甲状腺相关眼病与Th1/Th2免疫平衡

背景 甲状腺相关眼病(GO)是自身免疫性疾病,目前其发病机制尚不清楚,近年来的研究发现Th1/Th2型免疫平衡反应的失调是导致GO的主要原因. 目的 采用脂质体包裹的人促甲状腺激素受体(hTSHR)胞外段基因重组质粒免疫同系雌性BALB/c小鼠以建立GO动物模型,研究关于在GO小鼠模型血清Th 1/Th2型免疫反应平衡状态,探讨GO的病理机制.方法 采用计算机数字随机分配法将同系6～8周龄雌性BALB/c小鼠32只分为重组质粒注射组、空白对照组、空质粒注射组和脂质体注射组.重组质粒注射组分别于实验的0、3、6周采用脂质体包裹的重组质粒pcDNA3.1 +/hTSHR289各30 μg行双胫前肌内注射,再于腹腔内注射40 μg以免疫小鼠,空质粒注射组和脂质体注射组分别采用pcDNA3.1+和脂质体以同样的方法进行免疫,空白对照组不做任何处理.分别于注射前及各次注射后第4天及第17周末处死小鼠行心脏采血,采用ELISA法检查各组小鼠血清中白细胞介素(IL)-2及IL-4质量浓度,计算IL-2/IL-4值.于初次免疫后17周末处死重组质粒注射组小鼠,取甲状腺及眼眶组织制作病理切片,采用苏木精-伊红染色法检测标本组织中炎性细胞浸润情况,对有炎性细胞浸润的标本进行免疫组织化学检测,计算B细胞特异标志物CD20阳性细胞(B)与T细胞特异标志物CD3ε阳性细胞(T)的比值,B∶T＞1.0者为Th2反应,相反者为Th1反应.结果 在第2次和第3次注射后,重组质粒注射组小鼠血清中IL-2质量浓度明显低于空白对照组、脂质体注射组、空质粒注射组,差异均有统计学意义(均P＜0.05),但组间小鼠血清IL-4质量浓度差异无统计学意义(P＞0.05);重组质粒注射组小鼠在第2次、第3次免疫后血清IL-2质量浓度明显低于免疫前及第1次免疫后,差异均有统计学意义(注射前:P=0.009、0.019;第1次注射后:P=0.002、0.004),而处死时小鼠血清IL-2质量浓度有所回升,明显高于第3次免疫后IL-2质量浓度[(44.31±1.77) pg/ml与(42.43±2.29) pg/ml],差异有统计学意义(P=0.031).空白对照组、空质粒注射组、脂质体注射组、重组质粒注射组第2次、第3次注射后血清IL-4质量浓度及IL4/IL2值均明显高于注射前和第1次注射后,其处死时重组质粒注射组小鼠血清IL-4质量浓度明显高于第3次注射后,差异均有统计学意义(均P＜0.05).处死时重组质粒注射组苏木精-伊红染色有炎性细胞浸润的7只小鼠12个眼眶标本中4个眼眶B∶T值＞1.0. 结论 采用脂质体包裹的TSH受体胞外段基因重组质粒免疫同系雌性BALB/c小鼠可成功建立GO动物模型,重组质粒注射组小鼠在初次免疫后17周内以Th1型反应为主,小鼠第2次免疫后免疫平衡开始向Th2型转变.     

