干扰KIF14基因对子宫内膜癌细胞顺铂耐药的影响

目的:探讨KIF14基因对子宫内膜癌顺铂耐药细胞增殖、凋亡及顺铂敏感性的影响。方法:RT-qPCR和western-blot检测子宫内膜癌细胞Ishikawa及子宫内膜癌顺铂耐药细胞株Ishikawa/DDP中KIF14水平;将siRNA-KIF14及siRNA-NC转染Ishikawa/DDP细胞作为si-KIF14组和si-NC组,耐药组细胞不做处理,通过克隆形成实验检测干扰KIF14后子宫内膜癌顺铂耐药细胞增殖情况;流式细胞仪检测干扰KIF14后子宫内膜癌顺铂耐药细胞凋亡情况,western-blot检测增殖、凋亡及耐药基因相关蛋白ki-67、Bax、cleaved-Caspase-3、MDR1、P-gp表达水平;取各组细胞加入系列浓度顺铂,MTT法检测干扰KIF14后子宫内膜癌顺铂耐药细胞对顺铂敏感性。结果:与子宫内膜癌细胞Ishikawa相比,KIF14在子宫内膜癌顺铂耐药细胞株Ishikawa/DDP中高表达(P0.001);与耐药组和si-NC组相比,干扰KIF14后si-KIF14组Ishikawa/DDP细胞克隆形成数目和ki-67蛋白水平下降,细胞凋亡率以及Bax、cleaved-Caspase-3蛋白水平升高,IC50值下降,多药耐药基因MDR1、P-gp蛋白水平下降(均P0.001)。结论:干扰KIF14表达能够抑制子宫内膜癌顺铂耐药细胞Ishikawa/DDP增殖,促进凋亡,增加对顺铂的敏感性。     

抑制自噬基因Beclin 1的表达对耐药卵巢癌细胞A2780/DDP顺铂敏感性的影响及相关机制研究

[目的]观察抑制自噬基因Beclin1的表达对卵巢癌耐药细胞A2780/DDP顺铂敏感性的影响并探讨其中机制。[方法]利用脂质体将自噬基因Beclin1RNA干扰质粒pSUPER-Beclin1和对照质粒pSUPER-non分别转染耐药卵巢癌细胞A2780/DDP,筛选稳定表达株,检测顺铂作用下各组细胞(pSUPER-Beclin1组、pSUPER-non组和未转染组)生长抑制率、半数抑制浓度(IC50)、自噬和凋亡率的变化。[结果]A2780/DDP细胞转染干扰质粒pSUPER-Be-clin1后,细胞内Beclin1蛋白的表达明显下降;比较3组细胞顺铂48hIC50,pSUPER-Beclin1转染组最低(P﹤0.01);对3组细胞自噬与凋亡水平的检测显示,抑制Beclin1蛋白表达,在顺铂作用下,细胞自噬水平明显下降,而凋亡细胞比例明显升高,凋亡蛋白Caspase-3的表达亦明显上调,实验组与对照组相比差异有统计学意义(P﹤0.01)。[结论]抑制耐药细胞A2780/DDP自噬基因Beclin1的表达,可通过抑制自噬,增强凋亡提高耐药细胞对顺铂的敏感性。     

MDR1及MDR3基因与卵巢癌细胞顺铂耐药的关系

目的:探讨MDR1(Multidrug resistance gene-1)及MDR3(Multidrug resistance gene-3)基因与卵巢癌细胞顺铂耐药的关系。方法:两种质粒一起瞬时转染A2780/DDP细胞,空载体组及未转染组作为对照。Annexin V-FITC/PI双标流式细胞术、MTT法、RT-PCR、western blot分别检测A2780/DDP细胞早晚期凋亡、细胞增殖活性、MDR1和MDR3 mRNA表达及caspase-3蛋白水平。结果:两种质粒(pSuppressorNeo MDR1 siRNA,MDR3 siRNA)均未能逆转A2780/DDP细胞顺铂耐药:①流式显示转染MDR1 siRNA组、MDR3 siRNA组和pSuppressorNeo空载体组后相比较未转染A2780/DDP细胞凋亡率无显著改变(P>0.05);②在一定药物浓度范围内,转染MDR1和MDR3小分子干扰RNA均未能增强顺铂对A2780/DDP细胞的细胞毒作用;③与空载体组和未转染细胞相比,A2780/DDP细胞的MDR3及MDR1 mRNA表达均低下(P>0.05);④Caspase-3蛋白表达未见增加。结论:顺铂所致的卵巢癌细胞多药耐药与MDR1及MDR3基因过度表达均无关,卵巢癌细胞顺铂耐药为非P-gp     

