miR-27a-3p/RCBTB1/β-catenin轴与胃癌临床特征的关联性及益气化瘀解毒方抑制上皮间质转化的机制

目的：明确miR-27a-3p/RCBTB1/β-catenin与胃癌临床特征的关系,探讨益气化瘀解毒方抑制胃癌上皮间质转化（EMT）的作用机制。方法：生物信息学分析miR-27a-3p、RCBTB1在胃癌中的表达与临床意义;高通量测序检测小鼠肝转移瘤组织内mRNA表达差异;质粒转染构建沉默或过表达miR-27a-3p、RCBTB1的稳定细胞株;Transwell、划痕实验检测胃癌细胞侵袭迁移能力的改变;脾脏注射MFC细胞建立小鼠胃癌肝转移模型并以益气化瘀解毒方干预,检测肝转移瘤数量,苏木精-伊红染色（HE）染色法检测胃癌细胞肝脏浸润情况;RT-PCR、Western Blot检测miR-27a-3p、RCBTB1、β-catenin、E-cadherin、Snail的表达。结果：miR-27a-3p在胃癌组织中较正常组织升高（P<0.01）,且Ⅳ期胃癌组织中miR-27a-3p表达较Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期增高（P<0.05）。与对照组比较,miR-27a-3p过表达组胃癌细胞侵袭迁移能力增强,miR-27a-3p沉默组细胞侵袭性减弱（P<0.01）。高通量测序显示,益气化瘀解...     

黄芩素下调微小RNA-130a抑制肝癌细胞侵袭机制研究

目的:探讨黄芩素通过下调微小RNA-130a(miR-130a)抑制肝癌细胞侵袭的机制。方法:以肝癌细胞HepG2为研究对象,应用慢病毒转染法上调HepG2细胞miR-130a表达并设为miR-130a组,转染空载慢病毒作为空载对照组,以未转染细胞作为空白组。采用实时荧光定量PCR检测miR-130a表达水平; 黄芩素处理miR-130a组细胞; 侵袭小室实验考察细胞的侵袭能力; 蛋白印迹实验检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、钙蛋白酶抑制蛋白(Calpastatin)表达水平。结果:与空载对照组相比,miR-130a组细胞miR-130a表达明显上调,细胞侵袭率升高,MMP-9蛋白表达上调,Calpastatin蛋白表达下降,差异有统计学意义(均P<0.05)。与miR-130a组相比,黄芩素加miR-130a组的miR-130a、MMP-9蛋白表达均降低,Calpastatin蛋白表达升高,细胞侵袭率显著降低,差异有统计学意义(均P<0.01)。结论:miR-130a通过CANP-MMP-9信号通路促进HepG2细胞侵袭,黄芩素能抑制miR-130a诱导的CANP-MMP-9通路激活,抑制HepG2细胞侵袭。     

款冬花多糖通过调控miR-99a/PI3K/Akt通路影响食管癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的探索款冬花多糖通过miR-99a/PI3K/Akt通路影响食管癌细胞增殖、迁移和侵袭。方法 MTT检测款冬花多糖(10、20、40、80、160 mg/L)对食管癌细胞Eca109细胞存活的影响;Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭;Western blot检测MMP2、MMP9、Cyclin D1、p-PI3K和p-Akt蛋白表达;RT-PCR检测miR-99a表达。在Eca109细胞中转染miR-99a、anti-miR-99a并使用80 mg/L款冬花多糖进行处理,观察其在细胞增殖、迁移和侵袭中的作用。结果款冬花多糖抑制Eca109细胞增殖、迁移、侵袭及MMP2、MMP9、CyclinD1、p-PI3K、p-AKT蛋白表达(P<0.05),促进miR-99a表达(P<0.05)。过表达miR-99a抑制Eca109细胞中Cyclin D1、MMP2、MMP9蛋白表达,减少细胞存活率、迁移细胞数和侵袭细胞数(P<0.05)。低表达miR-99a部分逆转款冬花多糖对细胞增殖、迁移、侵袭、CyclinD1、MMP2、MMP9、p-PI3K和p-AKT蛋白表达...     