重组人促红细胞生成素对小鼠视网膜光损伤的防护作用

目的　探讨重组人促红细胞生成素(rHEPO)通过小鼠血视网膜屏障的情况及其对视网膜光损伤的保护作用。方法　24只BALB/c小鼠腹腔注射rHEPO,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测小鼠视网膜中促红细胞生成素(EPO)的含量; 24只BALB/c小鼠建立光损伤动物模型,通过光镜和核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口标记(TUNEL)法观察实验组小鼠(12只,腹腔注射rHEPO)和对照组小鼠( 12只,腹腔注射生理盐水)视网膜细胞的变化情况。结果　腹腔注射rHEPO后2、4、6及8h小鼠100μg视网膜蛋白中EPO的含量分别为(0 .68±0 .24)、(1 .87±0 .37)、(0. 96±0 .24)及(0. 47±0. 13)mU,差异有统计学意义(F=2 .113,P<0 .05),在腹腔注射药物后4h视网膜中EPO的浓度达到高峰。随光照时间延长,光镜下可见对照组视网膜杆细胞的内、外节破坏明显加重,外核层逐渐变薄,出现核固缩,甚至核碎裂;实验组各观察时间点损伤变化均较轻,仅见感光细胞内、外节排列紊乱,形成空泡,外核层细胞排列稍紊乱,厚度无明显变化。荧光显微镜下观察,对照组视网膜外核层的凋亡细胞随光照时间延长不断增多,至光照后7d凋亡细胞数量减少;实验组视网膜外核层仅见少量凋亡细胞,光照后72h凋亡细胞的数量明显减少,至光照后7d几乎无凋亡细胞。实验组视网膜外核层凋亡细胞的数量     

雷帕霉素缓释片防治兔高危角膜移植免疫排斥反应和新生血管增殖的研究

目的探讨雷帕霉素(RAPA)缓释片防治兔高危角膜移植术后免疫排斥反应和角膜新生血管增殖的疗效及其作用机制。方法RAPA缓释片制作:RAPA与载体乙交酯-丙交酯-己内酯三元共聚物(PGLC)制成RAPA缓释片(W/W=50/50),每粒缓释片含RAPA0·5mg。65只健康新西兰大白兔,其中45只兔(45只眼)采用缝线法诱导角膜新生血管生成,选择大于3个象限、新生血管长入角膜超过3mm的40只兔按照随机数字表法分为对照组(A组)、1mgPGLC载体前房植入组(B组)、1%RAPA滴眼液组(C组)及0·5mgRAPA缓释片前房植入组(D组),每组10只兔;余20只兔为供体。对4组兔行右眼同种异体穿透性角膜移植术,术后观察90d,记录排斥指数(RI,为植片水肿、混浊及血管长入评分合计)和新生血管指数(NI,为血管长入植片评分)。定期检测C、D组兔房水中RAPA浓度;术后3周,原位杂交法对4组兔角膜植片中白细胞介素(IL)-2R、单核细胞化学吸引蛋白质(MCP)-1、Fas/FasL进行检测,采用免疫组化法对肿瘤坏死因子(TNF)α和血管内皮细胞生长因子(VEGF)进行检测。术后90d,病理组织学检查视网膜、肝肾结构变化。结果(1)免疫排斥:A、B、C及D组兔发生免疫排斥反应的平均时间分别为(16·5±2·5)、(16·0±2·6)、(47·1±13·2)、(87·6±5·8)d(P=0·000)。术后2周,4组兔植片RI分别为4·9±2·2、3·9±0·9、0·8±0·4、0·3±0·6(P=0·000)。术后12周分别为10·4±0·8、10·0±0·0、7·2±2·2、2·0±3·3(P=0·000)。(2)角膜新生血管:术后2周,4组NI数分别为2·4±0·7、2·1±0·5、0·6±0·5、0·3±0·5(P=0·000)。术后12周分别为3·8±0·5、3·8±0·4、0·8±0·7、0·4±0·8(P=0·000)。(3)房水中RAPA浓度:术后第2、4、8、12周,D组房水中RAPA浓度分别10·7、12·0、9·2、7·0ng/ml,C组房水中RAPA浓度检测不出。(4)细胞因子表达:A、B组植片大量表达IL-2R、MCP-1、TNF-α、VEGF细胞因子,C、D组不表达上述细胞因子,4组植片中Fas/FasL均不表达。(5)组织病理:4组兔视网膜、肝肾组织结构正常。结论局部应用RAPA可以防治兔高危角膜移植术后免疫排斥反应和角膜新生血管增殖,RAPA缓释片疗效优于滴眼液。     

