bcr/abl及c-myb原癌基因反义寡核苷酸对K562细胞的作用研究

目的 为反义基因治疗慢粒白血病（ＣＭＬ）奠定实验基础,并进一步提示ＣＭＬ的发病机制。方法 设计并合成针对ｂｃｒ／ａｂｌ嵌合基因和ｃ－ｍｙｂ原癌基因的反义寡脱氧核苷酸（ａｓＯＤＮ）及其硫代衍生物,观察其对Ｋ５６２细胞的生长、ＤＮＡ合成及ｂｃｒ／ａｂｌ基因转录、表达以及细胞凋亡的影响。结果 针对ｂｃｒ／ａｂｌ基因及ｃ－ｍｙｂ癌基因的ａｃＯＤＮ可显著抑制Ｋ５６２细胞的生长、ＤＮＡ合成及ｂｃｒ／ａｂｌ基因     

慢性粒细胞白血病的分子生物学特征与临床研究进展

Ｐｈ染色体是慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）的细胞遗传学标记，而ｂｃｒ／ａｂｌ基因重排则为ＣＭＬ的分子基础。ＢＣＲ、ｃ－ａｂｌ基因重排及ｂｃｒ／ａｂｌ嵌合基因的结构，转录和表达是ＣＭＬ寻病的关键环节。随着分子生物学技术的迅速发展，对ｂｃｒ／ａｂｌ重组基因的研究日益深入有可能最终阐明ＣＭＬ的发病机制，并在临床上对ＣＭＬ诊断、分型、鉴别、预后判断及治疗等均有极其重要的指导意义。目前已在尝试利用分子生物学技术     

慢性粒细胞白血病的分子生物学特征与临床研究进展

Ｐｈ染色体是慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）的细胞遗传学标记，而ｂｃｒ／ａｂｌ基因重排则为ＣＭＬ的分子基础。ＢＣＲ、ｃ－ａｂｌ基因重排及ｂｃｒ／ａｂｌ嵌合基因的结构，转录和表达是ＣＭＬ发病的关键环节．随着分子生物学技术的迅猛发展，对ｂｃｒ／ａｂｌ重组基因的研究日益深入有可能最终阐明ＣＭＬ的发病机制，并在临床上对ＣＭＬ诊断、分型、鉴别、预后判断及治疗等均有极其重要的指导意义．目前已在尝试利用分子生物学技术在基因水平根治ＣＭＬ，这项技术为治疗ＣＭＬ开辟了一条新途径。     

骨髓细胞染色体培养法对评价干扰素治疗慢性白血病疗效的影响

慢性粒细胞白血病 (ＣＭＬ)是一种克隆性疾病 ,绝大多数患者的白血病细胞有固定的细胞遗传学异常 ,表现为 9号染色体和 2 2号染色体长臂交互易位 ,即出现Ｐｈ染色体。Ｐｈ染色体在分子水平上形成ｂｃｒ/ａｂｌ融合基因[1] 。Ｐｈ染色体可以出现在ＣＭＬ的所有白血病细胞 ,故作为发病确诊和微小残留病的主要指标。α -干扰素 (α -ＩＦＮ)是目前ＣＭＬ的首选治疗方案 ,据认为可以达到细胞遗传学缓解即Ｐｈ染色体消失。我们观察了 1994- 1999年期间应用α -干扰素治疗慢性粒细胞白血病前后Ｐｈ 染色体的变化 ,并比较了应用直接法和短期培养法…     

荧光原位杂交检测慢性粒细胞白血病的染色体畸变

目的 检测费城染色体（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ，Ｐｈ染色体）阴性，变异型Ｐｈ染色体及伴有其它染色体异常的慢性粒细胞白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ，ＣＭＬ）的ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因。方法 双色荧光原位杂交技术，检测伴有８种不同的骨髓细胞染色体畸变ＣＭＬ患者的ｂｃｌ／ａｂｌ融合基因。结果 ３例变异型Ｐｈ和７例有标准型Ｐｈ的ＣＭＬ患者均为ｂｃｒ／ａｂｌ融合     

