响。小分子肽作用后MC3T3-E1中骨保护素/核转录因子κB受体活化因子配体的比值要明显高于空白对照组(P < 0.01)。因此,认为小分子肽可以通过增加骨保护素的表达来影响骨保护素/核转录因子κB受体活化因子配体系统,间接地抑制破骨细胞的数量和功能。     

低频脉冲电磁场干预绝经后骨质疏松患者血清护骨素及核因子κB受体 活化子配体的变化

背景：脉冲电磁场能克服传统治疗方法的缺陷,对骨质疏松引起的疼痛、骨量减少、骨密度降低具有肯定的治疗作用。 目的：探讨低频脉冲电磁场治疗绝经后骨质疏松的作用机制。 方法：应用双能X 射线骨密度仪测量150 例绝经后妇女腰椎骨密度,按WHO标准诊断,无骨质疏松患者50例、骨质疏松患者100例。将骨质疏松患者随机分为骨质疏松组和低频脉冲电磁场治疗组,分别给予钙剂口服或钙剂口服+连续14 d的低频脉冲电磁场治疗。 结果与结论：各组患者基线资料具有可比性。与无骨质疏松患者比较,骨质疏松患者腰椎骨密度明显降低(P < 0.01),经低频脉冲电磁场治疗后无明显改变(P > 0.05),但患者血清β-1型胶原C-末端肽明显降低(P < 0.05)、骨钙素明显升高(P < 0.01)。与骨质疏松组比较,其他两组患者血清护骨素明显升高(P < 0.05);低频脉冲电磁场治疗组患者血清核因子κB受体活化子配体明显降低(P < 0.05)。说明低频脉冲电磁场干预14 d对骨质疏松有良好的防治作用。     

保留残端与不保留残端重建前交叉韧带腱骨愈合情况比较

BACKGROUND: Reconstruction with remnant preservation can enhance tendon-bone healing. However, the study limits on the histological level, and there is a lack of research based on the modular biological level. OBJECTIVE: To investigate whether anterior cruciate ligament reconstruction with remnant preservation can enhance tendon-bone healing. METHODS:Seventy-two New Zealand rabbits were randomly allocated to three groups (n=24 per group), followed by cruciate ligament reconstruction without remnant (group A), with remnant preservation (femoral tensioning and augmented suture) (group B) and with remnant preservation (graft passing remnant anterior cruciate ligament sheath) (group C), respectively. RESULTS AND CONCLUSION:Hematoxylin-eosin staining showed that the tendon-bone healing in the groups B and C surpassed that in the group A, and group B was better than group C. Real-time PCR revealed that the expression level of osteoprotegrin mRNA and the osteoprotegrin/receptor activator of nuclear factor-κB ligand (RANKL) ratio were greater in the groups B and C than in the group A, and highest in the group C, while the expression levels of RANKL mRNA in the groups B and C were lower than that in the group A. In conclusion, these two kinds of anterior cruciate ligament reconstruction methods with remnant preservation can enhance tendon-bone healing, which have obtained most obvious achievements in the anterior cruciate ligament reconstruction in the graft passing anterior cruciate ligament remnant sheath that may be related to the up-regulation of osteoprotegrin mRNA and down-regulation of RANKL mRNA. 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

犬切牙压低移动过程中牙周组织骨保护素/核因子κB受体活化因子配体的表达

背景：骨保护素及核因子κB受体活化因子配体是调控破骨细胞生成和活化的关键因子,机械力可影响牙周膜细胞和成骨细胞骨保护素及核因子κB受体活化因子配体的表达。 目的：观察犬切牙压低移动过程中牙周组织中骨保护素/核因子κB受体活化因子配体的表达。 方法：采用微型种植体作为支抗,将犬切牙分别施加牵引力1,2,4,12周,并设置对照组进行比较。牵引后切取犬切牙连同牙龈及牙槽骨组织块,制作组织切片进行骨保护素及核因子κB受体活化因子配体免疫组织化学染色,用Image-Proplus软件半定量分析图像平均吸光度值。 结果与结论：与对照组相比,核因子κB受体活化因子配体和骨保护素分别在在施加牵引力1和2周表达最显著,其平均吸光度值在施加牵引力1和2周时可达到峰值(P < 0.05),随后逐渐下降,施加牵引力12周恢复至对照组水平。结果证实,正畸牙压低移动过程中核因子κB受体活化因子配体及骨保护素的表达变化规律与骨改建过程一致,骨保护素/核因子κB受体活化因子配体系统是牙周组织改建的重要调节因素。     

