孕哺期铅暴露对仔鼠学习记忆能力及海马组织中P-JNK表达的影响

目的:研究孕哺期铅暴露对仔鼠学习记忆能力及海马组织中磷酸化JNK蛋白(P-JNK)表达的影响。方法:0.3(低剂量铅暴露)、1.0(中剂量铅暴露)和3.0(高剂量铅暴露)g/L醋酸铅溶液以自由饮水方式对母鼠孕哺期染毒,每组10只,并设未染毒对照组。每组取10只仔鼠用于实验,仔鼠出生第21天用水迷宫实验检测其学习记忆能力,并检测其血液和海马组织中铅的含量,采用Western Blot法测定其海马组织中P-JNK蛋白的表达水平。结果:迷宫实验中,各组仔鼠错误次数和平均逃避潜伏期时间比较,差异有统计学意义(F=302.475和26.902,P<0.001);组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组仔鼠血及海马组织铅水平比较,差异有统计学意义(F=53.139和9.392,P=0.003和0.001),组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组仔鼠海马组织中P-JNK蛋白表达比较,差异有统计学意义(F=67.103,P<0.001),各剂量铅暴露组P-JNK蛋白的表达明显高于对照组(P<0.05)。结论:铅经血脑屏障,可能通过上调海马中JNK磷酸化水平并激活其信号传导通路,造成子代神经系统的损伤,从而影响学习记忆功能。     

白藜芦醇对铅暴露小鼠学习记忆能力及氧化应激相关因子的影响

目的:探讨白藜芦醇对铅暴露小鼠学习记忆能力及氧化应激相关因子的影响。方法:将50只昆明小鼠随机分成5组,每组10只,即空白对照组、铅暴露组、白藜芦醇低、中、高剂量干预组。自由饮水形式染毒8周后,以Morris水迷宫实验测试小鼠学习记忆能力;用Z-5000型石墨炉原子吸收光谱仪测定血铅、海马组织铅含量;测定血清和海马组织中SOD活力和MDA含量。结果:Morris水迷宫实验结果显示,各组小鼠逃避潜伏期比较,差异有统计学意义(F=9.044,P<0.001)。各组小鼠血铅和海马组织铅含量比较,差异均有统计学意义(F=24.142和17.511,P均<0.001);与铅暴露组相比,白藜芦醇干预组海马组织铅含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。各组小鼠血清和海马组织SOD活力比较,差异均有统计学意义(F=35.190和11.933,P均<0.001);各组小鼠血清和海马组织MDA含量比较,差异有统计学意义(F=5.610和4.406,P均<0.05)。与空白对照组比较,铅暴露组和3个白藜芦醇干预组小鼠血清、海马组织SOD活力降低(P<0.05);与铅暴露组相比,白藜芦醇中剂量和高剂量干预组小鼠血清、海马组织SOD活力升高(P<0.05)。结论:白藜芦醇干预可降低铅暴露小鼠血铅、海马组织铅含量,拮抗其对学习记忆能力的损伤作用,提高SOD活力、降低MDA含量。     

左旋肉碱对慢性脑低灌注大鼠认知功能障碍的保护作用和机制

目的探讨左旋肉碱(L-carnitine, LCAR)对慢性脑低灌注大鼠认知功能障碍的保护作用和机制。方法 90只3～4月龄雄性SPF级SD大鼠按照随机数字表法分为4组:假手术对照组(SHAM组, n=15)、假手术左旋肉碱组(LCAR组, n=25)、双侧颈总动脉结扎组(2VO组, n=25)、双侧颈总动脉结扎+左旋肉碱组(2VO+LCAR组, n=25)。采用双侧颈总动脉结扎法建立慢性脑低灌注模型, 假手术组只分离血管, 不结扎;LCAR组和2VO+LCAR组在手术后按照300 mg·kg-1·d-1的剂量连续给予左旋肉碱腹腔注射给药, 共注射30 d。左旋肉碱干预30 d后, 用Morris水迷宫实验检测大鼠的空间学习和记忆能力, 用化学发光法检测海马组织ATP水平, 通过透射电镜观察海马神经元的线粒体结构和突触结构, 对线粒体损伤程度进行评分, 计数和测算囊泡密度, 用Western blot法检测海马组织的N-甲基-D-天冬氨酸受体功能亚单位(N-methyl-D-aspartate receptor subunit 2A or 2B, NR2A/B)、突触后致密蛋白95(p...     

