原因不明不孕患者子宫内膜胰岛素样生长因子Ⅱ及其受体mRNA的表达及其与性激素水平的相关性

目的探讨胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)及其Ⅰ型受体(IGF-ⅠR)、Ⅱ型受体(IGF-ⅡR) mRNA在原因不明不孕患者黄体中期子宫内膜的表达,及其与性激素水平变化的相关性.方法采用原位杂交、逆转录PCR(RT-PCR)技术,检测38例原因不明不孕患者(研究组)和20例正常育龄女性志愿者或因男方因素不孕患者(对照组)黄体中期子宫内膜IGF-Ⅱ、IGF-ⅠR、IGF-ⅡR mRNA的表达;放射免疫法测定同期血清雌二醇、孕酮水平.结果黄体中期子宫内膜间质细胞胞浆内,可见IGF-Ⅱ、IGF-ⅡR蓝色颗粒弥散分布,IGF-ⅠR 则主要在上皮细胞中分布.研究组IGF-Ⅱ mRNA的表达(灰度值,下同)为0.71±0.34,对照组为0.96±0.34,两组比较,差异有显著性(P<0.05);研究组IGF-ⅠR mRNA的表达为0.62±0.28,显著低于对照组的0.93±0.51(P<0.05);研究组IGF-ⅡR mRNA的表达为0.49±0.27,也显著低于对照组的0.73±0.36(P<0.05).研究组黄体中期孕酮水平为(34±15)nmol/L,显著低于对照组(53±17)nmol/L(P<0.01), 而血清雌二醇水平与对照组比较,差异无显著性(P>0.05).研究组与对照组IGF-Ⅱ mRNA与IGF-ⅠR、IGF-ⅡR mRNA的表达呈正相关;两组妇女孕酮与IGF-Ⅱ、IGF-ⅠR mRNA表达水平呈正相关;对照组孕酮与IGF-ⅡR mRNA表达水平呈正相关.结论原因不明不孕患者黄体中期孕酮不足,可能影响子宫内膜IGF-Ⅱ、IGF-ⅠR、IGF-ⅡR mRNA的表达,并可能是导致不孕的病因之一.     

基质金属蛋白酶9及其抑制剂在异位和在位子宫内膜组织中的表达

目的　探讨基质金属蛋白酶 9(MMP 9)及其抑制剂———金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)在子宫内膜异位症患者的异位和在位内膜组织中的表达。方法　采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白 过氧化物酶连接法 (SP法 ) ,分别检测 4 5例子宫内膜异位症患者 (研究组 )的异位和子宫内膜及 32例子宫肌瘤患者 (对照组 )的子宫内膜组织中MMP 9、TIMP 1的表达。结果　研究组异位和在位内膜及对照组子宫内膜组织中 ,MMP 9的表达分别为 0 381、0 336、0 2 76 ;TIMP 1的表达分别为0 2 39、0 2 5 3、0 2 6 7;研究组异位及在位内膜、对照组子宫内膜组织中MMP 9/TIMP 1的比值分别为1 5 94 ,1 2 93,1 0 34。研究组异位及在位子宫内膜组织中MMP 9、MMP 9/TIMP 1分别与对照组比较 ,差异均有显著性 (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ;研究组异位内膜组织中TIMP 1的表达与对照组比较 ,差异也有极显著性 (P <0 0 1) ;整个月经期 ,异位内膜组织中MMP 9表达升高 ,TIMP 1表达降低 ;在位内膜MMP 9表达升高 ,其中异位内膜比在位内膜MMP 9表达升高仅发生于增殖期。结论　异位子宫内膜组织中MMP 9、TIMP 1表达的变化可能与子宫内膜异位症的发生、发展有关。     