塞来昔布联合顺铂对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP生长和凋亡的影响

目的探讨塞来昔布联合顺铂对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP生长和凋亡的影响及其机制。方法采用MTT法检测不同浓度(0、0. 625、12. 5、25、50及100μmol/L)塞来昔布对COC1/DDP细胞生长的影响,计算出24、48及72h的IC50。将对数生长期的COC1/DDP细胞随机分为对照组(未做处理)、顺铂组(给予2μg/ml顺铂)、塞来昔布组(给予25μg/ml塞来昔布)及联合组(给予25μg/ml塞来昔布+2μg/ml顺铂)。MTT法检测各组细胞的生长情况,FCM检测各组细胞的凋亡情况,Western blot检测各组细胞中增殖细胞核抗原(Ki67)、细胞周期素D1 (Cyclin D1)、生存素(Survivin)和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白的表达。结果塞来昔布能够呈时间-浓度依赖性抑制COC1/DDP细胞生长,其在24、48和72 h的IC50分别为47. 05、25. 86和16. 11μmol/L。与对照组相比,顺铂组、塞来昔布组和联合组中COC1/DDP细胞的OD值以及Ki67、Cyclin D1、Survivin及Bcl-2蛋白的表达水平均显著降低,凋亡率均显著升高;但顺铂对COC1/DDP细胞的作用较弱,塞来昔布对COC1/DDP细胞的作用较强,联合用药能够增强两者对COC1/DDP细胞的作用且高于两者之和。结论塞来昔布联合顺铂能够协调抑制COC1/DDP细胞生长并诱导细胞凋亡,降低COC1/DDP细胞对顺铂的耐药性,其分子机制可能与下调Ki67、Cyclin D1、Survivin及Bcl-2蛋白表达有关。     

Smac联合顺铂对人肝癌细胞凋亡调控因子影响

目的 研究第二线粒体源的半胱天冬酶激活物(Smac)基因联合顺铂对人肝癌细胞SMMC-7721中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3、caspase-9和细胞色素c(Cyt c)蛋白表达的影响.方法 利用脂质体介导的方法将Smac转染入SMMC-7721,G418筛选后采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹(western blot)法检测筛选所得SMMC-7721/Smac细胞中Smac mRNA和蛋白的表达,四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线;顺铂处理后采用免疫细胞化学法检测细胞中caspase-3、caspase-9和Cyt c蛋白的表达.结果 SMMC7721/Smac细胞中Smac mRNA和蛋白表达均明显增加,12～120 h A490值为0.28 ～0.70,均明显低于同一时间点的SMMC-7721 (0.31～ 1.10) (P ＜0.05);与SMMC-7721比较,SMMC-7721/Smac细胞中caspase-3和Cyt c蛋白表达均增高,累积光密度值(IOD)分别从19 939/14 924增至28 347/21 017(P ＜0.05);顺铂作用下,SMMC-7721和SMMC-7721/Smac细胞中caspase-3、caspase-9和Cyt c蛋白表达均增加,且后者更明显;剂量为25 μg/mL时,SMMC-7721/Smac的caspase-3、caspase-9的IOD分别从对照的28 347/22 412增至46 696/39 728(P＜0.001).结论 Smac稳定过表达联合顺铂可明显增强细胞中凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-9和Cyt c表达,从而促进细胞凋亡.     

Caspase-2与caspase-3蛋白在顺铂诱导卵巢癌细胞系A2780和A2780/DDP凋亡中的表达

目的　探讨Caspase -2和caspase -3蛋白在顺铂诱导卵巢癌细胞系A2 780和A2 780 /DDP凋亡中的作用和对A2 780 /DDP细胞系顺铂耐药形成的可能影响。方法　用细胞培养方法 ,加入不同浓度 (分别为 0、5、10、2 0、40 μM)顺铂共同培养卵巢癌细胞系A2 780和A2 780 /DDP 2 4h、48h和 72h ,原位末端标记法 (TUNEL)检测卵巢癌细胞系凋亡情况 ,用免疫组化SABC法观察此过程中Caspase -2和caspase -3蛋白表达。结果　随顺铂作用时间延长和剂量增加 ,卵巢癌细胞系A2 780和A2 780 /DDP中凋亡逐渐增强(P <0 0 1) ,caspase -2和caspase -3蛋白表达呈现出对顺铂作用时间和剂量的依从性 (P <0 0 1) ,两种蛋白在A2 780细胞中表达明显强于A2 780 /DDP( P <0 0 1)。结论　Caspase -2和caspase -3蛋白活化促进顺铂诱导的卵巢癌细胞系A2 780和A2 780 /DDP凋亡 ,其表达抑制可能是影响顺铂耐药的A2 780 /DDP细胞凋亡的原因。     