慢性粒细胞性白血病急变的相关分子研究进展

慢性粒细胞性白血病（ＣＭＬ）是由ｔ（９，２２）（ｑ３４，ｑ１１）易位引起的一种血液系统恶性疾病。该易位重排形成的ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因及其所编码的Ｐ２１０蛋白在ＣＭＬ发生中的作用已被确认。近年研究表明ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因、抑瘤基因（如ｐ５３，Ｒｂ，ｐ１６等）及其它分子（如ＥＶＩ１，ｃｍｙｃ等）均与ＣＭＬ急变有关。分析这些相关分子对ＣＭＬ急变的直接或间接影响，对ＣＭＬ的分子病理学及其治疗研究均具指导意义。     

慢性粒细胞白血病急性变p53基因改变的初步探讨

慢性粒细胞白血病急性变ｐ５３基因改变的初步探讨陈敬春，刘树茂，费洪宝，龚维龙Ｐｈ染色体易位所致的ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因的形成及活化是慢性粒细胞白血病（简称慢位，ＣＭＬ））发病的关键。ＣＭＬ在临床上要经过慢性期（ＣＰ）、加速期（ＡＰ）及急变期（ＢＣ），...     

双色荧光原位杂交检测慢性粒细胞白血病的bcr/abl融合基因

自１９８４年发现了慢性粒细胞白血病（ｃｈｒｏｎｉｃｍｙｅｌｏｉｄｌｅｕｋｅｍｉａ,ＣＭＬ）具有ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因［１,２］,检测ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因就成为诊断ＣＭＬ的关键。Ｔｋａｃｈｕｋ等［３］使用间接标记的荧光原位杂交（ｆｌｕｏ－ｒｅｓｃｅｎ...     

α—2b干扰素联合低剂量阿糖胞苷治疗慢性粒细胞白血病

α－２ｂ干扰素（ＩＦＮα－２ｂ）与低剂量阿糖胞苷（ＬＤ Ａｒａ－Ｃ）联合应用具有相加作用,可以减少或消除Ｐｈ染色体阳性细胞和ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因,显提高慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）患的血液学和细胞遗传学缓解率,延长ＣＭＬ患的生存期,被认为是目前治疗ＣＭＬ最有前途的方案之一。     

bcr基因重排与白血病

Ｐｈ染色体为性粒细胞白血病的特异标记染色体，存在于９５％的ＣＭＬ患者中，近年来随着分子生物学的进展。已阐明Ｐｈ染色体所导致的ｂｃｒ／ａｂｌ基因重排是某些白血病发病的关键因素，本文复习了国内外有关文献，对该领域目前研究的进展做一简要综述。     

bcr／abl基因在人慢性髓性白血病发病中的作用

ｂｃｒ／ａｂｌ基因在人慢性髓性白血病发病中的作用尤胜国（中国医学科学院血液学研究所天津３０００２０）人慢性髓细胞白血病（ＣＭＬ）是一种骨髓多能造血干细胞的恶性疾患。该病具有明显的双时相病程；在疾病初始的慢性期，其骨髓中造血定向髓系祖细胞在数目上明显增...     

慢性髓系白血病bcr—abl融合基因的克隆及其在COS …

目的 克隆慢性髓系白血病（ＣＭＬ）融合基因ｂｃｒ－ａｂｌ的ｃＤＮＡ序列,并在真核细胞中表达。方法 以设计的两条引物扩增ｂｃｒ－ａｂｌ融合位点两侧的ｃＤＮＡ,测序后克隆至真核表达载体ｐｃＤＮＡ３．１,转染ＣＯＳ－７细胞。取常规培养的细胞进行ＲＴ－ＰＣＲ鉴定。结果 ①ＰＣＲ扩增出４９０ｂｐ大小的ｃＤＮＡ,其序列测定除第４５２位的碱基Ｃ突变为Ｔ外,其余序列均正确。②ＲＴ－ＰＣＲ法检测到转染细胞系中,有ｂ     

