体外培养人胎肝细胞色氨酸吸收试验——测定培养肝细胞功能的新方法

为了提高和确保培养人胎肝细胞对治疗重症肝病的疗效,我们用体外人胎肝细胞色氨酸吸收试验,来检测胎肝细胞的生物功能,取得了满意的结果。     

人胎肝干细胞的体外培养及诱导分化

为体外分离培养和诱导分化人胎肝干细胞 ,从原代分离培养人胎肝干细胞集落 ,免疫细胞化学鉴定细胞集落分子标志物的表达 ;在体外特定细胞因子作用下诱导干细胞定向分化为成熟肝脏细胞 ,对其生物学特性进行初步鉴定。结果 ,从人胎肝组织中成功分离表达AFP、Albumin、Cytokeratin等标志物的胎肝干细胞集落 ,在体外特定细胞因子作用下肝干细胞可定向分化为成熟肝脏细胞。因此人胎肝中同样存在具有干细胞特性的原始细胞 ,体外可定向分化为成熟肝细胞。人胎肝干细胞的分离培养对于生物型人工肝的制备及其深入研究奠定了良好的基础     

人胎肝细胞治疗重症肝炎,慢活肝和肝硬化现状

现将1989年7月“全国人胎肝临床应用研讨会”有关胎肝治疗重症病毒性肝炎、慢性活动型肝炎和肝硬化的论文概述如下: 一、人胎肝细胞治疗肝病的临床应用(一)重症病毒性肝炎:由于肝细胞再生能力很强,如果是一种既能暂时替代肝细胞的功能,又能刺激肝细胞再生和调节机体免疫的方法,则有可能降低重症肝炎的病死率。近几年,人胎肝细胞     

人胎肝细胞体外感染HCV的定性研究

目的：通过定性研究探讨人胎肝细胞在体外与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）阳性血清共培养２４ｈ是否能感染ＨＣＶ。方法：人胎肝细胞在体外与ＨＣＶ阳性血清共培养２４ｈ后,采用原位ＲＴ－ＰＣＲ技术对其进行ＨＣＶ定性检测。结果：通过原位ＲＴ－ＰＣＲ技术检测,发现人胎肝细胞内ＨＣＶ正、负链ＲＮＡ均为阳性。此外,将人胎肝细胞在体外与ＨＣＶ阳性血清共培养２４ｈ并经多次洗涤后继续培养的上清液加入到新鲜分离的正常人胎肝细胞培养     

谷胱甘肽-S转移酶A4-4基因转染人血管平滑肌细胞及对改善硝酸甘油耐药性的作用

目的谷胱甘肽-S转移酶是一类具有拮抗氧化应激损伤的酶,谷胱甘肽-S转移酶对于人血管平滑肌细胞的硝酸甘油耐药性是否具有改善作用尚无报道。本研究探讨谷胱甘肽-S转移酶A4-4基因转染人胎主动脉平滑肌细胞,观察谷胱甘肽-S转移酶是否能够改善硝酸甘油耐药性。方法建立稳定人谷胱甘肽-S转移酶A4-4转染的人胎主动脉平滑肌细胞株,进行Western blot、免疫组织化学、MTT细胞毒理学以及一氧化氮检测。结果与野生型和空载体转染的人胎主动脉平滑肌细胞组相比,过表达人谷胱甘肽-S转移酶A4-4的人胎主动脉平滑肌细胞在硝酸甘油作用24h后明显抵抗硝酸甘油造成的细胞损伤(P<0.05);经硝酸甘油耐药性方案诱导后,人谷胱甘肽-S转移酶A4-4转染的人胎主动脉平滑肌细胞组产生的一氧化氮含量高于其他两组(P<0.01)。结论本研究发现经谷胱甘肽-S转移酶A4-4基因转染的人血管平滑肌细胞可抵抗硝酸甘油作用所致的损伤,并可能具有改善硝酸甘油耐药性的作用。     

人胎球蛋白及其基因多态与代谢综合征的研究进展

人胎球蛋白主要由肝脏分泌，属于胎球蛋白族的人血浆糖蛋白。最新研究发现，此蛋白为胰岛素受体酪氨酸激酶天然的抑制剂，同时也是天然的钙沉积抑制剂，其基因多态性致血浆人胎球蛋白水平变化参与代谢综合征和动脉粥样硬化的发生、发展。本文对其致病关系研究进展做一综述。     

肝细胞生长素的研制及临床应用

近年国内已有应用“人胎肝细胞悬液”(FLC)治疗重症肝炎及慢性活动性肝炎获得较好疗效的报道。但临床广泛应用FLC尚存在两个亟待解决的问题:(1)人胎肝细胞来源困难;(2)胎肝细胞活性难以较长时间保存。我们从Labrecque氏研究肝     

