苦参联合胎肝低分子抑瘤物抗白血病及其机制

目的 :探讨苦参 (SF)、胎肝低分子抑瘤物 (LMW NTS)联合用药对正常人骨髓粒 巨噬系造血祖细胞(CFU GM )和急性髓性白血病细胞的影响及其作用机制。方法 :采用CFU GM集落培养、细胞液体培养、Wrigh giemsa染色、3H TdR掺入实验、DNA片段凝胶电泳和RT PCR等方法 ,观察SF和LMW NTS联用对白血病的作用。结果 :SF和LMW NTS联用 ,明显提高抑制白血病细胞增殖的能力 ,促进白血病细胞的凋亡 ,诱导白血病细胞中原癌基因c Myc的下调 ,抑制正常造血祖细胞CFU GM的作用明显低于抑制白血病细胞的作用。结论 :联合用药抗白血病的效果 ,较单用苦参或胎肝低分子抑瘤物明显提高     

用胎肝抑瘤物体外净化白血病细胞行自体骨髓移植

用体外液体及半固体培养方法，观察了不同剂量人胎肝低分子天然抑瘤物对正常造血细胞和髓系白血病细胞生长的影响。筛选出的低剂量（５０μｇ／　ｍｌ）抑瘤物能明显抑制白血病细胞生长，而对正常粒单系造血祖细胞的生长无明显影响。选用低剂量低分子抑瘤物体外净化２例急性粒系白血病患者的骨髓，随后作自体骨髓移植均获造血重建。     

用胎肝抑瘤物体外净化白血病细胞行自体骨髓移植

用体外液体及半固体培养方法，观察了不同剂量人胎肝低分子天然抑瘤物对下沉造血细胞和髓系白血病生长的影响。筛选出的低剂量抑瘤物能明显抑制白血病细胞生长，崦对正常粒单系造血祖细胞的生长无明显影响。选用低剂量低分子抑瘤物体外净化２例急性粒系白血病患者的骨髓，随扣作自体骨髓移植均获造血重建。     

苦参促粒系造血机制及对白血病HL—60细胞的诱导凋亡作用

目的：进一步探讨苦参促粒系造血机制及新的抗白血病作用机理。方法：建立实验性环磷酰胺（Cy:0.08g/kg)低白细胞血症小鼠模型,观察苦参对粒系造血的影响和对白血病HL－60细胞的诱导凋亡作用。结果：苦参对Cy所致外周血白细胞和中性粒细胞数下降具有对抗和促恢复作用（P＜0．01）,能增加骨髓有核细胞、粒－巨噬系祖细胞（CFU－GM）数（P＜0．01）促进CFU－GM增殖并诱导其向粒系、巨噬系分化,且其促粒系造血作用与鲨肝醇一致。此外,苦参与明显诱导白血病HL－60细胞凋亡,呈药物浓度－粒应关系。结论：苦参有望用于防治化疗所致的白细胞减少及通过诱导细胞凋亡发挥其抗肿瘤作用。     

烷化溶血磷脂作为骨髓净化药物的实验研究

目的：探讨烷化溶血凝脂（ALP）作为骨髓净化药物的潜在应用价值。方法：克隆形成实验测定HL60细胞生长;正常粒－单核系造血祖细胞（CFU－GM）集落产率的变化检测ALP对正常造血祖细胞的影响;RT－PCR检测bcl-2mRNA表达;流式细胞术检测Bcl-2蛋白表达。结果：ALP作用后,HL60细胞的克隆形成率明显下降（P＜0．01）;ALP对CFU－GM的影响不显著,20μg/ml预处理24h,CFU－GM集落产率才被抑制（P＜0．01）;ALP不影响bcl-2基因在mRNA及蛋白水平的表达。结论：ALP具有抑制白血病细胞增殖的作用,但对正常造血细胞无显著毒性,在白血病病人自体骨髓体外净化中有良好的应用前景。     

