薄层扫描法测定不同温度藤黄炮制品中藤黄酸及新藤黄酸的含量

薄层扫描法测定不同温度藤黄炮制品中藤黄酸及新藤黄酸的含量刘幸平，程康华，叶定江（南京中医药大学２１００２９南京林业大学２１００３７）关键词滕黄，藤黄酸，新藤黄酸，薄层扫描法藤黄为藤黄科植物（ＧａｒｃｉｎｉａｈａｎｂｕｒｙｉＨｏｏｋＦ．）分泌的干燥树脂...     

藤黄酸的研究进展

藤黄为藤黄科植物藤黄树分泌的干燥树脂,具破血散结、解毒、止血、杀虫之功效,用于癌症、脑水肿等多种病症的治疗,其中藤黄酸是其主要有效成分。从藤黄酸的抗肿瘤作用、药动学和新剂型等方面阐述藤黄酸的研究进展,讨论研究过程中存在的问题,为今后藤黄酸的进一步研究开发提供参考。     

藤黄中藤黄酸B的制备分离方法优选及结构确证

目的建立一种高效且重现性好的藤黄酸B的制备分离方法,并对分离产物进行结构确证。方法采用乙醇超声提取方式对藤黄药材进行初步提取,用中压制备色谱和高压制备色谱相结合的方式对藤黄乙醇提取物中藤黄酸B进行分离和纯化,并采用正交设计对提取和分离工艺进行优化。采用红外光谱、质谱、1 H-核磁共振谱、13C-核磁共振谱对分离得到的样品进行结构鉴定。结果优选的分离方法较其他方法简便且高效可控,分离得到的样品通过结构鉴定,确定为藤黄酸B且纯度可达到99%以上。结论所建立的藤黄酸B的提取分离方法具有高效、简便且重现性好的特点。同时,本研究提供了藤黄酸B相对完整的谱图信息,并确证了所分离藤黄酸B的结构。     

奥沙利铂联合氟脲嘧啶治疗胃肠肿瘤的临床疗效观察

目的:分析奥沙利铂联合氟脲嘧啶治疗胃肠肿瘤的临床疗效。方法:选取2013年3月-2014年4月本院收治的60例胃肠肿瘤患者的临床资料,按照随机数字表法分为观察组和对照组各30例。观察组采取奥沙利铂联合氟脲嘧啶治疗,对照组采取FOLFOX4方案治疗,观察比较两组患者的临床疗效及不良反应发生情况。结果:观察组的治疗总有效率83.33%明显高于对照组的50.00%,且不良反应发生率10.00%明显低于对照组的33.33%,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:奥沙利铂联合氟脲嘧啶治疗胃肠肿瘤疗效显著,见效快,不良反应较小,值得在临床推广。     

藤黄酸对心肌梗死大鼠心功能的影响及其机制

目的:探讨藤黄酸(GA)对心肌梗死(心梗)大鼠心功能的影响及可能机制。方法:SD雄性大鼠,随机分为正常对照组(Control)、心梗组(MI+vehicle)、心梗+藤黄酸组(MI+GA)。人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分别培养在装有GA和vehicle的培养皿中。2周后行超声检测左心室舒张末期直径,左心射血分数,心室缩短分数;ELISA法检测血清脑利钠肽(BNP)水平;CCK-8检测细胞活性;免疫荧光法检测α-SMA(平滑肌标记物),ki67和CD31(内皮细胞标记物)的表达水平;Western印记分析缺氧诱导因子-1(HIF-1α),血管上皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在心肌和HUVECs中的表达水平。结果:MI+vehicle组大鼠左室舒张末期直径增大,左心射血分数及心室缩短分数降低,GA干预能改善大鼠心功能;MI+vehicle组大鼠心肌梗死周边区血管密度明显降低,GA干预显著上调α-SMA、CD31、Ki67的表达,促进新生血管生成;在缺氧条件下,GA显著增强HUVECs成管能力。此外,GA可增加促血管生成因子HIF-1α、VEGF-A和bFGF的表达。结论:GA可能通过促进新血管形成而改善心梗后大鼠的心脏功能。     

