寒凝证类痛经大鼠模型血液流变学实验观察

目的:建立寒凝证类痛经动物模型,观察其血液流变学的变化.方法:动情间期雌性SD大鼠39只,随机分为4组:空白对照组、类痛经模型组,冷冻5d加给药组、冷冻10 d加给药组.对照组同步抓取不做任何处理,其余3组均每日给予大鼠皮下注射苯甲酸雌二醇注射液,连续10 d,第1天及第10天每日注射0.5 mg/只,第2～9天每日0.2 mg/只,末次给药1h后,腹腔注射缩宫素2 U/只.每天在注射以后,冷冻5d加给药组、冷冻10 d加给药组的大鼠放入低温冷柜(-25 ℃)冷冻,持续受冻4h左右,中间间隔2h开盖通气5s,制备寒凝证类痛经模型,并检测血液流变学指标.结果:与空白对照组比较,类痛经模型组、冷冻5d加给药组的全血还原黏度高切明显升高(P＜0.05);冷冻5d加给药组的刚性指数明显升高(P＜0.0)5).结论:通过血液流变学改变认为-25℃,5d冷冻并结合类痛经模型的制备方法,可成功制备寒凝证类痛经大鼠模型.     

寒凝证类痛经大鼠子宫体表温度及艾灸干预作用的研究

目的:观察寒凝证类痛经大鼠子宫体表投影区红外温度及其艾灸后的变化,探讨艾灸对子宫体表温度的影响及灸局部穴和远部穴的效应差异。方法:将48只3月龄雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、关元组、三阴交组,每组12只。除正常组外,其余各组大鼠以全身冷冻结合苯甲酸雌二醇注射法造模,关元组和三阴交组于造模结束后分别进行艾灸,3壮/穴。采用红外热成像方法动态监测各组大鼠灸前、灸后即刻、灸后5、10、20、30、40、50、60 min子宫体表投影区温度。结果:(1)时点温度:四组间不同时点的温度变化有统计学意义(F=243.46,P=0.000.05)。分组与监测时间的交互作用有统计学意义(F=16.21,P=0.000.05)。四组间红外温度的差异有统计学意义(F=3.35,P=0.030.05)。其中,正常组各监测时点间温度差异均无统计学意义;模型组灸后20~60 min各时点比灸前温度显著降低(P0.05);灸后30~60 min各时点比灸后即刻温度显著降低(P0.05);三阴交组灸后5~60 min各时点比灸前温度显著降低(P0.05);灸后10~60 min各时点比即刻温度显著降低(P0.01);关元组灸后即刻比灸前温度显著升高(P0.05),灸后5~60 min各时点均比灸前及即刻温度显著降低(P0.05)。(2)时段温差:与正常组、模型组比较,三阴交组和关元组的灸后5~60 min各点与灸前温度差值均显著增大(P0.05);与三阴交组比较,关元组的灸后即刻与灸前温度差值显著增大(P0.05)。正常组和模型组的各点温度差值未见显著差异(P0.05)。结论:寒凝证类痛经大鼠子宫体表投影区存在持续40 min温度降低时段,艾灸可使温度下降时点提前,使该段温度下降幅度显著增加;且灸局部穴和远端穴的即刻效应不同。说明艾灸在一定时间内促进子宫体表红外温度的下降,艾灸对于痛经的治疗作用并非依靠直接提高子宫体表温度,其具体起效机制尚须进一步探讨。     

寒凝血瘀证痛经证治浅谈

妇女经行前后及行经期间出现小腹疼痛，或痛引腰骶，甚至剧痛晕厥者，称为“痛经”，亦称“经行腹痛”。经行腹痛病位在胞宫、冲任，以不荣则痛或不通则痛为主要病机。在临床上痛经以病因病机为分型依据，笔者认为以寒凝血瘀型最多见（尤在我国北方），寒凝血瘀型系因寒致瘀而发的痛经。     