CD4和CD8基因敲除鼠行穿透性角膜移植术后免疫排斥特征的研究

目的　探讨CD4和CD8基因敲除小鼠行穿透性角膜移植术后免疫排斥反应发生的机制。方法　CD4、CD8基因敲除小鼠及C57BL/6小鼠各20只,分成3组,右眼接受穿透性角膜移植术,供体为BALB/c小鼠,术后裂隙灯显微镜评价角膜移植片情况,并详细记录免疫排斥的发生时间,在术后1、2、4周各取2只鼠术眼行免疫组织化学检查,观察眼前段CD+4 、CD+8 T细胞的变化。在术后2周, 3组小鼠各选其中10只接受皮肤移植,供体为BALB/c小鼠,监测皮肤移植后皮肤植片免疫排斥反应的时间和在皮肤发生排斥反应时角膜移植片的情况。结果　3组小鼠角膜移植术后免疫排斥发生时间明显不同,CD4基因敲除鼠角膜移植片保持透明,至少观察了90d未见免疫排斥反应发生;CD8基因敲除小鼠在(28±3)d时发生免疫排斥反应;C57BL/6小鼠发生免疫排斥反应的时间为(14±2)d(F=2034, P<0. 01)。移植皮肤后发生免疫排斥反应时间为:CD4基因敲除鼠(14±2)d,CD8基因敲除鼠(12±1)d,C57BL/6小鼠(10±1)d(F=42. 54, P<0. 01)。结论　小鼠行穿透性角膜移植术后免疫排斥反应可能是以T淋巴细胞,主要为CD+4 T细胞介导的免疫排斥反应,CD+8 T细胞参与了排斥反应过程。     

小分子化合物J2在抑制小鼠角膜移植排斥反应中作用的初步研究

目的 探讨小分子化合物J2在抑制小鼠角膜移植排斥反应中的作用。方法以23只C57BL／6小鼠作为供体,76只BALB／c小鼠作为受体建立角膜移植实验模型,随机数字法分为A、B、C及D组,A组为BALB／c小鼠自体原位角膜移植,B、C及D组为C57BL／6-BALB／c小鼠间同种异体角膜移植。术后灌胃给药,A组和B组给予不含药物的空白液,C组和D组分别给予环孢素A（CsA）和小分子化合物J2,连续灌胃12d,比较各组小鼠角膜植片的存活时间和存活率,术后21d对各组小鼠行外周血单核细胞行流式细胞学检查,并做角膜植片的组织学检查。结果A组观察期内角膜植片未发生排斥,B组角膜植片平均存活时间为（17．8±2．1）d,C组为（38．1±9．9）d,D组角膜植片存活时间为（40．6±8．3）d,D组与A组（P=0．04）及B组（P=0．00）比较存活时间差异均有统计学意义,与C组比较差异无统计学意义（P：0．99）。流式细胞学检查显示J2给药小鼠外周血CD^＋细胞、CD8^＋细胞未发生增殖,组织学检查证实术后21dD组角膜植片未见明显的淋巴细胞浸润。结论小分子化合物J2能够抑制排斥的发生,延长小鼠角膜植片存活时间。（中华胺群条峦,2007,43：608-612）     

干眼对白内障术后角膜散光的影响

目的了解干眼与白内障手术的关系,术前干眼对术后角膜散光的影响,以及术后干眼的发生与转归。方法将84例96眼患者随机分成2组,为44例51眼和40例45眼,分别行白内障囊外摘出术(I组)和小切口囊外摘出术(II组),并植入人工晶状体。所有患者于术前进行干眼检查,按积分分级,分别列入A、B、C3组,并于术后1月、3月随访远视力、干眼状况、角膜散光、轴位及非球面指数等指标。结果在I组中,C组术后1月角膜散光值为2·41±1·23,术后3月为2·12±0·89,与A组(1·94±1·01,1·51±0·72)和B组(2·03±1·08,1·60±0·75)角膜散光值的差异均有显著性意义(P<0·01);在II组中,C组术后1月角膜散光值为1·90±0·83,术后3月为1·12±0·71,与A组(1·28±0·62,0·82±0·54)和B组(1·34±0·64,0·86±0·55)角膜散光值的差异也均有显著性意义(P<0·01);而2组中A组和B组之间差异无显著性意义(P>0·05)。在I组和II组中,术前、术后1月、3月,角膜非球面指数值在各组患者中差异均有统计学意义(P<0·01)。I组中,术后1月、3月C组视力分别为0·43±0·30、0·54±0·33,较A组(0·62±0·24、0·70±0·28)和B组(0·58±0·21、0·65±0·26)低(P<0·01);II组中,术后1月、3月,C组视力分别为0·65±0·32、0·76±0·30,亦较A组(0·85±0·26、0·90±0·29)和B组(0·84±0·24、0·88±0·25)低(P<0·01);而A组和B组之间差异无显著性意义(P>0·05)。2组中术后1月C组患者数均较术前增加,术后3月则基本恢复至术前水平,且I组术后发生中重度干眼的比率高于II组。结论白内障术前干眼的程度与术后角膜散光、角膜非球面指数及术后视力的恢复都存在正相关,术前中重度干眼的存在及术后干眼的发生直接影响患者的手术效果。治疗术前干眼及预防术后干眼对提高手术预后都是至关重要的。     

