丹参酮IIA通过PKC/Cx43通路减轻大鼠心肌缺血再灌注致心律失常

目的 探讨丹参酮II_A（TA）对再灌注致心律失常的改善作用及机制。方法 取60只SD大鼠随机分为6组：对照组，模型组，TA低、高剂量（10、20 mg·^kg-1）组，蛋白激酶C （PKC）激活剂PMA （5 mg·^kg-1）组，TA （20 mg·^kg-1）联合PKC抑制剂Rottlerin （5 mg·^kg-1）组，每组10只。构建SD大鼠心肌缺血再灌注（I/R）模型，缺血30 min再灌注30 min；再灌注期间记录各组小鼠Ⅱ导联心电图并对再灌注后心律失常严重性进行评分；再灌注结束后，取颈静脉血采用试剂盒检测心肌损伤指标肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、天冬氨酸转氨酶（AST）和心肌肌钙蛋白（cTnT）水平；取左心室心脏组织，使用试剂盒检测丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性，实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测PKC、缝隙连接蛋白43（Cx43）mRNA表达，Western blotting法检测PKC、Cx43蛋白表达水平和磷酸化水平。结果 与模型组比较，TA 2个剂量组和PKC激活剂PMA组CK-MB、LDH、AST、cTnT、MDA水平均显著降低，SOD活性显著升高，室性早搏（PVB）次数、室性心动过速（VT）次数和持续时间以及心室颤动（VF）次数和持续时间显著减少，心律失常评分显著降低，差异均有统计学意义（P＜0.05、0.01、0.001） ；而TA联合PKC抑制剂组显著削弱TA的作用（P＜0.05、0.01、0.001） ；与模型组相比，TA 2个剂量组和PMA组Cx43 mRNA表达和磷酸化水平显著升高（P＜0.01、0.001） ，而PKC抑制剂使TA的作用显著减弱（P＜0.05、0.001）。结论 TA通过激活PKC调控Cx43表达和磷酸化而改善再灌注后心律失常，减轻心肌I/R损伤。     

金丝桃苷调控Nrf2/HO-1/NQO1通路减轻大鼠肾缺血再灌注损伤

目的 探究金丝桃苷对大鼠肾缺血再灌注(IR)损伤及核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)/醌氧化还原酶1(NQO1)信号通路的调节。方法 以结扎双肾动脉60 min再恢复灌注120 min构建肾IR大鼠模型,将40只SD大鼠随机均分为对照组,模型组,金丝桃苷12.5、25、50 mg·kg^-1组,留取大鼠血液和肾脏组织标本,检测24 h蛋白尿、血肌酐及尿素氮、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,HE染色观察肾脏组织病变,免疫组化法检测caspase-3表达,qRT-PCR法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素(IL)-6、IL-10 mRNA表达,Western blot法检测肾组织中Bcl-2、Bax、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达。另取32只大鼠随机均分为对照组、模型组、金丝桃苷50 mg·kg^-1组和金丝桃苷+ML385(30 mg·kg^-1)组,进行上述检测。结果与模型组比较,金丝桃苷25、50 mg·kg^-1组24 h蛋白尿、血肌酐、尿素...     

罗氟司特对急性心肌梗死大鼠心肌损伤的影响

目的 研究罗氟司特对急性心肌梗死(AMI)大鼠的治疗作用及其可能的作用机制。方法 将SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组(AMI)、低剂量实验组(AMI+1 mg·kg^-1罗氟司特)、高剂量实验组(AMI+3 mg·kg^-1罗氟司特),对照组(AMI+0.9 mg·kg^-1倍他乐克),每组10只,连续药物干预10 d后进行AMI造模。造模成功7 d后检测大鼠心功能指标水平,以酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清因子水平,以试剂盒检测心肌组织氧化应激相关指标水平,以原位末端标记法(TUNEL)法检测大鼠心肌组织心肌细胞凋亡情况,以蛋白质印迹法检测心肌组织蛋白表达水平。结果 假手术组、模型组、低剂量实验组、高剂量实验组和对照组大鼠的左心室射血分数(EF)水平分别为(64.44±3.65)%、(36.12±2.50)%、(41.91±3.92)%、(49.90±2.48)%、(53.28±3.22)%,肌酸激脢同工酶(CK-MB)水平分别为(19.15±0.91)、(77.86±5.92)、(61.58±4.78)、(43...     

