CyclinD1、P27、CK19、ALDH1A1在乳腺病变中表达及意义

目的探讨细胞周期D1(Cyclin D1)、P27、细胞角蛋白19(CK19)、ALDH1A1在乳腺病变中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测79例乳腺组织标本(包括正常乳腺、乳腺增生、乳腺导管原位癌、乳腺浸润性导管癌)中Cyclin D1、P27、CK19、ALDH1A1的表达情况,分析其与乳腺癌干细胞增殖及乳腺病变组织分化程度之间的关系。结果正常乳腺、乳腺增生、乳腺导管原位癌、乳腺浸润性导管癌中Cyclin D1、ALDH1A1的表达逐渐上升,P27、CK19的表达逐渐下降;乳腺正常及良性增生组织中Cyclin D1、CK19、ALDH1A1的表达明显低于乳腺导管原位癌及浸润性导管癌(P<0.05);乳腺正常及良性增生组织中P27的表达明显高于导管原位癌及浸润性导管癌(P<0.05)。结论 Cyclin D1、P27相互作用调节乳腺癌干细胞的发生及发展过程,CK19、ALDH1A1可作为乳腺癌诊断及恶性程度评估的参考指标。     

Id-1和Cyclin D1在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义

目的：探讨Id-1、Cyclin D1在乳腺浸润性导管癌中的表达及其意义。方法：采用免疫组织化学Elivision二步法检测80例乳腺浸润性导管癌、18例导管内癌、15例单纯性导管上皮增生及15例正常乳腺组织中Id-1和Cyclin D1蛋白的表达情况，并分析其临床病理意义。结果：在乳腺浸润性导管癌中Id-1和Cyclin D1阳性表达明显高于正常乳腺组织、单纯性导管上皮增生及导管内癌（P〈0.05）；Id-1蛋白阳性表达与浸润性导管癌TNM分期及淋巴结转移呈正相关（P〈0．05）；Cyclin D1阳性表达与组织学分级正相关（P〈0．05）；Id-1与Cyclin D1阳性表达正相关（P〈0．05）。Id-1和Cyclin D1同时阳性表达与生存期相关（P〈0．05）。结论：Id-1和Cyclin D1在乳腺浸润性导管癌的发生、演变过程中起重要作用，联合检测Id-1和Cyclin D1可作为判断乳腺浸润性导管癌预后不良的指标。     

多种癌、癌旁与正常组织中BAG-1表达的组织芯片检测与分析

目的 :检测凋亡相关基因BAG - 1在乳腺癌、胃癌、宫颈癌及其癌旁组织、正常组织中的表达 ,并讨论其意义。方法 :利用组织芯片采用免疫组化DAKOEnvision法检测乳腺癌、胃癌、宫颈癌及其癌旁组织、正常组织中BAG - 1的表达。结果 :组织芯片中BAG - 1在乳腺癌、胃癌、宫颈癌组织中的表达比其对应癌旁组织、正常乳腺组织中高 ,差异明显 (P <0 .0 5 )。结论 :BAG- 1在乳腺癌、胃癌、宫颈癌组织中表达高于癌旁组织和正常组织 ,提示BAG - 1表达可能与这些恶性肿瘤的发生有关。     

P16、Cyclin D1在外阴鳞状上皮增生和外阴鳞癌中的表达及意义

目的:探讨P16、Cyclin D1在外阴鳞癌发生、发展中的作用。方法:采用免疫组化SABC法,检测32例外阴鳞状上皮增生、32例VIN、34例外阴鳞癌组织标本中P16、Cyclin D1的表达。结果:与正常皮肤及外阴鳞状上皮增生相比,VIN组织中P16的阳性率降低,Cyclin D1的阳性率升高,差异均有显著意义(P<0.05)。VIN及鳞癌组织中,组织分级越高,P16蛋白缺失、Cyclin D1过表达越明显。结论:P16蛋白缺失与Cyclin D1过表达在外阴鳞癌发生、发展过程中具有重要作用。     