苦参抗白血病作用及其机制

采用CFU GM和白血病CFU L集落培养、NBT/MTT还原试验和DNA的片段化分析法 ,观察了苦参对正常人骨髓、脐带血粒 巨噬系造血祖细胞 (CFU GM)和人急性髓系白血病HL 6 0细胞增殖、分化、凋亡的影响。结果表明 :5 ,10 ,15 ,2 0 μg·μl-1苦参均能明显抑制HL 6 0细胞增殖并诱导其凋亡 ,呈浓度 效应关系 ;其中 15 μg·μl-1苦参诱导HL 6 0细胞分化作用明显 ,且 5～ 15 μg·μl-1苦参对正常人造血祖细胞无明显的细胞毒作用。提示苦参在一定浓度范围内有选择性抗白血病效应。此结果为进一步研究和开发苦参并应用于肿瘤临床提供了实验依据。     

胎脑低分子抑瘤物对白血病细胞作用的研究

目的：探讨人胎脑低分子肿瘤抑制物对白血病细胞的作用机制及其细胞内游离Ca^2 浓度（[Ca^2 ]i)的变化。方法：通过超滤技术分段提取胎脑低分子抑瘤物，采用光镜、相差显微镜和流式细胞仪检测凋亡，Fura-2荧光负荷技术测[Ca^2 ]i。结果：胎脑低分子抑瘤物可明显抑制K562白血病细胞的增殖，作用4h后可出现典型的凋亡改变，白血病细胞凋亡过程中，胞内[（Ca^2 ]i明显升高。结论：胎脑低分子抑瘤物可能有是通过诱导白血病细胞凋亡而抑制其增殖，在白血病细胞凋亡过程中[Ca^2 ]i升高。     

人参多糖对人早幼粒白血病细胞株(HL-60)增殖的影响

目的：探讨人参多糖（GPS）对人粒单系造血祖细胞（CFU－GM）和人早幼粒白血病细胞株（HL－60）增殖分化的影响。方法：采用造血细胞 外培养,形态学观察,免疫细胞化学,流式细胞术等实验血流学技术,结果：GPS在体外能抑制HL－60细胞增殖,而同等剂量的GPS能明显促进正常粒单系造血祖细胞的增殖分化;在本实验条件下未见GPS对HL－60细胞有明显的诱导分化作用,结论：GPS可能通过阻止HL－60细胞从静止期（G60期）进入增殖周期（S／G2＋M）期,抑制DNA的合成等途径进而抑制细胞的增殖;提示GPS有可能成为既能促进正常造血,又能抑制人白血病等肿瘤细胞的增殖的天然诱导剂。     

小鼠骨髓基质细胞对粒系祖细胞生长调控的实验研究

目的 研究放射损伤小鼠骨髓基质细胞对粒系祖细胞生长的影响。方法 采用体外小鼠骨髓基质细胞贴壁培养法和粒系祖细胞（CFU－GM）培养法。结果 伤后3－7d，有基质细胞贴壁的CFU－GM生长明显低于无贴壁组；伤后14d贴壁层形成后，放射损伤组的CFU－GM生长明显低于正常对照组；放射损伤后3－7d，骨髓基质细胞可抑制正常CFU－GM生长，用薄层琼脂分隔基质细胞贴壁层与靶细胞，其抑制作用减弱。当无外源性集落刺激因子（CSF）时，基质细胞贴壁层对CFU－GM生长仍显示一定刺激作用，结论 辐射使骨髓基质细胞功能受到一定损伤，但在放射损伤造血修复与重建过程中，骨髓基质细胞仍起着“刺激”与“抑制”双重的动态平衡调控作用。     

小鼠骨髓基质细胞系QXMSC1促进骨髓移植后的造血重建

目的：观察骨髓基质细胞系QXMSC1在骨髓移植后早期能否加速造血重建。方法：用脾克隆形成单位（CFU-S）测定QXMSC1对造血干细胞的影响。计数每根股骨有核细胞数，用半固体琼脂克隆形成法测定粒单系祖细胞（CFU－GM），微量甲基纤维素法测定红系祖细胞（CFU-E及BFU－E）。结果：QXMSC1细胞可明显增加CFU－S克隆数。在骨髓移植后第10天，QXMSC1可增加骨髓有核细胞数，增加CFU－GM、CFUE克隆数。移植后第20天，这些作用更明显，且对BFU-E也有明显的刺激作用。结论：骨髓基质细胞系QXMSC1与骨髓细胞共移植可明显促进骨髓移植后早期造血功能重建。     

