血清microRNA-122在儿童非酒精性脂肪肝病中的表达及意义

目的研究儿童非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)患者血清microRNA-122(miR-122)的表达及临床意义。方法收集2016年10月至2017年10月郑州大学附属儿童医院内分泌遗传代谢科就诊的7～14岁NAFLD患儿35例为NAFLD组, 选取与其性别及年龄匹配的健康儿童43例为对照组, 检测并记录两组儿童身高、体重、体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清miR-122水平, 进行统计分析。结果 NAFLD组年龄(9.97±1.93岁)与对照组(10.28±1.68岁)无明显差异(P=0.455), NAFLD组体重(65.91±15.94kg)、BMI(29.93±3.77kg/m2)、WHR(0.97±0.04)、TG(1.49±0.46mmol/L)、TC(3.96±0.67mmol/L)、ALT(32.7±15.65U/L)、血清miR-122水平(2.33±1.75)高于对照组相应水平(36.93±7.54kg、17.75±...     

儿童IgA肾病血清miR-152-5p及miR-210-5p的表达及其临床价值

目的探讨miR-152-5p及miR-210-5p在儿童IgA肾病(IgAN)中的表达及其临床价值。方法选取2018年1月至2022年6月由本院收治的109例IgAN患儿(IgAN组)、100例非IgA肾病的肾炎患儿(非IgAN组)和60例体检正常者(对照组)作为研究对象。其中IgAN患儿根据牛津分型评分(MEST)分为MEST≥3分组(41例)和MEST<3分组(68例), 并根据尿蛋白量分为尿蛋白≥1.0 g/24 h组(56例)和尿蛋白<1.0 g/24 h组(53例)。比较各组的miR-152-5p、miR-210-5p、IgA/C3及半乳糖缺乏型IgA1分子(Gd-IgA1)水平。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-152-5p、miR-210-5p、IgA/C3及Gd-IgA1诊断IgAN的价值。采用Pearson相关分析miR-152-5p、miR-210-5p表达水平与IgA/C3及Gd-IgA1的相关性。结果 IgAN组的miR-152-5p、miR-210-5p、IgA/C3及Gd-IgA1水平均明显高于非IgAN组和对照组(均P<0.00...     

血清miR-135-5p及miR-337-5p在糖尿病肾病中的表达及其临床意义

目的探讨糖尿病肾病(DN)患者的血清miR-135-5p及miR-337-5p表达及其临床意义。方法选取2018年1月至2020年12月本院收治的105例2型DN患者和60例体检正常者(对照组)。根据尿白蛋白排泄率(UAER)将105例2型DN患者分为早期DN组57例(UAER为20～200 μg/min)和临床期DN组48例(UAER>200 μg/min)。比较各组血清miR-135-5p及miR-337-5p表达水平, 应用多因素logistic回归分析影响DN发生的危险因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-135-5p及miR-337-5p表达水平在诊断DN中的价值。结果 DN组的血清miR-135-5p及miR-337-5p表达水平均明显高于对照组(均P<0.001)。临床期DN组的血清miR-135-5p及miR-337-5p表达水平均明显高于早期DN组(均P<0.001)。多因素logistic回归分析显示, 血清miR-135-5p及miR-337-5p表达水平升高是影响DN发生的独立危险因素(均P<0.001)。ROC曲线分析显...     