Bcl-2基因转染人白血病细胞系(K562)的生物学特性的观察

目的 :我们在慢性粒细胞白血病 (ＣＭＬ)急变研究中发现ＣＭＬ急变细胞ｂｃｌ- 2基因表达明显高于慢性期 ,甚至高于其他急性粒细胞白血病 (中华血液学杂志 ,1 999,2 0 :2 7) ;而ＣＭＬ急变时化疗反应甚差 ,是目前白血病治疗难题之一。为了进一步阐明Ｂｃｌ- 2基因在ＣＭＬ急变中的作用 ,我们将ｂｃｌ- 2基因转染人ＣＭＬ细胞系———Ｋ562 ,建立了一株ｂｃｌ- 2基因高表达的细胞株———Ｋ562 /ｂｃｌ- 2 ,并对它的生物学特性 ,特别对抗肿瘤药物的反应进行了研究。方法 :Ｂｃｌ- 2ｃＤＮＡ逆转录病毒载体质粒由中国医学科学院肿瘤研究所吴教…     

慢性粒细胞白血病特异性单、双及三单位核酶载体的构建

本文拟针对在慢性粒细胞白血病发病中起关键作用的ｂｃｒａｂｌ 融合基因, 构建特异性的系列核酶载体。为此,我们针对ｂｃｒａｂｌ 融合位点设计、合成了３ 个相邻的锤头状核酶。通过基因重组将３ 个单核酶按顺序定向克隆入改建的ｐＧＥＭ３ｚｆ 载体中,构建了ｂｃｒａｂｌ 单核酶、双核酶及三核酶体外转录载体, 并在此基础上将三单位核酶克隆入ｐ ＤｏＲｎｅｏ 载体中构建三核酶逆转录病毒载体。此外, 通过ＰＣＲ 方法, 扩增了ｂｃｒａｂｌ 融合位点附近约３７６ｂｐ 的序列,成功地构建了ｂｃｒａｂｌ 融合基因体外转录载体。本文构建的ｂｃｒａｂｌ 特异性系列载体,为今后遴选特异、高效的核酶打下了基础,并为将核酶用于自体骨髓移植的体外骨髓净化创造了条件。     

11例小儿急性粒细胞白血病中bcr区域重组的检测

１１例小儿急性粒细胞白血病中ｂｃｒ区域重组的检测金晓明，林坤治，李奇志，吕联煌，郭瑞官，邓国仁断裂点簇区域（ｂｒｅａｋｐｏｉｎｔｃｌｕｓｔｅｒｒｅｇｉｏｎ，ｂｃｒ）长５．８ｋｂ，位于ＢＣＲ基因中部，定位于人染色体２２ｑ１１．２１。研究表明，ｂｃｒ区域...     

bcr-ahl融合基因反义寡核苷酸对K562细胞生长的影响

目的：研究 ｂｃｒ－ａｂｌ融合基因硫代磷酸反义寡核苷酸（Ａｓｐｏ）对 Ｋ５６２细胞生长特性的影响,探讨其在慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）基因治疗中的意义。方法：倒置显微镜下细胞活体观察;Ａｓｐｏ与细胞共同培养２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ、９６ｈ及 １２０ｈ,用０．４％台盼蓝染色计各处理组死活细胞数,甲基纤维素半固体培养法观察其克隆形成率的变化,流式细胞仪测定各处理组细胞Ｐ２１０蛋白表达变化。结果：Ａｓｐｏ处理后细胞仍呈克隆状生长,当 Ａｓｐｏ浓度达５μｍｏｌ／Ｌ时,即可产生增殖抑制作用,呈一定的量效关系,其最大抑制效应时间为作用１２０ｈ,当Ａｓｐｏ达１０μｍｏｌ／Ｌ时,在一定细胞浓度范围内（１×１０４／ｍＬ－ ５× １０５／ｍＬ）,均有显著抑制作用,当Ａｓｐｏ浓度达５μｍｏｌ／Ｌ以上时,Ｋ５６２细胞 Ｐ２１０蛋白表达明显下降甚至不表达。 ｂ２ａ２型 Ａｓｐｏ对表达 ｂ３ａ２型 ｍＲＮＡ的 Ｋ５６２细胞也表现出交叉抑制作用。结论：ｂｃｒ－ａｂｌ融合基因反义寡核苷酸对Ｋ５６２细胞具有特异性增殖抑制作用,在慢性粒细胞白血病基因治疗中值得深人研究。     