二甲双胍拮抗STAT3信号通路在人乳腺癌顺铂耐药细胞凋亡中的作用

目的 分析二甲双胍拮抗信号传导与转录活化因子3(STAT3)信号通路在人乳腺癌顺铂耐药细胞凋亡中的作用。方法 MCF-7细胞株为A组,MCF-7/DDP细胞株为B组,MCF-7/DDP细胞株+DDP为C组,MCF-7/DDP细胞株+二甲双胍为D组,MCF-7/DDP细胞株+STAT3抑制剂STA-21为E组。A组和B组采用正常培养基培养,C组MCF-7/DDP细胞株加入1μg/ml DDP培养,D组MCF-7/DDP细胞株加入5 mmol/L二甲双胍培养,E组加入10μmoL/L的STAT3抑制剂STA-21培养。对MCF-7细胞株和MCF-7/DDP细胞株采用CCK-8法检测DDP的敏感性;采用平板克隆试验检测各组细胞增殖数目;采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;采用免疫荧光法检测各组受体相互作用蛋白(RIP)1和RIP 3蛋白表达水平;采用免疫印迹法检测各组细胞STAT3、p-STAT3、Caspase及p-Caspase蛋白表达水平。结果 浓度分别为0.01μg/ml、0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml及100μg/ml的DDP对MCF-7细胞IC50值均高于MCF-7...     

PTEN对耐顺铂的食管癌细胞的增殖及P-糖蛋白表达的影响

目的探讨PTEN对耐顺铂食管癌Ec9706/c DDP细胞增殖及P-gp表达的影响.方法采用顺铂浓度梯度增加的方法筛选食管癌耐药细胞株Ec9706/c DDP,采用流式细胞术检测PTEN转染后对Ec9706/c DDP细胞周期和凋亡的影响,采用Western blot检测PTEN转染后Ec9706/c DDP细胞P-gp表达改变。结果通过顺铂浓度梯度增加的方法成功诱导食管癌耐顺铂细胞株Ec9706/c DDP,与Ec9706/c DDP和Ec9706/c DDP+空载相比,转染野生型PTEN的Ec9706/c DDP细胞G1期细胞比例增加,S期细胞明显减少,差异有统计学意义(P0.05)。Ec9706/c DDP细胞株在野生型PTEN转染48 h后细胞凋亡率显著高于转染无活性G129E和C124S组,差异有统计学意义(P0.05)。Western blot结果显示:转染野生型PTEN的Ec9706/c DDP细胞P-gp蛋白的表达显著下调,而转染2种突变型的PTEN组没有明显改变。结论 PTEN在食管癌耐顺铂细胞株Ec9706/c DDP过表达能够显著抑制肿瘤细胞增殖,促进其凋亡,降低肿瘤耐药关键蛋白P-gp表达,从而逆转食管癌细胞的多药耐药。     

紫杉醇联合顺铂对人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP耐药性的逆转作用

目的:探讨紫杉醇联合顺铂对人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP耐药性的逆转作用。方法:取对数生长期SK-OV3/DDP细胞进行实验。实验分为顺铂组、紫杉醇组、联合组和空白对照组。顺铂组细胞给予顺铂15μg/ml;紫杉醇组细胞给予紫杉醇3.13μg/ml;联合组细胞给予顺铂15μg/ml+紫杉醇3.13μg/ml;空白对照组细胞不给予任何药品。所有细胞均培养48 h后进行实验。采用MTT法检测细胞的生长抑制率。采用流式细胞术检测各组细胞的细胞周期和凋亡率。结果:顺铂组细胞生长抑制率与空白对照组无明显增加(P<0.05),证实SKOV3/DDP对顺铂的耐药,紫杉醇组和联合组细胞生长抑制率较空白对照组和顺铂组明显增加(P﹤0.05),联合组细胞生长抑制率最高,较紫杉醇组增加更为明显(P﹤0.05)。顺铂组与空白对照组细胞多被阻滞于G1和S期,紫杉醇及联合组细胞多被阻滞于G2/M期,联合组作用较紫杉醇组更加明显(P﹤0.05)。顺铂组细胞凋亡率与空白对照组无明显差异(P>0.05),紫杉醇组和联合组细胞凋亡率较空白对照组和顺铂组明显增加(P﹤0.05),联合组细胞凋亡率最高,较紫杉醇组增加更为明显(P﹤0.05)。结论:紫杉醇联合顺铂可明显逆转卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP对顺铂的耐药性。     