膀胱癌组织miR-361-5p、BTF3表达变化及临床意义

目的检测膀胱癌组织中微小RNA-361-5p(miR-361-5p)、通用转录因子3(BTF3)的表达水平, 并探讨其临床意义。方法选取2015年3月至2017年6月本院收治的74例膀胱癌患者为研究对象, 所有患者均行根治性膀胱全切术, 收集癌组织及癌旁正常组织, 采用荧光定量PCR技术检测miR-361-5p、BTF3 mRNA的相对表达量, 采用免疫组化法检测BTF3蛋白的表达情况, 根据细胞染色强度和阳性细胞比例进行定量分析, 将患者分为miR-361-5p高表达组和低表达组、BTF3高表达组和低表达组, 分析miR-361-5p、BTF3表达水平与膀胱癌患者临床病理参数的关系, 分析患者的3年生存情况。结果膀胱癌组织中miR-361-5p水平明显低于癌旁组织(P<0.05), BTF3 mRNA水平明显高于癌旁组织(P<0.05);膀胱癌组织中BTF3蛋白的阳性表达率为62.16%(46/74), 癌旁组织中BTF3蛋白的阳性表达率为17.57%(13/74), 差异有统计学意义(χ2=30.694, P<0.001);miR-361-5p、BTF3表达水平与...     

右美托咪定通过miR-483-3p/CTNNB1轴调控绝经后骨质疏松血管生成

目的确定右美托咪啶(dexmedetomidine, Dex)在绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis, PMOP)中的作用及其分子机制。方法选取2020年1月至2021年1月烟台山医院收治的27例PMOP患者作为PMOP组, 同时选取20例健康志愿者作为Normal组。筛选PMOP中差异表达的miRNAs, 在临床上通过qRT-PCR试验检测miR-483-3p、连环蛋白β1(catenin beta 1, CTNNB1)在PMOP患者血清样本中的表达。体外实验中, 诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)为成骨细胞, Dex处理BMSCs且干预BMSCs中miR-483-3p、CTNNB1的表达, 检测成骨相关指标(RUNX2、OCN、OPN)的表达水平。将人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell, HUVECs)和BMSCs共培养后, 借助血管生成实验检测BMSCs的血管生成能力。结果相对于Normal组(1±0.46)(1.03...     

妊娠期高血压患者血清SFRP5、miR-124-3p表达及临床意义

目的探究妊娠期高血压疾病(HDCP)患者血清分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)、miR-124-3p表达水平及临床意义。方法选取金华市妇幼保健院2019年1月至2022年2月确诊的98例HDCP患者为观察组, 其中包括妊娠期高血压(GH)组41例, 轻度子痫前期(PE)32例, 重度PE 25例, 另选取同期的80名健康体检者作为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测SFRP5水平, 实时荧光定量法(qRT-PCR)检测miR-124-3p表达水平。分析SFRP5、miR-124-3p水平与HDCP患者临床病理指标的关系, 采用Pearson法分析SFRP5与miR-124-3p的相关性。HDCP的危险因素探究利用多因素Logistic回归。结果与对照组相比, 观察组血清SFRP5表达水平[(33.78±5.21)vs(43.34±8.56)ng/L]下调, 而miR-124-3p水平[(2.16±0.41)vs(1.01±0.17)]上调, 且观察组血清SFRP5水平随着疾病程度加重而降低[(38.43±6.37)vs(33.18±5.14)vs(26.94±3.38)ng/L...     

绝经后女性腰椎退行性病变与骨密度的相关性分析

目的探讨绝经后女性腰椎退行性病变与骨密度的相关性分析。方法选取2019年1月至2022年3月四川省骨科医院医学影像科收治的97例绝经后腰椎退行性变患者进行研究, 使用腰椎双能X线吸收测量法(dual energy X-ray absorption measurement, DXA)测定患者L1～L4椎体平均骨密度, 根据骨密度T值将其分为骨量正常组(A组, 28例)、骨量低下组(B组, 30例)和骨质疏松组(C组, 39例)。所有患者均接受腰椎MRI检查, 通过Pfirrmann分级系统对腰椎间盘退变程度(L1/2、L2/3、L3/4、L4/5、L5/S1)进行评估, 并分析腰椎退行性病变与骨密度的关系。结果绝经后女性骨质疏松发病率为40.21%, A组、B组、C组年龄分别为(52.34±3.17 vs 56.78±3.97 vs 66.08±4.05)岁, 绝经时间分别为(4.06±1.02 vs 8.04±2.04 vs 14.05±2.08)年, 体质量指数(BMI)分别为(26.47±1.67vs 24.05±1.52 vs 22.02±1.68)kg/m2, C组绝经时间和年...     

