过量蛋氨酸对大鼠肝、脑组织~3H-亮氨酸掺入量的影响

本实验以~3H-亮氨酸示踪,研究了过量蛋氨酸对大鼠肝、脑组织蛋白质合成代谢的影响。 以米为主食,补充小量黄豆粉配制成含12％蛋白质的基本饲料。实验分三组,以基本饲料添加0.2％DL-蛋氧酸为对照组;基本饲料添加2.0％DL-蛋氨酸组以及添加2.0％DL-蛋氨酸和3.0％甘氨酸为两个实验组。每组大鼠18只,单笼饲养21天。 结果表明,注入标记亮氨酸1～10h,添加过量蛋氨酸组大鼠肝组织~3H-亮氨酸掺入量(dpm/mg肝)明显低于对照组(P<0.01),掺入高峰时间延迟出现。添加过量蛋氨酸和3.0％甘氨酸组,~3H-亮氨酸掺入量比单纯添加过量蛋氨酸组明显提高(P<0.05),但仍低于对照组,掺入高峰与对照组相同在第2h出现。相反,三组大鼠脑组织1～10h内~3H-亮氨酸掺入量与掺入高峰时间均未见明显差别(P>0.1)。提示过量蛋氨酸的毒性对器官蛋白质合成的作用是不一致的。     

妊娠期溴氰菊酯暴露对仔鼠神经行为发育及脑Na+-K+-ATPase活性的影响

[目的]探讨妊娠期澳氰菊酯(deltamethein,DM)暴露对仔鼠脑Na -K -ATPase活性及神经行为发育的影响.[方法]确定母鼠妊娠后,随机分为0、3.35及6.70mg/kg DM染毒组,自妊娠1～19d按0.5 ml/100g体重隔日一次灌胃染毒,对照组给予相同剂量的色拉油.分别选择5、10、21 d龄仔鼠断头处死,测其脑组织Na -K -ATPase活性;选择30 d龄仔鼠进行主动逃避实验及旷场实验.[结果]3.35mg/kg染毒组仅21 d龄仔鼠存活率与对照组相比明显降低(P＜0.05),6.70mg/kg染毒组5、10、21 d龄仔鼠存活率均低于对照组(P＜0.01).3.35 mg/kg染毒组5 d龄仔鼠脑组织Na -K -ATPase活性无明显变化,10 d龄仔鼠活性降低,与对照组相比有显著性差异(P＜0.05),21 d龄仔鼠未见异常;6.70 mg/kg染毒组5、10d龄仔鼠脑组织Na -K -ATPase活性显著降低,21 d龄末见明显变化.6.70mg/kg染毒组30d龄仔鼠延迟时问为(3.86±1.40)s、被动逃避反应阳性率为24%,与对照组[(1.68±0.70)s、6%]相比,差异有显著性(P＜0.05).3.35和6.70 mg/kg染毒组仔鼠旷场实验中行进格子数均明显降低,与对照组的差异均有显著性(P＜0.05).[结论]孕鼠妊娠期接触DM可以抑制仔鼠脑组织Na -K -ATPase活性,并对其生长发育产生影响.     

长期接触低剂量氯化甲基汞致脑发育损伤大鼠动物实验模型的研究

目的:观察大鼠长期接触低剂量氯化甲基汞(MMC)不同发育阶段仔鼠脑汞含量。方法:雌性Wistar大鼠体重(120±20)g,随机分为3个实验组和对照组各30只。实验组母鼠从妊娠前90天至仔鼠出生后30天连续喂饲含有不同剂量(0.75、1.50和3.00 mg/kg)MMC的普通饲料,对照组给予普通饲料。采用干烧法用F732-V冷原子吸收测汞仪分别测定仔鼠大脑、小脑和海马组织汞含量。结果:在建立MMC所致脑发育损伤动物实验模型过程中,发现实验组母鼠的产子率低于正常鼠,高剂量组尤为明显,生后仔鼠外观无异常表现,不同脑区(大脑、小脑和海马)脑汞含量差异无统计学意义(P>0.05)。各实验组生后不同时间仔鼠脑汞含量明显高于相应对照组(P<0.05),各实验组仔鼠脑汞含量随母鼠接触剂量的增高而有不同程度升高(P<0.05),同一实验组内仔鼠脑汞含量随生后时间的延长逐渐升高,在生后30天达峰值。结论:甲基汞可透过血脑屏障蓄积于仔鼠脑内,且仔鼠脑汞含量与母鼠接触剂量之间存在一定剂量反应关系。     