HOXA10基因在子宫内膜组织中的表达及与不孕的关系

目的　探讨HOXA10基因在正常育龄妇女及不明原因不孕患者子宫内膜中的表达 ,在着床过程中的作用及与不孕的关系。方法　采用原位杂交和逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,检测 5 2例正常育龄妇女及 38例不明原因不孕患者子宫内膜组织中HOXA10基因mRNA的表达。其中 ,正常育龄妇女子宫内膜周期为 10例增殖早期、10例增殖晚期、9例分泌早期、16例分泌中期、7例分泌晚期 ,不明原因不孕患者子宫内膜周期为增殖早期 7例、增殖晚期 8例、分泌早期 6例、分泌中期 11例、分泌晚期 6例。结果　 (1)HOXA10基因mRNA在正常育龄妇女子宫内膜腺体及间质中均有表达。原位杂交法检测 (以显色区灰度阳性单位表示 )显示 ,分泌中期腺体为 5 6 9± 0 5 7、间质为 7 48± 0 6 7,分泌晚期腺体为 5 99± 0 40、间质为 7 98± 1 0 8,显著高于增殖早期 (腺体 3 0 4± 0 30 ,间质3 2 5± 0 31)、晚期 (腺体 3 35± 0 2 0 ,间质 3 2 0± 0 37)和分泌早期 (腺体 3 0 7± 0 2 6 ,间质 3 18± 0 2 7)(P <0 0 1) ;分泌中、晚期间质表达高于腺体 (P <0 0 1)。RT PCR法检测显示 ,HOXA10基因mRNA表达 ,分泌中期为 (5 7 0± 3 4) %、晚期为 (5 6 2± 2 9) % ,显著高于增殖早期的 (31 8± 2 6 ) %、晚期的(32 2± 2 3) %和     

白血病抑制因子在子宫内膜异位症并发不孕患者黄体中期子宫内膜中的表达

目的:探讨白血病抑制因子(LIF)在子宫内膜异位症(EM)导致不孕机制中的作用。方法:采用原位杂交及免疫组织化学方法对15例异位症并发不孕患者黄体中期子宫内膜中的LIF mRNA及其蛋白的表达进行定位及半定量分析,并以15例有生育妇女作为对照组。结果:子宫内膜异位症组LIF mRNA平均光密度为3.12±0.32,LIF蛋白平均光密度为9.31± 2.10,显著低于对照组的6.25±2.14与15.70±1.52(P<0.05)。结论:子宫内膜异位症组黄体中期子宫内膜LIF表达下降可能是其不孕的原因之一。     

基质金属蛋白酶-9及其组织抑制剂TIMP-3在子宫内膜异位症的表达

目的 :探讨基质金属蛋白酶 9(MMP 9)及其抑制剂TIMP 3在子宫内膜异位症发生发展中的作用。方法 :采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白 过氧化物酶染色法 (SP法 )检测 4 3例子宫内膜异位症的异位内膜和在位内膜中MMP 9、TIMP 3的表达 ,以 19例正常子宫内膜为对照组 ,并用银染法观察腺上皮基底膜的完整性。结果 :在异位内膜组织的腺上皮细胞MMP 9呈高表达状态 ,与子宫内膜异位症在位内膜和正常子宫内膜相比 ,差异有高度显著性 (P <0 .0 1)。子宫内膜异位症的在位内膜和异位内膜TIMP 3均呈低表达 ,与正常内膜相比 ,差异有高度显著性 (P <0 .0 1) ,异位内膜较在位内膜TIMP 3的表达降低 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。子宫内膜腺上皮的基底膜银染结果显示 :MMP 9与TIMP 3的染色强度比值与基底膜的阳性率呈负相关 (P <0 .0 1)。MMP 9、TIMP 3的表达强度与子宫内膜异位症的严重程度无显著相关性。结论 :异位内膜组织中MMP 9过度表达 ,而TIMP 3的表达下降 ,导致MMP 9/TIMP 3的比例增高 ,使子宫内膜异位症患者的异位内膜更具侵袭性 ,在子宫内膜异位症的发生发展中起重要作用     