藤黄酸诱导胃癌细胞凋亡及抗肿瘤转移的实验研究

目的 研究藤黄酸对人胃癌 BGC-803 细胞增殖和转移相关能力的影响及其机制。方法 MTT、Hoechst 染色法检测藤黄酸对 BGC-803 细胞的增殖和凋亡的影响;侵袭小室模型等方法检测藤黄酸对 BGC-803 细胞侵袭、黏附、迁移的影响;运用 RT-PCR、Western-blotting 法分析藤黄酸对胃癌细胞凋亡和转移相关基因 bcl-2、bax、细胞黏附分子-1 (ICAM-1) mRNA 和蛋白表达的影响。结果 藤黄酸抑制 BGC-803 细胞的生长,其抑制率与药物浓度及作用时间呈依赖关系。低浓度的藤黄酸处理 BGC-803 细胞后,可明显降低胃癌细胞的黏附、迁移和侵袭能力。随着藤黄酸浓度的增大,bcl-2、ICAM-1 mRNA 和蛋白表达均下调,bax mRNA 和蛋白表达上调。结论 藤黄酸对胃癌细胞 BGC-803 有明显的生长抑制作用,具有显著的促肿瘤细胞凋亡作用和抑制肿瘤细胞转移相关性质,其机制可能与下调 bcl-2、ICAM-1 及上调 bax 的表达有关。     

藤黄酸衍生物的研究

目的:制备藤黄酸的衍生物,并进行抗肿瘤活性的研究。方法:半合成方法制备了藤黄酸甲酯、乙酯和氯代物,用MS,UV,IR,1D和2D NMR光谱法鉴定。其结构分别为藤黄酸甲酯(2),6-甲氧基藤黄酸甲酯(3),藤黄酸乙酯(4),33-氯化转位藤黄酸(33-chlorogambogellic acid,5),33,37-二氯转位藤黄酸(33,37-dichloro-gam-bogellic acid,6)。结果和结论:藤黄酸乙酯,33-氯化转位藤黄酸和33,37-二氯转位藤黄酸为新化合物,初步的药理实验表明,化合物5和6比藤黄酸有较强的抗肿瘤活性。     

高效液相色谱 蒸发光散射检测法对藤黄中藤黄酸及其衍生物的含量测定

为了测定中药藤黄中藤黄酸及其衍生物的含量,本文建立了HPLC 蒸发光散射检测器测定其含量的方法。色谱条件是C18 柱;流动相:甲醇 乙腈 水 冰乙酸(6∶2∶1∶0 .3) ,流速0 .8 ml/ min ;检测器温度75 ℃,N2压力2 .1 L/ min ,进样量20 μl。结果表明藤黄酸及其衍生物响应峰面积回归方程是Y= 1 .582 X 16 .207 ,r =0 .9996 ,5 种商品藤黄中藤黄酸含量为22 .75 % 34 .58 % ,新藤黄酸含量为12 .75 % 21 .79 % ,其回收率分别为95 .89 % ,98 .04 % ;RSD3 .4 % 。方法快速简便,结果准确,只需藤黄酸的回归方程即可对藤黄酸衍生物等未知成分进行初步定量。     

顺铂、5-氟尿嘧啶对人宫颈肿瘤细胞(Hela细胞)的相互作用

目的：观察顺铂、5-氟尿嘧啶及甲氨喋呤在体外对人宫颈肿瘤细胞(Hela细胞)的作用。并观察顺铂、5-氟尿嘧啶配伍对Hela细胞的相互作用。方法：采用MTT例定法观察顺铂、5-氟尿嘧啶及甲氨喋呤单用及合用对Hela细胞的影响,流式细胞仪观察凋亡及细胞周期的变化。并利用中效原理判定顺铂和5-氟尿嘧啶合用的效果。结果：顺铂和5-氟尿嘧啶单独应用时随着药物剂量增加,其抑制作用也增加,两药大剂量(大于中效剂量)合用时可产生拮抗作用(CI＞1),小剂量(小于中效剂量)合用时可产生协同作用(CI＜1)。甲氨喋呤在本实验条件下未见明显抑瘤作用。结论：顺铂和5-氟尿嘧啶合用小剂量产生协同作用,大剂量产生拮抗作用。     