中药骨康调控成骨细胞核内结合因子α1的表达

背景：中药骨康在临床上治疗骨质疏松疗效明确,但其具体作用途径尚不清晰。 目的：假设中药骨康通过调节核内结合因子a1水平,控制其下游基因核因子κB受体活化因子配体和骨保护素表达,起到调控成骨细胞生长发育的作用。 方法：新生24 h内的SD乳鼠用于成骨细胞的分离培养。成年SD雌性大鼠用于制备药物血清,随机分为正常血清组和中药骨康组。2组大鼠按体表面积的方法给予中药骨康方的提取药物和生理盐水灌胃,连续给药1周。最后一次用药后2 h行心脏采血,分离血清。原代培养并传至第3代经碱性磷酸酶鉴定取得的大鼠成骨细胞,消化计数铺板并分为2组,以上述血清处理72 h,MTT法检测成骨细胞的增殖率,ELISA方法检测碱性磷酸酶分泌量并以相应吸光度值进行纠正,运用RT-PCR检测2组成骨细胞核内结合因子α1及其下游核因子κB受体活化因子配体和骨保护素mRNA表达情况。 结果与结论：中药骨康组成骨细胞骨保护素和核内结合因子a1 mRNA水平显著高于正常血清组,核因子κB受体活化因子配体蛋白和mRNA水平显著低于正常血清组(P < 0.01)。实验结果证实,中药骨康可通过影响核内结合因子a1表达,调控其下游基因核因子κB受体活化因子配体和骨保护蛋白表达和分泌,进而发挥治疗骨质疏松的作用。     

不同矫治正畸作用下牙周骨改建过程中压力侧相关因子的变化

背景：近年来研究表明核因子κB受体活化因子配体与正畸牙移动骨改建过程中破骨细胞的形成、分化和功能密切相关。 目的：观察不同矫治器正畸作用下兔牙周组织改建过程中压力侧组织核因子κB受体活化因子配体表达的变化,探讨不同矫治器的正畸效果。 方法：将64只健康大耳白兔随机分为4组：对照组、MBT矫治器组、Begg矫治器组、Damon Ⅲ矫治器组,每组16只。MBT矫治器组、Begg矫治器组、Damon Ⅲ矫治器组分别应用对应的矫治器对兔上颌切牙和第一磨牙进行矫治,近中移动牵引力为80 g;对照组不进行矫治。分别于矫治后第3,7,14,21天每组取4只白兔进行检测。 结果与结论：苏木精-伊红染色显示加力后各矫治器组压力侧牙周膜腔变窄,牙槽骨边缘出现骨吸收陷窝。抗酒石酸酸性磷酸酶染色显示,矫治7 d时,骨改建活跃,破骨细胞数量达到高峰;同时实时荧光定量PCR检测发现加力后压力侧牙槽骨组织中核因子κB受体活化因子配体mRNA的表达明显增高,并于加力后第7天达到最高峰,而后逐渐降低。加力第7天时,Damon Ⅲ矫治器组破骨细胞数量和核因子κB受体活化因子配体mRNA表达水平均明显高于MBT矫治器组和Begg矫治器组(P < 0.05)。提示在骨改建过程中核因子κB受体活化因子配体mRNA表达的变化规律与破骨细胞数量相一致,Damon Ⅲ矫治器的矫治效果优于MBT矫治器、Begg矫治器。     

自拟补肾活血颗粒对去卵巢骨质疏松症大鼠的治疗作用

目的:观察自拟补肾活血颗粒(MBHG)对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用。方法:雌性SD大鼠,随机取10只作为假手术组(sham组),其余大鼠制备去卵巢骨质疏松症,随机分为:模型(model)组;补肾活血颗粒高(200 mg/kg)、中(100 mg/kg)、低(50 mg/kg)剂量组;阳性对照组(戊酸雌二醇组)。每组10只,连续灌胃给药12周。观察大鼠骨小梁形态,测量骨小梁的面积、厚度、间距及面积百分数,全自动分析仪检测血清中钙、磷和碱性磷酸酶(ALP)含量,测量大鼠骨密度(BMD),ELISA法检测血清雌激素(E2)、骨钙素(BGP)、骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子(RANK)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)水平。结果:与模型组比较,各给药组骨小梁显著变宽,数目增多,网状结构有部分恢复。各给药组骨小梁厚度、骨小梁面积和骨小梁面积百分数均大于模型组,骨小梁间距均小于模型组(P0.05)。各给药组血清中钙、磷、E2、OPG以及股骨BMD水平均显著高于模型组,ALP、BGP、RANK和RANKL水平均显著低于模型组(P0.01)。结论:自拟补肾活血颗粒对去卵巢大鼠骨质疏松症有显著的治疗作用。作用机制可能与上调OPG、抑制RANKL分泌有关。     