母体铅暴露对仔鼠海马组织中糖原合成酶激酶-3βmRNA表达的影响

目的:观察母体铅暴露对仔鼠学习记忆及海马组织内精原合成酶激酶-3β(GSK-3β)mRNA表达的影响.方法:雌性小鼠40只,自妊娠第1天开始经饮水染铅,高、中、低剂量铅暴露组分别饮用0.3、1.0和3.0 g/L的醋酸铅水,对照组饮蒸馏水,至仔鼠出生后第21天断乳为止.抽取各组仔鼠10只,在出生后第7、14、21天分别测其血液和海马组织中铅水平;在出生后第21天时,进行Y型迷宫实验,并采用RT-PCR方法测定海马组织中GSK-3βmRNA的相对表达量.结果:4组仔鼠第7、14、21天血铅和海马组织铅水平随时间和染毒剂量的增加而变化(血清:F组间=315.204,F时间=16.427;F交互=53.125,P均<0.05.海马:F组间=256.205;F时间=7.312;F交互=10.213,P均<0.05);与对照组相比,各剂量铅暴露组血液和海马组织铅水平显著升高(P<0.05).第21天4组仔鼠的学习记忆能力(TI和T2)差异有统计学意义(F组间=43.312,F时间=72.345,F交互=83.532,P均<0.05),记忆保持率(T3)差异亦有统计学意义(F=18.264,P=0.013);低、中、高剂量铅暴露组T1、T2高于对照组,T3低于对照组(P均<0.05).4组仔鼠海马组织中GSK-3β mRNA的表达量比较,差异有统计学意义(F=37.263,P<0.001),低、中、高剂量铅暴露组均较对照组明显升高(P<0.05).结论:母体铅暴露导致铅在仔鼠体内蓄积,蓄积的铅通过诱导海马内GSK-3β mRNA的高表达,造成神经系统功能的损害,从而引起仔鼠学习记忆能力下降.     

孕期及哺乳期铅暴露对仔代大鼠学习记忆能力的影响及其机制

目的：探讨孕期及哺乳期铅暴露对仔代大鼠学习记忆能力和海马组织c-fos蛋白及小清蛋白（PV）表达的影响,阐明铅对仔代大鼠神经系统发育期记忆功能损害的可能机制。方法：8只孕期Wistar雌性大鼠随机分为对照组和低、中及高剂量铅暴露组。低、中和高剂量铅暴露组大鼠分别给予含0.05%、0.10%和0.20%醋酸铅的去离子水,对照组大鼠饮用去离子水。仔代大鼠出生10d后,采用Morris水迷宫法检测各仔代大鼠的学习记忆能力,原子吸收光谱法检测各组仔代大鼠血液和海马组织中铅质量浓度,生化方法测定各组仔代大鼠海马组织中一氧化氮（NO）水平和一氧化氮合酶（NOS）活性,蛋白免疫印迹法检测各组仔代大鼠海马组织中c-fos和PV蛋白表达水平,Pearson相关分析法分析仔代大鼠海马组织中c-fos和PV蛋白表达水平与学习能力指标、海马组织中NO水平及NOS活性的相关性。结果：定位航行实验,与对照组比较,中和高剂量铅暴露组仔代大鼠平均逃避潜伏期和游泳距离明显增加（P<0.05）。空间探索实验,与对照组比较,中和高剂量铅暴露组仔代大鼠目标象限停留时间和穿越次数明显减少（P<0.05）。各组仔代大鼠血液和海马组织中铅质量浓度比较差异有统计学意义（F=176.44,P<0.01;F=37.37,P<0.01）;与对照组比较,不同剂量铅暴露组仔代大鼠血液和海马组织中铅质量浓度明显升高（P<0.05）。各组仔代大鼠海马组织中NO水平和NOS活力比较差异有统计学意义（F=4.105,P<0.05;F=3.443,P<0.05）;与对照组比较,高剂量铅暴露组NO水平和NOS活力明显下降（P<0.05）。与对照组比较,不同剂量铅暴露组仔代大鼠海马组织中c-fos蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,中和高染铅暴露组仔代大鼠海马组织中PV蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。Pearson相关分析法,仔代大鼠海马组织中c-fos蛋白表达水平与水迷宫实验中学习能力指标、海马组织中NO水平和NOS活性呈正相关关系（P<0.01）,PV蛋白表达水平与水迷宫实验中学习能力指标、海马组织中NO水平和NOS活性呈负相关关系（P<0.01）。结论：孕期及哺乳期铅暴露可损伤仔代大鼠的学习记忆能力,其毒性作用机制可能与海马组织中c-fos蛋白表达水平降低和PV蛋白表达水平升高有关。     