苦参抗白血病作用及其机制

By using CFU-GM/CFU-L colony assay, NBT/MTT reductant test and DNA fragmentation analysis, we studied the effects of Sophora flavescens (SF) on CFU-GM proliferative ratio in human normal bone marrow/umbilical cord blood and on proliferation, differentiation and apoptosis in human acute myelogenous leukemia HL-60 cells. The results showed that 5, 10, 15, 20 micrograms.microliter-1 of SF significantly inhibited proliferation and induced apoptosis in the HL-60 cells in a dose-dependent fashion. Fifteen micrograms.microliter-1 of SF also induced differentiation in HL-60 cells. Furthermore, cytotoxic activity of SF(5-15 micrograms.microliter-1) was not apparent on human normal hematopoietic progenitors(CFU-GM). The results indicate that an appropriate concentration of SF has a selective antileukemic effect. Thus, these are important impetuses for further research of SF as an anticancer agent.     

干扰素、阿糖胞苷单独及联合应用对慢性粒细胞性白血病细胞生长的影响

目的 探讨临床治疗慢性粒细胞性白血病（CML）更有效的方法。方法 以半固体集落培养，药物作用24小时液体培养及常规染色分析法研究干扰素（IFN）与阿糖胞苷（Ara-c)对K562细胞株和CML患者及正常人的骨髓单核细胞的生长影响。结果 IFN对K562细胞无明显抑制作用。IFN与Ara-c对CMLCFU-GM有优势抑制作用。对Ph^ 细胞存在选择性杀伤作用，IFN与Ara-c联合使用能增强IFN或Ara-c单药对CML白血病细胞的杀伤作用。结论 IFN与Ara-c可作为CML慢性期治疗的药物治疗，IFN与Ara-c联合治疗CML有望获得比单用Ara-c更好的治疗效果。     

干扰素、阿糖胞苷单独及联合应用对慢性粒细胞性白血病细胞生长的影响

目的　探讨临床治疗慢性粒细胞性白血病 (CML)更有效的方法。方法　以半固体集落培养、药物作用 2 4小时液体培养及常规染色分析法研究干扰素 (IFN)与阿糖胞苷 (Ara- c)对 K5 6 2细胞株和 CML 患者及正常人的骨髓单核细胞的生长影响。结果　 IFN对 K5 6 2细胞无明显抑制作用。IFN与 Ara- c对 CML CFU- GM有优势抑制作用 ,对 Ph+细胞存在选择性杀伤作用。IFN与 Ara- c联合使用能增强 IFN或 Ara- c单药对 CML 白血病细胞的杀伤作用。结论　 IFN与 Ara- c可作为 CML 慢性期治疗的药物选择 ,IFN与 Ara- c联合治疗 CML 有望获得比单用 Ara- c更好的治疗效果     

Killing effect of interleukin-2 and interferon-alpha activated leukemic bone marrow in remission on K562 leukemic cells

OBJECTIVE To evaluate the killing effect of interleukin-2 (IL-2) and interferon-alpha (IFN-alpha) activated bone marrow cells on K562 cells.

METHODS Semi-solid colony and 3H-TdR incorporating method were used.

RESULTS Bone marrow from leukemia patients in remission was activated in vitro with IL-2 for 3 days. The activated bone marrow (ABM) displayed killing effects of 0.31-2.30 logs on K562 cells. This killing effect was further increased to 0.30-3.15 logs when IFN-alpha added with IL-2 to the marrow for activation. IL-2 alone or in combination with IFN-alpha showed no inhibition of CFU-GM and K562 cells. Compared with IL-2 or IFN-alpha alone, the combination of the two cytokines could more effectively maintain the killing effect of ABM on leukemic cells.

CONCLUSIONS IFN-alpha can augment the purging effect of IL-2 ABM and combination of the two cytokines can effectively maintain the cytotoxicity of ABM.