应用种植支抗大鼠牙齿移动压力侧与牙齿自然萌出过程中骨保护素及RANKL表达的比较

目的:比较应用种植支抗使大鼠牙齿移动与牙齿自然萌出过程中骨保护素及破骨细胞核因子B受体活化因子配基(RANKL)表达变化.方法:建立应用种植支抗牵引移动大鼠下颌第1磨牙的动物实验组.对照组取出生后0、7、10、15d及21 d的SD乳鼠处死,实验组分别于加力牵引2、4、7d及14d后,解剖分离大鼠下颌骨,拍X线片,常规H-E染色观察大体组织形态,免疫组织化学检测骨保护素及RANKL表达.结果:应用种植支抗牵引大鼠牙齿移动组中,X线示牵引的第1磨牙向近中移动,H-E染色示牙齿自然萌出组中的成骨细胞及破骨细胞强阳性表达,应用种植支抗牙齿移动组中成骨细胞及破骨细胞表达较多.免疫组织化学显示实验组和对照组骨保护素及RANKL阳性表达.结论:在牙齿自然萌出及正畸牙移动过程中,骨保护素及RANKL表达变化相似,其变化规律与牙槽骨改建过程一致.     

RANK/RANKL/OPG系统与肿瘤

胞核因子κB受体活化因子/细胞核因子κB受体活化因子配体/骨保护因子(RANK/RANKL/OPG)系统在破骨细胞的活化、发育、成熟过程中起关键性作用,近年研究发现该系统也广泛参与骨肿瘤发生、肿瘤骨转移、细胞凋亡,这些研究为相关疾病的治疗提供了新的思路和方法,如重组OPG和人类RANKL单克隆抗体AMG-162的应用。     

RhoA/ROCK信号通路在异常应力下关节软骨中的表达

背景：RhoA/ROCK信号通路在活体内关节软骨退变或者骨性关节炎的病理过程中是否发挥着作用,为此设计了该实验。 目的：探索RhoA/ROCK信号通路在软骨退变过程中的作用。 方法：采用家兔右膝关节伸直位制动模型,对制动2,4,6 周及对照组家兔的右膝关节胫骨平台负重面全层软骨进行苏木精-伊红染色、番红O染色及RhoA、ROCK免疫组织化学染色,比较制动前后软骨组织学、病理积分及RhoA、ROCK表达变化情况。 结果与结论：随着制动时间的延长,关节软骨退变程度逐渐加重,Mankin评分逐渐增加,且各组评分之间差异有显著性意义(P < 0.05)。免疫组织化学提示RhoA、ROCK表达变化主要集中在切线层及中间层软骨,且二者在关节软骨退变过程中表达变化趋势一致,均为先增多后减少。结果表明,在关节软骨退变过程中,RhoA/ROCK信号通路表达先递增后逐渐降低,RhoA/ROCK信号通路在异常应力所致的关节软骨退变过程中发挥了效应。     

透骨消痛胶囊促进成骨细胞的增殖和分化

背景：透骨消痛胶囊是福建中医药大学治疗骨关节炎的临床验方,以往的研究多集中于其对软骨的作用。 目的：观察透骨消痛胶囊对成骨细胞增殖、分化及骨重塑相关因子表达的影响。 方法：以透骨消痛胶囊干预大鼠成骨细胞ROS17/2.8,分空白对照组和各浓度透骨消痛胶囊组,MTT法测定细胞增殖,比色法检测成骨细胞分化的生物标志物碱性磷酸酶活性,ELISA法检测骨钙素,茜素红染色观察骨矿化结节,实时定量PCR和ELISA法检测骨重塑相关因子骨保护素/核因子κB受体活化因子配体的表达。 结果与结论：与对照组相比,质量浓度为0.25-2 g/L透骨消痛胶囊能显著促进ROS17/2.8细胞增殖(P < 0.05),上调碱性磷酸酶活性(P < 0.05)、骨钙素的表达水平(P < 0.05)和矿化结节面积(P < 0.05),增加骨保护素/核因子κB受体活化因子配体的比例(P < 0.05)。提示透骨消痛胶囊防治骨关节炎的作用机制可能与其促进成骨细胞的增殖、分化以及调节骨重塑平衡的作用有关。     