胚胎期暴露手机辐射对仔鼠脑组织NO和SOD的影响

目的:探讨胚胎期暴露手机辐射对仔鼠脑组织NO和SOD的影响.方法:将22只孕鼠分为3组,2个实验组母鼠妊娠全程暴露于手机辐射,对照组母鼠未暴露于手机辐射下.分娩8周后应用酶免疫标记技术测定暴露组和对照组仔鼠脑组织NO含量和SOD活性.结果:胚胎期暴露手机辐射仔鼠脑组织中NO含量高于对照组(P＜0.05),SOD活性低于对照组(P＜0.05).时分多址组与码分多址组间NO含量及SOD活性比较,均无统计学差异(P＞0.05)结论:胚胎期暴露手机辐射可能引起仔鼠脑组织中NO浓度上升,SOD活性降低.     

宫内γ线照射对仔鼠脑发育影响的研究

目的：探讨宫内γ线照射对仔鼠脑发育的影响。方法：采用整体动物实验，于SD大鼠孕17天给予1．0Gyγ线照射，观察生后1，4，7，14及21日龄仔鼠脑重、脑DNA和蛋白质含量的动态变化。结果：照射组仔鼠生后1，4，7，14及21日龄脑重、脑／体比值及脑组织蛋白质含量，与对照组比较均显降低；对照组仔鼠出生后脑组织DNA含量逐天下降，至生后第4天后又逐渐增高，照射组仔鼠第1及21日龄脑组织DNA含量显低于对照组。结论：孕17天大鼠受1．0Gyγ线照射可影响仔鼠脑发育，表现为脑重、脑DNA和蛋白质含量的降低。     

孕哺期铅暴露对小鼠脑组织8-羟基脱氧鸟苷和沉默信息调节因子1表达的影响

目的研究孕哺期铅暴露对成年仔鼠脑组织中DNA氧化损伤标志物8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy deoxy guanosine,8-OHd G)、沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)表达及学习记忆能力的影响。方法通过饮用2 g/L乙酸铅水溶液建立C57BL/6小鼠孕期染铅模型,并对哺乳期母鼠持续铅暴露至子代小鼠断乳,分娩3周后将仔鼠分笼以无铅去离子水饲养至12周龄,同时设立无染铅对照组。于仔鼠12周龄时以Morris水迷宫实验检测其学习记忆能力,以免疫组化方法检测8-OHd G在两组仔鼠脑组织中的表达和分布,采用Western blot测定其脑组织中SIRT1蛋白的表达水平。结果水迷宫实验结果显示,第3~5天铅暴露组成年仔鼠在定位航行实验中的平均逃避潜伏期长于对照组,最后一天穿越平台次数及在目标象限停留时间低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。铅暴露组仔鼠海马组织CA1区8-OHd G表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),但大脑皮层8-OHd G表达水平无明显差异(P0.05)。铅暴露仔鼠脑组织胞核内SIRT1水平低于对照组,胞浆内SIRT1水平高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论孕哺期铅暴露对成年仔鼠学习记忆能力的影响可能与脑组织(特别是海马组织)DNA氧化损伤有关;铅暴露使成年仔鼠脑组织中SIRT1发生核质转移,该现象可能与SIRT1对铅暴露小鼠的神经保护作用有关。     