穿心莲内酯抑制IKK/IκBα/NF-κB信号通路改善抑郁症大鼠的抑郁样行为

目的 探讨穿心莲内酯(Andro)通过抑制核转录因子-κB抑制蛋白激酶(IKK)/核因子κB抑制蛋白(IκBα)/核因子-κB(NF-κB)信号通路改善抑郁症(MDD)大鼠的抑郁样行为。方法 随机取12只SD大鼠作为空白对照组(NC组),其余大鼠采用慢性不可预知轻度应激(CUMS)结合孤养模式造模,将造模成功大鼠随机平分为模型组(Mod组)、Andro组(25 mg·kg^-1·d^-1)、Res组(30 mg·kg^-1·d^-1 IKK/IκBα/NF-κB信号通路激活剂Res)、Andro+Res组(25 mg·kg^-1·d^-1Andro+30mg·kg^-1·d^-1 Res),每组12只大鼠,Mod组和NC组灌胃等量0.9%氯化钠溶液。旷场实验、糖水偏好实验、强迫游泳实验、平衡木实验评估大鼠行为;ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平;免疫荧光染色检测小胶质细胞、星形胶质细胞活性;Western ...     

毛蕊花苷对心肌缺血再灌注大鼠Notch信号通路及Sirt3的影响

目的 探究毛蕊花苷对心肌缺血再灌注(MI/R)大鼠Notch信号通路及沉默信息调节因子3(Sirt3)的影响。方法 用结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注2 h建立MI/R模型。按照体质量将SD大鼠随机分为5组：假手术组、模型组、阳性对照组和毛蕊花苷低、高剂量组,每组12只。毛蕊花苷低、高剂量组分别腹腔注射毛蕊花苷10和20 mg·kg^-1,阳性对照组腹腔注射5.4 mg·kg^-1曲美他嗪,假手术组和模型组分别注射等量的0.9%NaCl。再灌注开始时进行给药,共1次,假手术组分离左冠状动脉前降支,不结扎。用2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色法检测大鼠心肌梗死面积,用TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡指数,用试剂盒检测血浆中乳酸脱氢酶(LDH)含量及心肌组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,用流式细胞仪检测心肌组织内活性氧ROS的水平,用蛋白质印迹法检测心肌组织中Notch1、发状分裂相关增强子-l(Hes-1)和Sirt3蛋白的表达水平。结果 假手术组、模型组、阳性对照组、毛蕊花苷高剂量组大鼠的心肌梗死面积百分比分别为0、(35...     

辛伐他汀对帕金森病大鼠神经功能的影响

目的 探究辛伐他汀介导腺苷酸活化蛋白激酶/过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(AMPK/PGC-1α)通路对帕金森病大鼠模型神经功能的影响。方法 SD大鼠建立帕金森病大鼠模型,建模成功后分为模型组、阳性药物组(1.67 mg·kg^-1多巴丝肼)、低剂量实验组(10 mg·kg^-1辛伐他汀)、高剂量实验组(20 mg·kg^-1辛伐他汀)、抑制药组(20 mg·kg^-1辛伐他汀+0.25 mg·kg^-1的AMPK抑制药BML-275),并选择10只正常大鼠作为对照组。用酶联免疫吸附(ELISA)法检测多巴胺(DA)、3,4二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)、5羟色胺(5-HT)水平,用蛋白质印迹法检测酪氨酸羟化酶(TH)、AMPK/PGC-1α通路相关蛋白表达水平,用免疫组化法检测TH表达水平,用试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平。结果 对照组、模型组、高剂量实验组、抑制...     