黄芪联合顺铂对喉癌Hep-2细胞的体外抑制作用

目的 研究黄芪与顺铂联合对体外培养的人喉癌Hep-2细胞的抑制作用.方法 用MTT法检测黄芪、顺铂单独或联合作用对人喉癌Hep-2细胞的抑制率;用流式细胞技术及Western-blotting法检测黄芪、顺铂单独或联合作用对人喉癌Hep-2细胞凋亡的影响.结果 作用24h后黄芪组、顺铂组、黄芪联合顺铂组对Hep-2细胞的抑制率分别为(53.83±17.12)％、(69.12±27.12)％、(84.55±27.84)％,与对照组(0％)比较差异有统计学意义(t=16.87,16.67,40.90,P＜0.01).黄芪组、顺铂组、黄芪联合顺铂组Hep-2细胞的凋亡率[(38.2±13.6)％、(67.2±17.8)％、(86.4±25.1)％]与对照组[(17.1±1.3)％]比较差异有统计学意义(t =8.11,12.77,24.92,P＜0.05),且联合用药组的效果较任一单独用药组更为明显(t=11.33,9.37,P＜0.01).结论 黄芪通过促进细胞凋亡有效提高顺铂对Hep-2细胞抑制作用的敏感性,通过调节Bcl-2/Bax蛋白表达,能提高顺铂对喉癌的治疗效果.     

地塞米松对顺铂诱导卵巢癌细胞株凋亡的拮抗作用

目的:探讨地塞米松(DEX)对顺铂(DDP)诱导卵巢癌细胞株凋亡的影响。方法:应用MTT比色法检测细胞活性,利用免疫组织化学法检测凋亡相关基因bcl-xl和caspase3的表达。结果:0.001~1μM浓度范围内的地塞米松对顺铂诱导人卵巢癌细胞株HO-8910的凋亡有抑制作用(P<0.05),提高DDP浓度能拮抗该效应;并能上调抗凋亡蛋白bcl-xl的表达,降低caspase3的表达活性(P<0.05)。结论:顺铂治疗卵巢癌前用地塞米松进行预处理后可拮抗顺铂的抗肿瘤作用,bcl-xl抗凋亡通路参与该作用。     

非小细胞肺癌组织ZO-1蛋白表达检测及其临床意义

目的:探讨NSCLC(Non Small Cell Lung Cancer,非小细胞肺癌)患者中ZO-1(zonula occluden-1,紧密连接蛋白-1)蛋白检测的临床意义。方法:应用western blot检测101名NSCLC患者癌组织及癌旁组织ZO-1蛋白的表达,以61名肺部良性病变患者作为对照。结果:ZO-1蛋白在癌组织中表达低于癌旁组织,差异具有显著统计学意义(P<0.01);ZO-1蛋白在癌旁组织中表达低于对照组,差异具有显著统计学意义(P<0.05)。癌旁组织ZO-1蛋白在淋巴结未转移组中表达高于淋巴结转移组,差异具有显著统计学意义(t=-4.44,P<0.01),在2年生存组中表达高于2年死亡组,差异具有显著统计学意义(t=3.62,P<0.01);癌组织中ZO-1蛋白在2年生存组中表达高于2年死亡组,差异具有显著统计学意义(t=2.52,P<0.05)结论:癌旁组织中ZO-1蛋白和NSCLC患者淋巴结转移明显相关,癌旁组织和癌组织中ZO-1蛋白和NSCLC患者2年生存率明显相关。     