缺铁性贫血对大鼠生殖机能及仔鼠生长发育的影响

为研究缺铁性贫血 (IDA)对大鼠的生殖机能及对仔鼠生长发育影响 ,将 4周龄Wistar雌性大鼠随机分为二组 ,实验组喂低铁基础饲料 ,对照组喂在基础饲料中添加铁的对照饲料。 14周后与正常雄鼠合笼交配 ,观察仔鼠的生长发育情况。对母鼠及仔鼠血清微量元素Fe、Zn、Cu、Mn、Se进行测定。结果显示 ,IDA组母鼠窝仔均数、活产率、活胎数及幼仔 4日存活率均低于对照组 (P <0 0 1) ;IDA组仔鼠出生体重低、生长迟缓、毛发稀疏 ,具典型贫血临床特征。;IDA组仔鼠血液指标检测 :血红蛋白、红细胞压积均低于对照组 (P <0 0 0 0 1)。母鼠及仔鼠血清Fe、Cu低于对照组 (P <0 0 0 0 1)。结论认为缺铁性贫血可降低大鼠的生殖机能 .严重地影响了仔鼠的正常生长发育 ,并导致仔鼠体内其它微量元素代谢失调。     

妊娠大鼠碘缺乏和甲状腺功能减退对仔鼠海马神经颗粒素表达的影响

目的观察妊娠大鼠碘缺乏和甲状腺功能减退对仔鼠海马神经颗粒素(neurogranin,Ng/RC3)表达的影响。方法将妊娠清洁级Wistar大鼠28只按体重随机分成对照组、碘缺乏组、甲状腺功能减退1、2组,每组7只。自妊娠第6天(GD6)起,碘缺乏组饲以缺碘地区粮食配制的饲料[碘含量为(14.11±1.96)ng/g],饮用自来水;甲状腺功能减退1、2组分别给予5和15mg/L丙基硫尿嘧啶(propylthiouracil,PTU)溶液作为饮用水,饲喂普通饲料[碘含量为(470.50±46.52)ng/g],直至仔鼠出生后第28天(PN28);对照组饮用自来水,饲喂普通饲料。分别于PN14、PN21、PN28和PN42时,每组随机取5只仔鼠,观察海马CA1、CA3和DG区Ng表达。结果在PN14时,碘缺乏组、甲状腺功能减退1、2组仔鼠海马CA1区Ng蛋白表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05);在PN21时,碘缺乏组、甲状腺功能减退1、2组仔鼠海马CA1区以及碘缺乏组、甲状腺功能减退2组仔鼠海马CA3区Ng蛋白表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05);在PN28时,碘缺乏组、甲状腺功能减退1、2组仔鼠海马CA3区以及碘缺乏组、甲状腺功能减退2组仔鼠海马CA1区Ng蛋白表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05);在PN42时,碘缺乏组、甲状腺功能减退1、2组仔鼠海马CA3区和CA1区Ng蛋白表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论妊娠大鼠碘缺乏和甲状腺功能减退可降低仔鼠海马CA1和CA3区Ng的表达。     

高碘对仔鼠脑甲状腺激素的影响及硒的干预作用

目的研究高碘摄入对小鼠仔鼠脑组织甲状腺激素的影响及硒的干预作用。方法将60只Balb/c小鼠随机分为4个不同的饮水组:正常对照组、高碘组(3000μg/L)、单独补硒组(200μg/L)、高碘加硒组(I3000μg/L+Se200μg/L)。喂养4个月时,雌雄交配。测定14和28日龄仔鼠血清TSH和甲状腺激素水平以及0、14和28日龄仔鼠大脑组织甲状腺激素水平。结果14日龄仔鼠高碘组血清TT4水平显著低于对照组和高碘加硒组,而TSH水平显著高于对照组和高碘加硒组(P<0·05),高碘组0和14日龄仔鼠脑组织甲状腺激素含量显著低于对照组、单独补硒组和高碘补硒组(P<0·05),28日龄仔鼠血清和脑组织甲状腺激素含量各组间差异无统计学意义。结论补硒能缓解高碘所致仔鼠脑组织甲状腺激素的改变。     