粒细胞集落刺激因子保护急性损伤人胎肝细胞的实验研究

目的建立D-半乳糖胺(D-galactosamine,D-GalN)对人胎肝细胞急性损伤的模型,观察粒细胞集落刺激因子(Granulocyte-colony stimulating factor,G-CSF)对人胎肝细胞损伤的保护作用。方法分别用梯度浓度的D-GalN和不同的作用时间孵育人胎肝细胞,用四唑盐比色法(MTT法)检测细胞活性,以确定最佳的人胎肝细胞急性损伤造模条件。将胎肝细胞分为4组进行不同处理:第1组为空白对照组,第2组(G组)用G-CSF处理正常细胞,第3组(ND组)和第4组(GD组)都用D-GalN进行损伤造模,但GD组加入G-CSF作为治疗,第3组加入等量的0.9%氯化钠溶液作为实验对照。最后用MTT法和乳酸脱氢酶(LDH)释放量检测各组细胞活性。结果当D-GalN浓度为10 mg/ml,作用时间为12 h时,可以杀伤90%以上的人胎肝细胞,并且可以保证有足够的药物反应时间。空白对照组和G组的细胞活性差异无统计学差异,但GD组细胞活性明显高于ND组(P0.05)。结论 D-GalN对人胎肝细胞急性损伤的造模条件为D-GalN 10 mg/ml作用12 h。G-CSF对D-GalN造成的人胎肝细胞急性损伤具有保护作用。     

多种添加剂对冻存人胎胰岛存活性的影响

研究多种添加剂对人胎胰岛冻存后存活性的影响，是在以二甲亚砜为主的冷冻保护剂中，添加多种制剂，比较其对冻存人胎胰岛的保护作用。结果显示多种添加剂可不同程度地提高冻存人胎胰岛嵉拇婊钚裕纫允笛棰褡椋ǎ粒裕校樱希模└灾关键词     

胎肝细胞孵育红母细胞的超微结构研究

目的探讨胎肝细胞与红母细胞的定位。方法胎肝细胞电镜观察。结果首次发现大量红母细胞被封入于肝细胞浆内。结论人及小鼠胎肝细胞能孵育红母细胞     

猪胰岛异种移植治疗Ⅰ型糖尿病

猪胰岛异种移植治疗Ⅰ型糖尿病陈冰，祝希媛近年来，移植的观念已被人们所接受。针对Ⅰ型糖尿病病人，胰岛移植将是比较彻底的治疗方法。我国是世界上进行人胎胰岛移植数量最多的国家，但由于人胎胰缺乏，人们已考虑猪做为供体的可能性。猪的胚胳发育过程与人相似，胎猪４...     

原代培养人胎肝细胞体外感染HBV的研究

目的建立HBV感染人胎肝细胞体外培养系统。方法 首先分离、培养人胎肝细胞，然后应用HBV阳性血清感染体外培养的人胎肝细胞；每隔2d收集上清液和肝细胞，应用ELISA,免疫组化法、原位杂交法和斑点杂交法检测上清液和细胞中HBsAg和HBV DNA。结果 上清液中HBsAg在感染后2d～20d均可测出，以感染后4d～16d达高峰(A值在0．22左右)。免疫组化检测细胞中HBsAg呈阳性表达，原位杂交和斑点杂交检测细胞和上清液中HBV DNA也呈阳性表达。结论 HBV在原代培养人胎肝细胞中能稳定复制和表达至少达16d。     

胎胸腺,脾及肝细胞悬液联合输注治疗重症肝炎42例疗效观察

近年来,国内应用人胎肝细胞悬液输注治疗重症肝炎已有不少报道,人胎胸腺、脾及肝细胞悬液联合输注治疗重症肝炎报道较少。我院近2年用以上两种混悬液输注治疗42例重症肝炎,获得较好疗效,现报道如下。     

分析孕早期雌二醇水平与先兆流产及胎停的影响

目的讨论雌二醇水平对早孕期先兆流产以及胎停的影响。方法用免疫化学发光法对876例早孕妇女(孕4-10周)进行血清雌二醇含量的检测,分析不同浓度的雌二醇水平对流产及胎停的影响,为了更好的观察雌二醇结果对先兆流产及停胎的影响,我们将测得血清人绒毛膜促性腺激素值较孕周异常者排除146人,又将血清孕酮较孕周异常者排除56人,将余下674人按照血清雌二醇测定值≦600 pg/ml分为研究组113人;血清雌二醇测定值600 pg/ml分为对照组561人。分别对二组进行难免流产人数的百分比计算,分析对比其结果的相关性。结果通过对比分析,发现雌二醇水平较低对先兆流产及停胎有显著影响。结论通过对674例早孕妇女的雌二醇水平进行测定分析分组对比,我们发现血清雌二醇水平低于600 pg/ml的患者较高于600 pg/ml更容易发生流产及胎停现象。     