双眼或单眼慢性阿托品化幼猫的视功能发育

用幼猫双眼或单眼慢性阿托品化的方法 ,造成屈光不正或屈光参差的弱视动物模型 ,在整个视觉发育期 ,连续检测其条栅视力 (GA)和对比敏感度函数 (CSF) ,并与正常幼猫相比较。结果表明 :正常幼猫的GA 3 5周龄时为 1 4 8± 0 31c/d ,达到成年 (1 6周龄 )后为 3 67± 0 1 4c/d ,屈光不正组分别为 1 0 0± 0 2 5c/d和 2 1 5± 0 65c/d ,屈光参差组分别为 1 2 6± 0 30c/d和 2 0 5± 0 4 0c/d。在 1 6周龄屈光不正组或屈光参差组与正常组之间均有显著性差异 (t =4 839和 7 0 1 2 ,P均小于0 0 1 ) ,屈光不正组与屈光参差组之间却无显著性差异 (t=0 4 1 0 ,P >0 50 )。屈光不正组和屈光参差组猫CSF均低于正常 ,且以屈光参差组更明显。总之 ,人工模拟的屈光不正和屈光参差均造成幼猫GA和CSF的功能障碍 ,即弱视。两者所造成的视功能障碍无明显差异 ,可能意味着两者有相似的发病机制     

提前视觉刺激及高浓度氧对小鼠屈光状态的影响

目的探讨提前视觉刺激和高氧是否为拟早产儿近视的原因及两因素间的相互作用关系。方法74只C57BL/6J小鼠被随机分为以下4组:提前开睑接受视觉刺激诱导产生近视模型组20只,通过吸高氧形成早产儿视网膜病变(retinopathy of prematurity,ROP)模型组18只,提前开睑联合吸高氧组16只,正常对照组20只。定期检查各组屈光状态。结果第Ⅰ组小鼠右眼较左眼可形成(-9.77±0.09)D的相对近视,差异有非常显著性(P<0.01)。第Ⅱ组小鼠与对照组比较,第33天可形成最高相对近视[(-7.17±0.10)D],差异有非常显著性(P<0.01)。第Ⅲ组小鼠右眼与正常对照组相比,第33天时可形成更高的相对近视[(-16.18±0.13)D],差异有非常显著性(P<0.01)。三组近视均可逐渐恢复。结论提前视觉刺激和高氧均可诱导小鼠形成可逆性相对近视,且两种因素可产生叠加作用。     