醉茄素A通过circOSBPL10/miR-128-3p通路调控乳腺癌MDA-MB-231细胞糖酵解、增殖、迁移及侵袭的机制研究

目的 探讨醉茄素A对乳腺癌MDA-MB-231细胞糖酵解、增殖、迁移、侵袭的影响及其对环状RNAOSBPL10（circOSBPL10）/微小RNA-128-3p（miR-128-3p）通路的调控作用。方法 采用不同浓度（10、20、40 μg/mL）的醉茄素A处理乳腺癌细胞MDA-MB-231（醉茄素A低剂量组、醉茄素A中剂量组、醉茄素A高剂量组）;si-NC、si-circOSBPL10分别转染入MDA-MB-231细胞（si-NC组、si-circOSBPL10组）;pcDNA、pcDNA-circOSBPL10分别转染入MDA-MB-231细胞后加入40 μg/mL的醉茄素A处理细胞（醉茄素A+pcDNA组、醉茄素A+pcDNA-circOSBPL10组）;根据试剂盒检测葡萄糖消耗与乳酸产生量,以及丙酮酸激酶、己糖激酶的水平;采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖抑制率;采用Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力;采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测circOSBPL10与miR-128-3p的表达量;双荧光素酶报告基因实验检测circOSBPL10与miR-128-3p的靶向关系;Western blot法检测增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67（Ki-67）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白表达量。结果 与对照组比较,醉茄素A低剂量组、醉茄素A中剂量组、醉茄素A高剂量组葡萄糖消耗与乳酸生成量以及丙酮酸激酶、己糖激酶的水平均明显降低（P＜0.05）,迁移及侵袭细胞数减少（P＜0.05）,细胞增殖抑制率升高（P＜0.05）,Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白水平降低（P＜0.05）,circOSBPL10的表达水平降低（P＜0.05）,miR-128-3p的表达水平升高（P＜0.05）;双荧光素酶报告基因实验证实circOSBPL10可靶向结合miR-128-3p;与si-NC组比较,si-circOSBPL10组葡萄糖消耗与乳酸生成量以及丙酮酸激酶、己糖激酶的水平均明显降低（P＜0.05）,细胞增殖抑制率升高（P＜0.05）,迁移及侵袭细胞数减少（P＜0.05）,Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白水平降低（P＜0.05）;与醉茄素A+pcDNA组比较,醉茄素A+pcDNA-circOSBPL10组葡萄糖消耗与乳酸生成量以及丙酮酸激酶、己糖激酶的水平均明显升高（P＜0.05）,细胞增殖抑制率降低（P＜0.05）,迁移及侵袭细胞数增多（P＜0.05）,Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白水平升高（P＜0.05）。结论 醉茄素A可通过调控circOSBPL10/miR-128-3p通路而抑制乳腺癌细胞糖酵解、增殖、迁移及侵袭。     

miR-7介导加味四君子汤含药血清抑制B16恶性黑色素瘤细胞侵袭和相关蛋白MMP2和MMP9表达的影响

目的:研究miR-7是否介导加味四君子汤含药血清对恶性黑色素瘤细胞B16迁移侵袭及其相关机制的研究。方法:37℃、5%CO2的恒温培养箱中培养B16恶性黑色素瘤细胞,收集对数期细胞,等效剂量为9.22 g/kg的加味四君子汤终浓度10%的小鼠含药血清,作用24 h。实验分为空白对照组、血清对照组、转染阴性对照组、miR-7模拟物组和miR-7抑制物组,每组含5个样本数,应用Real-time PCR法检测miR-7模拟物和miR-7抑制物的转染效率、应用Transwell实验检测B16细胞侵袭能力,应用Realtime PCR和Western Blot方法检测基质金属蛋白酶(metalloprotease,MMP)2和9基因的mRNA和蛋白的表达。结果:miR-7模拟物和miR-7抑制物成功转染到B16恶性黑色素瘤细胞中,与空白对照组、血清对照组和阴性对照组相比,miR-7模拟物组(Relative Conc值为8.47±0.28)和miR-7抑制物组(Relative Conc值为0.19±0.01)分别显著升高和显著降低miR-7表达;与空白对照组和血清对照组及阴性对照组相比,miR-7模拟物组的细胞的侵袭能力显著降低,miR-7抑制物组的细胞的迁移侵袭能力显著升高;与空白对照组和血清对照组及阴性对照组相比,miR-7模拟物组MMP2和MMP9mRNA和蛋白表达水平显著降低,miR-7抑制物组MMP2和MMP9mRNA和蛋白表达水平显著升高。结论:miR-7介导加味四君子汤含药血清抑制B16恶性黑色素瘤细胞迁移侵袭过程,并且能够显著降低与B16恶性黑色素瘤细胞侵袭相关的蛋白MMP2和MMP9表达,提示miR-7可能是加味四君子汤抗恶性黑色素瘤的重要分子之一。     

