酪氨酸抗hCG诱导的大鼠离体Leydig细胞睾酮生成与蛋白质合成的关系

近年来我室的实验结果证明,酪氨酸除具有抗hCG 致孕酮生成作用外,对LH/hCG 诱导的雄激素和cAMP 生成也有一定的抑制作用,而且,酪氨酸还能拮抗外源cAMP 诱导大鼠离体Leydig 细胞的睾酮生成。据文献报道,hCG 能促进大鼠离体Leydig 细胞蛋白质合成,并认为新合成的蛋白质在hCG 诱导睾酮生成的过程中起重要作用。为了探讨酪氨酸抗hCG 致睾酮生成的作用机理,本文观察     

低剂量辐射诱导适应性反应的研究进展

NSCEAR（联合国原子辐射效应科学委员会）1986年规定,就人体照射而言,低水平辐射指剂量在0．2Gy以内的低LET辐射或0．05Gy以内的高LET辐射,同时剂量率在0．05mGy／min以内。实际研究中把照射剂量符合上述条件而剂量率高于0．05mGy／min者称低剂量辐射（LDR）。近年来,许多实验证实低剂量照射预处理细胞或机体后可产生对随后相对高剂量照射诱发损伤的抗性,称低剂量辐射诱导的适应性反应。     

hCG调节原代培养小鼠睾丸Leydig细胞Atrn mRNA和Atrn蛋白的表达及与睾酮分泌的相关性

目的探讨hCG刺激的Leydig细胞睾酮分泌与Atrn mRNA和Atrn蛋白表达的关系。方法将原代培养的Leydig细胞分为5组,分别在培养液中加入0、0．1、1、10、100ng／mLhCG,培养24h后吸取培养液用于测定睾酮分泌量。同时提取细胞mRNA和总蛋白,用实时定量RT—PCR和Westernblot方法分别检测Leydig细胞中AtrnmRNA和Atrn蛋白表达量。结果刺激24h后,与0ng／mLhCG剂量组相比较,0．1,1,10,100ng／mLhCG剂量组睾酮生成量都明显增加,统计学差异较大（P〈0．01）。Leydig细胞AtrnmRNA表达量增加（0．1ng／mLhCG组P〈0．05,其余剂量组P〈0．01）。睾酮生成量与Atrn蛋白表达量（r=0．987,P〈0．01）和AtrnmRNA表达量（r=0．982,P〈0．01）呈正相关。结论原代培养的Leydig细胞在hCG刺激下,睾酮生成量、AtrnmRNA和Atm蛋白表达量都呈现hCG剂量依赖性的增加。     

小鼠脾淋巴细胞UDS的辐射效应研究

本实验采用UDS的检测,判断不同剂量电离辐射对脾淋巴细胞损伤后DNA修复能力的影响。结果显示,大剂量(0.5～6.0Gy)X射线全身照射后24h脾淋巴细胞UDS呈剂量依赖性抑制,剂量效应关系呈线性,无肩区。小剂量(25～250 mGy)X射线单次全身照射后24 h脾淋巴细胞UDS的变化与大剂量效应不同,50 mGy组呈现明显的刺激效应(P<0.05)。低水平Y射线持续照射(剂量率5.4m Gy/6 h·d)4周末,累积剂量130mGy脾淋巴细胞UDS也呈现明显的刺激效应(P<0.02)。实验资料说明,大剂量电离辐射对脾淋巴细胞DNA切除修复能力有抑制作用,而小剂量能产生刺激作用,并且引起刺激的总剂量因剂量率的不同而异。     