人乳腺癌组织中Tbx3基因表达变化及其意义

目的　探讨Tbx3基因在乳腺癌发生发展过程中的作用。方法　收取新鲜乳腺癌和癌旁乳腺组织各44例,以Tripure试剂提取细胞总RNA,以RT PCR法检测两种组织中Tbx3基因的表达水平,并比较其表达状况与乳腺癌相关临床病理因素之间的关系。结果　Tbx3基因在乳腺癌组织中的表达显著强于癌旁乳腺组织(P<0 01),与患者的年龄、肿瘤大小无关,但随着临床分期的进展、出现腋窝淋巴结转移、肿瘤浸润程度增加和组织学级别的增高,该基因的表达明显增强。结论　高表达的Tbx3基因可能在乳腺癌发生发展过程中起促进作用,并可能是乳腺癌进展中关键性转变的标志性基因之一。     

喉癌中P~(16)蛋白的表达及其临床意义

目的:探讨P~(16)基因低表达在喉癌的发生发展及患者生存时间的关系。方法:采用免疫组化方法对49例喉癌与癌旁组织,26例喉部良性病变组织中P~(16)蛋白进行检测。结果:发现①49例喉癌中P~(16)蛋白表达阳性率为47.9％(23/49),癌旁组织中P~(16)蛋白表达阳性率为68.7％,26例喉良性病变中P~(16)蛋白表达阳性率为100％,三者之间的检出率存在显著性差异(P<0.01);②23例P~(16)蛋白表达阳性的患者中5例死于术后半年,10例死于术后1年,8例死于术后1年半;26例P~(16)蛋白表达阴性的患者中,15例死于术后半年,其中3例癌旁组织中P~(16)蛋白表达阳性;6例死于术后1年,其中1例癌旁组织中P~(16)蛋白表达阳性;2例死于术后1年半,癌旁组织中P~(16)蛋白皆表达阴性;P~(16)蛋白表达阳性的患者与阴性的患者之间,死亡率存在显著性差异(P<0.01)。结论:①P~(16)基因低表达与喉癌发生发展有关;②P~(16)蛋白的阴性表达可能与患者的生存时间有关。     

多巴胺受体亚型在乳腺癌中的表达检测

目的 检测多巴胺受体亚型在乳腺癌中的表达情况,探讨其与临床病理特征的相关性。方法 收集20例乳腺癌患者癌和癌旁组织样本,通过实时荧光定量聚合酶链反应（quantitative real-time PCR,qRT-PCR）、蛋白质印迹法(western blot,WB）、免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）检测多巴胺受体基因各亚型（DRD1-DRD5）的表达情况,分析其表达情况与患者临床病理特征的相关性,并利用癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库进行生物信息学分析。结果 TCGA数据库生物信息学分析和IHC均提示DRD1、DRD2在乳腺癌组织中低表达（P<0.05）,IHC提示DRD3蛋白在乳腺癌组织低表达（P<0.05）,TCGA数据库生物信息学分析、WB均提示DRD4蛋白在乳腺癌组织中高表达（P<0.05）,qRT-PCR和IHC均提示DRD5蛋白在癌旁组织高表达（P<0.05）,且DRD5在癌旁组织的表达高于所有亚型在癌和癌旁的表达（P<0.05）。DRD1在乳腺癌中表达与年龄相关（χ2=13.852,P<0.05）,腋窝淋巴结转移可能与DRD4的表达存在相关性（Likelihood Ratio=5.8,P=0.055),DRD1、DRD4表达情况在各分子分型之间差异显著（Fisher’s Exact Test,P<0.05）。结论 多巴胺受体各亚型在乳腺癌中表达不同,部分亚型与乳腺癌患者的临床特征密切相关。     

乳腺癌组织中PTEN的表达及其临床意义

目的研究肿瘤抑制基因PTEN在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化染色检测146例乳腺癌组织和10例乳腺癌癌旁正常组织PTEN蛋白的表达情况。结果10例乳腺癌癌旁正常组织均有PTEN表达,免疫组化染色较强,PTEN表达于乳腺小叶腺泡上皮细胞及导管上皮细胞的胞质和胞核。146例乳腺癌组织的PTEN阳性表达率为57．5％（84／146）,PTEN蛋白表达于癌细胞的胞质和胞核,PTEN表达与乳腺癌原发肿瘤的大小、病理分期以及雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）有关,PTEN高表达的乳腺癌患者2年生存情况明显优于低表达者（P〈0．05）,且ER、PTEN同时表达的乳腺癌患者2年无病生存率高于其中之一未表达或均未表达者（P〈0．05）。结论乳腺癌组织中存在肿瘤抑制基因PTEN的表达缺失或减弱,可能与乳腺癌的发生、发展及预后有关。     