丹参酮ⅡA通过调控miR-27a抑制肝星状细胞活化的机制研究

目的 探讨丹参酮ⅡA(TⅡA)通过调控微小RNA-27a(miR-27a)抑制人肝星状细胞（LX2细胞）活化的机制。方法使用10μg/L转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导LX2细胞活化;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测miR-27a的表达;瞬时转染miR-27a的模拟物和抑制剂增强或抑制miR-27a的表达,细胞计数（CCK-8）法检测细胞增殖情况,Western blot法检测胶原蛋白Iα2(COL1A2)、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、磷酸化糖原合成酶激酶3β(P-GSK3β)、分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)的表达;用不同浓度的TⅡA干预LX2细胞,CCK-8法检测细胞增殖情况,RT-qPCR检测miR-27a的表达,Western blot法检测COL1A2、α-SMA、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、P-GSK3β、SFRP1和细胞周期蛋白D1(CCND1)的表达。结果 miR-27a在TGF-β1干预的LX2细胞中表达增加（P<0.05）。LX2细胞中miR-27a被敲低48 h和72 h后,细胞增殖显著被抑制（P<0.05）,抑...     

款冬花多糖调控miR-889-3p/TLR4对IL-6诱导的乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

[目的] 探讨款冬花多糖对白细胞介素-6（IL-6）诱导的乳腺癌细胞恶性行为作用机制。[方法] IL-6诱导人乳腺癌细胞MCF-7后,不同浓度的款冬花多糖处理。转染miR-NC、miR-889-3p mimics的MCF-7细胞经IL-6处理;转染NC-inhibitor、miR-889-3p-inhibitors的MCF-7细胞经款冬花多糖与IL-6处理;噻唑蓝（MTT）、平板克隆形成以及Transwell^TM实验分析细胞增殖、迁移及侵袭;实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-889-3p、Toll 样受体 4（TLR4）的表达量;蛋白免疫印迹（Western blot）法检测基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、TLR4蛋白表达量;双荧光素酶报告实验验证miR-889-3p与TLR4的靶向关系。[结果] 款冬花多糖可降低IL-6诱导的MCF-7细胞增殖（P＜0.05）、迁移及侵袭能力（P＜0.05）,而提高miR-889-3p的表达（P＜0.05）,呈剂量依赖性;TLR4是miR-889-3p的靶基因,miR-889-3p可靶向调控TLR4的表达;转染miR-889-3p mimics可降低IL-6诱导的MCF-7细胞增殖、迁移及侵袭（P＜0.05）;转染miR-889-3p-inhibitors可恢复款冬花多糖对IL-6诱导的MCF-7细胞增殖、迁移及侵袭。[结论] 款冬花多糖可通过调节miR-889-3p/TLR4表达而抑制IL-6诱导的乳腺癌细胞恶性行为。     

桂皮醛通过PI3K/Akt信号通路抑制TGF-β1诱导的结肠癌细胞LoVo上皮间质转化

目的:探讨桂皮醛对转化生长因子-β_1(Transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)诱导的结肠癌LoVo细胞增殖、侵袭及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及其与磷酯酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的关系。方法:通过TGF-β_1诱导结肠癌细胞株LoVo发生上皮间质转化,使用桂皮醛(0,20,40,80 mg·L-1)干预由TGF-β_1诱导的LoVo细胞的增殖,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测桂皮醛对TGF-β_1诱导的细胞增殖能力的影响。转移小室(transwell)侵袭实验检测细胞侵袭能力变化。蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测E-钙黏蛋白(E-cadherin),N-钙黏蛋白(N-cadherin),波形蛋白(Vimentin)及PI3K/Akt信号通路关键蛋白的表达。采用PI3K/Akt抑制剂LY290004来验证桂皮醛通过PI3K/Akt信号通路抑制TGF-β_1诱导的EMT。结果:与空白组比较,桂皮醛能有效抑制TGF-β_1诱导的增殖及侵袭能力(P0.01),显著增加E-cadherin的表达,抑制N-cadherin,Vimentin及TGF-β_1刺激的p-Akt和p85的表达(P0.01);同时通过抑制PI3K/Akt信号通路的激活逆转TGF-β_1诱导的EMT(P0.01)。结论:桂皮醛可通过调节PI3K/Akt信号通路抑制TGF-β_1诱导的结肠癌细胞LoVo的上皮间质转化,降低其侵袭能力。     