振腹法治疗寒凝证类原发性痛经模型大鼠优效参数组合的探讨

目的 探究振腹治疗寒凝证类痛经大鼠的优效参数。方法 采用全身冷冻法结合苯甲酸雌二醇、缩宫素注射法建立寒凝痛经大鼠模型,随机分为盐水组、模型组以及9个振腹组,共11个组,每组6只。在冷冻5天、振腹干预5天,同时每日注射苯甲酸雌二醇致敏后,注射缩宫素致痛,立即测定大鼠扭体潜伏期、扭体次数和子宫体表投影温度,并计算扭体评分。(1)采用方差分析法观察盐水组、模型组和9个振腹组间的差异。(2)采用三因素三水平正交实验方差分析9个振腹组的行为学结果,找出影响振腹疗效的主因素,并得出疗效最优参数组合。结果 (1)与盐水组比较,模型组扭体潜伏期明显缩短,扭体评分明显增加,子宫体表投影温度明显降低(P0.01);与模型组比较,4个振腹组扭体潜伏期明显延长(P0.05),8个振腹组扭体评分明显减少(P0.05),所有振腹组子宫体表投影温度均显著增高(P0.05)。(2)振腹组正交实验结果显示:振腹疗法最主要的影响因素为治疗时间(P0.01)。综合考虑痛经发作潜伏期、疼痛程度及子宫温度,振腹治疗寒凝证类痛经大鼠的综合优效参数组合为长时间、高频、低幅。结论 振腹疗法能够延长寒凝证痛经大鼠的潜伏期,减轻疼痛,提高子宫温度。治疗时间是影响振腹法治疗寒凝证类痛经的最主要参数。长时间、高频、低幅振动是治疗寒凝证类痛经的最优效参数组合。     

温经汤对寒凝血瘀证大鼠模型血液流变学指标的影响

目的 观察温经汤对寒凝血瘀证模型大鼠血液流变学的影响,反证模型的建立并研究温经汤对寒凝血瘀证的干预作用.方法 制作急性寒凝血瘀证大鼠模型,并给予温经汤煎剂灌胃1周,腹主动脉取血检测全血黏度、毛细管血浆黏度、红细胞聚集指数、红细胞变形指数及红细胞压积.结果 与对照组比较,模型组全血黏度、毛细管血浆黏度、红细胞聚集指数及红...     

温经汤对寒凝血瘀证大鼠模型血液流变学指标的影响

目的观察温经汤对寒凝血瘀证模型大鼠血液流变学的影响,反证模型的建立并研究温经汤对寒凝血瘀证的干预作用。方法制作急性寒凝血瘀证大鼠模型,并给予温经汤煎剂灌胃1周,腹主动脉取血检测全血黏度、毛细管血浆黏度、红细胞聚集指数、红细胞变形指数及红细胞压积。结果与对照组比较,模型组全血黏度、毛细管血浆黏度、红细胞聚集指数及红细胞压积明显升高（P〈0．05或P〈0．01）,红细胞变形指数下降（P〈0．05）;而与模型组比较,中药组各项指标明显改善,均具有统计学意义（P〈O．05或P〈0．01）。结论温经汤可改善大鼠寒凝血瘀证模型血液流变学指标,提示中药对血瘀证防治具有积极作用。     