细颗粒物PM2.5对大鼠IL-10、IL-22表达的影响及百令胶囊的干预作用

目的观察细颗粒物(PM 2.5)对大鼠肺损伤的影响,探讨中药百令胶囊对肺损伤的保护作用。方法2019年9—10月于河北省人民医院动物研究中心进行实验。将40只Wistar雄性大鼠按随机数字表法分为空白对照组、PM2.5染毒组及PM2.5+百令胶囊低、中、高剂量组5组。除空白对照组外,其余4组每3天将PM2.5混悬液(10 m g/kg)经大鼠气管内滴入进行PM2.5染毒,共10次。在PM2.5染毒基础上,百令胶囊组分别以低(0.25 g/kg)、中(0.5 g/kg)、高(1 g/kg)3种不同剂量的百令胶囊悬液每日连续给予大鼠灌胃,共28 d;通过HE染色观察各组大鼠肺组织炎性病理变化,并应用ELISA法测定血清中白介素10(IL-10)、IL-22蛋白含量,利用实时荧光定量PCR法检测大鼠肺组织IL-10、IL-22 mRNA的表达。结果大鼠肺组织病理检查发现,PM2.5染毒组可见大量慢性炎性细胞浸润,百令胶囊干预各组较PM2.5染毒组炎性细胞浸润情况明显减轻。与空白对照组比较,PM2.5染毒组大鼠血清IL-10水平明显降低(t/P=27.758/0.000),血清IL-22水平明显升高(t/P=28.190/0.000)。与PM2.5染毒组比较,百令胶囊干预各组随剂量的增加,血清IL-10水平逐渐升高(F/P=224.867/0.000),而血清IL-22水平则逐渐下降(F/P=149.115/0.000)。Pearson相关分析表明:血清IL-10与IL-22水平呈负相关(r=0.960,P<0.05)。实时荧光定量PCR法检测法结果显示,与空白对照组比较,PM2.5染毒组肺组织IL-10 mRNA表达水平明显降低(t/P=61.342/0.000),肺组织IL-22 mRNA水平明显升高(t/P=55.298/0.000);与PM2.5染毒组比较,百令胶囊干预各组随剂量的增加,肺组织IL-10 mRNA水平逐渐升高(F/P=1131.931/0.000),而IL-22 mRNA水平则逐渐下降(F/P=604.257/0.000)。结论PM 2.5短期暴露可造成大鼠肺部炎性损害,百令胶囊可通过促进IL-10的分泌及表达,以及抑制IL-22的生成,对肺部起到保护作用。     