山慈菇-蜂房药对抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞体外侵袭转移的机理研究

目的 研究山慈菇-蜂房药对对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响及其作用机制。方法 噻唑蓝（MTT）法检测山慈菇-蜂房药对大鼠含药 血清对细胞活力的影响,Transwell小室法测定其侵袭力,实时荧光定量PCR（RT-PCR）法检测细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）基 因的表达。结果 山慈菇-蜂房药对组MDA-MB-231细胞体外生长杀伤率为35.86 %;能明显抑制MDA-MB-231 细胞的侵袭能力（P＜ 0.01）,其抑制率为34.8 %;MMP-9 mRNA明 显降低,TIMP-1 mRNA明显升高,MMP-9 mRNA/ TIMP-1 mRNA值显著降低（P＜ 0.05,P＜ 0.01）。结论 山慈菇-蜂房药对能够抑制MDA-MB-231 细胞侵袭能力,其机制可能与 下调MMP-9mRNA表达,上调TIMP-1mRNA的表达,降低MMP-9 mRNA/ TIMP-1 mRNA比值有关。     

上调miR-590-3p对胰腺癌细胞侵袭转移的作用及影响机制

目的 观察miR-590-3p基因表达对人胰腺癌Capan-2细胞侵袭转移能力的影响。方法 人胰腺癌Capan-2细胞分为两组：阴性对照组（NC组）及转染miR-590-3p mimics组（miR-590-3p mimics组）。采用qRT-PCR法检测正常胰腺导管上皮细胞hTERT-HPNE以及胰腺癌Capan-2细胞中miR-590-3p的表达,通过流式细胞术检测miR-590-3p对Capan-2细胞凋亡的影响,通过MTT实验检测miR-590-3p对Capan-2细胞增殖的影响,通过划痕实验检测细胞迁移能力的变化,通过Transwell实验检测细胞侵袭能力的变化,采用Western blot法检测AKT/mTOR通路相关蛋白表达变化。结果 胰腺癌Capan-2细胞较正常胰腺导管上皮细胞中miR-590-3p表达水平显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）;与NC组相比,miR-590-3p mimics组miR-590-3p mRNA表达水平显著升高,差异有统计学意义（P<0.05）;流式细胞术实验结果显示,与NC组相比,miR-590-3p mimics组细胞...     

红景天对乳腺癌治疗的研究

目的：研究红景天提取物对乳腺癌MDA-MB-435细胞株增殖及血管新生相关因子的影响。方法：人乳腺癌MDA-MB-435细胞培养后,加入红景天提取物10mg／ml、20mg／ml,设置空白对照组。药物治疗24小时后,使用流式细胞仪进行分选、MTT法测定细胞增殖能力,以及VEGF表达的影响。结果：红景天处理后,MDA-MB-435细胞株的形态学特征发生显著变化,且随着药物浓度增加而愈加明显;阻滞MDA-MB-435细胞增殖周期的作用,主要阻滞于S期,该作用随着药物浓度增加亦增强;显著抑制MDA-MB-435细胞的增殖活性：处理24小时,各剂量组肿瘤细胞表达VEGF mRNA无明显差异,44小时后,给药组明显地抑制MDA-MB-435细胞表达VEGF的作用。结论：红景天提取物在体外可阻滞乳腺癌MDA-MB-435细胞增殖周期、降低乳腺癌MDA-MB-435细胞的增殖活性、减少促血管新生因子VEGF表达。     