99Tc-亚甲基二膦酸盐对胶原诱导性关节炎大鼠骨侵蚀的治疗作用

目的：观察99锝-亚甲基二膦酸盐(99technetium-methylenediphosphonate,99Tc-MDP)注射液对胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis, CIA）大鼠模型骨侵蚀的治疗作用,探讨其治疗骨侵蚀的有效作用成分及可能的作用机制。方法：建立CIA大鼠关节炎模型,分为模型组、帕米膦酸二钠组、MDP组和99Tc-MDP组,关节炎指数评价关节肿胀程度;放射学评分评价骨质破坏情况;HE染色观察关节病理组织形态学变化;ELISA检测血清中核因子κB受体活化因子配体（receptor activator of NF-κB ligand,RANKL）、骨保护素（osteoprotegerin,OPG）和Dickkopf-1（DKK-1）的水平。结果：99Tc-MDP组、MDP组、帕米膦酸二钠组关节炎指数评分、骨质破坏评分均低于模型对照组（P＜0.05）;99Tc-MDP组与帕米膦酸二钠组、MDP组相比,差异有统计学意义（P＜0.05）;99Tc-MDP组、MDP组、帕米膦酸二钠组血清OPG水平高于模型组（P＜0.05）,血清RANKL和DKK-1水平低于模型组（P＜0.05）;99Tc-MDP组血清OPG水平高于帕米膦酸二钠组和MDP组（P＜0.01）,RANKL和DKK-1水平低于帕米膦酸二钠组和MDP组（P＜0.01）,但帕米膦酸二钠组和MDP组间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：99Tc-MDP治疗CIA大鼠骨侵蚀的有效作用成分为99Tc与亚甲基二膦酸盐两者的螯合物,并且是通过促进OPG和抑制RANKL和DKK-1的表达发挥作用的。     

Osteoclast induction in periodontal tissue during experimental movement of incisors in osteoprotegerin‐deficient mice

Osteoprotegerin (OPG) is a novel secreted member of the tumor necrosis factor (TNF) receptor superfamily that negatively regulates osteoclastogenesis. The receptor activator of the NFKB ligand (RANKL) is one of the key regulatory molecules in osteoclast formation and binds to OPG. In this study, it was suggested that OPG and RANKL are involved in alveolar bone remodeling during orthodontic tooth movement. We examined RANKL localization and osteoclast induction in periodontal tissues during experimental movement of incisors in OPG‐deficient mice. To produce orthodontic force, an elastic band was inserted between the upper right and left incisors for 2 or 5 days, and the dissected maxillae were examined for cytochemical and immunocytochemical localization of tartrate‐resistant acid phosphatase (TRAP), vacuolar‐type H⁺‐ATPase, and RANKL. Compared to wild‐type OPG (+/+) littermates, TRAP‐positive multinucleated cells were markedly induced in the periodontal ligament (PDL) on the compressed side and in the adjacent alveolar bone of OPG‐deficient mice. These multinucleated cells exhibited intense vacuolar‐type H⁺‐ATPase along the ruffled border membranes. Because of accelerated osteoclastic resorption in OPG‐deficient mice, alveolar bone was severely destroyed and partially perforated at 2 and 5 days after force application. In both wild‐type and OPG‐deficient mice, RANKL expression became stronger at 2 and 5 days after force application than before force application. There was no apparent difference in intensity of RANKL expression between OPG (+/+) littermates and OPG‐deficient mice. In both wild‐type and OPG‐deficient mice, expression of RANKL protein was detected in osteoblasts, fibroblasts, and osteoclasts mostly located in resorption lacunae. These results suggest that during orthodontic tooth movement, RANKL and OPG in the periodontal tissues are important determinants regulating balanced alveolar bone resorption. Anat Rec 266:218–225, 2002. © 2002 Wiley‐Liss, Inc.