碘缺乏对大鼠仔鼠小脑c-fos和c-jun蛋白表达的影响

目的研究碘缺乏对大鼠仔鼠小脑c-fos和c-jun蛋白表达的影响.方法选择健康Wistar大鼠30只(雌性20只,雄性10只),将雌鼠随机分成碘缺乏组及对照组,每组10只.碘缺乏组大鼠于合笼前1周开始喂饲低碘饲料(含碘20～40 ng/g),饮去离子水,直至仔鼠生后30 d;对照组大鼠喂饲标准饲料(含碘145～186 ng/g),饮自来水.取生后第20、30、60天仔鼠,测定体重、血清中游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)和游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)水平,并取小脑组织进行免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)染色,用图像分析方法分析大鼠仔鼠小脑皮质c-fos和c-jun蛋白表达情况.结果碘缺乏组仔鼠生后第20、30、60天时,体重均低于对照组(均P＜0.01),血清T3、T4水平均低于对照组(均P＜0.01),小脑组织c-fos和c-jun染色强度均低于对照组(均P＜0.05),总积分光密度值均低于对照组(均P＜0.05).结论碘缺乏可降低大鼠仔鼠小脑组织c-fos和c-jun蛋白表达,影响神经系统的发育.     

孕期及哺乳期锌干预对仔鼠脑组织bcl-2mRNA表达的影响

目的　观察锌与脑组织中 bcl- 2 m RNA表达关系 ,明确锌调节中枢神经系统发育及功能以及锌与神经细胞凋亡间的分子机制。方法　将成年刚怀孕 ICR雌性小鼠随机分为 5组并饲以不同锌水平的饲料 ,使其分别成为严重缺锌组 (1 mg/kg)、轻度缺锌组 (5mg/kg)、适锌组(30 mg/kg)、高锌组 (1 0 0 mg/kg)及高锌对喂组 (1 0 0 mg/kg)。实验动物在孕期和哺乳期均喂饲实验饲料 ,而断奶期 (2 0日龄 ,P2 0 )至成年 (70日龄 ,P70 )各组改喂普遍饲料。在 P2 0和 P70期收集各实验组动物脑组织 ,采用 Northern blot技术检测 bcl- 2 m RNA表达情况。结果　在 P2 0及 P70仔鼠脑组织中均有 bcl- 2 m RNA表达 ;P2 0期缺锌组 (严重缺锌组及轻度缺锌组 )实验仔鼠脑组织bcl- 2 m RNA的表达量明显少于非缺锌组 (适锌组、高锌对喂组及高锌组 ) ,并表现出与膳食锌水平呈正依赖关系 ;成年 (P70 )时 ,各实验组仔鼠脑组织 bcl- 2 m RNA表达水平未见明显差异。结论　锌对脑组织中神经细胞凋亡具有调节作用 ,发育期锌缺乏可促进脑细胞凋亡发生 ,并抑制 bcl- 2m RNA表达 ;补充锌可能通过提高 bcl- 2 m RNA转录水平抑制神经细胞凋亡。     