SeO2逆转人卵巢癌耐药细胞株耐药性的研究

[目的]探讨SeO2对体外培养的人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP细胞耐药性的影响及其可能的作用机制.[方法]用MTT法、流式细胞术、电镜检测体外培养的COC1/DDP细胞在单独SeO2及与DDP联合作用下的增殖抑制及凋亡程度,用间接免疫荧光标记法在流武细胞仪上检测Survivin蛋白的表达水平.[结果]SeO2对COC1/DDP细胞的增殖抑制作用随SeO2浓度升高而明显增强,其最适浓度约10μmol/L,SeO2与DDP同时作用时增殖抑制作用明显增高;应用流武细胞术,10μmoL/L的SeO2与DDP同时作用于COC1/DDP细胞72 h,凋亡率达(30.66±2.34)%,电镜术也可检测到凋亡细胞存在;应用间接免疫荧光标记法在流式细胞仪上检测,SeO2与DDP同时作用72 h COC1/DDP细胞的Survivin蛋白表达水平明显降低.[结论]在体外,SeO2可增强COC1/DDP细胞对DDP的敏感性,诱导其凋亡.其诱导凋亡机制可能与下调Survivin蛋白的表达水平有关.     

体外培养人卵巢癌细胞株SKOV-3、SKOV-3/DDP并探讨卵巢癌顺铂耐药机制

目的:通过对人卵巢癌细胞株SKOV-3、SKOV-3/DDP体外培养,探讨卵巢癌顺铂耐药机制。方法:用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞仪测定SKOV-3、SKOV-3/DDP细胞顺铂耐药指数及细胞周期变化,并分析细胞内Bcl-2蛋白及细胞膜上Fas、Fas-L表达情况。结果:相对于SKOV-3细胞;SKOV-3/DDP细胞顺铂耐药指数约为4倍,其细胞周期主要分布于G0/G1期、S期,细胞内Bcl-2蛋白表达及细胞膜Fas、Fas-L水平明显升高。结论:细胞主要分布于潜伏期、细胞内凋亡抑制蛋白Bcl-2水平升高及细胞膜Fas、Fas-L表达增加,可能是卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV-3/DDP顺铂耐药的部分机理。     

抑制ClC-3表达促进顺铂诱导人卵巢癌SKOV3/DDP细胞凋亡的作用机制

目的:探讨抑制ClC-3基因表达对顺铂(DDP)复制的人卵巢癌SKOV3/DDP细胞损伤促进作用过程中的具体作用机制,为应用DDP治疗卵巢癌提供实验依据。方法:转染pSH1-siRNA-ClC-3重组质粒到人卵巢癌SKOV3/DDP细胞,Western blotting方法观察热休克蛋白(HSP70)、溶酶体组织蛋白酶D(cathepsin D)蛋白表达。结果:与SKOV3细胞比较,SK-OV3/DDP细胞中HSP70蛋白表达增加(P<0.05)。转染pSH1-siRNA-ClC-3重组质粒联合DDP作用后,SKOV3/DDP细胞中HSP70蛋白表达降低(P<0.05),cathepsin D蛋白表达增加(P<0.05)。结论:抑制ClC-3基因表达促进顺铂诱导SKOV3/DDP细胞凋亡的可能作用机制与溶酶体膜通透性(LMP)增加有关。     

NF-Kappa B p65与CD68在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 通过检测非小细胞肺癌(NSCLC)中核转录因子κb p65 (NF-κB p65)蛋白、CD68阳性细胞的表达,探讨它们在肺癌发生发展中的作用以及两者的关系.方法 免疫组化SP法检测67例人NSCLC标本(每个标本取癌组织、癌旁组织、正常组织)中NF-κB p65和CD68的表达,多组间比较运用单因素方差分析,并采用Pearson相关分析NF-κB p65蛋白表达与CD68阳性细胞数量的相关性.结果 肺癌组织、癌旁组织、正常组织中NF-κB p65的平均光密度值分别为0.174±0.034,0.139±0.016,0.090±0.01;CD68阳性细胞数分别为11.779±1.368,97.486±2.538,52.140±1.853,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).CD68的表达与TNM分期、淋巴节转移、是否侵及胸膜有关(P＜0.05).NF-κB p65蛋白在NSCLC中的表达与癌组织分化程度、TNM分期、淋巴节转移及是否侵及胸膜有关(P＜0.05).CD68阳性细胞数量和NF-κB p65蛋白的表达呈正相关(r=0.416,P＜ 0.05).结论 NF-κB p65蛋白的表达和CD68+巨噬细胞的浸润与NSCLC的发生发展转移相关,提示CD68+巨噬细胞可能通过激活NF-κB促进非小细胞肺癌的发生发展.     