川芎嗪改善缺血再灌注诱导的大鼠急性肾损伤

目的探讨川芎嗪对缺血再灌注(I/R)诱导的大鼠急性肾损伤的保护作用及其与线粒体自噬的相关性。方法 48只Wistar大鼠分为正常对照组、模型组、模型+TMP(10,15和20 mg·kg^-1)组和正常+TMP(15 mg·kg^-1)组。通过夹闭双侧肾动脉45 min再灌注30 min制备大鼠急性肾损伤模型;模型+TMP(10,15和20 mg·kg^-1)组大鼠于夹闭双侧肾动脉45 min再灌注30 min后一次性ip给予不同剂量的TMP;正常+TMP(15 mg·kg^-1)组于开腹刺激75 min后一次性ip给予TMP 15 mg·kg^-1。给予TMP 24 h后,肌氨酸氧化酶法检测血清中肌酐(Cr)含量;尿素酶-谷氨酸脱氢酶法检测血清中尿素氮(BUN)含量;ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;WST-1法检测肾组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性;TBA法检测肾组织匀浆中丙二醛(MDA)含量。HE染色检测肾组织病理变化,免疫组织化学法检测大鼠肾组织中磷酸...     

芍药苷调节PI3K/AKT/NF-κB信号通路对血栓闭塞性脉管炎大鼠的治疗作用研究

目的 探讨芍药苷(PAE)对血栓闭塞性脉管炎(TAO)大鼠的治疗作用及作用机制。方法 通过月桂酸钠注射法建立TAO大鼠模型。将大鼠随机分为假手术组(腹腔注射适量0.9%NaCl)、模型组(腹腔注射适量0.9%NaCl)、低剂量实验组(腹腔内注射5 mg·kg^-1·d^-1 PAE)、高剂量实验组(腹腔内注射20 mg·kg^-1·d^-1 PAE)、高剂量+激动药剂(腹腔注射20 mg·kg^-1·d^-1 PAE+尾静脉注射10 ng·mL^-1·kg^-1·d^-1 740 Y-P)组。用磁珠凝固法检测凝血酶时间(TT);用酶联免疫吸附测定试剂盒检测白细胞介素(IL)-1β、内皮素1(ET-1)水平;用蛋白质印迹法检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、核因子(NF)-κB p65、p-NF-κB p65蛋白的表达水平。结果 假手术组、模型组...     

蒙花苷及其代谢产物对大鼠急性肝损伤的保护作用

目的 研究蒙花苷及其代谢产物(刺槐素、芹菜素、间苯三酚、对羟基苯甲酸和对羟基苯甲醛)对D-氨基半乳糖胺(D-GalN)致大鼠急性肝损伤的保护作用。方法 健康SD大鼠72只,随机分为正常组、模型组、阳性对照组(100 mg·kg^-1水飞蓟素)、蒙花苷组(90 mg·kg^-1蒙花苷)及其代谢产物给药组(40 mg·kg^-1刺槐素、40 mg·kg^-1芹菜素、20 mg·kg^-1间苯三酚、20 mg·kg^-1对羟基苯甲酸和20 mg·kg^-1对羟基苯甲醛),每组8只;各给药组每天灌胃给药1次,连续给药7 d。除正常组外,其余各组大鼠末次给药2 h后,腹腔注射600 mg·kg^-1D-GalN造成急性肝损伤模型。用试剂盒测定血清中谷草转氨酶(GOT)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,用试剂盒检测肝组织中谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量。结果 正常组、模型组、阳性对照组、蒙花苷组、刺槐素组、芹菜素组、间苯三...     