基质金属蛋白酶2、9及其特异性组织抑制剂在自发性胎膜早破发病中的作用

目的　探讨基质金属蛋白酶 (MMP) 2、9及其特异性组织抑制剂 (TIMP)在自发性胎膜早破发病中的作用。方法　采用RT PCR方法对 8例自发性胎膜早破患者 (胎膜早破组 )、8例正常阴道分娩产妇 (阴道分娩组 )以及 8例择期剖宫产产妇 (剖宫产组 )的胎膜组织中MMP 2、MMP 9和TIMP 2、TIMP 1mRNA的表达进行检测。结果　 (1)MMP 2 :胎膜早破组为 0 84 9± 0 0 37,阴道分娩组为 0 32 7± 0 0 2 3,剖宫产组为 0 30 7± 0 0 2 8。胎膜早破组MMP 2表达水平明显高于阴道分娩组和剖宫产组 ,两组比较 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5 ) ;阴道分娩组MMP 2表达水平与剖宫产组比较 ,差异均无统计学意义 (P >0 0 5 )。 (2 )MMP 9:胎膜早破组为 0 0 2 6± 0 0 0 4 ,阴道分娩组为 0 0 0 8± 0 0 0 1,剖宫产组无表达。胎膜早破组MMP 9表达水平明显高于阴道分娩组 ,两者比较 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。 (3)TIMP 2 :胎膜早破组为 0 4 2 0± 0 12 2 ,阴道分娩组为 0 730± 0 14 8,剖宫产组为 0 885± 0 0 6 5。胎膜早破组TIMP 2表达水平明显低于阴道分娩组和剖宫产组 ,两者比较 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5 ) ;阴道分娩组TIMP 2表达水平明显低于剖宫产组 ,两组比较 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。 (4)TI     

基质金属蛋白酶MMP-2 MMP-9及其抑制因子TIMP-1TIMP-2在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的　研究基质金属蛋白酶MMP 2、9和组织抑制因子TIMP 1、2在子宫内膜异位症中的表达及意义。方法　 2 0 0 0年 3月至 2 0 0 2年 4月应用免疫组化S P法检测卵巢巧克力囊肿 4 5例的异位内膜和其中 2 0例在位内膜 ,以及 2 2例正常子宫内膜中MMP 2、9及TIMP 1、2的表达。结果　异位内膜组织中MMP 2、9和TIMP 1、2的表达均显著高于在位内膜和正常内膜 (P <0 0 1)。在位内膜和正常子宫内膜组织细胞中的表达率比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。子宫内膜异位症组织中MMP 2、9的表达与侵袭程度正相关。TIMP 1、2的表达则与侵袭程度呈负相关。结论　MMP 2、9是检测子宫内膜异位症较好的分子标志 ,人工诱导TIMP 1、2或阻断MMP 2、9的表达可能抑制内异症的发生发展 ,有望成为子宫内膜异位症治疗新的辅助手段     

MMP-9及TIMP-1与胎膜早破关系的研究

目的 :研究胎膜早破 (PROM)孕妇羊水、血清中基质金属蛋白酶 9(MMP 9)、金属蛋白酶组织抑制剂 1(TIMP 1)的含量及在胎膜中的表达 ,探讨其与PROM的关系。方法 :选择临产前足月剖宫产分娩的胎膜早破者 2 5例 (PROM组 )和正常未破膜者 2 0例 (对照组 ) ,用双抗体夹心ELISA法测定羊水、血清中MMP 9、TIMP 1的含量 ,并用免疫组化SABC法检测胎膜中MMP 9及TIMP 1的表达。结果 :①PROM组和对照组羊水中MMP 9含量分别为 (887.2 4± 36 3.2 5 )与(6 6 6 .15± 2 39.5 8)ng/ml,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;两组血清中MMP 9含量分别为 (38.72± 2 3.4 8)与 (17.4 5± 10 .77)ng/ml,差异有非常显著性 (P <0 .0 0 1) ;两组羊水与血清中TIMP 1含量差异无显著性 (P >0 .0 5 )。②PROM组血清与羊水中MMP 9、TIMP 1的含量无相关性 (r分别为 0 .133与 0 .10 3,P >0 .0 5 )。③PROM组和对照组胎膜MMP 9的阳性表达分别为 10 0 %、85 % ,差异有非常显著性 (P <0 .0 0 1)。结论 :胎膜早破孕妇羊水、血清中MMP 9含量明显升高 ,且MMP 9在胎膜中高表达 ,可能是胎膜早破发生的原因之一     