异长春花碱抑制人乳腺癌细胞转移侵袭的作用及其机制

目的 探讨异长春花碱抑制人乳腺癌细胞转移侵袭的作用及其机制.方法 人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-435细胞分别用异长春花碱1、10 μmol/L处理后,MTS法检测细胞黏附能力,Transwell法检测细胞侵袭能力,ELISA法检测细胞转移生长因子-β (TGF-β)分泌的变化,明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9活性,Western blotting法检测肿瘤细胞E-钙黏素、N-钙黏素、MMP-2、MMP-9、p-JNK及p-Akt蛋白的表达,RT-PCR法检测肿瘤细胞E-钙黏素、N-钙黏素及MMP-2、MMP-9基因的表达,双荧光素酶报告基因实验考察AP-1和核因子-κB (NF-κB)活性的变化.结果 异长春花碱1、10 μmol/L给药后,细胞黏附能力:MCF-7细胞分别下降34.8％、66.8％,MDA-MB-435细胞分别下降42.6％、72.3％;侵袭能力:MCF-7细胞分别下降44.4％、72.2％,MDA-MB-435细胞分别下降47.7％、86.4％; TGF-β分泌:MCF-7细胞分别下降28.2％、52.1％,MDA-MB-435细胞分别下降39.0％、55.1％;E-钙黏素基因表达:MCF-7细胞分别上调86.5％、181.6％,MDA-MB-435细胞分别上调116.6％、160.7％; N-钙黏素基因表达:MCF-7细胞分别下降33.7％、74.1％,MDA-MB-435细胞分别下降57.6％、76.9％; MMP-2基因表达:MCF-7细胞分别下降71.6％、88.4％,MDA-MB-435细胞分别下降57.4％、69.4％; MMP-9基因表达:MCF-7细胞分别下降15.0％、84.0％,MDA-MB-435细胞分别下调22.1％、73.0％;E-钙黏素蛋白表达显著上调,N-钙黏素蛋白表达明显下调,MMP-2和MMP-9及p-JNK、p-Akt蛋白表达显著下降;AP-1活性:MCF-7细胞分别下降27.7％、68.2％,MDA-MB-435细胞分别下降34.8％、71.4％; NF-κB活性:MCF-7细胞分别下降18.4％、44.8％,MDA-MB-435细胞分别下降24.4％、51.9％.结论 异长春花碱可抑制人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-435细胞体外侵袭能力,其机制可能与下调肿瘤转移相关信号通路及上皮间质转化表达有关.     

miR-92a对人胃癌细胞株生物特性的影响及机制研究

目的探讨miR-92a对人胃癌细胞株生物特性的影响及可能的分子机制。方法在人胃癌细胞(SGC-7901)中瞬时转染miR-92a inhibitor,采用CKK-8法检测细胞株增殖情况,采用TUNEL方法检测细胞凋亡情况,采用Transwell迁移和侵袭实验观察细胞转移情况,并采用Western blot方法检测Bcl-2、Survivin蛋白表达情况。结果人胃癌细胞株在瞬时转染miR-92a inhibitor后,细胞增殖能力明显降低(P<0.05),凋亡明显增加(P<0.05),迁移和侵袭的细胞数量明显较少(P<0.05),Western blot检测结果显示Bcl-2、Survivin蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论 miR-92a可以促进胃癌细胞增殖、迁移和侵袭,抑制细胞凋亡,其可能通过调控Bcl-2、Survivin来促进胃癌的发生。     

桂皮醛对miRNA-146a干扰的骨关节炎滑膜炎性反应影响的实验研究

目的:研究miRNA-146a基因及桂皮醛对miRNA-146a干扰的滑膜成纤维细胞释放TLR4、NO、MMP-13的影响,探寻其在OA滑膜炎性反应分子学机制中的作用。方法:采用脂质体转染法将miR-146a基因模拟及抑制性质粒载体对经LPS诱导后的OA滑膜炎性反应效应细胞滑膜成纤维细胞进行基因导入,并用桂皮醛对干扰后的细胞进行干预,检测不同组间TLR4、NO及MMP-13表达的差异。结果:miRNA-146a相关质粒转染后的TLR4、NO、MMP-13浓度的变化趋势大致相同:与对照组比较,三者的inhibitor组均升高,mimics组则均呈下降趋势(P0.05)。桂皮醛单独作用于miRNA-146a干扰后的细胞时,与对照组比较,TLR4、NO、MMP-13浓度均有明显下降(P0.05),而当mimics和CA联合干预时,三者释放量显著下降(P0.05)。结论:miRNA-146a及桂皮醛均对骨关节滑膜炎性反应产生影响,当mimics和桂皮醛联合作用时,抑制炎性反应效果最好。为进一步阐明骨关节炎分子机制和药物靶点的识别与开发提供实验依据。     