低剂量辐射诱导EL-4淋巴瘤细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的剂量率效应

目的：观察低剂量辐射诱导EL-4淋巴瘤细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的剂量率效应,以揭示低剂量辐射生物效应及其诱导适应性反应的可能机制。方法：实验分D2组（攻击剂量）、D1（诱导剂量）+ D2组和假照组。用X射线照射离体EL-4淋巴瘤细胞,其D1为75 mGy（剂量率6.25~200.00 mGy•min^-1）,D2为1.5 Gy（剂量率287 mGy/min）,D1和D2间隔6 h。通过流式细胞仪检测其细胞凋亡和细胞周期进程的变化。结果：当D1剂量率为6.25~50.00 mGy,D1 + D2组细胞凋亡百分数明显低于D2组（P<0.05）G₀/G₁期细胞百分数明显低于D2组（P<0.01）,而S期细胞百分数不同程度高于D2组。结论：D1为75 mGy（剂量率6.25~50.00 mGy•min^-1）,D2为1.5 Gy（剂量率287 mGy•min^-1）、D1和D2间隔6 h,可诱导体外EL-4淋巴瘤细胞凋亡和细胞周期进程的适应性反应。     

131I近距离放射对C6胶质瘤细胞杀伤的实验研究

目的 探讨131I近距离放射杀伤培养C6胶质瘤细胞的有效剂量率及有效剂量,指导治疗计划.方法 将负载活度60mCi 131I的放疗囊置于距离培养的C6胶质瘤细胞5mm、30mm处照射,持续72h/次,每隔4d用Annexin V-FITC/PI双染、流式细胞术以及克隆形成率法检测照射后C6胶质瘤细胞的凋亡率和细胞存活分数.结果 照射72h后能诱导部分瘤细胞凋亡,凋亡率可达16.42％±1.66％;瘤细胞存在增殖性死亡现象;瘤细胞存活分数在72h照射后下降,最低为59.0％±2.39％;在131I近距离放射时,较低剂量率(＜400mGy/h)情况下,也可诱发C6胶质瘤细胞凋亡.在剂量率186.6-677.8mGy/h区间,随剂量率加大凋亡率反而减小.诱导瘤细胞凋亡的有效吸收剂量率应≥47.64-61.65mGy/h,72h累计吸收剂量≥3.9Gy.结论 放疗囊负载131I近距离照射72h后可诱发C6胶质瘤细胞部分凋亡,瘤细胞存活分数下降.诱导C6胶质瘤细胞凋亡的有效剂量率应≥47.64-61.65mGy/h,72h有效累计吸收剂量≥3.9Gy.     

电离辐射对γ—干扰素产生的影响

本实验对大剂量(0.5～8.0Gy)和小剂量(25～250 mGy)X射线照射后,C_(57)BL/6小鼠脾细胞γ-干扰素(IFNγ)产生的变化进行了观察,结果表明:全身大剂量单次照射后,脾细胞IFNγ的产生随照射剂量增高呈直线性下降,D_(37)=1.91Gy,以照射后1～4天下降最显著;离体大剂量单次照射后脾细胞IFNγ产生的变化规律与整体照射相似,但辐射敏感性较整体照射低,D_(37)=4.18～4.87Gy;小剂量照射后脾细胞IFNγ的产生未见减少,相反在75和100 mGy组出现明显的刺激作用。     

猕猴受γ线不同方式照射期间及停照后的几项生物效应

20条健康猕猴随机分成急性一次(223mGy/min)、分次累积(223mGy/min、每周照射一次,0.25Gy/次)、低剂量率慢性连续(每周照射5天,50mGy/day)照射及对照四个组。在0～2Gy累积剂量范围内,对猕猴造血、免疫及细胞遗传学方面的某些生物效应进行了比较研究。并在停照后一年中对上述指标的恢复过程作了动态观察。结果表明,在不同照射条件下辐射损伤的程度和特性不一,由辐射所诱发的体细胞效应大多数是可以恢复的。     

Adaptive response of thymocyte apoptosis induced by X-irradiation with 75 mGy

目的：本研究观察胸腺细胞凋亡小体（TAB）以评价低剂量辐射诱导的胸腺细胞凋亡的适应性反应。方法：实验用X射线全身照射Kunmin雄性小鼠，诱导剂量75mGy（D1），攻击剂量1．5或2．0Gy（D2），D1和D2间隔6h，D2照后20h检测TAB百分数。结果：D1+D2组TAB百分数明显低于D2组（P＜0．05）。此外，将75mGy照射的脾细胞外液加入2Gy照射的胸腺细胞悬液中，在培养72h明显低于2Gy照射组（P<0．05）。结论：低剂量辐射（75mGy）可改变免疫细胞的外环境，降低其凋亡，并且可诱导其后大剂量（1．5或2．Gy）照射的小鼠胸腺细胞凋亡的适应性反应。     