敲低B-细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因对子宫颈癌细胞顺铂敏感性的研究

目的探讨子宫颈癌C4-1细胞敲低B-细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因(Bcl-2)的表达,提高人子宫颈癌C4-1细胞对顺铂(DDP)化疗敏感性的作用与机制。方法应用敲低Bcl-2慢病毒转染子宫颈癌C4-1细胞,将其分为对照组、空载组及敲低组,上述分组通过DDP处理后分别作为对照+DDP组、空载+DDP组和敲低+DDP组。采用RT-PCR法检测C4-1细胞Bcl-2 mRNA表达水平,采用流式细胞仪检测C4-1细胞凋亡率,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测C4-1细胞对DDP的敏感性。结果敲低组与空载组及正常对照组比较,C4-1细胞的凋亡率明显增加(P0.05),C4-1细胞Bcl-2 mRNA表达量降低;敲低组+DDP组与空载+DDP组和对照+DDP组比较IC50值降低,上述差异均有统计学意义(P0.05)。结论慢病毒转染子宫颈癌C4-1细胞敲低Bcl-2表达可增加凋亡率,提高子宫颈癌C4-1细胞对顺铂的敏感性。     

丙戊酸钠联合顺铂对HO-8910细胞增殖的影响及机制

目的:探讨丙戊酸钠(VPA)联合顺铂(DDP)对体外培养的人卵巢癌细胞HO-8910细胞增殖抑制和凋亡作用及机制。方法:3 mM浓度的VPA、1μg/m l的DDP及VPA联合DDP分别处理人卵巢癌细胞株HO-8910不同时间(24、48、72 h)后,采用MTT法检测细胞的增殖活性;Hoechst 33258荧光染色观察细胞凋亡形态学改变;RT-PCR检测p53基因mRNA水平表达变化;W estern b lot法检测p53及Stat3蛋白表达变化。结果:VPA对卵巢癌HO-8910细胞株有生长抑制作用,且VPA联合DDP优于单独用药(P<0.05);Hochest 33258荧光染色结果显示,用药后细胞呈现明显的核碎裂、核固缩等典型凋亡改变,VPA联合DDP组细胞凋亡改变较单独用药组明显(P<0.05);RT-PCR检测显示VPA单独用药及联合DDP用药均能提高p53基因的mRNA表达水平;W estern b lot结果显示VPA联合DDP显著增强卵巢癌HO-8910细胞中p53蛋白表达,降低Stat3蛋白的表达,联合用药组效果更明显。结论:VPA单独用药在体外可有效杀伤卵巢癌HO-8910细胞株,与DDP联合应用具有明显的协同作用,推测其可能的作用机制是诱导p53表达水平上调及Stat3表达水平下调。     

三仙保宫汤对小鼠宫颈癌U14细胞抑制作用的研究

目的:观察三仙保宫汤、顺铂(cisplatin,DDP)及其两者联合应用对小鼠宫颈癌细胞株U14移植瘤的抑制作用及凋亡诱导作用,并初步探讨三仙保宫汤的抗肿瘤作用机制。方法:随机分为模型对照组、顺铂组、三仙保宫汤组、三仙保宫汤联合顺铂组,分别给予不同药物干预21天,并采用免疫组织化学法检测各组肿瘤组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。。结果:三仙保宫汤联合顺铂组的作用优于单药组。结论:1.三仙保宫汤具有明显抑制小鼠宫颈癌移植瘤生长的作用,其联合顺铂组肿瘤组织的Bax蛋白表达率明显高于单独用药。     

组蛋白去乙酰化酶1siRNA提高人宫颈癌HeLa细胞的化疗敏感性

目的探讨应用小干扰核糖核酸(siRNA)干扰组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)的表达,提高人类宫颈癌He La细胞对顺铂(DDP)化疗敏感性的作用与机制。方法合成针对HDAC1的siRNA采用脂质体法转染宫颈癌He La细胞,将其分为siRNA组、阴性siRNA组及对照组。对照组、siRNA组和阴性siRNA组通过DDP处理后分别作为对照+DDP组、siRNA+DDP组和阴性siRNA+DDP组。采用PCR检测HDAC1 mRNA表达,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测He La细胞对DDP的敏感性。结果与阴性siRNA组及对照组比较,siRNA组He La细胞的凋亡率增加,差异具有统计学意义(P0.05);和阴性siRNA组及对照组比较,siRNA组HDAC1 mRNA表达量降低,差异具有统计学意义(P0.05),siRNA+DDP组IC50值低于阴性siRNA+DDP组及对照+DDP组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论 HDAC1 siRNA可抑制HDAC1基因的表达水平,使组蛋白去乙酰化水平增加,提高宫颈癌He La细胞对顺铂的敏感性。