基因芯片技术筛选孕期缺锌仔鼠脑中差异表达基因

目的: 探讨母鼠在孕期和哺乳期缺锌对仔鼠成年后脑功能特别是学习记忆能力的影响,考察孕期缺锌母鼠所产仔鼠脑内基因的差异表达状况并筛选相关差异表达基因。方法: 怀孕ICR雌鼠24只随机分为(A)对照组,(B)孕期及哺乳期轻度缺锌组,(C)孕期严重缺锌组。对照饲料、轻度缺锌饲料及缺锌饲料的锌含量分别为100 mg/kg、5 mg/kg和1 mg/kg。仔鼠断乳后饲喂普通市售饲料。A、B组仔鼠70日龄(P70)后以穿梭箱法测试仔鼠的学习记忆能力,并制备海马脑片检测仔鼠长时程增强(LTP)变化情况;以A组仔鼠作对照,基因芯片技术检测C组仔鼠(P1)脑中差异表达基因。结果: C组仔鼠出生后即死亡。行为测试中,B组仔鼠达到学习标准所需次数多于A组仔鼠,二者有显著性差异;B组仔鼠海马脑片诱导的LTP低于A组仔鼠;基因芯片检测初步确认C组仔鼠脑中有8条差异表达基因(A组仔鼠作对照,表达差异2倍以上),其中5条锌上调序列,3条锌下调序列。结论: 孕期及哺乳期轻度缺锌即可造成仔鼠成年后学习记忆能力下降,同时也影响海马的突触可塑性,故孕期是锌缺乏造成脑功能损伤的关键时期;孕期缺锌引发的仔鼠成年后脑功能损伤可能与神经细胞Ras-MAPK信息传递途径中MAPKK2表达紊乱有关。     

锌对仔鼠中枢神经系统胶质酸性纤维蛋白表达的影响

目的　探讨微量元素锌缺乏与胶质酸性纤维蛋白 ( GFAP)表达的关系及锌调节胶质细胞分化的机制。方法　给处于孕期及哺乳期的 ICR母鼠喂饲含不同锌水平饲料 ,采用 West-ern blot技术检测其仔代胚胎、大脑、小脑及肝组织中 GFAP的表达情况 ;同时在穿梭箱内检测成年仔鼠 ( 70日龄 )的学习能力 ;行为实验结束后 ,在仔鼠的海马脑片上进行诱导长时程增强 ( LTP)实验。结果　实验仔鼠小脑在新生期 (出生第 1天 ,P1 )开始表达 GFAP,而大脑在出生后第 5天( P5)才开始有 GFAP印迹出现 :之后至成年小脑及大脑持续表达 GFAP;实验鼠肝组织在发育全过程中均未见有 GFAP印迹。比较各实验组 GFAP表达量为 :P1至 P5期非缺锌组 ( 30 mg/kg及1 0 0 mg/kg) GFAP杂交条带明显强于缺锌组 ( 1 mg/kg及 5mg/kg) ;P1 0至成年期 ,缺锌组 ( 1 mg/kg及 5mg/kg)大脑及小脑 GFAP的杂交条带反而强于非缺锌组 ( 30 mg/kg及 1 0 0 mg/kg) ,其强度与膳食锌呈负依赖关系。行为学检测表明 ,轻度缺锌组 ( 5mg/kg)达到学会标准所需次数明显多于高锌组 ( 1 0 0 mg/kg) ;电生理检测表明 ,轻度缺锌组仔鼠海马脑片上诱导的 LTP明显低于高锌组上所诱导的。结论　补充锌在发育早期可促进神经前体细胞向神经胶质细胞分化及 GFAP表达 ;神经胶质细胞分化     

牛磺酸对高碘仔鼠脑发育和学习能力的影响

目的：探讨牛磺酸对高碘仔鼠脑发育和智力的影响。方法：将动物随机分为3组：适碘组、高碘组、高碘＋0．6％牛磺酸组（简称牛磺酸组）,各组亲代小鼠饲养3个月后雌雄交配,测定各组30日龄仔鼠的学习记忆能力及脑组织相关生化指标。结果：高碘组30日龄仔鼠脑蛋白质和DNA含量下降,牛磺酸组与适碘组差异无显性：高碘组30日龄仔鼠脑海马组织乙酰胆碱酯酶活性比适碘组和牛磺酸组明显升高,乙酸胆碱含量下降。与适碘组相比,牛碘酸组乙酰胆碱酯酶活性无统计学差异,而乙酰胆碱含量上升。结论：牛磺酸能拮抗高碘所致的发育障碍。     