EZH2及DNMT1在三阴性乳腺癌中的表达及意义

目的探讨EZH2及DNMT1在三阴性乳腺癌中的表达特点及与主要临床病理参数的关系。方法采用免疫组化SP法,检测131例三阴性乳腺癌、78例非三阴性乳腺癌及65例癌旁组织中EZH2及DNMT1的表达情况。采用多因素logistic回归分析EZH2及DNMT1阳性表达有关的因素,Spearman等级相关分析三阴性乳腺癌中EZH2及DNMT1表达的相关关系。结果 EZH2蛋白在三阴性乳腺癌组织、非三阴性乳腺癌组织和癌旁组织的阳性表达率分别为86.3%、89.7%和40.0%;DNMT1蛋白在三种组织中的阳性表达率分别为63.4%、66.6%和44.6%;两种蛋白在乳腺癌组织中的表达均高于癌旁组织(P<0.05);两种蛋白在三阴性乳腺癌与非三阴性乳腺癌组织间表达差异无统计学意义。在三阴性乳腺癌中,EZH2阳性表达与肿瘤组织学分级、肿瘤直径、淋巴结是否转移有关(P<0.05),DNMT1的表达与肿瘤组织学分级、淋巴结是否转移有关(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,肿瘤组织学分级为影响EZH2及DNMT1表达的最主要因素;三阴性乳腺癌中DNMT1与EZH2的表达呈正相关(r=0.34,P<0.01)。结论 EZH2与DNMT1的高表达与三阴性乳腺癌的分化、生长、转移有关,且两者在三阴性乳腺癌中的表达呈正相关,其联合检测可能对三阴性乳腺癌的预后判断更有价值。     

ERCCI与BRCA1在非小细胞肺癌及癌旁组织中的表达及临床意义

目的探讨DNA修复基因ERCCI与BRCA1在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测32例肺癌,24例癌旁组织ERCCI与BRCA1的表达。结果NSCLC中ERCCI与BRCA1在癌旁组织内表达高于癌组织,且差异具有统计学意义（P〈0.05）;BRCA1在淋巴结有无转移之间表达差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论NSCLC中,ERCCI与BRCA1在癌旁组织的表达高于癌组织,BRCA1可作为判断预后的一项指标。     

葡萄胎发病新基因F1O在原发性肝癌中的表达分析

目的 通过检测原发性肝细胞癌中F10基因的表达,探讨该基因对肝细胞癌发生和发展的可能作用.方法 采用地高辛标记F10探针,原位杂交检测人肝细胞癌组织及癌旁组织F10基因的表达水平;通过实时荧光定量PCR方法,在PE ABI 7000型荧光定量PCR仪上检测肝细胞癌患者手术切除的癌组织及癌旁组织F10基因拷贝数.结果 原位杂交结果表明肝癌组织F10基因阳性表达,癌旁组织F10基因不表达;荧光定量PCR显示8例肝细胞癌标本中有6例肿瘤组织中F10基因表达明显高于癌旁组织,其中2例高出4倍以上.结论 原发性肝癌组织中存在F10基因的高表达,相应的癌旁组织中未见其表达,提示F10基因在肝细胞癌的发生、发展中起一定的作用.     

MiR-29a及其靶向基因在宫颈癌中的表达和临床意义

目的 探讨microRNA-29a(miR-29a)及其靶向DNA甲基转移酶3A（DNA-methyltransferase 3 A,DNMT3A）基因、DNMT3B基因在宫颈鳞癌和癌旁组织以及在宫颈癌细胞系Hela和人正常宫颈细胞株ECT-1中的表达差异;探讨Hela细胞株过表达miR29a后DNMT3A、DNMT3B的表达差异,为宫颈癌靶向治疗提供基础。方法 选取青海大学附属医院2015年6月—2017年6月收治的20例宫颈鳞癌患者的癌组织及癌旁组织;培养宫颈癌细胞系Hela和人正常宫颈细胞株ECT-1,qRT-PCR法检测组织和细胞中miR-29a的表达,分析miR-29a的表达差异。Western Blot法检测癌组织及癌旁组织中DNMT3A、DNMT3B的表达水平,并分析其差异。采用分子生物学方法,转染Hela细胞株过表达miR29a,测定DNMT3A、DNMT3B表达水平,并分析其差异。qRT-PCR法、Western Blot法和ELISA法检测细胞中DNMT3A、DNMT3B的表达水平,并分析其差异。结果 MiR-29a在宫颈鳞癌组织中的表达量明显低于癌旁组织;miR-29a在人宫颈癌细胞系Hela中表达量明显低于人正常宫颈细胞株ECT-1。宫颈鳞癌组织中DNMT3A、DNMT3B的表达明显高于癌旁组织。Hela细胞过表达miR29a后,DNMT3A、DNMT3B的表达均明显下降。结论 MiR-29a可能是宫颈癌的抑癌基因,它可能通过降低DNMT3A、DNMT3B的表达水平来达到抑癌作用,有望成为宫颈癌靶向治疗的潜在靶点。     

