胆囊结石患者胆汁、粘膜和结石细菌的分子生物学研究

我们采用聚合酶链式反应脱氧核糖核酸扩增技术（ＰＣＲＤＮＡ）对胆囊结石患者胆汁、粘膜、结石、门静脉血细菌ＤＮＡ进行研究，现将结果报道如下。一、对象与方法１．方法　７０例单纯胆囊结石患者，其中男２６例，女４４例，年龄１８～７１岁，平均（４３．６２±１２．０２）岁，经Ｂ超检查诊断为胆囊结石，同期施行腹腔镜胆囊切除术，且患者近半年来无急性发作史。２．方法　（１）标本收集：完成腹腔镜胆囊切除，在无菌操作下分别收集门静脉血、胆汁、粘膜和结石［１］。（２）细菌引物：需氧菌包括大肠埃氏杆菌、伤寒杆菌、幽门螺…     

胆汁钙离子在胆结石形成中的病理作用

胆汁钙离子在胆结石形成中的病理作用石新山黄懋魁伍福乐胆固醇、胆色素结石中均含有胆色素钙、碳酸钙、脂肪酸钙等钙盐，且胆固醇结石核心也存在胆色素钙颗粒，表明胆汁钙离子（Ｃａ２＋）及其他成分改变对胆结石形成起病理作用［１，２］。我们通过测定胆结石胆汁ｐＨ，...     

结石对胆囊粘膜病理损害与胆囊癌关系的研究

研究１２０例结石性慢性胆囊炎，７５例无结石慢性胆囊炎及２４例胆囊癌的胆囊标本，结果显示结石组中胆囊粘膜的非典型增生病变的发生率为２５．８％，无结石组中发生率为２．７％，两组判别有极显著性意义（Ｘ＾２＝１７．６０，Ｐ〈０．０１）。说明结石的存在加重胆囊粘膜的病理损害。对各组胆囊粘膜细胞核ＤＮＡ含量及ＡｇＮＯＲ颗粒计数进行研究，发现单纯增生、轻、中、重非典型增生，高、中、低分化胆囊癌，其ＤＮＡ含量及Ａ     

单个与多发胆固醇结石患者胆道细菌感染状况及与免疫球蛋白相关性的对照研究

目的 多发胆固醇结石患者胆囊炎症程度较高,可能与结石形成有关.对多发和单个胆固醇结石患者胆道细菌感染状况及与免疫球蛋白含量的相关性进行对照研究.方法 :用半定量PCR法测定分析38例胆囊结石患者胆石、胆汁和粘膜的细菌DNA阳性率和菌落数,并测定相应胆汁和粘膜IgA、IgG、IgM含量.结果 :单个和多发胆石组的胆汁细菌DNA阳性率分别为75.0%和73.7%,胆囊粘膜细菌DNA阳性率分别为66.7%和64.0%,结石核心的细菌DNA阳性率分别为57.1%和85.7%,结石外周细菌阳性率分别为71.4%和85.7%,两组间差异均无显著性.两组间胆汁和粘膜IgA、IgG、IgM含量差异无显著性,菌落数与免疫球蛋白含量不相关.多发胆石组粘膜细菌DNA阳性者的胆囊粘膜IgA、IgG含量高于阴性者(P<0.05).单个和多发胆石组胆汁胆固醇饱和指数(CSI)差异无显著性,各组内胆汁细菌阳性与阴性者的CSI差异也无显著性.结论 :多发和单个胆固醇结石患者胆囊细菌感染率相似,细菌感染不是多发胆固醇结石患者胆囊炎症严重的原因.多发胆固醇结石患者胆囊粘膜细菌与IgA、IgG含量增高有关,可能间接参与胆固醇结石的形成过程.     