阴道壁结缔组织中基质金属蛋白酶及其组织抑制物的表达

目的探讨女性压力性尿失禁(SUI)患者阴道壁结缔组织中基质金属蛋白酶(MMP)9及其组织抑制物(TIMP)1的mRNA表达变化及其与SUI发病的关系。方法收集24例有完整随访资料的女性SUI患者的阴道壁结缔组织标本作为研究组,根据年龄不同分为>60岁和≤60岁两类,每组12例;另选7例非SUI妇女作为对照组,应用RT-PCR法检测MMP-9和TIMP-1mRNA表达量。以MMP-9、TIMP-1与内参照3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因的扫描灰度,计算曲线下峰面积作为PCR产物含量。结果(1)研究组中>60岁和≤60岁者MMP-9mRNA的表达量分别为0·56±0·20和0·56±0·19,均高于对照组的0·37±0·18,分别比较,差异均有统计学意义(P<0·05);>60岁和≤60岁者MMP-9mRNA的表达量比较,差异无统计学意义(P>0·05)。(2)研究组中>60岁和≤60岁者TIMP-1mRNA的表达量分别为0·23±0·11和0·31±0·12,均低于对照组的0·41±0·13,分别比较,差异均有统计学意义(P<0·05),TIMP-1mRNA的表达量在>60岁和≤60岁者间比较,差异也有统计学意义(P<0·05)。(3)MMP-9/TIMP-1比值,研究组中>60岁和≤60岁者及对照组分别为2·49±1·82、1·82±1·58、0·90±1·38,分别比较,差异均有统计学意义(P<0·05)。结论SUI患者MMP-9的高表达和TIMP-1的低表达,导致MMP/TIMP比值升高,年龄越大,MMP/TIMP比值升高越显著;MMP与TIMP比例失衡,在SUI的发病过程中可能起重要作用。     

黄体中期子宫内膜形态与白血病抑制因子的相关性

目的:探讨不孕妇女黄体中期宫腔镜下不同子宫内膜形态与宫腔冲洗液中白血病抑制因子(LIF)浓度及内膜中LIF基因表达的相关性。方法:64例不孕患者在黄体中期行宫腔镜检查,根据子宫内膜形态学表现将患者分为两组,同时收集两组患者的宫腔冲洗液。各组随机抽取5名患者采集内膜组织。采用ELISA法检测冲洗液中LIF浓度,RT-PCR法测定LIF mRNA在子宫内膜中的表达。结果:(1)Ⅱ组LIF浓度(61.696±44.127 pg/mL)明显较Ⅰ组(14.375±15.155 pg/mL)高,P<0.05。(2)Ⅰ组内膜中LIF mRNA的相对转录丰度值(0.93±0.02)与Ⅱ组(1.55±0.08)比两组有显著性差异(P<0.05)。结论:黄体中期子宫内膜形态类型与宫腔冲洗液中LIF浓度高度相关。     