miR-20a通过ATG16L1影响细胞自噬并参与调节雷公藤甲素肝毒性

目的 观察雷公藤甲素对miR-20a及自噬相关16样蛋白L1（autophagy related 16 like protein1,ATG16L1）表达的影响,探讨miR-20a对雷公藤甲素所致肝细胞毒性的调控作用。方法 利用雷公藤甲素处理人正常肝细胞株HL7702和C57BL/6J小鼠,通过qRT-PCR和Western blotting检测miR-20a、ATG16L1及自噬标记物微管相关蛋白1轻链3II（microtubule-associated protein 1 light 3II,LC3II）的表达。利用雷公藤甲素和miR-20a模拟物或抑制物共同处理HL7702细胞,通过qRT-PCR和Western blotting检测ATG16L1及LC3II的表达;CCK-8法检测细胞存活率;试剂盒检测乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）释放量;ELISA检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cystein-asparate protease-3,Caspase-3）和Caspase-9的活性。结果 雷公藤甲素显著下调人正常肝细胞或小鼠肝组织中miR-20a表达（P＜0.05）,上调ATG16L1和LC3II的表达（P＜0.05）。miR-20a模拟物可抑制雷公藤甲素引起的ATG16L1、LC3II表达升高（P＜0.05）,进一步降低细胞存活率（P＜0.05）,提高LDH释放量（P＜0.05）,上调Caspase-3和Caspase-9活性（P＜0.05）,而miR-20a抑制物具有相反作用。结论 miR-20a通过ATG16L1影响自噬过程,参与调节雷公藤甲素肝细胞毒性。     

没食子酸通过P13K/AKT 信号通路影响胃癌MGC-803细胞侵袭性

目的 探讨没食子酸(gallic acid,GA)对胃癌MGC-803细胞侵袭能力的影响及机制。方法 体外培养胃癌MGC-803细胞,噻唑蓝（MTT）法观察细胞的生存率;transwell 小室法检测GA 对MGC-803细胞侵袭能力的影响;Western-blotting 技术检测没食子酸对P13K/AKT 通路相关因子( PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT) ,细胞基质金属蛋白酶( MMP2、MMP9) 蛋白表达的改变。结果 MTT检测6.25～50μmol·L-1 GA可抑制MGC-803的生长,并呈剂量依赖性（P＜0.05）;transwell 小室法显示,与对照组比较,经GA处理后MGC-803细胞侵袭能力明显降低（P＜0.05）;Western-blotting结果显示,没食子酸处理后的MGC-803细胞PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、MMP2、MMP9蛋白表达下降,同时加入P13K 抑制剂后,显示可抑制P13K/AKT 通路活化,抑制MMP2 和MMP9 的表达;结论 没食子酸可有效抑制胃癌MGC-803细胞侵袭能力,其机制可能是通过调控P13K/AKT 信号通路,抑制MMP2 和MMP9 的表达有关。     

雪松醇调节miR-503-5p/TCF3轴对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

[目的]探讨雪松醇调节miR-503-5p/T细胞因子3(TCF3)轴对乳腺癌（BC）细胞增殖、迁移和侵袭的影响。[方法]实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测BC组织和细胞中miR-503-5p及TCF3蛋白表达水平;以不同浓度的雪松醇（0、14、28、56、112、225μmol/L）干预MCF7细胞,噻唑蓝比色法（MTT）法检测细胞增殖情况;将MCF7细胞分为：control组（正常培养）、雪松醇组（112μmol/L）、inhibitor-NC（转染inhibitor-NC）、miR-503-5p inhibitor组（转染miR-503-5p inhibitor）。qRT-PCR检测细胞中miR-503-5p的表达水平;MTT法与胸腺嘧啶核苷类似物（Edu）染色和Transwell小室分别检测细胞增殖、迁移和侵袭;蛋白免疫印迹（Western blot）方法检测增殖细胞核抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、TCF3蛋白的表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-503-5p和TCF3的靶向关系;小鼠体内肿...     