过表达miR-27a对急性脑梗死大鼠海马神经元损伤的影响及其机制

目的 探究过表达miR-27a对急性脑梗死大鼠海马神经元损伤的影响及可能机制。方法 将60只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、Agomir阴性对照组(Agomir-NC组)和miR-27a agomir组(Agomir组),每组15只。采用改良Longa线栓法构建急性脑梗死大鼠模型,于造模前1天和造模成功时,分别经侧脑室注射15 mg/kg的agomir-NC或miR-27a agomir。术后72 h,采用Zea-Longa评分法对大鼠神经功能缺损进行评分;采用氯化三苯基四氮唑染色法(TTC)测量大鼠脑梗死面积;原位缺口末端标记法(TUNEL)检测大鼠海马组织细胞凋亡水平;qRT-PCR法检测各组大鼠海马组织miR-27a的表达水平;流式细胞术(FCM)检测各组大鼠海马组织中Iba-1⁺/CD68⁺小胶质细胞所占百分比;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组大鼠海马组织IL-1β、IL-6、TNF-α及iNOS的表达水平;Western blotting检测大鼠海马组织中TLR4信号通路相关蛋白TLR4、MyD...     

温压装药爆炸模拟气体对大鼠神经行为及海马神经发生的影响

目的探讨温压装药爆炸模拟气体对大鼠神经行为及海马神经发生的影响。方法选取48只8～10周龄SPF级雄性SD大鼠, 按照随机数字表法分为对照组、5 min暴露组、10 min暴露组和15 min暴露组, 每组12只。吸入染毒后28 d, 以高架十字迷宫评估大鼠焦虑样行为, 双向主动回避实验评估学习、记忆功能;免疫荧光染色法检测海马齿状回神经干细胞(neural stem cells, NSCs)标志分子神经上皮细胞蛋白(SOX2)、成熟神经元标志分子神经元核抗原(neuronal nuclei, NeuN)的阳性表达情况;Western blot检测海马组织SOX2、NeuN蛋白表达量。采用GraphPad prism 8. 0进行数据分析与制图, 重复测量设计资料的比较采用重复测量方差分析, 其他数据多组间比较采用单因素方差分析, 两两比较采用Tukey法。利用Image J工具对海马神经细胞进行计数。结果 (1)高架十字迷宫实验结果显示, 4组大鼠进入开臂次数百分比、开臂停留时间百分比均差异有统计学意义(F=22.31, 5.43, 均P<0.05)。5 min、10 min、...     

rhG-CSF对大鼠缺血缺氧神经元巨自噬水平的影响

目的:探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对缺血缺氧神经元巨自噬水平的影响及意义。方法:采取氧糖剥夺法制作细胞缺氧模型,Western blot法检测0、100、200μg/L rhG-CSF干预下细胞巨自噬标志微管相关蛋白轻链3膜型和胞质型比值(LC3Ⅱ/LC3Ⅰ)的变化,单丹磺酰戊二胺(MDC)法荧光观察巨自噬空泡变化,MTT法检测细胞活力。应用改良线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型,rhG-CSF干预前及干预7 d后进行改良的神经功能缺损评分评定,Western blot法检测干预7 d后大鼠皮层神经元LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,免疫组化法检测LC3蛋白的表达。结果:随着rhG-CSF给药剂量的增加,细胞缺氧模型LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和巨自噬空泡数量逐渐增加(F=288.686,154.698,P<0.001),细胞活力也相应增强(F=74.456 P<0.001)。动物实验中,干预7 d后,rhG-CSF组大鼠缺血神经元LC3Ⅱ/LC3Ⅰ(F=573.085,P<0.001)及LC3阳性细胞数(F=88.945,P<0.001)分别较假手术组及模型组上调,大鼠的神经功能缺损评分较干预前明显降低(F组间=20.403,F时间=19.193,F交互=33.415,P<0.001)。结论:局灶性脑缺血后rhG-CSF可能通过上调巨自噬水平参与神经元的保护。     