天香丹胶囊通过调节G蛋白偶联雌激素受体保护心肌缺血再灌注损伤

目的 探讨天香丹胶囊(TXD)对预处理去卵巢雌性合并心肌缺血再灌注(I/R)大鼠心肌损伤的保护作用与其可能机制。方法 将60只SD雌性大鼠摘去卵巢后随机分为假手术组、模型组、阳性对照组、低、中、高3个剂量实验组，每组10只。阳性对照组灌胃0.8 mg·kg^-1雌二醇溶液，低、中、高剂量实验组分别灌胃给予0.2、0.4和0.8 g·kg^-1天香丹溶液，假手术组、模型组灌胃等量双蒸水。连续处理60 d。末次给药12 h后建立心脏缺血再灌注模型；其中假手术组只穿线不结扎，另取10正常SD雌性大鼠为正常组(不做任何处理)。用酶联免疫吸附试验法检测血清中大鼠心肌肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性、三磷酸肌醇(IP3)的含量；用微量法检测血清中乳酸脱氢酶(LDH);用MTB微板法检测心肌组织中Ca²⁺浓度；用苏木精-伊红染色检测大鼠心肌组织病理变化；用蛋白质印迹法检测心肌组织中G蛋白偶联雌激素受体(GPER)、磷脂酶C(PLC-β)、三磷酸肌醇受体(IP3R)以及肌浆网钙ATP酶(SERCA2)蛋白表达水平。结果 正常组、假手术组、模...     

纳洛酮对内吗啡肽-1减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤作用的影响

目的 探讨纳洛酮对内吗啡肽-1(EM-1)减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤作用的影响。方法 将30只SD雄性大鼠随机分为假手术组(S组)、心肌缺血再灌注组(IR组)、内吗啡肽-1后处理组(EM50组)、内吗啡肽-1+纳洛酮后处理组(EM50+Nal组)、纳洛酮后处理组(Nal组);S组冠状动脉左前降支(LAD)下穿丝线不结扎维持150 min, EM50组在结扎LAD 25 min后经尾静脉输注50μg·kg^-1 EM-1,EM50+Nal组结扎LAD 10 min后静脉推注3 mg·kg^-1纳洛酮,在灌注前5 min将经静脉输注50μg·kg^-1EM-1,Nal组结扎LAD 10 min后,静脉注射3 mg·kg^-1纳洛酮。用酶联免疫吸附试验试剂盒法检测血浆中乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、肌酸激酶(CK-MB)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)以及丙二醛(MDA)的含量。结果 S组、IR组、EM50组、EM50+Nal组和Nal组的...     

麦冬皂苷D调控磷酸酶及张力蛋白同源物诱导激酶1/帕金蛋白通路对脓毒症心肌损伤的保护作用

目的 探讨麦冬皂苷D(OPD)对脓毒症大鼠心肌损伤及磷酸酶及张力蛋白同源物诱导激酶1/帕金蛋白(PINK1/parkin)通路的影响。方法 用盲肠结扎穿孔法构建脓毒症大鼠模型,并将造模成功的大鼠随机分为模型组、实验组、对照组和联合组,每组8只。在模型制备成功后12 h,实验组给予腹腔注射40 mg·kg^-1 OPD,对照组给予腹腔注射20 mg·kg^-1 3-MA,联合组给予腹腔注射40 mg·kg^-1 OPD和20 mg·kg^-1 3-MA;假手术组和模型组均给予腹腔注射等量0.9%NaCl。5组大鼠每12 h重复给药1次,连续给药6 d。用酶联免疫吸附试验法检测血清肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)水平,用蛋白质印迹法检测大鼠心肌组织中PINK1和parkin蛋白的表达水平。结果 实验组、对照组、联合组、模型组和假手术组的血清cTnⅠ水平分别为(0.98±0.20)、(3.44±0.69)、(1.64±0.38)、(2.39±0.45)和(0.37±0.07)mg·L^-1,PINK1蛋...     