小分子化合物J2抑制小鼠角膜移植术后排斥反应的研究

目的 探讨新型药物J2抗同种异基因小鼠角膜移植术后排斥反应的作用及其机制.方法 实验研究.采用随机分组设计的研究方法.建立以C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体的角膜移植实验模型,其中供体38只,受体100只,随机分为A、B、C、D 四组,每组25只.A组为BALB/c小鼠白体原位角膜移植,B、C及D组均采用C57BL/6-BALB/c同种异体角膜移植,术后采用腹腔注射给药,自手术当日开始,A组、B组给予安慰剂,C组给予CsA 10 mg/kg体重,D组给予J215 mg/kg体重,每天1次,连续给药12 d.观察各组植片生存指数变化,苏木素-伊红染色及冰冻切片免疫组织化学观察角膜植片病理改变;分别在术后1、2、3及4周行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测角膜植片中细胞因子的表达.各组间植片存活时间差异采用One-Way ANOVO分析进行比较,两组之间比较采用SNK法.结果 B组角膜植片平均存活时间为(18.88±4.19)d,D组发生排斥时间明显延迟为(33.62±6.S0)d,两组比较差异有统计学意义(q=8.33,P=0.00),而D组与C组比较差异无统计学意义(q=0.85,P=0.60).组织学检查证实,术后21 d,B组见大量细胞浸润,而D组与C组植片未见明显的细胞浸润.免疫组织化学检测显示安慰剂组角膜植片大量CD4+和CD8+T淋巴细胞浸润,J2组与CsA组植片仅有少量的CD4+和CD8+T淋巴细胞浸润.RT-PCR结果显示,在正常小鼠角膜未见IL-10和IFN-γ基因表达;异基因移植组从第1周开始表达各种基因,第3周表达明显增强;而J2组与CsA组从第1周开始表达,第2、3周表达减弱,第4周表达强于前3周.结论 J2通过拮抗CD4与主要组织相容性抗原(MHC)Ⅱ分子结合抑制CD4+T淋巴细胞激活,从而具有抗小鼠角膜移植排斥作用.     

准分子激光屈光性角膜切削术治疗高度近视的远期疗效分析

高度近视的治疗 ,目前已有多种方法[1,2 ] 。我们对自1996年始采用准分子激光多步分级的切削方法治疗高度近视手术满 4年且资料齐全者 112只眼 ,进行追踪观察 ,现报告如下。1　资料和方法1 1　一般资料选用高度近视手术满 4年者 112只眼 ,男性 2 4只眼 ,女性 88只眼 ;年龄 :18～ 4 9岁 ;手术范围为近视 - 6 0 0～- 12 2 5D ,术前平均 (- 8 2 7± 1 6 8)D ,散光平均 (- 1 35±0 39)D ;按屈光度分为两组 :1组 :- 6 0 0～ - 9 75D ,80只眼 ,平均 (- 7 5 5± 1 0 8)D ;2组 :- 10 0 0～ - 14 0 0D ,32只眼 ,平均 (- 10 74± 0 77)D。…     

Direct orbital manometry in patients with thyroid-associated orbitopathy.

PURPOSE: To determine orbital tissue tension and orbital compartment compliance in patients with and without thyroid-associated orbitopathy (TAO). DESIGN: Prospective case series. PARTICIPANTS: Orbits of patients with TAO (18 orbits) and control patients without TAO (35 orbits) were studied. METHODS: An orbital manometer was designed to directly measure orbital tissue tension in patients undergoing ocular or orbital surgery. MAIN OUTCOME MEASURES: Tissue tension was recorded before, during, and for 5 minutes after a 5-ml retrobulbar injection of anesthetic. Orbital compliance was calculated as change in volume divided by change in tissue tension. RESULTS: Resting orbital tissue tension was 4.4 +/- 2.2 mmHg (mean +/- SD) in normal orbits and 9.7 +/- 4.8 mmHg in orbits of TAO patients (P = 0.0005) Following retrobulbar injection, orbital tissue tension rose to 12.0 +/- 3.6 mmHg (P = 0.0000000000000006 compared with baseline) in the control group and to 36.3 +/- 15.2 mmHg in the TAO group (P = 0.0000007 compared with baseline, and P = 0.000008 TAO group versus control group). Orbital compartment compliance was 0.80 +/- 0.50 ml/mmHg in the control group and 0.27 +/- 0.21 ml/mmHg in the TAO group (P = 0.00001). Resting orbital tissue tension in 8 TAO orbits with compressive optic neuropathy was 12.4 +/- 4.9 mmHg, and was 7.8 +/- 3.5 mmHg in 10 orbits of TAO patients without compressive optic neuropathy (P < 0.05). No adverse events occurred. CONCLUSIONS: Retrobulbar injection causes consistent measurable changes in orbital tissue tension. Orbital manometry safely demonstrated higher orbital tissue tension and lower orbital compartment compliance in the orbits of TAO patients versus those of normal subjects. Resting orbital tissue tension was higher in the orbits of TAO patients with compressive optic neuropathy than in those orbits without. Compressive optic neuropathy may partially result from an orbital compartment syndrome in some patients with TAO. Directly assessing orbital dynamics in vivo may prove useful as an adjunct in the clinical evaluation of patients with TAO and other orbital disorders.     