地卓西平诱导精神分裂症模型大鼠海马灰质体积及免疫相关基因的变化

目的探讨地卓西平(dizocilpine, MK-801)重复给药建立的精神分裂症模型大鼠的海马灰质体积和候选免疫相关基因表达的变化。方法将出生后28 d的30只SPF级雄性Sprague-Dawley大鼠按照随机数字表法分为MK-801中剂量组(0.25 mg/kg)、MK-801高剂量组(0.50 mg/kg)和生理盐水(5 mL/kg)组, 每组10只, 大鼠按照分组连续腹腔注射给药14 d, 1次/d。大鼠在出生后60 d依次进行旷场实验、新物体识别实验和Y迷宫实验, 分别检测自发活动、探索能力、焦虑程度和物体识别记忆能力以及空间工作记忆;在出生后67 d时采用结构磁共振成像检测大鼠海马灰质体积的变化;在出生后70 d采用qRT-PCR检测大鼠海马组织候选免疫相关基因的表达。采用SPSS 25.0进行统计分析, 多组间比较采用单因素方差分析, 进一步两两比较采用Tukey检验。结果 (1)行为学结果表明, 3组大鼠的运动总距离、中央区域活动时间、新物体识别指数、自发正确交替率均差异有统计学意义(F=11.15, 10.11, 13.62, 11.99, 均P<0.05)。...     

牛磺酸对1-溴丙烷致大鼠认知功能障碍的保护作用

目的观察牛磺酸对1-溴丙烷致大鼠中枢神经系统功能损伤的保护作用。方法 SPF级成年雄性Wistar大鼠60只,按体质量随机分为空白对照组、1-溴丙烷染毒组、低剂量牛磺酸干预组、高剂量牛磺酸干预组、牛磺酸对照组。1-溴丙烷采用玉米油稀释,经口染毒,剂量800 mg/kg,染毒15～20 d,采用Morris水迷宫检测大鼠认知功能。实验21 d处死动物,迅速分离大脑皮层及海马,采用高效液相色谱法检测脑组织中牛磺酸含量,采用Western blotting法检测线粒体氧化磷酸化蛋白复合体及凋亡相关蛋白的表达。结果 Morris水迷宫结果显示,与空白对照组相比,1-溴丙烷染毒组大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数明显降低(P<0.01);与1-溴丙烷染毒组相比,低剂量和高剂量牛磺酸干预组逃避潜伏期明显缩短,穿越平台次数增加(P<0.01)。HPLC结果显示,与空白对照组相比,1-溴丙烷染毒组大鼠皮层和海马牛磺酸含量明显降低(P<0.001,P<0.05),与1-溴丙烷染毒组相比,低剂量和高剂量牛磺酸干预组大鼠脑组织牛磺酸含量明显升高(P<0.001,P<0.01...     

急性一氧化碳中毒对大鼠脑红蛋白的影响

目的探讨急性一氧化碳中毒对大鼠脑红蛋白的影响,为一氧化碳中毒的防治提供理论依据。方法健康雄性SD大鼠20只随机分为对照组和一氧化碳染毒组,每组10只。染毒组按60ml/kg体重腹腔注射一氧化碳,每周一次,注射4周。对照组注射等量的空气。染毒结束后进行神经行为学测试包括旷场试验、甩尾试验和后肢撑力试验,同时检测大鼠海马、皮质、小脑中脑红蛋白的变化。结果一氧化碳中毒后大鼠在中央格停留时间明显增加,修饰次数、直立次数和大小便次数也较对照组明显增加,穿格次数明显减少;甩尾时间比对照组明显延长、后肢展开距离增加明显,差异有统计学意义。此外CO染毒大鼠皮质和小脑中的NGB含量增加,而海马中的NGB呈下降的趋势。结论一氧化碳中毒致脑组织脑红蛋白含量变化,这可能参与了CO中毒致神经损伤的机制。     