两例无t（8;21）M2b型急性髓系白血病的基因检测

两例无ｔ（８；２１）Ｍ_（２ｂ）型急性髓系白血病的基因检测肖志坚，王建祥，郝玉书，李建波，陈佩贞，卞寿庚，钱林生，孟庆祥Ｍ２ｂ型急性髓系白血病（ＡＭＬ）常见ｔ（８；２１）（ｑ２２；９２２）染色体易位［１］。１９９１年在２１号染色体ｑ２２断裂区发现了Ａ?..     

肺癌中PTEN蛋白的表达

蛋白酪氨酸磷酸酶基因 (Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅａｎｄｔｅｎｓｉｎｈｏｍｏｌｏｇｄｅｌｅｔｅｄｏｎｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｔｅｎ ,ＰＴＥＮ/Ｍｕｔａｔｅｄｉｎｍｕｌｔｉｐｌｅａｄｖａｎｃｅｄｃａｎｃｅｒ1 ,ＭＭＡＣ1 ) [1 5] 是 1 997年发现位于 1 0号染色体 (1 0ｑ2 3)上的一个基因 ,其编码蛋白质即蛋白酪氨酸磷酸酶 (Ｐｒｏｔｅｉｎｔｙｒｏｓｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ)。为了探索ＰＴＥＮ蛋白在肺癌中表达的意义 ,我们用该蛋白的抗体对肺癌进行了免疫组织化学研究 ,现将结果报道于下。一、材料与方法1 材料 :根据ＷＨＯ分类…     

人β2微球蛋白基因的克隆与鉴定

人 β2微球蛋白基因 (β2 ｍｉｃｒｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ,β2 Ｍ)位于染色体15ｑ2 1～ 2 2 .2 ,成熟蛋白产物由 99个氨基酸组成 ,是ＨＬＡ Ⅰ类分子的轻链 ,在ＣＤ8+ 细胞毒Ｔ细胞 (ＣＴＬ)反应中起重要作用。近年发展的ＨＬＡⅠ 肽四聚复合物 (ｔｅｔｒａｍｅｒｉｃｃｏｍｐｌｅｘ)技术 ,就是通过基因工程制备ＨＬＡ Ⅰ类分子的轻链和重链 ,模拟靶细胞膜表面的ＨＬＡⅠ 表位复合物与Ｔ细胞受体 (ＴＣＲ)结合来检测Ｔ细胞群中相应表位的特异性ＣＴＬ[1] 克隆。为此 ,我们采用逆转录聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)克隆了 β2 Ｍ ,并进行了鉴…     

EB病毒LMP1促鼻咽癌细胞生长与CD23、bcl-2表达和凋亡的关系

目的 :探讨ＥＢ病毒ＬＭＰ1表达的促鼻咽癌细胞生长作用与ＣＤ2 3、ｂｃｌ- 2表达和细胞凋亡的关系。方法 :用免疫组化ＬＳＡＢ法检测ＬＭＰ1、ＣＤ2 3和ｂｃｌ- 2蛋白的表达 ;用ＭＴＴ法测定鼻咽癌细胞的生长能力 ;用ＤＮＡ电泳法、流式细胞仪测定法和末端脱氧核苷酸转移酶介导核苷酸缺口标志 (ＴＵＮＥＬ)法检测癌细胞凋亡 ;用ＭＴＴ法观察ＣＤ2 3单克隆抗体对鼻咽癌细胞生长能力的影响。结果 :用含ＬＭＰ1基因质粒转染并表达ＬＭＰ1的鼻咽癌细胞 (Ｌ -ＣＮＥ1 )在 1 5%血清和无血清培养液培养下的生长能力均明显增强 ,并表达ＣＤ2 3蛋白 …