肝胆管结石并发门静脉高压症外科治疗探讨

目的探讨肝胆管结石合并胆汁性肝硬化门静脉高压症的外科治疗方法。方法全面评估患者,积极术前准备,对大多数患者施行一次性胆道手术,治愈率为95．5％。结论胆汁性肝硬化门静脉高压症患者经去除胆道结石梗阻,建立有效引流后肝硬化门静脉高压症有可能逆转,故对大多数患者可行一次性胆道手术治疗。     

胆囊结石时胆囊粘膜的病理损害及其与胆囊癌的关系

目的 研究胆囊结石时胆囊粘膜的病理损害过程中细胞ＤＮＡ及核仁形成体区嗜银蛋白（Ａｇｎｏｒ）含量的改变,探讨各型病理改变在胆囊癌发病中的位置。方法 应用免疫组织化学方法对１５６例胆囊结石及９例合并结石的胆囊癌标本进行对照研究。结果 胆结石引起胆囊粘膜典型增生、非典型增生及胆囊癌的发生率分别为７５．１５％、１９．３９％、５．４５％。引起粘膜的肠上皮化生发生率为３８．７８％。从单纯增生、非典型增生到胆囊癌细胞Ａｇｎｏｒ蛋白及ＤＮＡ含量逐级增高。结论 胆囊结石可引起不同程度的粘损伤,粘膜的非典型增生为胆囊癌的癌前病变。     

瘦素与胆结石形成的关系

瘦素(Leptin)是由脂肪细胞分泌的一种调节机体能量平衡的激素.胆结石病人血中瘦素的浓度较高,瘦素可以通过调节脂质代谢,影响胆囊的收缩性,改变胆汁蛋白的成分等机制影响结石的形成.本文就对瘦素在胆结石形成中的作用的研究进展做一综述.     

90年代初、末海南地区胆石症特点的变迁

为分析海南地区相隔近8年的两组胆结石患者的临床特点和胆汁细菌培养结果的变化。笔者对1989年10月~1994年3月246例（甲组）和1998年10月~2001年3月135例（乙组）两组胆结石患者的临床特点包括性别、年龄、结石部位、胆汁细菌培养结果等进行分析对比。 结果显示甲组平均年龄44.3岁，乙组平均年龄51.6岁。甲组单纯胆囊结石和胆管结石分别占8.5%，91.5%，乙组分别占48.1%，51.9%。两组分别有20.7%和14.1%合并胆道化脓性感染。甲组92.7%胆汁培养阳性，其中G-杆菌占92.2%，G+球菌占7.8%；乙组48.0%胆汁培养阳性，其中G-杆菌占75.9%，G+球菌占24.1%。提示海南地区近8年来胆结石患者平均年龄增高，胆囊结石住院构成比呈增高趋势。胆道化脓性感染呈下降趋势，胆汁培养G-杆菌下降，而G+球菌则有升高趋势。     

套式聚合酶链反应扩增胆固醇结石中细菌DNA及其临床意义研究

为探讨细菌在胆固醇结石发病机理中的作用，从３０例胆汁细菌培养阴性的胆囊胆固醇结石中提取ＤＮＡ，应用套式聚合酶链反应扩增细菌１６ＳｒＲＮＡ基因片段作为有细菌存在的分子证据。结果显示，２６例胆固醇结石中有细菌ＤＮＡ存在。提示细菌可能在胆固醇结石的形成中具有一定的作用。     

色素结石是小菌落和色素粒子的复合物

作者进行下列实验观察:1) 胆结石形态。85块病人结石经脱水固定后剖开,在扫描电镜下观察其表面及内部。2) 粘着于结石表面的细菌。取78块胆结石(色素结石及胆固醇结石各39块),从病人胆汁培养分离出15种细菌。将细菌放入灭菌的胆汁(42例)或肉汤(36例)中,做成15种不同细菌的悬浊液。在每种细菌悬浊液中放入一块已灭菌的结石,进行培养。每种     

聚合酶链反应对胆囊癌组织中细菌DNA片段的检测研究

目的　研究胆囊癌组织及相应胆汁中的细菌菌谱,以探讨胆囊癌的发生与细菌感染的关系。方法　采用聚合酶链反应（ＰＣＲ） ,对３７ 例胆囊癌组织标本及９ 例相应胆汁中的细菌ＤＮＡ 片段进行分子生物学扩增。结果　３７ 例胆囊癌组织标本中细菌ＤＮＡ 片段检出率为７８－３７％ （２９／３７）,９ 例相应胆汁中细菌ＤＮＡ检出率为７７－８％ （７／９）。结论　胆囊粘膜癌变可能与厌氧菌尤其是产气荚膜梭菌感染存在联系,厌氧菌与需氧菌协同作用,长期刺激胆囊粘膜可能是引起癌变的主要因素。     