甲状腺相关眼病患者眼眶组织糖皮质激素受体mRNA的表达

目的探讨糖皮质激素受体（GR）α和β mRNA在甲状腺相关眼病（TAO）患者眼眶组织中的表达。方法眼外肌和（或）眼眶脂肪组织标本取自在我科行手术治疗的17例严重TAO患者,意外死亡的10例健康成年人眼外肌和（或）眼眶脂肪组织标本作为对照。提取眼外肌或眶脂肪组织总RNA,将RNA逆转录为cDNA,用荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法实时检测GRα和GRIβ的PCR扩增全过程,计算各个样本GRα和GRIβ mRNA的表达量。结果眼外肌和眶脂肪组织均表达GRα和GRβ mRNA。TAO患者GRα mRNA表达量为（40．15±11．37）拷贝／μ1,正常对照为（20．64±7．07）拷贝／μl。TAO患者GRα mRNA表达量与GRβ mRNA表达量的比值（GRα／GRβ比值）为77．76±18．77,正常对照为148．34±23．86,差异具有统计学意义（P＜0．05）。眼外肌与眶脂肪组织之间,甲状腺机能正常、亢进及低下患者之间,使用糖皮质激素治疗与未使用糖皮质激素患者之间GRα mRNA表达量和GRα／GRβ比值比较,差异均无统计学意义（P＞0．05）。结论TAO患者眼眶组织GRα mRNA的表达增强;GRα／GRβ比值降低可能在TAO的病理发生和糖皮质激素的治疗反应中起一定作用。     

脂多糖诱导炎症反应对甲状腺相关眼病眼眶前脂肪细胞分化的影响

目的 观察脂多糖诱导炎症反应对甲状腺相关眼病( TAO)眼眶前脂肪细胞分化的影响,探讨TAO眼眶脂肪增殖的发病机制。方法 实验研究。眼眶组织取TAO行开眶减压术的患者。将体外培养的TAO眼眶成纤维细胞,分为A组与B组,A组采用1 mg/L的脂多糖作用8h,然后常规用诱导分化液Ⅰ和Ⅱ诱导直至分化结束,B组仅用诱导分化液Ⅰ和Ⅱ诱导至分化结束。采用油红O染色法测定分化后脂肪细胞相对含量,逆转录聚合酶链反应法与Western blot法检测环氧化酶2( COX2)与过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ) mRNA与蛋白的表达,酶联免疫吸附实验检测上清液中前列腺素E2( PG E2)的表达。两样本均数比较采用t检验,多样本比较采用单因素方差分析,两两比较采用SNK检验。结果 分化后油红O染色显示两组细胞形态上无明显差异。A组细胞吸光度(A)值(1.02±0.08)较B组(0.74±0.06)明显升高,差异具有统计学意义(t=8.502,P=0.000)。A组细胞分化后PPARγ mRNA( 1.74±0.19)与蛋白(0.47 ±0.04)的表达分别较分化前PPARγ mRNA(0.30±0.07)与蛋白(0.08±0.02)的表达明显增强(P＜0.05);B组细胞分化后PPARγ mRNA(1.15 ±0.18)与蛋白(0.35±0.03)的表达分别较分化前PPARγ mRNA(0.13 ±0.04)与蛋白(0.03 ±0.01)的表达明显增强(P＜0.05);A组细胞分化后COX2 mRNA (0.28±0.07)与蛋白(0.24±0.03)的表达分别较分化前COX2 mRNA( 1.54 ±0.10)与蛋白(0.49±0.03)的表达明显减弱(P＜0.05);B组细胞分化后COX2 mRNA的表达（0.08±0.03）较分化前(0.19±0.07)明显减弱(P＜0.05),而COX2蛋白的表达(0.01±0.01)与分化前(0.03±0.01)比较差异无统计学意义(P＞0.05)。分化后A组细胞上清液中PGE2分泌水平(208.43±15.06)ng/L较分化前(898.75±21.09)ng/L显著降低(P＜0.05);分化后B组细胞上清液中PGE2分泌水平(30.61±5.75) ng/L与分化前（35.75±4.09）ng/L比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。诱导分化前A组细胞COX2 mRNA与蛋白的表达及PGE2的分泌较B组明显增强(P＜0.05),而PPARγ mRNA与蛋白的表达亦强于B组(P＜0.05),分化后A组细胞COX2及PPARγmRNA与蛋白的表达、PGE2的分泌均强于B组(P＜0.05)。结论 脂多糖可诱导TAO眼眶前脂肪细胞产生炎症反应,使其炎症标志物COX2及其控制合成的PGE2表达增强,并使脂肪生成关键转录因子PPARγ表达上调,分化后PPARγ表达显著增强,而COX2与PGE2的表达明显降低。     