孕期及哺乳期锌缺乏损伤脑组织微管聚合机理研究

为探讨发育期锌缺乏降低脑组织微管聚合作用的可能机理,作者观察了孕期及哺乳期锌缺乏母鼠及仔代成年时的学习能力以及脑组织α微管蛋白（α－Ｔｕｂ）、β－微管蛋白（β－Ｔｕｂ）和微管相关蛋白２（ＭＡＰ）２表达水平。给昝于孕期及哺乳期ＩＣＲ母鼠喂饲含不同锌水平的实验饲料,饲料锌水平分别为１、５、３０及１００ｍｇ／ｋｇ。在穿梭箱内检测实验仔鼠成年（７０日龄）时的学习能力,然后采用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ技术检     

硒对小鼠高碘性氧化损伤的干预作用研究

目的:研究高碘性甲状腺肿形成的机制并寻求合适的硒干预剂量。方法:140只Balb/c小鼠分为7组:正常组、高碘组(饮水含碘3000μg/L)和5个补硒组(饮水含碘3000μg/L,硒分别为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/L),共喂养16w。放射免疫法测定甲状腺激素水平,测定血浆、肝脏、肾脏和甲状腺组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)水平。结果:高碘组GSH-Px、SOD活性下降,MDA含量升高,而经饮水补充0.2~0.3mg/L硒组各项指标与正常组无显著性差异。结论:高碘会导致小鼠抗氧化能力下降,而经饮水补充0.2~0.3mg/L硒是有效的干预剂量。     

维生素提高动物急性缺氧耐受性的研究

为了研究维生素抗缺氧的作用,采用动物观察了烟酰胺与复合维生素1、2、3组方的抗缺氧效果。结果表明,(1)烟酰胺和复合维生素都能提高减压缺氧小鼠的存活率,显著延长存活时间(P<0.05);(2)烟酰胺能明显提高密闭缺氧大鼠心、肝组织中的NAD~+含量(P<0.0O1);(3)三种复合维生素均能不同程度地降低密闭缺氧大鼠脑组织中乳酸含量(P<0.01)与乳酸/丙酮酸比值(P<0.05)。表明维生素对改善缺氧动物体内物质代谢和提高缺氧耐力都有一定作用。     

Effects of cadmium on 3H-leucine incorporation and cell growth of cultured myocardiocytes]

The effects of cadmium on 3H-leucine incorporation and cell growth of cultured cardiac myocytes were investigated by measuring the incorporation quantity of radioisotope labelled amino-acid and the cell volume on cultured myocardiocytes in neonatal Wistar rats. The results showed that 3H-leucine incorporation was decreased significantly in 1 x 10(-4) mmol/L CdCl2 for 24 h, and was gradually reduced with prolongation. The cell volume was decreased after exposed to Cd for 48 h. The volume was from (2053 +/- 189) microns 3 to (1847 +/- 176) microns 3. There was no significant difference in cell number between the treated group and the control group. These data indicated that cadmium can inhibit the synthesis of protein and the growth on cultured myocardiocytes.     

孕妇碘营养与子女脑发育

碘是合成甲状腺激素（TH）的必需元素,在妊娠期TH参与调控与脑神经发育有关的基因,TH的作用一直沿续到婴幼儿出生后3年。胎儿的TH在妊娠早、中期主要来自孕妇的游离甲状腺素（FT4）,而妊娠晚期胎儿TH合成也依赖于母亲提供碘。来自缺碘地区的研究证实缺碘损伤脑神经发育,并因缺碘程度而呈现出从重到轻的脑发育障碍,即地方性克汀病、亚临床地方性克汀病和普遍的智力损伤,即便是隐匿性碘缺乏,也会增加孕妇TH异常和胎儿脑神经发育受损的风险,而有效的补碘能预防脑神经损伤。孕妇面临的碘过量主要发生在高水碘地区,无论是人群调查还是动物研究均显示脑神经对碘过量可能有较强的耐受性,但孕妇仍要避免长期暴露于高碘环境。个体碘营养评价可选用24 h尿碘检测。由于我国多数地区外环境长期处于缺碘状态,建议孕妇首选安全、有效和方便的碘盐,孕妇的适宜碘营养范围为200～500 μg/d。