染色质解旋酶DNA结合蛋白5、细胞角蛋白20在胃癌中表达及临床意义

目的探讨染色质解旋酶DNA结合蛋白5(CHD5)和细胞角蛋白20(CK20)在胃癌组织中的表达情况以及其临床意义。方法选取解放军202医院自2013年6月至2016年6月经临床确诊为胃癌并经手术治疗的56例患者病理蜡块标本为研究对象。采用免疫组化方法(IHC-P)检测胃癌及其对应的癌旁组织标本中CHD5和CK20的表达情况。结果 CHD5基因在胃癌及其相应的癌旁组织中的阳性表达率分别为12.5%(7/56)和87.0%(49/56),差异有统计学意义(P<0.05);CK20基因在胃癌及其相应的癌旁组织中的阳性表达率分别为71.4%(40/56)和0,差异有统计学意义(P<0.05)。CHD5与CK20基因在胃癌组织中的表达呈负相关。CHD5和CK20基因的表达与胃癌组织标本的浸润深度、分化程度、淋巴结受累情况、远处转移以及TNM分期有关(P<0.05),而与患者的年龄、性别以及肿瘤的大小无关(P>0.05)。结论 CHD5基因在胃癌组织的的阳性表达明显低于其在相应的癌旁正常组织;CK20基因在胃癌癌旁正常组织中无表达,在胃癌组织中高表达,两种肿瘤标志物同时检测可能为胃癌的治疗提供新的基因靶点。     

DEPDC1基因在非肝炎病毒相关性肝细胞癌及癌旁组织中的表达及临床意义

目的 探讨DEPDC1基因与非肝炎病毒相关性肝细胞癌临床病理特征的关系及其对预后判断的意义。方法 收集56例非肝炎病毒相关性肝细胞癌及癌旁组织,实时定量PCR检测癌组织及癌旁组织中DEPDC1蛋白和mRNA的表达,结合临床数据分析DEPDC1表达的意义。结果 DEPDC1蛋白在肝癌组织中的表达(7.83±0.17)显著高于癌旁组织(4.67±0.22),差异比较有统计学意义（P<0.05）;DEPDC1 mRNA在肝癌组织中的表达高于癌旁组织中的表达,高表达率为73.2%(41/56);在DEPDC1高表达组,肿瘤分化程度较低,甲胎蛋白水平较高,微血管癌栓发生率高。结论 DEPDC1分子表达水平与非肝炎病毒相关性肝癌的生物学行为相关,可能位于致癌因素最终的共同通路上。     

乳腺癌组织中周期素依赖性激酶10基因启动子甲基化状态检测的临床意义

目的探讨乳腺癌组织中周期素依赖性激酶10（cyclin dependent kinase 10,CDK10）基因启动子甲基化状态及其与临床病理参数的联系。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应检测CDK10基因启动子在50例乳腺癌组织及相应癌旁组织中的甲基化状态并结合临床病理资料进行分析。结果在乳腺癌组织中CDK10基因甲基化阳性率为60%（30/50）,癌旁对照组织未出现CDK10基因甲基化。CDK10基因甲基化同淋巴结转移与临床分期显著相关（P＜0.05）。结论CDK10基因甲基化与乳腺癌临床分期密切相关,可能是参与乳腺癌发展的重要分子事件。     

肾细胞癌组织中CDK4、CyclinD1的表达及其意义

目的 探讨肾细胞癌组织中CDK4、CyclinD1的表达水平及意义。方法 应用实时荧光定量PCR法检测30例人肾细胞癌组织及癌旁肾组织中CDK4、CyclinD1的表达水平。结果 CDK4和CyclinD1在肾癌细胞中的表达水平均明显高于癌旁肾组织,但CyclinD1的表达升高水平和比例高于CDK4表达的升高。CyclinD1／CDK4的比值,在肾癌组织中高于癌旁肾组织。结论 CDK4和CyelinD1的过度表达可能引起细胞异常增殖、分化失控。CDK4和CyclinD1基因在肾细胞的发生、发展中可能起重要作用。     