低剂量辐射对人骨髓间充质干细胞生物学特性的影响

目的：探讨低剂量辐射（LDR）对骨髓间充质干细胞（BM-MSC）生物学特性的影响。方法：应用体外培养传代的P4、P5、BM- MSC,分别采用剂量为50、75和100 mGy X射线照射(剂量率为12.5 mGy•min^-1),　检测不同剂量照射后BM-MSC生长、细胞周期与凋亡的变化。结果：与对照组比较,50、75和100 mGy照射后第5天BM-MSC生长进度明显加快（P<0.05）; 与同一时间对照组比较,50、75和100 mGy照射BM-MSC后,G₀/G₁期细胞百分率减少(P<0.05）,照射后72 h降至最低;S期细胞百分率在照射后48 和72 h逐渐明显增多(P<0.05）,以75 mGy照射后72 h,S期细胞百分率增多最明显(68.88%);而细胞凋亡的变化是50、75和100 mGy照射后24和48 h有增多趋势,照射后72 h凋亡细胞百分率有减少趋势。结论：LDR对BM-MSC有兴奋性效应。     

Effect of low dose radiation on subpopulations of lymphocytes and T cell subsets in mice

<正> The effect of radiation on lymphocyte subpopulations and T cell subsets of peripheral blood was studied in mice after X- and y-irradiation.lt was found that (1) there were neither marked changes in the percentage and absolute number of acid alpha-naphthol acetyl esterase "positive(ANAE + )cells of different granular patterns, nor significant lowering of the T11/Ts ratio after single whole body X-irradiation in the dose range of 25-250 mGy with a dose rate of 12.5mGy/min. At the same time no significant changes were found at different time intervals after irradiation. After continuous low level irradiation with 60Co γ-rays with a dose rate of 5.4 mGy/6h.d,the ANAE grauular pattern of lymphocytes showed no significant changes with cumulative doses of 32.4 -520 mGy. (3)There was no decrease in the "splenocyte Ts index in Kunming mice after low dose X-irradiation. The results suggest that the stimulatory effect of low dose radiation on the PFC reaction can not be explained on the basis of a decrease in num     

Adaptive response of thymocyte apoptosis and cell cycle progression induced by low dose X-ray irradiation in mice

The dose-effect of adaptive response of thymocyte apoptosis and cell cycle progression induced by whole-body X-ray irradiation (WBI) was studied in male Kunming mice. The inductive doses (D1) were 25, 50, 75, 100 or 200 mGy 6 h before the challenging doses (D2) of 1.0, 1.5 or 2.0 Gy. The changes in the percentages of the thymocyte apoptotic bodies (TAB) and the cells in different phases of cell cycle were measured with flow cytometry. The percentages of TAB decreased, the arrests of G1 and G2 + M phases diminished, and the cells of DNA synthesis of S phase increased when the D1 + D2 groups was compared with the D2 groups. When D1 was 200 mGy, the adaptive response of thymocyte apoptosis and cell cycle progression were no longer induced by low dose radiation (LDR). In addition, the extracellular fluid from the splenocytes were cultured with Con A for 48 h in vitro 24 h after 75 mGy WBI was placed in the murine thymocyte suspension from mice irradiated with 2.0 Gy WBI and co-incubated. The thymocyte apoptosis decreased. Especially, noteworthy was that the percentages of TAB after the incubation for 72 h were significantly lower than those in 2.0 Gy irradiated thymocytes (P < 0.05). These results indicate that when the mice were irradiated with 25-100 mGy (D1, 12.5 mGy/min) 6 h before 1.0-2.0 Gy (D2, 0.287 Gy/min) exposure, an adaptive response of thymocyte apoptosis and cell cycle progression may be induced under the condition of WBI, and LDR (75 mGy) may change the microenvironment of immune cells and decrease the thymocyte apoptosis.     