叉头框蛋白O3在胰腺癌中的表达及其对胰腺癌细胞的影响

目的分析叉头框蛋白O3(FOXO3)在胰腺癌中的表达及其对胰腺癌细胞运动和增殖的影响。方法检索LinkedOmics数据库胰腺癌患者胰腺癌和癌旁组织FOXO3表达。Western印迹和实时定量聚合酶链反应检测胰腺癌细胞系和人胰腺星状细胞HPSC中FOXO3表达。选择低表达FOXO3的PANC-1、MIAPaCa-2胰腺癌细胞, 分别转染FOXO3过表达质粒和阴性对照质粒。克隆形成实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验和细胞周期检测各组胰腺癌细胞运动和增殖能力。结果 LinkedOmics数据库中, 64例胰腺癌患者癌组织中FOXO3蛋白相对表达水平明显低于癌旁组织(t=8.36, P<0.001)。PANC-1细胞过表达FOXO3后细胞克隆数为(30.0±6.6)个(40倍视野下计数), 低于阴性对照细胞的(92.7±6.7)个, 差异有统计学意义(t=11.54, P<0.001)。PANC-1和MIAPaCa-2在上调FOXO3表达后细胞划痕修复率较对照组显著下降。Transwell实验PANC-1细胞FOXO3过表达后(每个100倍视野下)穿膜数(21.0±6...     

FOXO4通过抑制炎症反应减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤

目的探讨叉头框蛋白O(forkhead box protein O, FOXO)4在心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation, H/R)损伤中的作用及对炎症反应的影响。方法 H9c2细胞体外培养至密度30%～50%, 按随机数字表法分为6组(每组3孔):对照组(Con组)、缺氧/复氧组(H/R组)、过表达FOXO4+H/R组(OF+H/R组)、过表达FOXO4阴性对照+H/R组(OF-NC+H/R组)、沉默FOXO4+H/R组(siFOXO4+H/R组)、沉默FOXO4阴性对照+H/R组(siRNA-NC+H/R组)。Con组细胞正常培养。H/R组细胞进行缺氧6 h复氧6 h处理。OF+H/R组、OF-NC+H/R组、siFOXO4+H/R组和siRNA-NC+H/R组细胞在质粒或RNAoligo转染5 h后正常培养48 h, 再进行H/R处理。Cell Counting Kit-8试剂盒检测细胞活性, 乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)试剂盒检测培养液中LDH含量, 实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluoresce...     

血清NLR和SII与绝经后骨质疏松椎体压缩骨折的相关性及对短期预后的预测价值

目的探讨血清中性粒细胞/淋巴细胞比率(neutrophil-to-lymphocyte ratio, NLR)、全身免疫炎症指数(systemic immune-inflammation index, SII)水平与绝经后骨质疏松椎体压缩骨折(osteoporotic vertebral compression fracture, OVCF)的相关性及对短期预后价值的分析。方法选取2018年12月至2021年12月吉林大学中日联谊医院收治的132例绝经后OVCF患者为观察组, 98例绝经后骨质疏松但未患OVCF患者为对照组, 对两组患者的一般资料、骨密度、NLR和SII进行分析比较, 应用Logistic分析影响绝经后OVCF发生的相关因素。根据绝经后OVCF术后骨折再发情况分为两组, 对NLR和SII绘制ROC曲线, 分析其对绝经后骨质疏松OVCF的预后价值。结果对照组NLR为2.96±0.41、STI为39.41±23.45, 观察组NLR水平为3.42±0.32、SII为431.77±31.14, 与对照组相比水平均升高(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示腰...     