高铜饮食对大鼠认知功能及海马突触蛋白的影响

目的观察高铜饮食对大鼠神经行为功能及海马突触相关蛋白表达的影响。方法 30只SD雄性大鼠按照随机数字表法分为对照组、高铜饮食组, 每组15只。对照组大鼠喂食普通饲料、普通水, 高铜饮食组大鼠喂食硫酸铜含量为1 g/kg的高铜饲料和0.185%浓度的硫酸铜去离子水12周。采用电感耦合等离子体-原子发射光谱法和等离子体-质谱法分别检测大鼠血清、海马中铜的含量, 并通过刻板行为实验、旷场实验、Morris水迷宫实验检测大鼠的神经行为功能;Western blot技术检测海马微管相关蛋白2(microtubule associated protein 2, MAP2)、生长相关蛋白43(growth associated protein 43, GAP43)的表达水平。运用SPSS 22.0进行统计分析, 两组间比较采用两独立样本t检验。结果与对照组比较, 高铜饮食组大鼠血清铜[(1.67±0.69)mg/L、(1.98±0.24)mg/L, t=17.53, P<0.05]及海马组织游离铜[(3.52±1.24)mg/g、(4.78±0.57)mg/g, t=10.34, P<0...     

妊娠期铅、镉暴露对新生大鼠海马BDNF及ZnT7蛋白表达的影响

目的 探究妊娠期铅(Pb)、镉(Cd)暴露对新生大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)及锌转移体7(ZnT7)蛋白表达的影响.方法 妊娠SD大鼠分为4组:对照组(NC组,饮用蒸馏水)、Pb组(300 mg/L)、Cd组(10 mg/L)及Pb+Cd组(300 mg/L Pb+10 mg/L Cd),每组3只.采用饮水染毒,干预21 d.采集各组21 d龄新生大鼠的血液及海马组织样本,PE700Z型原子吸收光谱仪测定血液及海马组织Pb、Cd水平;水迷宫实验测定新生大鼠认知能力;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测海马组织中BDNF及ZnT7蛋白水平;Pear-son法分析Pb+Cd组新生大鼠海马组织中BDNF、ZnT7蛋白水平与血液、海马中Pb、Cd水平的相关性.结果 与NC组比较,Pb组、Cd组及Pb+Cd组新生大鼠逃避潜伏期、进入盲端次数、海马组织中ZnT7蛋白水平显著增加,BDNF水平显著降低(P<0.05),其中以Pb+Cd组变化最明显.Pb+Cd组新生大鼠海马组织中BD-NF水平与血液及海马组织Pb、Cd水平均呈负相关(P<0.05),ZnT7蛋白水平与血液及海马组织Pb、Cd水平均呈正相关(P<0.05).结论 妊娠期Pb、Cd暴露可协同降低新生大鼠认知能力,可能与海马BDNF表达降低,ZnT7蛋白表达升高有关.     

亚慢性铝暴露对SD大鼠学习记忆功能及海马细胞凋亡作用的研究

目的探讨亚慢性铝暴露对SD大鼠学习记忆功能及海马细胞凋亡的影响。方法将40只初断乳SPF级SD大鼠随机分为4组,每组10只,分别为对照组(蒸馏水),低、中、高浓度组(分别是2mg/ml、4mg/ml、6mg/ml AlCl_3),采用自由饮水方式让大鼠连续染毒AlCl_33个月。采用Morris水迷宫试验来检测各组每只大鼠的认知能力。采用HE染色法检测大鼠海马的病理变化,TUNEL法检测海马凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平。结果与对照组相比,低、中、高AlCl_3浓度组潜伏期长,差异均有统计学意义(q=4.28,P<0.01;q=7.41,P<0.01;q=9.85,P<0.01);三组铝染毒大鼠停留目标象限时间均短于对照组(F=11.62,P<0.01);三组铝染毒大鼠穿越平台次数均少于对照组(F=16.90,P<0.001)。三组不同浓度铝染毒组内两两比较显示,高浓度组和中浓度组的潜伏期均长于和穿越平台次数均少于低浓度组,高浓度组停留目标象限时间短于低浓度组和中浓度组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与对照组相比,铝暴露各浓度组大鼠海马神经元数目减少,胶质细胞数量增多;铝暴露组Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增多,Bcl-2/Bax比值降低,凋亡细胞数增多。结论亚慢性铝暴露可致大鼠学习记忆功能下降,其机制可能与AlCl_3诱导海马细胞Bcl-2表达下调、Bax表达上调有关。     