麦门冬汤加减联合顺铂对A549细胞化疗增敏的作用机制

目的:通过体外实验观察麦门冬汤加减(modified Maimendong Tang)联合顺铂(cisplatin)对人肺腺癌A549细胞增殖,凋亡及侵袭转移能力及对半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的蛋白表达量的影响,探讨麦门冬汤加减方化疗增敏的作用并研究其相关机制。方法:分别用麦门冬汤加减(15 g·L-1),顺铂(9 mg·L-1),联合药物干预肺腺癌A549细胞,实验分为空白组、麦门冬汤加减组、顺铂组、麦门冬汤加减+顺铂组。利用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同质量浓度(0,5,10,15,20,25 g·L-1)麦门冬汤加减和不同质量浓度(0,3,6,9,12,15 mg·L-1)顺铂干预A549细胞24,48,72 h后的增殖能力,检测各组A549细胞的增殖能力;流式细胞术分析各组的凋亡程度及周期的变化;划痕实验和transwell小室实验检测各组的侵袭转移能力;蛋白免疫印迹法检测各组Caspase-3,EGFR蛋白表达的变化情况。结果:与空白组比较,麦门冬汤加减,顺铂干预A549细胞后呈浓度依赖性、时间依赖性抑制细胞的增殖(P0.05);各药物组均能抑制A549细胞增殖能力,减弱划痕愈合能力,减少穿过transwell小室的细胞,促进细胞凋亡,下调Caspase-3,EGFR蛋白表达(P0.05)。与单独给药组比较,麦门冬汤加减与顺铂联合应用后更能明显抑制肺腺癌A549细胞增殖能力和更能诱导A549细胞的凋亡,G0/G1期的细胞增多更明显,S期的细胞明显减少(P0.05);联合用药后,细胞划痕愈合能力明显减弱,穿过transwell小室的细胞明显减少,Caspase-3,EGFR的蛋白表达量下降更明显(P0.05)。结论:麦门冬汤加减与顺铂合用后抑制肺癌细胞A549增殖及侵袭转移能力,诱导细胞凋亡,两者存在协同增敏作用,其相关机制可能与下调Caspase-3,EGFR的蛋白表达相关。     

淫羊藿素对人卵巢癌A2780细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的 观察淫羊藿素对人上皮性卵巢癌A2780细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响，并探讨淫羊藿素通过调控A2780细胞上皮间质转化（EMT）相关分子表达抑制细胞侵袭迁移。方法 设置空白组，淫羊藿素低、中、高剂量组（5，10，20 μmol·L^-1）分别作用于人卵巢癌A2780细胞48 h。采用细胞增殖与活性检测CCK-8）法，流式细胞术检测各组细胞增殖抑制率及凋亡率；划痕实验及transwell迁移实验观察细胞迁移情况并计算划痕愈合率与迁移率；transwell侵袭实验观察细胞侵袭情况并计算侵袭率；蛋白免疫印迹法（Western blot）与实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测EMT相关分子E-钙黏蛋白（E-cadherin），N-钙黏蛋白（N-cadherin），波形蛋白（Vimentin）和肿瘤侵袭迁移相关分子基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白及mRNA表达情况。结果 CCK-8与流式细胞术结果显示，与空白组比较，淫羊藿素各组细胞抑制率显著上升（P<0.01），细胞总凋亡率上升（P<0.05）；划痕实验及transwell侵袭迁移实验结果显示，与空白组比较，淫羊藿素组的侵袭迁移能力减弱，细胞侵袭迁移数量和侵袭迁移率明显减少（P<0.05）；Western blot与PCR结果显示，与空白组比较，淫羊藿素各组中N-cadherin，MMP-9，Vimentin蛋白和mRNA表达总体呈下降趋势，E-cadherin的表达呈上升趋势。结论 淫羊藿素对人卵巢癌A2780细胞具有抑制增殖、促进凋亡的作用，可能通过调控EMT相关分子表达抑制A2780细胞的侵袭迁移。     

桂皮醛对NIH3T3细胞周期及相关蛋白表达的影响

目的：观察肉桂主要成分桂皮醛对小鼠成纤维瘤细胞株NIH3T3细胞周期及相关蛋白的影响。方法：采用流式细胞仪检测桂皮醛(5.5 ng ·mL^-1)对NIH3T3细胞周期分布的影响；用免疫细胞化学法检测桂皮醛对NIH3T3细胞的细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和增殖细胞核抗 原(PCNA)蛋白表达的影响。结果：流式细胞仪检测显示,桂皮醛作用24 h后NIH3T3细胞S期比例上升了3%(P<0.05),G₂/M期比 例无明显升高,细胞增殖指数(PrI)增加了3.5%(P<0.01)。经桂皮醛刺激后,NIH3T3细胞Cyclin D1和PCNA蛋白表达量明显增加,与对照组 比较,有极显著差异(P<0.01)。结论：桂皮醛可推动NIH3T3细胞周期向前进展,这种正向调控作用与桂皮醛能促进Cyclin D1和PCNA蛋白 表达有关。