雷公藤-甘草配伍干预肾病综合征大鼠AVPR2/AQP2的表达

目的 探讨阿霉素诱导的肾病综合征大鼠AVPR2和AQP2的表达以及雷公藤-甘草配伍的干预机制。方法 选取成年健康雄性SD大鼠,随机选取10只作为空白组,其余大鼠均接受尾静脉注射给予6.5 mg·kg^-1的阿霉素诱导复制大鼠肾病综合征模型。并采用随机数字法将造模成功的大鼠分为4组(n=10):模型组(n=10)、阳性对照组(雷公藤多苷片80 mg·kg^-1·d^-1,n=10)、雷公藤组(雷公藤提取物240 mg·kg^-1·d^-1,n=10)及雷公藤-甘草组(雷公藤提取物240 mg·kg^-1·d^-1+甘草提取物80 mg·kg^-1·d^-1,n=10)。测定大鼠24 h尿蛋白含量、血清白蛋白、尿素、肌酐水平、肾脏中AVPR2和AQP2 mRNA表达水平。结果 大鼠经阿霉素造模后表现出大量蛋白尿、低蛋白血、高度水肿症候。相比于模型组,雷公藤及配伍给药组大鼠精神状态较好,体质量增加明显。与模型组相比...     

к阿片受体可通过抑制β肾上腺素受体进而调节心肌细胞Cx43发挥抗缺血/再灌注性心律失常

目的观察κ阿片受体选择性激动剂(U50488H)及β肾上腺素受体激动剂(异丙肾上腺素,ISO)对大鼠心脏缺血/再灌注(ischemia and reperfusion,I/R)引起的心律失常的影响,初步探讨U50488H对心肌细胞缝隙连接蛋白Cx43的调节机制。方法实验大鼠随机分为5组即对照组、I/R组、ISO+I/R组、U50488H+ISO+I/R组、Nor-BNI(κ阿片受体阻断剂)+U50488H+ISO+I/R组。观察每组心律失常的发生情况并计算心律失常评分,RT-PCR检测Cx43 mRNA表达及用免疫组化方法显示大鼠心肌Cx43的分布特征,半定量统计分析。结果①心律失常评分:ISO+I/R组高于I/R组(P<0.05),在ISO前给予U50488H则可以降低ISO引起的心律失常(P<0.05),其效应可被Nor-BNI阻断。②Cx43 mRNA水平:ISO+I/R组比I/R组略增高,在ISO前给予U50488H则可使基因表达水平降低(P<0.05),其效应可被Nor-BNI阻断。③Cx43蛋白表达:ISO+I/R组Total-Cx43高于I/R组(P<0.05),P-Cx43降低但与I/R组比较差异无统计学意义,给予U50488H后,可提高总Cx43和P-Cx43表达量(P<0.05),其效应可被Nor-BNI阻断。结论κ阿片受体激动剂可通过抑制β肾上腺素受体对Cx43调节从而发挥抗缺血/再灌注性心律失常的作用。     

五味子乙素对心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的 研究五味子乙素对心肌梗死大鼠的保护作用及其作用机制。方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组(10 mg·kg^-1卡托普利)、低剂量实验组(30 mg·kg^-1五味子乙素)、高剂量实验组(60 mg·kg^-1五味子乙素),每组10只,连续给药14 d后检测心功能相关指标。以试剂盒检测血清心肌损伤标志物及血清炎症因子水平,以原位末端标记(TUNEL)法和蛋白质印迹法分别检测大鼠心肌细胞凋亡和相关蛋白的表达水平。结果 假手术组、模型组、阳性对照组、低剂量实验组、高剂量实验组大鼠的左心室射血分数(LVEF)水平分别为(78.42±4.32)%、(41.65±2.94)%、(59.76±5.35)%、(49.13±3.92)%和(67.04±3.00)%,肌酸激脢同工酶(CK-MB)含量分别为(33.95±2.68)、(100.51±3.92)、(48.27±3.70)、(70.34±2.93)和(49.13±3.67)U·L^-1,白细胞介素-1β(IL-1β)水平分别为(1.02±0.1...     