寒凝证类痛经大鼠子宫张力和体表区域温度的变化及艾灸干预作用的实验研究

目的:观察艾灸不同介入时机对寒凝证类痛经大鼠左右三阴交、左右三阴交-血海连线温度的影响及其与镇痛效应的相关性。方法:通过阴道涂片筛选出动情间期3月龄SD雌性大鼠,随机分为盐水组、模型组、灸三阴交1次组(第10d施灸)、灸三阴交3次组(第6d、8d及10d施灸),每组20只。除盐水组外,模型组、灸三阴交1次组、灸三阴交3次组采用全身冷冻法结合苯甲酸雌二醇注射法造模。运用红外热成像仪检测左右三阴交穴区、三阴交-血海连线区各时间点温度。运用BL-420E+生物机能实验系统检测在体大鼠子宫收缩强度。结果:与盐水组相比,模型组子宫收缩强度明显增强(P0.01);与模型组比较,两艾灸组均显著减少了子宫收缩波个数(P0.01)并降低了子宫活动度(P0.01),两艾灸组间差异无统计学意义(P0.05)。盐水组在各个时间点,大鼠左右三阴交穴区及三阴交-血海连线区温度平衡(P0.05);模型组大鼠左右三阴交穴区在5~60各个时间点温度失衡(5、40、50、60P0.05,10、20、30P0.01)左右三阴交-血海连线区即刻-30各个时间点温度失衡(5、30P0.05,即刻、10、20P0.01);两艾灸组在各个时间点,大鼠左右三阴交穴区、三阴交-血海连线区温度平衡(P0.05)。结论:艾灸三阴交可明显缓解寒凝证类痛经大鼠子宫痉挛性收缩,并改善三阴交穴区及三阴交-血海连线区左右温度的失衡状态。艾灸不同介入时机对于缓解痛经的疼痛状态无差异。     

不同艾灸量对寒凝证类痛经大鼠疼痛反应及脊髓内μ受体mRNA表达的影响

目的:观察不同刺激量艾灸关元穴对寒凝证类痛经大鼠扭体反应及脊髓内μ受体表达的影响,探讨不同灸量的镇痛效应及其部分中枢机制。方法:按随机数字表法将60只雌性SD大鼠,随机分为盐水组、寒凝证类痛经模型组、A组(艾灸1壮)、B组(艾灸3壮),每组15只。除盐水组外,其它各组采用全身冷冻法结合苯甲酸雌二醇注射液加缩宫素注射法制备寒凝证类痛经大鼠模型,A组和B组以不同灸量艾灸关元穴。观察大鼠扭体反应,并以荧光定量PCR(RT-PCR)法测定脊髓内μ受体mRNA的表达水平。结果:(1)扭体反应:与盐水组比较,模型组、B组扭体潜伏期缩短、扭体次数、扭体评分明显增高(P<0.05)。与模型组比较,A组、B组扭体次数、扭体评分明显减少(P<0.05)。(2)脊髓μ受体mRNA的表达:与盐水组比较,A组与B组的表达均增强(P<0.01),与模型组相比,A组与B组的表达增强(P<0.01)结论:(1)不同艾灸量施予关元穴对寒凝证类痛经大鼠模型均有镇痛作用。(2)艾灸产生镇痛效应的部分机制可能通过增强寒凝证类痛经模型大鼠脊髓内阿片受体的表达产生镇痛效应。     

寒凝证类痛经大鼠经穴左右红外温度及艾灸作用的研究

目的观察寒凝证类痛经大鼠左右穴区及经穴连线艾灸前后红外温度,比较灸三阴交与关元效应差异。方法阴道涂片法筛选动情间期大鼠48只,随机分为正常组、模型组、三阴交组和关元组,每组12只。全身冷冻结合苯甲酸雌二醇注射法造模,治疗组分别灸双侧三阴交和关元,3壮/穴。红外热成像仪动态监测相关穴区及经络连线左右艾灸前后红外温度。结果与正常组比较,灸后5~30 min,模型组三阴交-血海经络连线左右温差显著增加(P0.05);灸后30 min,其他3组三阴交右侧穴区温度显著降低(P0.01)。与模型组比较,灸后5~30 min,三阴交组三阴交-血海经络连线左右温差显著降低(P0.05),关元组10~30 min连线左右温差显著降低(P0.05);两艾灸组比较,三阴交组对连线左右温差影响早于关元组。结论艾灸可显著减小经络连线左右温差,缓解失衡状态,且灸三阴交恢复失衡作用早于灸关元。     