电离辐射对Jurkat T细胞凋亡与坏死的影响

目的：研究电离辐射诱导Jurkat T细胞凋亡与细胞坏死的变化规律,探讨电离辐射作用后细胞的死亡模式与机理。方法：采用Annexin V-EGFP和PI 双染、流式细胞术(FCM)检测不同剂量（0.075、0.500、1.000、2.000、4.000和6.000 Gy）X射线照射后Jurkat T细胞凋亡与细胞坏死的时间-效应关系和剂量-效应关系。结果：时间-效应关系,2.000 Gy X射线照射后,与假照组比较,Jurkat细胞凋亡百分率在照射后18 h显著增加,至24 h始终维持在较高水平（P＜0.001）;细胞坏死百分率于照射后4 h显著增加,12 h 达峰值,至48 h始终维持在较高水平（P＜0.001）。剂量-效应关系,0.075Gy X射线照射后18 h,Jurkat T细胞凋亡百分率和细胞坏死百分率与假照组相比较未见明显变化（P＞0.05）。2.000~6.000 Gy较大剂量X射线照射后18 h,细胞凋亡百分率和细胞坏死百分率与假照组比较均呈剂量依赖性增加（P＜0.001）。结论：2.000 Gy以上剂量X射线可以诱导Jurkat T细胞发生凋亡和坏死,细胞坏死比细胞凋亡出现时间更早,持续时间更长。     

“Radiation Hormesis”中的剂量率效应

为了揭示不同剂量率Ｘ射线低剂量全身照射对低剂量辐射兴奋效应（ＲａｄｉａｔｉｏｎＨｏｒｍｅｓｉｓ）的影响，采用不同剂量率（１２．７ｍＧｙ／ｍｉｎ和０．２Ｇｙ／ｍｉｎ）对Ｂａｌｂ／ｃ小鼠进行低剂量全身照射，研究了低剂量辐射兴奋效应中的剂量率效应。结果表明：采用不同剂量率Ｘ射线照射同一剂量时，所引起的生物效应不同。剂量率为１２．７ｍＧｙ／ｍｉｎ时，脾细胞３Ｈ－ＴｄＲ参入量对ＣｏｎＡ的反应性明显增强，尤其以７６．７ｍＧｙ和１０５．５ｍＧｙ照射组最为显著（Ｐ＜０．０１），表现出明显的辐射免疫兴奋效应。而剂量率为０．２Ｇｙ／ｍｉｎ时，在１０５．５ｍＧｙ以内，脾细胞３Ｈ－ＴｄＲ参入量对ＣｏｎＡ的反应性无明显变化。该结果提示：高剂量率低剂量全身照射不能引起低剂量辐射兴奋效应。     

3.0 Gy X线全身照射后对大鼠下丘脑—垂体—肾上腺皮质系统应激反应的影响

本文报道了3.0 GyX线全身照射后1、3日大鼠下丘脑—垂体—肾上腺皮质系统对应激刺激(一侧后肢骨折)的反应性变化。正常大鼠受应激刺激后10min,血浆β—EP、皮质酮、肾上腺和垂体的cAM P及下丘脑M—EnK水平都明显升高,而下丘脑β—EP含量则显著降低。照射后1日未应激组,血浆β—EP、皮质酮和垂体cAMP水平均显著高于正常对照,下丘脑β—EP也明显低于正常对照。照后1日应激组各参数虽明显高于正常对照,但与未应激组相比,除肾上腺cAMP和下丘脑B—EP水平显著升高外,其余各参数均差异不显著。照后3日未应激组,各参数都回降到接近正常水平。照后3日应激与未应激组相比,6项参数有4项显著增高,其余血浆皮质酮和下丘脑B—EP 2项虽有升高但差异不显著。结果表明,3.0GyX射线全身照射基本上未降低机体对应激的适应能力。     