红景天苷调控AMPK/Drp1信号通路对急性脑出血大鼠的神经功能的保护机制

目的 研究红景天苷(salidroside, Sal)对急性脑出血(intracerebral hemorrhage, ICH)大鼠的神经功能保护作用及其机制。方法 根据Rosenberg法改良造大鼠ICH神经损伤模型。按照随机性原则将SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、Sal低、中、高(50、100、200 mg·kg^-1)、AMPK激动剂(AICAR)组、阳性药(醒脑静)组,每组各10只。于造模结束1 h后腹腔注射各剂量Sal,连续1周,AMPK激动剂组腹腔注射AICAR(200 mg·kg^-1),阳性药组腹腔注射醒脑静注射液(1.8mL·kg^-1),假手术组和模型组腹腔注射等量生理盐水。采用神经评分、脑含水量等检测各组大鼠的神经功能损伤;MitoSOX Red试剂盒检测各组大鼠脑组织ROS水平;ELISA测定血清炎性因子IL-6、IL-1β及TNF-α水平;TUNEL染色检测各组大鼠神经细胞凋亡情况;Western blot检测相关蛋白Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、...     

苦杏仁苷对糖尿病肾病大鼠肾小管上皮细胞损伤的影响

目的 研究苦杏仁苷对糖尿病肾病(DKD)大鼠肾小管上皮细胞损伤及腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物西罗莫司靶蛋白(AMPK/mTOR)通路的影响。方法 将SD大鼠分为空白组、模型组、苦杏仁苷低剂量组(3 mg·kg^-1)、苦杏仁苷高剂量组(10 mg·kg^-1)、Compound C组(2.5 mg·kg^-1 AMPK抑制药Compound C)、苦杏仁苷高剂量+Compound C组(10 mg·kg^-1苦杏仁苷+2.5 mg·kg^-1 Compound C),每组10只。除空白组外,其余各组大鼠用连续喂养高脂高糖饲料+腹腔注射60 mg·kg^-1 1%链脲佐菌素(STZ)方法进行DKD造模,造模成功后第2天给予相应药物处理,每天1次,持续给予8周,空白组、模型组均给予等体积0.9%NaCl。用二喹啉甲酸(BCA)法检测大鼠24 h尿蛋白含量,用血糖仪检测大鼠空腹血糖,用全自动生化分析仪检测大鼠血肌酸酐和血尿素氮水平,用原位末端标记法(TUNEL)染色检测大鼠...     

芹菜素对大鼠肾损伤的保护作用及机制研究

目的:研究芹菜素(apigenin, APG)对阿霉素诱导大鼠肾损伤的保护作用并探索其机制。方法:将60只实验用SD大鼠尾静脉注射阿霉素建立大鼠阿霉素肾病(adriamycin nephropathy, AN)模型,另取10只大鼠给予等体积溶媒作为空白对照组。将AN大鼠随机分为模型组、阳性对照地塞米松组(DEX组,剂量0.1 mg·kg^-1·d^-1)、APG低剂量组(APL组,剂量50 mg·kg^-1·d^-1)、APG中剂量组(APM组,剂量100 mg·kg^-1·d^-1)、APG高剂量组(APH组,剂量200 mg·kg^-1·d^-1),每组10只。DEX及APG给药组均每日灌胃治疗,正常对照组和模型组同步灌胃APG溶剂,即0.5%CMC-Na溶液,疗程60 d。测量24 h尿蛋白总量(PRO)及血清肾功能、肝功能等监测指标;HE染色法对肾脏组织进行病理学检查;免疫组化法标记肾脏组织的CD68蛋白,检测巨噬细胞在...     