MMP-26和TIMP-4在人正常月经周期中的表达

目的:观测MMP-26、TIMP-4和ER-α在正常月经周期不同时相子宫内膜组织中的表达及其调节机制。方法:正常子宫内膜组织(n=76)按月经周期时相分为增生早期、增生中期、增生晚期、分泌早期、分泌中期、分泌晚期和月经期。所有标本应用免疫组化和RT-PCR检测MMP-26、TIMP-4和ER-α。结果:MMP-26和TIMP-4蛋白主要定位于子宫内膜腺上皮细胞。增生晚期和分泌早期子宫内膜MMP-26表达高于增生早、中期和分泌中、晚期及月经期子宫内膜。TIMP-4与MMP-26同步表达,月经周期中TIMP-4在增生晚期和分泌早期表达最强。MMP-26mRNA/TIMP-4mRNA表达于增生期开始增强,分泌早期达到高峰,而后下降,至月经期达到最低点。MMP-26启动区-130~-116位点和TIMP-4启动区-930~-916位点间序列与ERE高度同源。结论:人类子宫内膜腺上皮中存在MMP-26和TIMP-4蛋白表达,并呈周期性变化,其表达与子宫内膜功能相关。MMP-26和TIMP-4启动区相关区段与ERE同源,提示ER-α参与MMP-26和TIMP-4基因调节。     

Matrix metalloproteinases-2 and -9 in cervical cancer: different roles in tumor progression

The incidence of uterine cervical cancer has increased slightly in Western countries, with an increase in relatively young women. Overexpression of matrix metalloproteinases (MMPs)-2 and -9 has turned out as a prognostic factor in many cancers. We compared the expression of the proteins MMP-2 and MMP-9 in cervical primary tumors with clinical outcome and risk factors of cervical cancer. One hundred sixty-one patients with cervical cancer treated in Ume? University Hospital or Sahlgrenska University Hospital, Sweden, between 1991 and 1995 were included in the study. Paraffin-embedded tissue samples obtained prior to treatment were examined immunohistochemically by specific antibodies for MMP-2 and MMP-9. Forty-two percent of the tumors were intensively positive for MMP-2 and 31% for MMP-9. Nineteen percent of the samples were intensively positive for both proteinases and 47% negative or weak for both. Overexpression of MMP-2 seemed to predict unfavorable survival under Kaplan-Meier analysis and in the multivariate analysis. Early sexual activity and low parity seemed to correlate to overexpression of MMP-2. MMP-9 was not associated with survival or sexual behavior. Intensive MMP-9 was noted in grade 1 tumors. We conclude that MMP-2 and MMP-9 have different roles in uterine cervical cancer. MMP-2 could be associated with aggressive behavior, but MMP-9 expression diminishes in high-grade tumors.     

Ets-1和MMP-9在胎膜早破中的表达

目的研究转录因子Ets-1和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在胎膜早破中的表达和作用。方法胎膜早破（PROM）患者67例,胎膜未破裂组70例,分娩后取破口处胎膜组织,采用免疫组织化学法染色,并使用病理影像多媒体图文操作系统对Ets-1和MMP-9阳性表达物的面积积分光密度（AIOD）进行半定量分析。结果①Ets-1在胎膜滋养层细胞核及胞浆中均有表达,且细胞核表达明显;MMP-9在胎膜滋养层细胞中的表达,主要位于细胞浆中;②Ets-1在胎膜早破组（0.0373±0.0119）中高表达,与胎膜未破裂组（0.0062±0.0089）比较,差异有高度统计学意义（P〈0.001）;③MMP-9在胎膜早破组（0.0928±0.0453）中高表达,与胎膜未破裂组（0.0345±0.039）比较,差异有高度统计学意义（P〈0.001）。结论Ets-1和MMP-9在人类胎膜上均有表达,且在胎膜早破中高表达且具显著相关性,表明Ets-1可能通过上调MMP-9的基因表达量使胎膜细胞外基质（ECM）的降解加速致胎膜紧张度降低,引发胎膜早破。     