Ultrasound measurement of the horizontal external eye muscles in patients with thyroid disease. Is orbital involvement associated with thyroid autoantibodies?

PURPOSE: To describe ophthalmic findings with emphasis on exophthalmometry and ultrasonic assessment of extraocular eye muscle diameter in a consecutive group of females with Graves' disease (GD), compared with healthy controls and patients with other thyroid diseases. We also investigated the relationship with biochemical markers of thyroid autoimmunity such as TSH receptor antibodies (TRAb) and anti-thyroid peroxidase antibodies (anti-TPO). METHODS: Seventy adult women (age 26-74 years) with various types of thyroid disease consecutively entered the study at a tertiary referral center for thyroid-associated ophthalmopathy (TAO). Twenty-three had long-standing GD with TAO. Clinically, TAO was mainly absent in 22 with newly diagnosed GD and in seven with relapse of GD. Nine with Hashimoto's thyrolditis and nine with multinodular goiter were included for comparison and 18 healthy females served as controls. A full ophthalmic status included B-scan ultrasonic assessment of the four horizontal rectus muscle thicknesses, and a clinical NOSPECS score was attempted for each. RESULTS AND CONCLUSIONS: Besides higher NOSPECS scores, the TAO subgroup had higher exophthalmometry and muscle thickness. The GD groups without significant TAO also scored higher in these ratings compared to controls. Hertel recordings, NOSPECS and muscle thicknesses were all correlated in GD but showed no correlation to thyroid antibodies (TRAb and anti-TPO). Thus, the muscle thickness did not correlate with thyroid autoimmune activity. Nevertheless, we found extraocular muscle assessment useful since a) thicker muscles were usually found in patients with GD, with or without evidence of TAO, and b) other space-occupying orbital lesions could be excluded, thereby reducing the need for the more elaborate imaging techniques (CT, MRI, etc.).     

Roles of CD4+CD25+ T cells in the development of experimental murine allergic conjunctivitis

Background CD25+ regulatory T (T reg) cells play a suppressive role in experimental autoimmune uveoretinitis as well as experimental airway inflammation but their involvement in the development of allergic conjunctivitis (AC) remains unclear. We therefore investigated whether T reg cells play a role in the development of experimental AC (EC). Methods BALB/c and C57BL/6 mice were actively immunized with ragweed (RW). The mice were treated with an anti-CD25 Ab (PC61) or control normal rat IgG (nrIgG) either 2 days prior to active immunization or during the induction phase (days 0, 2, 4, 6 and 8). Ten days after active immunization, the mice were challenged with RW-containing drops. Twenty-four hours after the challenge, the conjunctivas were harvested for histological analysis of eosinophil infiltration, and the spleens were harvested for cell culture for splenocyte transfer. Cultured splenocytes were transferred into syngeneic mice, and 4 days after the transfer, the recipient mice were challenged with RW. Twenty-four hours after the challenge, conjunctivas were collected for histological analysis. Results Pretreatment with PC61 did not affect EC in either strain of mice; however, treatment with PC61 during the induction phase significantly suppressed EC in C57BL/6 mice. In contrast, transfer of RW-primed splenocytes from mice treated with PC61 induced EC that was significantly more severe regardless of strain and treatment protocol. Conclusions The finding that T reg cells play a suppressive role in the development of EC in splenocyte transfer experiments suggests that modulation of T reg cells may be a possible therapy for AC.     