藤黄酸抑制人结肠癌SW480细胞增殖过程中APC蛋白的表达变化

目的 观察藤黄酸对人结肠癌SW480细胞增殖和APC蛋白表达的影响,探讨其可能抗肿瘤的作用机制.方法 以不同浓度(0、0.5、1、4μg/ml)的藤黄酸干预体外培养的人结肠癌细胞株SW480,分别于24、36、48 h后,应用MTT法检测细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,Western-blot分析APC蛋白的变化.结果 1 μg/ml以上浓度的藤黄酸可以显著抑制人结肠癌细胞株SW480细胞增殖,且随浓度增加效果增强,随着时间增加抑制率显著增加(P＜0.01).藤黄酸浓度达到4 μg/ml时,C2/M期细胞达到54.74％;藤黄酸浓度为0、0.5、1、4μg/ml时SW480细胞的凋亡率分别为(0.17±0.08)％、(0.85±0.19)％、(7.12±1.21)％、(15.87±1.59)％.用不同浓度的藤黄酸处理SW480细胞株24 h,APC蛋白的表达随药物浓度的升高而增加(P＜0.01).结论 藤黄酸能够抑制人结肠癌细胞株SW480增殖并诱导其凋亡,干扰SW480细胞周期使其阻断于G2/M期,高表达APC蛋白有可能是藤黄酸抗癌作用的重要机制.     

赖氨藤黄酸对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制

目的: 研究赖氨藤黄酸(GAL)对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响并探讨其作用机制,为GAL 抗乳腺癌的临床研究和应用提供理论依据。方法: 选取处于对数生长期的MCF-7细胞,并随机分为空白对照组、不同剂量 (0.25、0.50、1.00、2.00、4.00和8.00 μmol·L^-1)GAL组和不同剂量(0.25、0.50、1.00、2.00、4.00和8.00μmol·L^-1)藤黄酸组,采用MTT法检测各组MCF-7细胞48 h增殖活性。选取对数生长期的MCF-7细胞,2 μmol·L^-1 GAL作用MCF-7细胞不同时间(0、6、12、24、36、48和60 h),采用MTT法检测作用不同时间后各组MCF-7细胞增殖活性。流式细胞术和Hoechst 33258染色检测各组MCF-7细胞24 h时凋亡情况,采用Western blotting 法检测各组MCF-7细胞24 h时凋亡相关蛋白的表达水平。结果: 细胞培养24 h 后,不同剂量GAL组MCF-7细胞存活率低于空白对照组(P<0.05),随剂量增加和作用时间延长细胞存活率下降(P<0.05)。流式细胞术和Hoechst 33258染色,与空白对照组比较,不同剂量GAL组MCF-7细胞凋亡率明显升高(P<0.05),且呈剂量依赖性。Western blotting检测,与空白对照组比较,不同剂量GAL组细胞沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白表达水平明显降低 (P<0.05),而caspase-3切割片段蛋白的表达水平明显高于对照组 (P<0.05)。结论: GAL 通过抑制SIRT1蛋白表达水平和上调caspase-3切割片段蛋白的表达水平诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡。     

Q小剂量奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶和亚叶酸钙治疗高龄晚期胃癌临床观察

目的评价小剂量奥沙利铂联合亚叶酸钙和5-氟尿嘧啶治疗高龄晚期胃癌的有效性及安全性。方法治疗组18例，70岁以上晚期胃癌采用小剂量奥沙利铂联合亚叶酸钙和5-氟尿嘧啶治疗后评价近期疗效和中位生存期；对照组15例，70岁以上晚期胃癌单纯接受支持疗法，随访24个月，观察中位生存期。结果治疗组中近期疗效，部分缓解10例，5例无变化，3例进展；有效率55．56％；主要副作用恶心、呕吐，黏膜炎，骨髓抑制；随访24个月，中位生存期11．20个月；对照组中位生存期6．34个月（P〈0．05）。结论小剂量奥沙利铂联合亚叶酸钙和5-氟尿嘧啶治疗高龄晚期胃癌是安全的、有效的方法，可以推广。     

多西紫杉醇联合奥沙利铂和5-氟尿嘧啶治疗晚期胃癌41例

目的观察多西紫杉醇联合奥沙利铂和5-氟尿嘧啶方案治疗晚期胃癌的客观疗效、疾病进展时间、生存时间和毒性反应。方法41例晚期胃癌患者给予多西紫杉醇35 mg.m-2(第1天,第8天,第15天),奥沙利铂85 mg.m-2(第1天,第8天,第15天),5-氟尿嘧啶500 mg.m-2(第1天至第5天),28 d为1周期,疗程4周期。结果41例患者中完全缓解3例,部分缓解21例,稳定10例,进展7例,总有效率58.54%;中位疾病进展时间为5.73个月。常见的毒性反应为白细胞和中性粒细胞减低、腹泻和周围神经毒性反应等。结论多西紫杉醇联合奥沙利铂、5-氟尿嘧啶化疗方案治疗晚期胃癌的疗效显著,耐受性较好。     