电离辐射对Jurkat T细胞周期进程的影响

目的：探讨电离辐射诱导Jurkat T细胞损伤过程中细胞周期进程的变化规律。方法：采用流式细胞术 (FCM) 检测低剂量（0.075 Gy）和较大剂量（0.5、1.0、2.0、4.0及6.0 Gy）X射线照射后Jurkat T细胞周期进程变化的时间-效应关系和剂量-效应关系。结果：时间-效应关系研究发现,2.0 Gy X射线照射后Jurkat T细胞相继发生S期延迟和G₂期阻滞,S期细胞百分率于照射后立即增加(P<0.001),而G₂+M期细胞百分率照射后8 h开始显著增加（P<0.001）。剂量-效应关系研究发现,75 mGy低剂量X射线照射即可诱导Jurkat T细胞发生S期延迟（P<0.001）和G₂期阻滞（P<0.05）;0.5~6.0 Gy较大剂量X射线照射后,Jurkat T细胞发生S期延迟和G₂期阻滞。与假照组相比较,G₀/G₁期细胞百分率显著降低（P<0.001）,在0.5~6.0 Gy内具有剂量依赖性,而S期和G₂+M期细胞百分率显著升高（P<0.05或P<0.001）。结论：X射线照射可以改变Jurkat T细胞周期进程,诱导其相继发生S期延迟和G₂期阻滞,在0.5~6.0 Gy内具有剂量依赖性。     

离辐射对小鼠EL-4淋巴瘤细胞caspase-3蛋白表达的影响

目的：观察电离辐射对caspase-3蛋白表达的影响。方法：采用体外传代培养的小鼠EL-4淋巴瘤细胞为实验材料；采用单克隆抗体免疫荧光标记，FACScan流式细胞仪(FCM)检测蛋白表达的变化；采用PI荧光标记及FCM测定细胞凋亡的变化；量效实验, 观察0.5、1.0、2.0、4.0及6.0 Gy X射线照射后24 h EL-4细胞caspase-3蛋白表达及细胞凋亡的变化；时效实验, 观察4.0 Gy照射后2、4、8、12、24、48及72 h EL-4细胞caspase-3蛋白表达的变化。结果：量效实验表明，0.5、2.0、4.0及6.0 Gy X射线照射后24 h EL-4细胞中caspase-3蛋白表达均明显增高，与假照射对照组比较，差异具有显著性 (P<0.05或P<0.01)。0.5、1.0及4.0 Gy 照射后24 h EL-4细胞凋亡明显增高，与假照射对照组比较，差异具有显著性 (P<0.05或P<0.01)。 时效实验表明，4.0 Gy照射后8、12及24 h EL-4细胞中caspase-3蛋白表达均明显增高, 与同时间点假照射对照组比较，差异具有显著性 (P<0.01或P<0.001)。结论：电离辐射可诱导EL-4细胞caspase-3蛋白表达增高。同时诱导EL-4细胞凋亡。     

流式细胞术分析不同剂量X射线对HL-60细胞周期的影响及其诱导的细胞凋亡

比较不同剂量X射线对HL-60细胞的影响,建立X射线诱导HL-60细胞凋亡的生物研究模型,探索细胞周期检测点对放射剂量的耐受性.采用对数生长期的HL-60细胞经2,5,10,15,20Gy的X射线照射后培养4h,用流式细胞仪分析HL-60细胞周期的改变.结果发现,不同剂量X射线照射均可诱导HL-60细胞凋亡,凋亡率有随照射剂量增大而增高的趋势.经2,5Gy剂量照射的HL-60细胞主要表现为S期细胞的比例减少,G2/M期细胞的比例增多,经15,20Gy剂量照射的HL-60细胞主要表现为S期细胞和G2/M期细胞的比例均减少.结果显示,以X射线照射HL-60细胞可建立理想的射线诱导的细胞凋亡模型,小剂量照射和大剂量照射可能引起不同时相的细胞发生凋亡,提示细胞对放射剂量的反应性与细胞周期检测点之间存在一定的关系.