肺腺癌多药耐药细胞株特异表达的新基因cDNA片段在肺癌组织中表达的研究

目的　检测人肺腺癌多药耐药细胞株特异表达的新基因cDNA片段在多种肺癌组织及其相应癌旁正常组织中的表达情况。方法　分别运用原位杂交技术和Northernblot方法检测该基因cDNA片段在肺癌组织中的表达及定位情况。结果　组织原位杂交和Northernblot的检测结果均显示 ,在 12例肺腺癌组织中有 6例表达阳性 (5 0 % ) ,在其他肺癌组织及其癌旁正常组织中无表达 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5或P <0 0 1)。图像分析显示 ,该基因在肺腺癌组织的相对表达量显著高于其癌旁正常组织 (P <0 0 5 )。结论　新基因片段在部分肺腺癌组织有表达 ,可能与临床上部分肺腺癌化疗效果不佳及MDR的产生有关。     

Prx4在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:研究过氧化物还原酶4(Peroxiredoxin 4,简称Prx 4)在胰腺癌组织中的表达水平,探讨其临床意义.方法:利用Elivison免疫组化法检测36例手术切除的胰腺癌及21例癌旁正常胰腺组织,以及胃癌、食管癌、肝癌、结肠癌、肺癌和乳腺癌组织各10例中Prx 4的表达情况.比较Prx 4在胰腺癌与癌旁正常胰腺组织,胰腺癌与其他肿瘤之间表达率和表达强度的差异.分析Prx 4与胰腺癌大小、分化程度及淋巴结转移的相关性.结果:胰腺癌组织中Prx 4的表达阳性率为80.6%(29/36).癌旁正常胰腺组织中的表达阳性率分别为19%(4/21).Prx 4在胰腺癌组织中的表达阳性率显著高于在癌旁正常胰腺组织中的表达阳性率(P均＜0.05).Prx 4在胰腺癌组织中的表达阳性率(80.6%)高于在其他常见恶性肿瘤组织中的表达阳性率(在肺癌、乳腺癌组织中的表达阳性率为20%,在胃癌、食管癌和肝癌组织中的表达阳性率为30%).结论:Prx 4在胰腺癌组织中的表达阳性率和表达强度显著高于癌旁正常胰腺组织,提示Prx 4可能在胰腺癌发病过程中起一定作用.Prx 4在胰腺癌的表达阳性率和表达强度明显高于其他恶性肿瘤,有可能为潜在的胰腺癌标志物.     

聚集素及金属蛋白酶9在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨聚集素（Clusterin）和金属蛋白酶9在乳腺癌组织中的表达及与临床特征的关系。方法：采用免疫组织化学染色法分别对48例术前未行放化疗的乳腺癌者手术后的蜡块标本及16例癌旁组织进行Clusterin和MMP-9检测。结果：肿瘤组织及癌旁组织中Clusterin阳性率分别是77.1%（37/48）和31.3%（5/16）,MMP-9表达的阳性率分别为72.9%（35/48）和18.8%（3/16）,肿瘤组织及癌旁组织之间的阳性率均有显著性差异,Clusterin表达与MMP-9表达正相关。结论：Clusterin和MMP-9在乳腺癌发生发展中起重要作用,联合检测对预测乳腺癌发生发展及预后评价有重要意义。     

多药耐药相关基因在胃癌的表达

检测从未接受过化疗瓣胃癌病人胃癌组织及癌旁组织的酸性谷胱甘肽S－转移酶（GST－π）基因、多药耐药相关蛋白（MRP）基因、肺耐药蛋白（LRP）基因和多药耐药基因1（MDR1）。使用半定量逆转录聚合链酶反应（RT－PCR）方法。结果显示,在胃癌组织中,GST－π、MRP、LRP和MDR1表达阳性率分别为36.00%、12.00%、10.00%和10.00%,无显著高于癌旁组织中的表达,表达的总阳性率达46.00％。说明上述4种基因在未化疗过的胃癌组织中均有不同程度的高表达;但它们之间无共表达。近半数的胃癌病人可能存在固有性耐药。