拟康氏木霉胞外多糖联合奥沙利铂可体外协同抑制结直肠癌细胞的增殖

目的 探讨拟康氏木霉胞外多糖（EPS）联合奥沙利铂（Oxa）用药对结肠癌细胞HCT116的协同抑制作用。方法 实验分为Control组（0 μg/mL）、Oxa组（8 μg/mL Oxa）、EPS组（100 μg/mL EPS）、EPS+Oxa组（8 μg/mL Oxa+100 μg/mL EPS）。CCK-8检测细胞活力,CompuSyn软件拟合Fa-CI曲线评价联用效果。流式检测凋亡和周期、划痕实验和transwell实验检测细胞迁移能力,Oxa和EPS相关基因与结直肠癌相关基因取交集进行PPI分析以及GO和KEGG富集分析。结果 Oxa单用或与EPS联用处理HCT116细胞,均可使HCT116细胞活力受到抑制,并呈现剂量与时间依耐性,两者联用有明显的协同作用（CI<1）。两药联用组的细胞总凋亡率与Oxa组以及对照组比较均显著升高（P<0.05）;联合用药组处于S期的比例高于其他各组。EPS和Oxa均具有抑制HCT116细胞迁移的作用,两者联用后抑制作用更为明显。KEGG分析显示主要涉及耐药、凋亡、血管新生等通路。结论 EPS联合奥沙利铂可协同抑制HCT116细胞增殖,促进该细胞凋亡和细胞S周期阻滞、抑制细胞迁移,铂耐药、PI3K-Akt、MAPK等信号通路发挥了关键作用。     

多西紫杉醇联合草酸铂和5-氟尿嘧啶治疗进展期胃癌的疗效分析

目的观察多西紫杉醇联合草酸铂和5-氟尿嘧啶治疗进展期胃癌的临床疗效及不良反应。方法32例进展期胃癌采用多西紫杉醇75 mg/m^2,第1天静脉输注1 h;草酸铂100 mg/m^2,第1天静脉输注3 h;醛氢叶酸0.2 g/m^2,第1天静脉输注2 h;5-氟尿嘧啶2.4 g/m^2用便携式微量输液泵持续静脉输注48 h,21天为1个周期。治疗2个周期后评价疗效和不良反应。结果32例患者均可评价,获得完全缓解（CR）1例、部分缓解（PR）13例、稳定（SD）11例、进展（PD）7例,总有效率（RR）为43.8%（14/32）,中位疾病进展时间（TTP）6.5个月,中位生存期10.1个月。主要不良反应为骨髓抑制、腹泻、四肢末梢感觉异常,其中Ⅱ-Ⅲ度白细胞减少为65.7%（21/32）,Ⅱ-Ⅲ度血小板减少为34.4%（11/32）,Ⅰ-Ⅱ度神经毒性为56.3%（18/32）,Ⅰ-Ⅱ度腹泻为18.8%（6/32）。结论多西紫杉醇联合草酸铂、5-氟尿嘧啶方案治疗进展期胃癌疗效肯定,且毒副反应可以耐受,患者临床受益。     

紫杉醇联合奥沙利铂与卡培他滨联合奥沙利铂治疗晚期胃癌的疗效比较

目的比较紫杉醇联合奥沙利铂与卡培他滨联合奥沙利铂治疗晚期胃癌的疗效。方法对本院2016年1月~2017年1月接受治疗的晚期胃癌患者60例进行研究,根据化疗方案不同随机分为A组及B组,每组各30例。A组予紫杉醇联合奥沙利铂治疗,B组予卡培他滨联合奥沙利铂治疗,化疗2个周期后评价疗效,并观察不良反应。结果 A组治疗后的有效率50.0%(15/30),B组治疗后的有效率40.0%(12/30),A组与B组近期疗效相比,差异不存在显著性(P0.05)。A组患者骨髓抑制、恶心呕吐、神经毒性、脱发、口腔黏膜溃疡、肝功能损害的发生率分别与B组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论紫杉醇联合奥沙利铂与卡培他滨联合奥沙利铂治疗晚期胃癌疗效相似,无明显不良反应。     