自噬在镉致大鼠肾脏损伤中的作用

目的:探讨不同浓度氯化镉染毒对大鼠肾脏功能的损伤及自噬在肾脏损伤中的作用,初步阐明镉损伤毒作用机制。方法:将40只大鼠随机分为空白对照组、低剂量染毒组(0.2 mg·kg^-1 CdCl₂)、中剂量染毒组(0.4 mg·kg^-1 CdCl₂)和高剂量染毒组(0.8 mg·kg^-1 CdCl₂),每组10只。腹腔注射给予氯化镉溶液制备肾损伤模型,空白对照组大鼠给予等量生理盐水,观察大鼠一般状态和体质量。5周后,取大鼠肾脏组织和血液,检测肾功能相关指标肌酐、尿素氮和β2微球蛋白表达水平;原子吸收光谱法测定肾脏组织中镉水平;免疫组织化学法检测肾脏组织中自噬相关Beclin1蛋白的表达水平;Western blotting法检测肾脏组织中自噬相关蛋白LC3B的相对表达水平。结果:各染毒组大鼠明显精神萎靡,从染毒第3周开始,高剂量染毒组大鼠体质量增长减慢,显著低于空白对照组(P<0.05);至染毒结束,中、高剂量染毒组大鼠体质量均显著低于空白对照组(P<0.05)。中、高剂量染毒组大鼠血清肌肝、尿素氮和β2微球蛋白表达水平较空白对照组显著升高(P<0.05),且高剂量染毒组大鼠血清肌肝水平显著高于低剂量染毒组(P<0.05),中、高剂量染毒组大鼠尿素氮水平显著高于低剂量组(P<0.05)。原子吸收光谱法检测,各染毒组大鼠肾脏组织中蓄积大量金属镉,空白对照组仅见微量镉蓄积,且低、中和高剂量染毒组大鼠镉的蓄积量呈递增趋势。与低剂量染毒组比较,中、高剂量染毒组大鼠肾脏组织中镉水平显著升高(P<0.05);与中剂量染毒组比较,高剂量染毒组大鼠肾脏组织中镉水平显著升高(P<0.05)。免疫组织化学法检测,各染毒组大鼠肾脏组织中Beclin1蛋白表达水平显著高于空白对照组(P<0.05),且中、高剂量染毒组大鼠肾脏组织中Beclin1蛋白表达水平显著高于低剂量组(P<0.05),同时高剂量染毒组大鼠肾脏组织中Beclin1蛋白表达水平显著高于中剂量组(P<0.05)。Western blotting检测,各染毒组大鼠肾脏组织中LC3B蛋白相对表达水平显著高于空白对照组(P<0.05),且中、高剂量染毒组大鼠肾脏组织中LC3B蛋白相对表达水平显著高于低剂量组(P<0.05)。结论:在0.2~0.8 mg·kg^-1剂量范围内,随着氯化镉染毒剂量增加,镉对大鼠肾脏功能损伤逐渐加重,其机制可能与增加肾脏细胞自噬有关联。     

盐酸法舒地尔对蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤海马ROCK2蛋白及铁死亡的影响

目的探讨盐酸法舒地尔(fasudil hydrochloride, FH)对蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage, SAH)大鼠早期脑损伤海马区Rho激酶2(Rho-associated kinase 2, ROCK2)蛋白及铁死亡的影响。方法 36只SPF级Sprague-Dawley大鼠用随机数字表法分为3组:假手术组(Sham组)、蛛网膜下腔出血组(SAH组)、SAH+ROCK2蛋白抑制剂FH组(FH组), 每组12只。颈内动脉刺破法建立SAH大鼠模型, FH组大鼠于造模成功后30 min腹腔注射FH(15 mg/kg), Sham组与SAH组注射等体积0.9%氯化钠溶液。干预后24 h, 采用穿梭箱实验观察大鼠学习记忆能力, 比色法检测大鼠海马区脑组织中Fe2+含量, 免疫组化及Western blot检测海马组织中ROCK2蛋白及铁死亡相关蛋白长链脂酰辅酶A合成酶4(long-chain acyl-CoA synthetase 4, ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4, GPX4)的表达水平。采用SP...     