miR-485-5p靶向EGFR对卵巢癌顺铂耐药细胞系的影响

目的探讨miR-485-5p对顺铂耐药卵巢癌细胞的影响及其机制。方法 RT-qPCR检测人正常卵巢上皮细胞株(IOSE-80)及卵巢癌细胞株(A2780、SKOV3、OVCAR3、OVCA433)中miR-485-5p的表达。构建顺铂(DDP)耐药卵巢癌细胞并检测miR-485-5p与EGFR的表达。CCK8法检测各组细胞增殖能力, 流式细胞术测定细胞凋亡。结果相对于IOSE-80细胞, 各卵巢癌细胞株中miR-485-5p的表达显著下降, EGFR表达上升(均P<0.05)。SKOV3/DDP细胞株(0.17±0.02)中miR-485-5p表达较SKOV3细胞(0.32±0.04)进一步下降(t=5.81,P=0.004)。而SKOV3/DDP细胞中EGFR表达则较SKVO3进一步上升(P<0.05)。SKOV3/DDP细胞转染miR-485-5p mimic能抑制细胞增殖活力、诱导细胞凋亡, 转染miR-485-5p inhibitor则相反(均P<0.05)。SKOV3/DDP细胞转染EGFR能促进细胞增殖并抑制细胞凋亡, 该作用被miR-485-5p mim...     

miR-539-5p对雄激素非依赖性前列腺癌细胞阿帕鲁胺敏感性及恶性表型的影响及机制研究

目的研究miR-539-5p对雄激素非依赖性前列腺癌细胞C4-2B阿帕鲁胺(ARN-509)敏感性及恶性表型的影响及相关机制。方法获取去势抵抗性前列腺癌、去势敏感性前列腺癌及良性前列腺组织, 并选取处于对数生长期C4-2B前列腺癌细胞, 传代扩增后, 采用miR-539-5p质粒对C4-2B细胞系进行转染, 共分为空白组, 转染组(miR-539-5p质粒)及对照组(对照质粒)。qPCR检测组织及3组细胞中miR-539-5p、AR及热休克因子结合蛋白1(heat shock factor binding protein 1, HSBP1)基因的表达含量;Western blot检测3组细胞雄激素受体AR及HSBP1的蛋白表达含量;Transwell实验检测3组细胞的侵袭迁移能力;CCK-8法检测3组细胞的增殖能力及雄激素受体拮抗剂ARN-509的半抑制浓度(IC50);平板克隆实验检测3组细胞的克隆形成能力。结果组织qPCR提示:良性前列腺组织、前列腺癌去势敏感患者肿瘤组织及前列腺癌去势抵抗患者肿瘤组织miR-539-5p的表达分别为0.29±0.04、0.17±0.02、0.07±...     

泌尿系结石与非酒精性脂肪性肝病相关性的研究进展

近年来, 临床上发现非酒精性脂肪肝患者多伴有泌尿系结石, 且随着非酒精性脂肪肝的严重程度增加泌尿系结石的伴发率也呈递增趋势。同时, 泌尿系结石患者的非酒精性脂肪性肝病检出率也高于非泌尿系结石对照组。本文回顾国内外有关泌尿系结石与非酒精性脂肪性肝病相关性的研究, 介绍相关的发病机制如胰岛素抵抗、氧化应激、脂代谢异常和乙醛酸解毒受损, 便于临床早期筛查和诊断。同时, 本文针对两种疾病共同的危险因素, 包括代谢相关疾病、生活方式和饮食因素提供了相应的预防措施建议, 以期降低非酒精性脂肪性肝病相关泌尿系结石的发生和复发风险。     