磷酸肌酸钠对阿霉素所致心肌损伤大鼠急性期心肌组织连接蛋白43表达的影响

目的探讨磷酸肌酸钠对阿霉素所致心肌炎大鼠急性期心肌组织连接蛋白43(Cx43)表达的影响,探讨磷酸肌酸钠对阿霉素所致心肌炎并发心律失常发挥作用的机制。方法 60只雄性SD大鼠分为磷酸肌酸钠干预组,阿霉素组和正常对照组,观察大鼠的一般情况,第14天无痛苦处死全部大鼠并留取心脏。免疫组织化学法检测Cx43蛋白水平表达,并进行定量分析。结果①阿霉素组大鼠心室肌组织炎症病灶中变性、坏死周围心肌细胞Cx43表达明显减弱,甚至阴性,分布不规则,Cx43蛋白表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。②磷酸肌酸钠组Cx43蛋白表达明显高于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论阿霉素所致心肌损伤大鼠急性期心肌组织Cx43蛋白表达下降。磷酸肌酸钠能明显提高CVB心肌炎大鼠急性期心肌组织Cx43蛋白表达。     

PKC及缝隙连接蛋白Cx43改变在吗啡和舒芬太尼预处理缺氧复氧损伤心肌中的作用

目的：探讨蛋白激酶C（PKC）信号通路及心肌缝隙连接蛋白Cx43改变在阿片药物预处理中的作用。方法：原代心肌细胞分离培养。将培养5 d的心肌细胞分成8组。正常对照组（C组）不给予任何处理,建立培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型（I/R组）,吗啡组（MF组）加入吗啡至终浓度0.3 μmol·L^-1,舒芬太尼组（SF组）加入舒芬太尼至终浓度0.000 3 μmol·L^-1,PKC激动剂PMA+吗啡组（PMA+MF组）加入PMA至终浓度0.02 μmol·L^-1,再进行吗啡预处理;PKC抑制剂Rottlerin+吗啡组（ROT+MF组）加入Rottlerin至终浓度5 μmol·L^-1,再进行吗啡预处理;PKC激动剂PMA+舒芬太尼组（PMA+SF组）加入PMA至终浓度0.02 μmol·L^-1,再进行舒芬太尼预处理;PKC抑制剂Rottlerin+舒芬太尼组（ROT+SF组）加入Rottlerin至终浓度5 μmol·L^-1,再进行舒芬太尼预处理。各组做上述相应处理后取材检测细胞存活率。免疫荧光共聚焦技术检测缝隙连接蛋白Connexin 43（Cx43）的平均光密度（AOD）,用Western-blot检测细胞Cx43总蛋白及其磷酸化水平（P-Cx43）的表达量。结果：与C组比较,其余各组心肌细胞存活率、Cx43 AOD值、心肌细胞Cx43总蛋白表达及P-Cx43表达降低（P<0.05）;与I/R组比较,MF组、SF组、ROT+MF组、ROT+SF组、PMA+MF组、PMA+SF组心肌细胞存活率、Cx43 AOD值、Cx43总蛋白和P-Cx43表达增高（P<0.05）;与MF组比较,ROT+MF组心肌细胞存活率、Cx43 AOD值、Cx43总蛋白及P-Cx43表达降低（P<0.05）,SF组心肌细胞存活率、Cx43 AOD值和Cx43总蛋白降低（P<0.05）,而P-Cx43表达增高（P<0.05）,PMA+MF组心肌细胞存活率、Cx43 AOD值、Cx43总蛋白和P-Cx43表达均增高（P<0.05）;ROT+SF组较SF组心肌细胞Cx43 AOD值、Cx43总蛋白和P-Cx43表达低（P<0.05）,而PMA+SF组较SF组心肌细胞存活率、心肌细胞Cx43 AOD值、Cx43总蛋白和P-Cx43表达高（P<0.05）。结论：吗啡和舒芬太尼预处理可减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤,且吗啡对心肌细胞的保护作用较舒芬太尼强,这种心肌细胞保护作用可能与PKC信号通路的激活有关。