重复经颅磁刺激对卒中后睡眠剥夺模型大鼠学习记忆及海马突触可塑性的影响

目的探讨重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation, rTMS)对卒中后睡眠剥夺模型大鼠学习记忆及海马区突触可塑性蛋白表达的影响。方法 28只SPF级8周龄健康雄性Wistar大鼠, 按照随机数字表法分为对照组、假手术组、模型组和rTMS组, 每组7只。模型组和rTMS组大鼠采用大脑中动脉栓塞+对氯苯丙氨酸腹腔注射法建立卒中后睡眠剥夺模型, rTMS组大鼠在建模后连续14 d进行rTMS干预;假手术组大鼠仅分离动脉但不结扎、不插线;对照组大鼠正常饲养。采用旷场实验观察大鼠自主行为, 水迷宫实验观察其空间学习记忆能力, Western blot法检测海马组织酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor type B, TrkB)含量, 免疫荧光法检测海马组织脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)、即刻早期基因c-fos表达情况, 光学显微镜及透射电镜观察海马区神经元形态及结构。采用SPSS 21.0软件进行统计分析, 逃避潜伏期数据采用重复测量...     

香烟烟雾染毒对雄性大鼠睾丸组织一氧化氮水平的影响

目的 探讨香烟烟雾染毒对大鼠睾丸组织结构及睾丸组织一氧化氮(NO)水平的影响.方法 清洁级成年雄性SD大鼠160只,分为对照组和低、中、高剂量染毒组,各组大鼠分别染毒2、4、6、8、12周,每组10只.染毒组采用呼吸道静式染毒,每天1次,每次0.5 h.观察大鼠睾丸组织结构,检测各组大鼠体质量及睾丸组织NO水平.结果 染毒4、6、8、12周时,中、高剂量染毒组大鼠体质量与对照组和低剂量组相比均明显降低(P<0.05),染毒8、12周时,高剂量染毒组大鼠体质量与中剂量组相比明显降低(P<0.05),并且随着染毒剂量的增加,降低更加明显.染毒2、4、6、8周时,高剂量组大鼠睾丸组织NO水平与对照组和低、中剂量组相比均明显升高(P<0.05);染毒8周时,中剂量组大鼠睾丸组织NO水平与对照组相比明显升高(P<0.05);染毒12周时,低、中、高剂量组大鼠睾丸组织NO水平与对照组相比均明显升高 (P<0.05) ,中、高剂量组大鼠睾丸组织NO水平与低剂量组相比明显升高 (P<0.05).结论 香烟烟雾染毒可致雄性大鼠睾丸组织NO水平升高,导致雄性大鼠睾丸组织损伤.     

Erastin对大鼠焦虑抑郁样行为及海马铁死亡相关蛋白表达的影响

目的探讨海马注射铁死亡诱导剂Erastin对大鼠焦虑抑郁样行为及其海马铁死亡相关蛋白表达的影响。方法 40只6周龄健康雄性SD大鼠按照随机数字法分为对照组、Erastin低剂量(200 ng/μL)组、Erastin中剂量组(400 ng/μL)、Erastin高剂量组(600 ng/μL)、脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)组(LPS组, 10 μg/L), 每组8只大鼠。向各组大鼠双侧海马注射相应药物(每侧2.5 μL)后于第4天开始进行体质量及行为学检测, 行为学测试包括糖水偏爱实验(sucrose preference test, SPT)、旷场实验(open field test, OFT)、强迫游泳实验(forced swimming test, FST)和高架十字迷宫实验(elevated plus maze, EPM), 观察大鼠的抑郁及焦虑样行为。采用Western blot技术和RT-PCR技术分别检测海马铁死亡相关蛋白及其mRNA表达水平, 包括谷胱甘肽过氧化物酶4 (glutathione peroxidase 4, GPX4)、环氧化酶2...