微小RNA-590-3p靶向叉头框蛋白A2对肿瘤细胞增殖和转移特性的影响

目的探讨微小RNA(miRNA, miR)-590-3p靶向叉头框蛋白A2(FOXA2)对肿瘤细胞增殖和转移特性的影响。方法采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析人卵巢上皮细胞HOSEpiC和卵巢癌细胞skov3中miR-590-3p水平;将人浆液性卵巢癌细胞系skov3随机分为对照组和观察组, 分别采用miRNA对照和miR-590-3p抑制剂转染skov3细胞, 72 h后采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成实验和体外移植瘤实验分析两组细胞的增殖能力;采用Transwell和蛋白质印迹法(Western blot)分析两组细胞迁移、侵袭和上皮间质转化能力;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-590-3p的靶基因, Western blot分析两组细胞靶基因表达以及增殖和迁移相关蛋白表达水平。计量数据比较采用t检验。结果人卵巢上皮细胞HOSEpiC miR-590-3p表达水平(0.77±0.14)明显低于卵巢癌细胞skov3 miR-590-3p表达水平(1.22±0.15), 差异有统计学意义(t=5.450, P<0.05)。对照组细胞48 h吸光度值(2...     

miR-4783-3p在肝癌组织中的表达及对肝癌细胞增殖和迁移的影响

目的研究miR-4783-3p在肝癌组织中的表达及对肝癌Huh-7细胞增殖及迁移产生的影响。方法采用cBioPortal数据库分析肝癌组织和癌旁组织中miR-4783-3p的表达, 严格按照Lipofectamine? 2000转染试剂盒说明书, 分别将miR-4783-3p过表达模拟物或过表达对照模拟物转染至Huh-7细胞, 即过表达组和对照组。通过CCK-8实验分析Huh-7细胞增殖情况, 细胞划痕法分析Huh-7细胞迁移情况。双荧光素酶报告基因法检测miR-4783-3p与胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)mRNA的靶向关系。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测IGFBP2mRNA的表达。Western-blotting检测IGFBP2蛋白和EGFR-STAT3分子通路蛋白的表达。正态分布的计量资料以均数±标准差(±s)表示, 组间比较采用t检验或单因素方差分析。结果肝癌组织中miR-4783-3p的表达明显低于癌旁组织(P<0.01)。与对照组比较, 过表达组Huh-7细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。对照组和过表达组中Huh-7细胞划痕愈合率...     

叉头框蛋白M1促进三阴性乳腺癌进展的分子机制

目的探讨叉头框蛋白M1(FOXM1)在乳腺组织表达水平及其对乳腺癌细胞进展的影响。方法选取2022年1月至2023年1月郑州大学第一附属医院择期手术的68例乳腺癌组织和癌旁组织作为研究对象, 采用蛋白质印迹法(Western blot)和荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析FOXM1蛋白和mRNA表达水平;采用对照短发卡RNA(shRNA)和FOXM1 shRNA慢病毒感染乳腺癌细胞MDA-MB-231, 建立对照组和FOXM1 KD组细胞, 采用噻唑蓝(MTT)法测定两组细胞的活力;流式细胞术分析两组细胞的周期和凋亡水平;Transwell分析两组细胞迁移和侵袭能力, Western blot分析两组细胞上皮细胞和间质细胞标志物表达水平;采用荧光定量PCR分析肿瘤和细胞中FOXM1靶基因KIF4A、MYBL2和Integrin β1 mRNA表达水平。组间比较采用t检验。结果癌旁组织FOXM1蛋白表达水平(1.29±0.28)明显低于三阴性乳腺癌组织(1.90±0.26), 差异有统计学意义(t=12.890, P<0.05)。荧光定量PCR结果显示, 癌旁组织FOXM1 mRN...     