     

卵黄囊干细胞向粒-单系造血祖细胞的定向诱导分化

目的：观察卵黄囊干细胞向粒-单系造血祖细胞（CFU-GM）的定向诱导分化,稳定和优化检测卵黄囊CFU-GM的方法。方法：应用体外琼脂培养法,观察多种因素对小鼠卵黄囊干细胞形成粒-单系造血祖细胞集落形成单位的影响;应用染色压片法对所生成的集落性质作鉴定。结果：植入不同数量的E7.5~8.5 d的卵黄囊干细胞与CFU-GM生成数量之间呈高度正相关;在接种相同数量的卵黄囊细胞数的情况下,DMEM培养体系生成的CFU-GM数明显多于IMDM培养体系生成的集落数（P<0.01）;马血清（HS）组优于胎牛血清（FBS）组（P<0.01）;与GM-CSF相比,WEHI-3条件培养液（W3-CM）能明显促进卵黄囊CFU-GM的生成（P<0.01）。采用完整琼脂凝块压片法对卵黄囊细胞所形成的集落进行鉴定表明为粒-单系细胞集落。结论：卵黄囊干细胞具有向CFU-GM分化的能力;卵黄囊干细胞CFU-GM诱导体系中各组分变化均可影响CFU-GM的集落生成率;以DMEM,GM-CSF或W3-CM,HS为组分的体系可稳定地检测卵黄囊细胞CFU-GM的集落生成率。     

当归多糖对人粒单系祖细胞和粒系白血病细胞株增殖分化的实验研究

目的：研究当归多糖(APS)对人粒单系造血祖细胞(CFU—GM)和急性早幼粒白血病细胞株(HL-60)增殖分化的影响。方法：采用造血细胞体外培养，形态学观察，流式细胞术和免疫细胞化学等实验血液学技术。结果：APS对正常CFU-GM的体外增殖有显著刺激作用；而对HL-60细胞的增殖却有明显的抑制作用；APS可能通过阻止HL-60细胞从静止期进入增殖周期，抑制DNA的合成等途径来抑制细胞增殖；APS可能诱导HL-60细胞发生凋亡。结论：APS有可能成为既能促进正常造血，又能抑制白血病等肿瘤细胞增殖，并诱导其凋亡或分化的天然诱导剂。     

L_(801)急性粒系白血病小鼠发病的某些动力学特征

L_(801)急性粒系白血病小鼠传代,稳定后,取小鼠在发病过程中第1、3、5、7天的骨髓细胞,观察某些动力学特征。结果显示,第3天开始,骨髓细胞的粒一单核祖细胞产率显著减少,第5天开始,电泳率显著增高,并有染色体核型改变。文中讨论了这些变化的意义。     

In vitro inhibitory effect of CD_8~ cells from patients with aplastic anemia on normal CFU-GM growth was blocked by cimetidine

ＩｎｖｉｔｒｏｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｅｃｔｏｆＣＤ＋８ｃｅｌｓｆｒｏｍｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｐｌａｓｔｉｃａｎｅｍｉａｏｎｎｏｒｍａｌＣＦＵＧＭｇｒｏｗｔｈｗａｓｂｌｏｃｋｅｄｂｙｃｉｍｅｔｉｄｉｎｅＷａｎｇＭｉｎｇｃｈｕｎ汪明春，ＹａｎｇＬ...     

胎牛肝细胞低分子抑瘤因子对肿瘤患者免疫功能的保护作用

目的 :观察胎牛肝细胞低分子抑瘤因子 (L MW- NTS)对接受化疗和放疗的肿瘤患者的免疫功能的保护作用。方法 :在放疗、化疗间隙期开始 ,给 5 4例肿瘤患者应用 L MW- NTS治疗 ,并以单克隆抗体 APAAP桥联酶标技术和免疫单向扩散法 ,分别检测这些肿瘤患者应用 L MW- NTS治疗前后 T细胞亚群、免疫球蛋白和补体等免疫指标 ,观察其变化情况 ,同时检测 2 0例正常人作为对照。结果 :接受放化疗后肿瘤患者免疫指标均低于正常人 (t=8.7893,P <0 .0 1) ,说明放疗、化疗对患者免疫功能有一定损害 ;在应用 L MW- NTS之后 ,继续进行放疗、化疗 ,其免疫指标得到一定程度的恢复。结论 :L MW-NTS对于患者在放疗、化疗过程中的免疫功能有明显的保护作用 ,减轻其免疫功能受损状态 ,有助于其免疫功能恢复