单结合型胆红素与胆石形成的关系

观察实验性胆结石豚鼠的胆汁和胆石，人类各型胆结石及胆汁保温沉淀和溶血性黄疸模型动物的胆汁中胆红素组分的含量及变化。发现：成石豚鼠的胆石及胆囊胆汁中，存在较高比例的单结合胆红素（ＭＣＢ），分别占总胆红素的１／３和２／３。ＭＣＢ在人类胆红素石和胆固醇核心中分别占总色素的２．３％和１４．９％，而黑色结石中则有一种ＭＣＢ异构体的色素占９．６％。ＭＣＢ％和ＵＣＢ％在保温孵育的人胆汁上清和沉淀中含量相当，双结     

胆囊粘膜功能与其结石形成的关系（文献综述）

胆囊粘膜的吸收与分泌功能与胆囊结构的形成密切相关，胆囊粘膜对肝胆汁的吸收作用，使其中具有重要生理功能的各成份浓度十倍地上升，促进结石形成胆囊粘膜分泌的多种糖蛋白，也对结石的形成有关。     

胆固醇性胆石症患者胆汁及血清中胆汁酸含量的初步观察

胆汁酸代谢紊乱是形成胆结石的重要原因。当胆汁中胆汁酸的相对含量下降，胆固酸／胆汁酸＞1：11时，胆汁胆固醇即呈过饱和状态，形成“致石胆汁”（Lith。geni。Bile）［fi。血清胆汁酸含量是反映机体胆汁酸代谢的重要指标。为此我们对胆石患者及非胆石患者的血清胆酸含量及胆汁类脂含量进行了比较。1材料和方法1．1病例选择及分组本研究选择胆固醇结石患者及非胆石患者各30例。年龄在30～60岁之间，均为上海市区女性居民，饮食习惯类同；无其他胃肠道疾病及糖尿病、甲亢等代谢性疾病，一年以内未服用降脂药、激素类药物（如避孕药，皮质…     

套式聚合酶链反应扩增胆固醇结石中细菌DNA及其临床意 …

为探讨细菌在胆固醇结石病机理中的作用，从３０例胆汁细菌培养阴性的胆囊胆固醇结石中提取ＤＮＡ，应用套式聚合酶链反应扩增细菌１６ＳｒＲＮＡ基因片段作为有细菌存在的分子证据。结果显示，２６例胆固醇结石中有细菌ＥＮＡ存在。     

由胆固醇结石提取DNA进行套式聚合酶链反应的研究

为探讨微生物在胆固醇结石形成中的作用，作者从３０例胆汁细菌培养阴性的胆囊胆固醇结石中提取ＤＮＡ，应用套式聚合酶链反应（ＮＰ－ＰＣＲ）技术从中特异性地扩增细菌ＤＮＡ片段。结果显示２６例（８６．６７％）胆固醇结石中有细菌ＤＮＡ存在。此外，用１６ＳｒＲＮＡ基因序列对照分析鉴定细菌种类，８例（２６．６７％）为与大肠杆菌相似的ＤＮＡ片段；７例（２３．３３％）为痤疮丙酸杆菌型ＤＮＡ序列；２例（６．６７％）ＤＮＡ片段与化脓性链球菌相关；７例（２３．３３％）ＤＮＡ片段具有多样性，可能有多种细菌混合感染；另外２例（６．６７％）ＤＮＡ分子量较低，归类于其它未鉴定细菌。作者认为多数胆固醇结石内有细菌ＤＮＡ存在，但这些微生物的确切作用，有待于进一步深入研究。     