99Tcm-奥曲肽眼眶显像在甲状腺相关眼病中的临床应用

目的 研究99Tcm-奥曲肽眼眶显像在判断甲状腺相关眼病(TAO)患者眼部炎性反应活动度中的临床价值.方法 根据临床活动度评分(CAS)标准,将30例TAO患者分为活动组和非活动组,11例正常志愿者为对照组.所有对象行99Tcm-奥曲肽眼眶断层显像,并计算眼眶奥曲肽摄取比值(UR).6例活动组患者于抗炎治疗后进行了二次显像.结果 3组眼眶的奥曲肽UR均数分别为1.40±0.18、1.15±0.10及1.07±0.20,活动组与非活动组、对照组两两相比,差异均有统计学意义(均P＜0.001);非活动组与对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).所有TAO患者的UR与其CAS具有良好的相关性(rall= 0.859,P＜0.001).对活动组患者的治疗前后UR比较,差异有统计学意义(t=4.39,P=0.007).治疗前后CAS比较,差异有统计学意义(Z=-5.51,P＜0.001),表明治疗后评分降低,治疗有效.结论 99Tcm-奥曲肽眼眶显像可帮助临床医师判断TAO炎性反应活动度,为制订治疗方案提供依据,并可用于疗效评价.     

脂多糖诱导炎症反应对TAO眼眶成纤维细胞环氧合酶-2及前列腺素E_2表达的影响

目的观察脂多糖（LPS）对甲状腺相关眼病（TAO）眼眶成纤维细胞环氧合酶-2（COX-2）表达及前列腺素E2（PGE2）分泌的影响。方法眼眶组织分别取自3例3眼因眼球萎缩行义眼台植入（正常对照组）和4例4眼因TAO行开眶减压术（TAO组）的患者。细胞原代培养采用组织块法。将体外培养的2组眼眶成纤维细胞,分别采用0、10、100、1000μg/L的LPS作用24h,或1000μg/LLPS分别作用0、4、8、12、24h。半定量逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）检测各组COX-2mRNA的表达,ELISA法检测上清液中PGE2的表达。结果组织块培养法第3天即有成纤维样细胞自组织块边缘游出,细胞呈长梭形和多角形。10、100、1000μg/LLPS作用后,与未用LPS刺激时相比,正常对照组和TAO组眼眶成纤维细胞COX-2mRNA的表达均增强,PGE2的分泌增加。与正常对照组相比,1000μg/LLPS作用时间相同时,TAO组COX-2mRNA表达及PGE2的分泌增加更为明显（P〈0.05）。结论 COX-2通路可能参与了活动期TAO的炎症过程;在疾病的活动期,采用抑制COX-2的治疗,可减轻局部炎症反应,可能对活动期TAO的治疗有效。     

重组人抵抗素对TAO患者眼眶前脂肪细胞分化的影响

目的探讨重组人抵抗素对甲状腺相关眼病（TAO）患者眼眶前脂肪细胞分化的影响及其在TAO发病中的可能作用。方法10例严重TAO患者眼眶脂肪组织来自眼眶减压术中,正常对照组来自各种原因行眼球摘除术者。培养眼眶前脂肪细胞,并诱导分化,在分化液中分别加入0、10、25、50、100μg／L质量浓度的重组人抵抗素,采用逆转录PCR（RT—PCR）法检测分化过程中过氧化物酶增生体激活受体γ（PPARγ）基因的表达,研究重组人抵抗素对前脂肪细胞分化的作用。结果TAO患者及正常对照组眼眶前脂肪细胞在体外均可被诱导分化成脂肪细胞。分化成熟的脂肪细胞可被油红O染成橘红色。重组人抵抗素对眼眶前脂肪细胞的分化有抑制作用,RT-PCR结果显示PPARγ基因的表达随着抵抗素质量浓度的升高而减弱,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论重组人抵抗素可抑制人眼眶脂肪组织来源前脂肪细胞的分化,脂肪细胞标记性PPARγ基因的表达减弱,有望在TAO治疗方面开创新的研究方向。