氟致人胎肝细胞氧化应激与细胞凋亡关系的研究

目的：研究氟致人胎肝细胞氧化应激和细胞凋亡之间的关系。方法：体外培养的人胎肝细胞接触不同浓度的氟化钠24h后，检测人胎肝细胞凋亡百分率、细胞周期构成比、脂质过氧化物(LPO)、还原型谷胱甘肽(GSH)和培养液中LPO水平以及乳酸脱氢酶（LDH)、丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的活性。结果：氟染毒组培养液中LDH和AST活性均显著高于对照组；细胞内和上清液中LPO水平升高，细胞内GSH则明显下降，并且二者均与氟浓度呈现明显的剂量一效应关系；氟可使人胎肝细胞凋亡百分率明显升高，S期细胞数增多。结论：氟可致人胎肝细胞氧化应激，诱导细胞凋亡，一定浓度范围内的氟所诱导的氧化应激与细胞凋亡之间呈现明显的正相关关系。     

人胎肝匀桨T_4-5′脱碘酶的初步研究

为阐明人胎脏器T_4-5’脱碘作用的酶促本质及其在胎儿发育期间的活性变化,我们测定了正常人胎肝匀浆中T_4-5’脱碘作用。胎肝以Tris-HCl缓冲液为介质匀浆,取2,000×g离心之上清与非放射性T_4,13mM二巯基来苏糖醇一起保温,保温物以乙醇提取并用放射免疫法测定T_3的生成量。结果证实了人胎肝T_4-5’脱碘作用的酶促本质。该酶活性依赖于保温时间、温     

铜蒸气激光对人胎肝及脐血造血细胞增殖作用的实验研究

人胎肝和脐血均富含造血干 /祖细胞[1] ,我们研究了铜蒸气激光对人胎肝及脐血造血细胞的刺激效应 ,并与集落刺激因子 (ＣＳＦ)对造血细胞增殖作用比较 ,探讨低能量铜蒸气激光与ＣＳＦ刺激胎肝及脐血造血细胞效应的关系及体外扩增脐血造血细胞的意义。一、材料与方法1 脐血和胎肝的收集和分离 :(1)肝素抗凝健康足月产儿脐带血 ,每次 2 0～ 30ｍｌ,经密度梯度离心制成单个核细胞(ＭＮＣ)悬液。 (2 )取水囊引产 4～ 5个月人胎肝 ,经机械及酶处理制成ＭＮＣ悬液。2 激光源照射 :激光源为铜蒸气激光器 ,输出波长5 10 6ｎｍ ,能量为 5 0 0Ｊ/ｍ2…     

鼠特异性Fas抗体对人鼠嵌合肝中人肝细胞增殖的促进作用

目的: 探讨人胎肝细胞移植联合使用Jo2抗体的策略,促进人胎肝细胞在小鼠肝内存活和增殖.方法:裸鼠经脾移植1×106人胎肝细胞,移植后第1天ip JO2抗体,剂量为0.2mg/kg,1次/wk,持续12 wk为实验组,裸鼠经人胎肝细胞移植后未给予JO2抗体为对照组,建立人鼠嵌合肝动物模型.采用HE染色、原位末端标记方法(TUNEL染色)观察未经人胎肝细胞移植而给予JO2抗体24 h后处死的裸鼠肝脏组织.免疫组化、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同时相点实验组和对照组嵌合肝中肝组织人白蛋白、特异人增殖细胞核抗原(PCNA)和人白蛋白mRNA表达.结果:未经人胎肝细胞移植而给予JO2抗体的裸鼠病理组织切片发现肝组织出血、坏死和细胞凋亡.实验组和对照组裸鼠均能存活至24 wk.移植后嵌合鼠肝组织表达人白蛋白和人PCNA阳性细胞的时间:实验组2-20 wk,对照组2-12 wk; 白蛋白mRNA表达:实验组4-16wk, 对照组4-8 wk:实验组与对照组移植后8、12 wk PCNA表达差异有显著性(25.7%±8.5% vs 13.4%±7.8%, 29.4%±5.0% vs 8.5%±2.3%,均P<0.05).结论:人肝细胞异种移植于裸鼠体内能够存活,经小剂量JO2抗体ip裸鼠,使人鼠嵌合肝中人肝细胞得以增殖,存活时间延长.     

自制胎头吸引器的临床应用

胎头吸引器是用于头位难产、协助胎头经阴娩出的助产器械。目前临床应用的锥型、牛角型、钟型胎头吸引器具有负压不易控制、易滑脱、需多人操作等缺点。近年来，我们对胎头吸引器负压控制系统进行研究，自制新型胎头吸引器用于临床，认为其具有使用方便、安全、不需反复放置等优点。     

人胎肝细胞混悬液临床应用进展

人胎肝细胞(FLC)混悬液应用于临床始于1958年,Uphoff首先提出:输注胎肝细胞可使放射元素所致骨髓再生障碍的基因小鼠的造血完全重建,而不发生移植物抗宿主病。从此很多学者对胎肝造血细胞的特征及治疗机理的研究表明:妊娠4～6个月的胎肝中存在着丰富的造血干细胞,而且这种造血干细胞的增殖能力,较成年人造血干细胞更