针刺不同穴位对寒凝证类痛经大鼠左右三阴交穴区温度变化的影响

目的:观察针刺不同穴位对寒凝证类痛经大鼠的三阴交(双)穴区温度的影响及其与镇痛效应的相关性。方法:将大鼠随机分为盐水组、寒凝证类痛经模型组(简称模型组)、针刺三阴交组、针刺关元组。采用全身冷冻法结合注射苯甲酸雌二醇和缩宫素造模,用红外热成像方法检测各组大鼠左右两侧三阴交穴区各时间点温度,并同步观测各组大鼠的扭体反应。结果:与盐水组比较,模型组扭体潜伏期明显缩短、扭体次数明显增多、扭体总分明显升高(P<0.01);与模型组比较,两针刺组扭体潜伏期均明显延长、扭体次数均减少、扭体总分均降低(P<0.05,P<0.01)。模型组大鼠在5-60min左右三阴交穴区温度失衡(P<0.05,P<0.01);针刺三阴交组大鼠在10-40min左右三阴交穴区温度失衡(P<0.05);针刺关元组大鼠在0-30min左右三阴交穴区温度失衡(P<0.05)。针刺三阴交穴在针刺5min时、针刺结束后50-60作用显著,针刺关元穴仅在针刺结束后40-60min作用显著。结论:寒凝证类痛经大鼠处于疼痛状态且左右三阴交穴区温度失衡;针刺三阴交穴、关元穴均能缓解疼痛反应,调节其失衡状态。     

温经散寒脐贴治疗寒湿凝滞型原发性痛经患者的疗效观察

目的:观察温经散寒脐贴对寒湿凝滞型痛经患者的临床疗效。方法:选取116例寒湿凝滞型痛经患者,随机分成观察组(60例)和对照组(56例),对照组常规西药对症治疗,观察组在对照组的治疗用药基础上加用中药脐贴治疗。每周期治疗时间共4天,治疗4个周期,治疗结束后评价两组的治疗效果。治疗结束后3个月,随访统计复发情况。结果:治疗结束后观察组临床痊愈22例(36.67%),显著高于对照组11例(19.64%)(P<0.05),观察组总有效率93.33%,对照组总有效率73.21%,两组具有显著差异(P<0.01)。对不同程度痛经患者分别统计疗效发现,观察组中中度痛经患者的总有效率为96.88%,显著高于对照组中中度痛经患者的治疗总有效率70.79%。(P<0.05)。治疗结束3个月后,观察组有14例患者症状复发,显著低于对照组28例(P<0.01)。结论:温中散寒脐贴可以提高寒湿凝滞型痛经患者的临床疗效。     

肝郁型黄褐斑小鼠模型的建立及其与现有模型的比较研究

目的：建立并验证肝郁型黄褐斑小鼠模型，并与现有其他模型进行比较。方法：注射黄体酮同时，进行慢性束缚和紫外线局部照射。结果：黄体酮＋紫外线＋束缚复合法造模较其他方法更能导致皮肤丙二醛（MDA）升高和超氧化物歧化酶（SOD）降低以及皮肤黑色素细胞的增加，并且具有肝郁证的行动学表现。结论：黄体酮＋紫外线＋束缚法建立的肝郁型黄褐斑小鼠多因素模型获得成功。     

原发性痛经的中医证候分布特点分析

目的：研究原发性痛经的中医证候分布及其特点。方法：按入选、排除标准收集原发性痛经的患者240例，分析在不同年龄、病程、婚姻状况、痛经疼痛程度、痛经疼痛持续时间方面的中医证候分布及各证候的特点。结果：本病实证多于虚证，实证中以寒湿凝滞证最常见，其次是气滞血瘀证，而虚证中以气血虚弱证为多，中医证候在不同的年龄、病程、VAS、疼痛时间，均有不同的特点。结论：重视原发性痛经的年龄、病程、疼痛程度与持续时间，治疗时，及时根据病情，加用活血化瘀行气温经的药物。     

原发性痛经的中医证候分布特点分析

目的:研究原发性痛经的中医证候分布及其特点。方法:按入选、排除标准收集原发性痛经的患者240例,分析在不同年龄、病程、婚姻状况、痛经疼痛程度、痛经疼痛持续时间方面的中医证候分布及各证候的特点。结果:本病实证多于虚证,实证中以寒湿凝滞证最常见,其次是气滞血瘀证,而虚证中以气血虚弱证为多,中医证候在不同的年龄、病程、VAS、疼痛时间,均有不同的特点。结论:重视原发性痛经的年龄、病程、疼痛程度与持续时间,治疗时,及时根据病情,加用活血化瘀行气温经的药物。     