SIRT1/FoxO1信号通路在三叶苷减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用

目的评价沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头框蛋白O1(FoxO1)信号通路在三叶苷减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法清洁级健康雄性SD大鼠80只, 6～8周龄, 体质量230～280 g, 采用随机数字表法分为4组(n=20):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(CIR组)、三叶苷+脑缺血再灌注组(T组)和三叶苷+脑缺血再灌注+SIRT1/FoxO1信号通路抑制剂EX527组(E组)。采用大脑中动脉栓塞法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。T组和E组大鼠于缺血前3 d时开始灌胃给予三叶苷15 mg/kg, 2次/d, 连续3 d;E组大鼠每次灌胃前腹腔注射EX527 5 mg/kg。于再灌注24 h时采用改良Longa评分评估神经功能, 随后处死大鼠取全脑组织, 采用TTC染色确定脑梗死体积, 流式细胞术检测海马神经元凋亡率和ROS水平, Western blot法检测SIRT1及乙酰化FOXO1(Ac-FOXO1)表达, ELISA法检测SOD和MDA含量, HE染色后光镜下观察海马CA1区病理学结果。结果与S组比较, CIR组Longa评分、脑梗死体积、海马神经元凋亡率、RO...     

血浆miR-128-3p在重症胰腺炎患者中的表达及临床意义

目的检测微小RNA-128-3p(miR-128-3p)在重症胰腺炎(severe pancreatitis, SAP)患者血浆中的表达情况及临床意义。方法选择2017年6月至2020年12月在上海市宝山区中西医结合医院就诊的SAP患者175例为观察对象, 根据患者严重程度分级, 将患者分为轻症急性胰腺炎(mild acute pancreatitis, MAP)组78例, 中重症急性胰腺炎(moderate to severe acute pancreatitis, MSAP)组50例和SAP组47例。根据患者预后情况, 将SAP组分为存活组28例和死亡组19例。qRT-PCR法检测miR-128-3p水平, 对患者进行急性生理健康与慢性疾病(APACHEⅡ)评分、Ranson评分, pearson分析血浆miR-128-3p水平与APACHEⅡ、Ranson评分相关性, ROC曲线分析血浆miR-128-3p对SAP患者预后不良的预测价值。结果 MAP组、MSAP组、SAP组3组间APACHEⅡ[(3.41±1.56)、(5.63±1.78)、(6.57±1.83)分]、Ranso...     

细胞焦亡在非酒精性脂肪性肝炎中的研究进展

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)对人类健康造成了巨大威胁。大约25%的NAFLD患者发展为非酒精性脂肪性肝炎(NASH), 对我国造成了十分严重的卫生经济负担。研究人员致力于研究NASH发病的潜在分子机制, 提出新的治疗方法。近期研究表明, 炎症小体和gasdermin-D(GSDMD)介导的炎症性程序性细胞死亡与NASH的发生发展有关。本文就NASH发病机制中细胞焦亡及其相关分子的研究进展作一综述。     

肾移植受者骨密度评估及影响因素分析

目的评估肾移植受者骨密度,分析影响因素,为肾移植术后骨质疏松防治提出方向。方法回顾性分析南京医科大学第一附属医院2017年1月至2019年5月收治的254例肾移植受者,年龄(40.5±9.8)岁,男性168例、绝经期女性15例。应用双能X线吸收测定法(DEXA)检测右股骨颈及腰椎骨密度,评估骨质疏松发生率,分析影响因素。结果 254例受者骨量减少/骨质疏松在右股骨颈的发生率为20.1 %和2.8 %,在腰椎的发生率为26.1 %和3.6 %。卡方检验示术后时间较长、高龄、绝经受者右股骨颈及腰椎骨量丢失发生率更高(P<0.05)。线性回归分析示右股骨颈骨密度与身体质量指数(BMI)、胆固醇、甘油三酯、术前甲状旁腺切除术史呈正相关,与急性排斥、绝经女性呈负相关;腰椎骨密度与BMI、胆固醇、术前甲状旁腺切除术史呈正相关,与甲状旁腺激素(PTH)呈负相关(P<0.05)。结论肾移植受者骨量丢失发生率较高。监测骨密度,控制甲状旁腺亢进、维持良好营养状态、减少糖皮质激素用量等,对防治骨量丢失有积极作用。