基质金属蛋白酶MMP-9及其组织抑制剂TIMP-1在卵巢肿瘤中的表达及意义

目的　研究基质金属蛋白酶MMP - 9及组织抑制剂TIMP - 1在卵巢肿瘤中的mRNA表达及与卵巢癌临床病理特征和预后的关系。方法　应用RT -PCR方法检测 4 8例卵巢癌、 2 1例良性卵巢肿瘤及 2 2例正常卵巢组织中MMP - 9及TIMP - 1mRNA的表达情况 ,进行阳性率及半定量的比较 ,并将其结果与临床及病理学资料进行统计学分析。结果　MMP - 9在卵巢癌中表达的阳性率及半定量明显高于正常卵巢组织 ,其表达水平与卵巢癌的手术病理分期及预后有关 ,在Ⅲ -Ⅳ期患者中的表达显著高于Ⅰ -Ⅱ期患者 (P <0 0 5 )。MMP - 9阳性患者累积生存率明显低于阴性者。TIMP - 1的表达在卵巢癌中无明显增高 ,且与临床病理无相关性。MMP - 9/TIMP- 1在卵巢癌中的比值明显高于正常卵巢组织。结论　MMP - 9及MMP - 9与TIMP - 1的平衡失调与卵巢癌的浸润转移密切相关 ,MMP - 9可作为监测晚期卵巢癌患者预后的一个指标。     

MMP-9及TIMP-1在子宫腺肌病中的表达及临床意义

目的:研究MMP-9和TIMP-1在子宫腺肌病中的表达,探讨其在子宫腺肌病发病机制中的作用。方法:采用免疫组化方法检测子宫腺肌病中MMP-9、TIMP-1的表达。结果:MMP-9、TIMP-1在子宫腺肌病异位内膜中表达的阳性率均高于在位内膜及正常子宫内膜(P<0.05),二者在在位内膜与正常子宫内膜的表达差异无统计学意义(P>0.05);子宫腺肌病患者痛经的程度随MMP-9、TIMP-1在异位子宫内膜中表达程度的增高而增高(P<0.05)。结论:MMP-9和TIMP-1的异常表达与子宫腺肌病的发生和生物学行为有关。异位内膜中MMP-9和TIMP-1过度表达与子宫腺肌病痛经的发生有关。     

Increased matrix metalloproteinases-1,-9 in the uterosacral ligaments and vaginal tissue from women with pelvic organ prolapse

Objectives

To investigate the possible association of increased matrix metalloproteinases (MMPs)-1,-9 with pelvic organ prolapse (POP) and to evaluate whether inflammatory processes contribute to its development.

Study design

Forty women who underwent hysterectomy, 20 with POP grade 2 and above, and 20 without POP, participated in the study. Biopsies from the uterosacral ligaments and vaginal mucosa were obtained from each woman. Each biopsy was sectioned and stained for MMP-1 and MMP-9 by immunohistochemical methods and with hematoxylin and eosin (H&E). MMP-1,-9 expressions were evaluated on the immunostained slides. H&E stained sections were examined for possible inflammatory changes.

Results

A higher stromal (extra-cellular) expression of MMPs-1,-9 was found in POP cases compared with controls in vaginal biopsies (MMP-1: p = 0.004; MMP-9: p = 0.042) as well as in uterosacral ligament biopsies (MMP-1: p = 0.011; MMP-9: p = 0.015). Increased intracellular expression of both MMPs was also demonstrated in fibroblasts in biopsies of women with POP (p < 0.001 for all). Most of these differences persisted after controlling for age. The degree of inflammatory changes reflected by the number of lymphocytes, plasma cells and capillary-sized blood vessels per 10 high power fields, was similar in specimens obtained from women with and without POP.

Conclusions

The expression of MMPs-1,-9 appears to be increased in tissues from women with POP. This supports an association, although not a causal relation, between increased MMPs-1,-9 and POP. Inflammation does not seem to play an important role in the pathogenesis of POP.