替吉奥胶囊联合奥沙利铂、伊立替康/亚叶酸钙治疗晚期胃癌疗效分析

目的:观察替吉奥(S1)胶囊联合奥沙利铂与伊立替康/亚叶酸钙治疗晚期胃癌的临床疗效及毒副反应.方法:48例晚期胃癌患者,采用以下化疗方案:替吉奥胶囊80 mg/m2,餐后口服,每天两次,连续服用2周,停药1周;奥沙利铂130 mg/m2,静脉滴注3h,d1;伊立替康80 mg/m2,d1、d15,5周重复;亚叶酸钙20...     

多西他赛联合奥沙利铂和氟尿嘧啶治疗进展期胃癌的疗效和安全性评价

目的:评价多西他赛?奥沙利铂?氟尿嘧啶联合化疗方案(DOF方案)对进展期胃癌的疗效和不良反应?方法:65例进展期胃癌随机入组DOF方案组(n = 33)和奥沙利铂联合氟尿嘧啶(FOLFOX4)方案组(n = 32),观察两组的临床疗效和不良反应?结果:DOF方案组的有效率(RR)为51.5%,中位无进展时间(TTP)为8.6个月,1年生存率为57.3%;FOLFOX4方案组的RR为46.9%,TTP为5.8个月,1年生存率为41.2%?统计学分析提示,两组客观有效率相似(P > 0.05);DOF方案组的TTP和1年生存率优于FOLFOX4方案组,差异有统计学意义(P < 0.05);DOF方案组的中性粒细胞减少?血小板减少和脱发的发生率高于FOLFOX4方案组,差异有统计学意义(P < 0.05)?结论:DOF方案治疗进展期胃癌疗效较好,不良反应可耐受,值得临床上推广应用?     

术前区域动脉灌注5-Fu联合奥沙利铂对于结肠癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的：研究术前区域动脉灌注5-Fu和奥沙利铂对于结肠癌细胞增殖和凋亡的影响。方法：选择在本院确诊为结肠癌的60例患者,随机分为5-Fu联合奥沙利铂组（A组）、5-Fu组（B组）、奥沙利铂组（C组）、对照组（D组）,每组15例。分别于术前区域动脉灌注相应的药物。检测各组肿瘤组织中Ki标记指数（Ki67LI）、凋亡细胞数目、凋亡指数（AL）、凋亡基因含量。结果：A组肿瘤组织中Ki标记指数明显低于B组、C组以及D组;A组肿瘤组织中的凋亡细胞数目和凋亡指数明显低于B组、C组以及D组;A组肿瘤组织中凋亡基因Caspase-3、Caspase-9、Fas、FasL的蛋白质表达量均高于B组、C组以及D组。以上差异均具有统计学意义。结论：术前区域动脉灌注5-Fu和奥沙利铂能够显著性抑制结肠癌肿瘤细胞的增殖,促进肿瘤细胞的凋亡,这种作用的可能机制是上调Caspase-3、Caspase-9、Fas、FasL的蛋白质表达量。     

多西紫杉醇联合奥沙利铂和5-氟尿嘧啶治疗晚期胃癌33例临床观察

目的考察多西紫杉醇联合奥沙利铂、5-氟尿嘧啶和亚叶酸钙方案治疗晚期胃癌的临床效果。方法33例晚期胃癌患者给予多西紫杉醇35mg／m^2（第1天,第8天,第15天）,奥沙利铂85mg／m^2（第1天,第8天）,5-氟尿嘧啶500mg／m^2（第1天至第5天）,28天为1周期,疗程4周期。结果33例患者中完全缓解3例,部分缓解16例,稳定10例,进展4例,总有效率57．58％;中位疾病进展时间为5.12个月,常见的毒性反应为白细胞和中性粒细胞减低,消化道反应和周围神经毒性反应等。结论多西紫杉醇联合奥沙利铂、5-氟尿嘧啶及亚叶酸钙化疗方案治疗晚期胃癌的疗效显著,毒性反应患者能耐受,可能延长患者生存期。