妇科虚寒证大鼠模型的创建

目的 模拟妇科虚寒证发生的病因,依据“寒邪伤阳”的中医学理论,创建妇科虚寒证模型.方法 将SD雌性大鼠按随机数字表法分为模型组和正常组,每组20只.模型组置于0～1℃冰水中并放入4℃冰箱中,2次/天,20 min/次,共30天.每天测定大鼠体温及观察动情周期的变化,当大鼠体温降低(与正常组之间比较差异有统计学意义),阴道细胞涂片显示动情周期紊乱时,显示造模成功.择动情间期处死大鼠,检测血液生殖内分泌激素[血清卵泡刺激素( FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、孕酮(P)]、甲状腺功能[血清总三碘甲状腺原氨酸(T3)、总甲状腺素(T4)、促甲状腺素(TSH)]、肾上腺功能[血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(Cor)]、细胞免疫功能[血清白细胞介素-2(IL-2)]、能量检测[血浆环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、cAMP/cGMP比值,乳酸脱氢酶(LDH)]及胸腺、脾脏、子宫、卵巢指数.结果 与正常组比较,第30天时模型组动物外观差,被毛无光泽,耳、爪紫暗;精神萎靡,蜷缩少动,反应迟钝,喜扎堆;饮水量、食量减少,体重减轻,体温降低显著,便溏;动情周期、间期延长;血浆cGMP含量、cAMP/cGMP比值、LDH、血清IL-2含量及E2、P、T、T3、LH、TSH均有不同程度的降低,胸腺和卵巢指数显著降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 采用延长冰箱冷冻加冰水浸泡时间的方法制作的妇科虚寒证大鼠模型,符合妇科虚寒证的临床特征.     

寒凝血瘀模型大鼠红细胞膜生物学研究

目的: 从血液流变学和红细胞膜生物学变化探讨寒凝血瘀证在红细胞膜上的生物学差异。方法: 20只Wistar大鼠,随机分为空白组及寒凝血瘀组,每组10只。寒凝血瘀组大鼠置于0~1℃冰水中8~10 min,待大鼠全身僵直后取出,连续造模14 d,第15天大鼠皮下注射盐酸肾上腺素0.8 mL·kg^-1(0.8 mg·kg^-1),共2次,间隔4 h,2次之间将大鼠置于冰水中浸泡5 min,末次造模后禁食不禁水12 h。次日以乌拉坦1 g·kg^-1麻醉,固定,取血测定血液流变学指标以及红细胞膜组分相关指标。结果: 与空白组比较,寒凝血瘀组大鼠体重显著降低;全血黏度显著增高(P<0.05);血浆黏度及血脂无显著变化;红细胞变形指数在600,800,1 000 s^-1切变率下均显著降低(P<0.05);血沉K值显著升高(P<0.05);APTT(活化部分凝血活酶时间)降低极显著(P<0.01);FIB(纤维蛋白原)含量显著升高(P<0.05);TT(凝血酶时间)、PT(凝血酶原时间)无显著影响,但有降低趋势;Na⁺-K⁺-ATP酶活力、唾液酸含量及SOD(超氧化物歧化酶)活力均显著降低(P<0.05);MDA(丙二醛)含量及膜胆固醇含量有升高趋势但无显著差异;巯基含量有降低趋势,但无显著差异。结论: 寒凝血瘀模型可能由于红细胞膜上Na⁺-K⁺-ATP酶、唾液酸及SOD的减少导致全血黏度及红细胞变形性发生改变。     

慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气虚血瘀痰阻证评价

目的评价慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型的中医证候特征。方法采用气道内灌注内毒素加香烟烟熏的复合方法建立大鼠COPD模型,并对该模型从宏观状态、病理形态结构和肺功能等方面进行观测,评价该模型的中医证候特点。结果模型组大鼠皮毛失去光泽、黄涩,爪甲紫黯,精神萎靡,汗多,活动减少,少反抗,少厮咬,呼吸深大,活动加剧,体重较健康对照组减轻,气道分泌物增多;肺组织体积增大、出现瘀血,小气道壁、平滑肌、胶原较正常对照组增厚,差异有统计学意义（P〈0．05）,与正常组比较,肺呼气总阻力（Re）、最大通气量（MVV）、第0．3秒用力呼气容积与用力呼气容积的百分比（FEV0.3／FVC）、用力呼气流速（FEF25-75）均降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。给予益气活血化痰法中药复方干预后,COPD模型大鼠上述体现气虚血瘀证的表象轻,小气道气道壁、胶原厚度均较模型组薄,肺功能Re、FEV0.3、FEV0.3／FVC、MVV、FEF25-75优于模型组,差异有统计学意义。结论气道内灌注内毒素加香烟烟熏的复合方法建立的COPD大鼠模型符合人类COPD的病理及肺功能改变特点,同时也体现了气虚血瘀痰阻证证候学特征。     

针灸治疗气滞血瘀型原发性痛经临床观察

目的:观察针灸治疗气滞血瘀型原发性痛经的疗效。方法:80例原发性痛经的患者,随机分为观察组和对照组,每组各40例。观察组采用针灸治疗,对照组以芬必得口服。结果:观察组治愈率为65.5%,总有效率92.5%;对照组治愈率为36.5%,总有效率72.5%。两组总有效率比较,观察组明显优于对照组。结论:针灸治疗原发性痛经疗效可靠,明显优于口服芬必得胶囊,具有疗效好、副作用小的优点,值得临床推广。     

老年肝郁失眠证候大鼠模型的建立和评价

目的:建立并评价复合型老年肝郁失眠证候大鼠模型。方法:Wistar大鼠随机分为环境对照组,单因素模型组(睡眠剥夺组),复合型模型组,复合型模型+舒郁安神方35 g.kg-1.d-1治疗组。采用D-半乳糖腹腔注射60 mg.kg-1.d-1大鼠6周致亚急性衰老模型,然后采用夹尾刺激法致肝郁,每次刺激30 min,1日2次,持续1周,最后放入自制睡眠剥夺箱中进行快速眼动睡眠(REMS)剥夺48 h,制作老年肝郁失眠证候大鼠复合型模型。观测大鼠体征、脑部自由基水平及血浆6-酮-前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)、血栓素B2(TXB2)含量。结果:与环境对照组、单因素模型组、舒郁安神方组比较,老年肝郁失眠证候复合型模型组大鼠丙二醛(MDA)、TXB2含量均显著升高(P<0.01),而超氧化物歧化酶(SOD)活性、6-keto-PGF1a含量及6-keto-PGF1a/TXB2均显著降低(P<0.01)。结论:老年肝郁失眠证候大鼠模型具有临床证候病理特征,是可行、可靠的复合型动物模型。     

基于代谢组学的实寒证、虚寒证原发性痛经患者尿液的比较研究

目的:比较实寒证、虚寒证原发性痛经患者尿液内源性代谢物的异同,从整体角度分析两证的病理生理学机制,揭示同病异证的生物学本质差异。方法:采用病证结合模式,以实寒证、虚寒证原发性痛经患者为研究对象,选择N-甲基-N-三甲基-硅基三氟乙酰胺(MSTFA)作为衍生化试剂对月经周期第2d(MC2)尿液代谢产物进行气相色谱-飞行时间质谱(GC-TOFMS)检测,得出两组总离子流色谱图(TIC),结合非监督的主成分分析(PCA)进行多维统计分析,寻找实寒证、虚寒证原发性痛经的差异代谢产物。结果:两组检测出的差异性代谢产物有葡萄糖、果糖、异柠檬酸、乳酸、甘氨酸、原藻醇、马尿酸7种。与实寒组比较,虚寒组升高的有乳酸,降低的有葡萄糖、果糖、异柠檬酸、甘氨酸、原藻醇、马尿酸。结论:实寒证、虚寒证原发性痛经患者尿液的差异代谢物质涉及到糖、氨基酸代谢及肠道菌群的异常,主要差异点为糖代谢。