人正常与结石性胆囊上皮细胞分泌颗粒和溶酶体的定量分析及其意义

作者对20例胆固醇结石和15例正常人的胆囊上皮细胞分泌颗粒和溶酶体进行了定量分析，同时测定其胆囊胆汁中的糖蛋白含量，比较两组间的差异。结果显示：结石组胆囊上皮细胞分泌颗粒数、体密度和总面积均明显高于对照组，而溶酶体含量则明显低于对照组，结石组胆汁中糖蛋白含量较对照组高，且胆汁中糖蛋白含量与细胞分泌颗粒数呈正相关，与溶酶体含量呈负相关。作者认为胆囊上皮细胞分泌颗粒影响胆汁糖蛋白量的变化，而溶酶体则可能与细胞内分泌颗粒或蛋白的降解有关，提示胆襄粘膜细胞内结构改变对结石形成起有一定作用。     

人正常与结石性胆囊上皮细胞分泌颗粒和溶酶体的定量分析及其意义

作者对２０例胆固醇结石和１５例正常人的胆囊上皮细胞分泌颗粒和溶酶体进行了定量分析，同时测定其胆囊胆汁中的糖蛋白含量，比较两组间的差异。结果显示：结石组胆囊上皮细胞分泌颗粒数、体密度和总面积均明显高于对照组，而溶酶体含量则明显低于对照组；结石组胆汁中糖蛋白含量较对照组高，且胆汁中糖蛋白含量与细胞分泌颗粒数呈正相关，与溶酶体含量呈负相关。作者认为胆囊上皮细胞分泌颗粒影响胆汁糖蛋白量的变化，而溶酶体则可能与细胞内分泌颗粒或蛋白的降解有关，提示胆囊粘膜细胞内结构改变对结石形成起有一定作用。     

单纯胆囊结石患者胆囊胆汁淀粉酶改变及其意义探讨

目的探讨单纯胆囊结石患者胆囊胆汁淀粉酶(amylase,AMY)的改变及其意义。方法影像学诊断明确的单纯胆囊结石患者50例,均行LC术,术中取胆囊胆汁3 mL,采用干化学法检测AMY,与血AMY比较,并对切除的胆囊行常规病理检查。结果 50例患者中胆囊胆汁AMY为30~3 020 U/L,平均(474.7±753.2)U/L,与血清AMY(64.3±17.1)U/L比,胆汁AMY明显升高(P0.05)。其中胆固醇性结石19例,胆色素性结石14例,混合性结石17例,胆色素性结石组和混合性结石组均高于胆固醇性结石组的胆汁AMY(P0.05)。腺肌症胆汁AMY水平高于非腺肌症的AMY水平(P0.01)。结论胆囊结石患者存在胰胆反流,胆汁中AMY升高可能与结石形成及胆囊的病理学改变密切相关。     

骨桥蛋白在胆固醇结石患者胆汁中的表达及成核作用研究

目的 探讨骨桥蛋白在人胆固醇结石形成中的作用.方法 36例胆固醇结石患者为结石组,19例肝移植供体为正常组,分别测定骨桥蛋白、钙离子及脂质成分在胆囊胆汁中的含量,用成核时间法研究骨桥蛋白在胆汁中的成核作用.结果 骨桥蛋白呈剂量依赖性地抑制胆固醇自发成核.50 μg/ml的骨桥蛋白可分别使结石组和正常组胆汁的成核时间延缓48.90％和17.07％,100 μg/ml的骨桥蛋白可使成核时间延缓91.51％和32.93％;并可抑制钙离子诱导的促成核作用.50μg/ml骨桥蛋白+钙离子可分别使结石组和正常组胆汁成核时间延缓75.78％和33.96％,而100μg/ml骨桥蛋白+钙离子则使成核时间分别延缓125.90％和62.26％.结石组胆汁中胆固醇、磷脂、胆汁酸及胆固醇饱和指数均显著高于正常组胆汁(P＜0.05),而骨桥蛋白和钙离子含量则明显低于正常组胆汁中的含量(P＜0.05).结论 骨桥蛋白可抑制胆固醇成核,并参与胆结石的发生发展.