甲状腺素联合多奈哌齐对成年期甲状腺功能减退症大鼠海马syntaxin-1的影响

目的 观察甲状腺素( T4 )联合多奈哌齐对成年期甲状腺功能减退症(甲减)大鼠的海马内突触前膜相关蛋白1 (syntaxin-1)表达的影响,探讨甲减脑损伤及可能的恢复机制. 方法 44只SD大鼠随机分为4组:对照组、甲减组、T4替代治疗组及T4和多奈哌齐联合治疗组. 通过饮水给予丙基硫氧嘧啶0. 05%建立成年期大鼠甲减模型共6 周. 第5周开始,对照组腹腔注射等量生理盐水, T4替代治疗组每日给予左旋甲状腺素(L-T4) 6 μg/100 g 体重(BW)腹腔注射,联合治疗组每日给予6 μg/100g BW L-T4腹腔注射及饮用水中加入0. 005%多奈哌齐. 采用免疫组织化学法和West-ern blot法分析4 组大鼠海马syntaxin-1 的表达情况. 结果与对照组比较,甲减组大鼠血清三碘甲状腺原氨酸( T3 )、T4水平减低,促甲状腺激素(TSH)水平升高(P<0. 01),海马内syntaxin-1在CA1、CA3 各层及齿状区多形层( DG-PL)表达显著增加( P <0. 01 );T4 替代治疗后,血清 T3、T4 和TSH水平恢复至正常水平, syntaxin-1 蛋白的表达未完全恢复到对照组水平(P<0. 05);T4联合多奈哌齐治疗后syntax-in-1蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义. 结论 T4联合多奈哌齐治疗可以修复成年期甲减导致的脑损伤.     

成年期甲减大鼠海马Munc18表达及甲状腺素的治疗效应

目的 观察成年期甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠海马神经突触前膜胞内蛋白Munc18表达及常规剂量和大剂量替代治疗后的变化.方法 用丙基硫氧嘧啶(PTU)建立成年期大鼠甲减及治疗模型,放射免疫法测定血清甲状腺素水平,免疫组织化学法观察Munc18在大鼠海马结构的表达与分布.结果 与正常对照组比较,甲减大鼠血清T3、T4水平减低,差异有统计学意义,常规剂量替代治疗后恢复正常,大剂量替代治疗后升高,差异有统计学意义.免疫组织化学法显示甲减组海马CA3区、齿状回 (DG)和CA1区多形层的Munc18平均光密度值减低,常规剂量替代治疗后,仅DG区分子层平均光密度值减低,大剂量替代治疗后,其差异无统计学意义.结论 成年期甲减可致海马内Munc18蛋白表达减少,常规剂量甲状腺素替代治疗能使其大部分恢复,大剂量替代治疗能全部恢复.     

Synaptotagmin 1在成年期甲减大鼠海马内表达变化及甲状腺素治疗效应

目的 研究成年期甲状腺功能减退症(甲减)大鼠海马突触小体内突触结合蛋白1(syt 1)的表达量及甲状腺素替代治疗后的恢复状况,探讨甲减脑损伤及恢复的分子基础.方法 用丙基硫氧嘧啶(PTU)建立成年期大鼠甲减模型,采用Western blot方法 分析甲减组、小剂量甲状腺素替代治疗组、大剂量甲状腺素替代治疗组、正常对照组大鼠海马内syt 1的表达情况.结果甲减组大鼠血清T3、T4水平显著低于正常对照组(P<0.05);背侧海马突触小体内syt 1的蛋白表达水平显著低于正常对照组(P<0.05).小剂量甲状腺素替代治疗后,血清T3、T4恢复至正常水平;syt1蛋白表达水平与甲减组比较未见明显改变(P>0.05).经大剂量替代治疗后血清T3、T4高于正常;syt1的蛋白表达恢复到正常水平(P<0.05).结论 成年期甲减大鼠海马内syt1蛋白表达降低,甲状腺素治疗能使其恢复,且恢复的程度与甲状腺素的治疗剂量有关,大剂量替代治疗较小剂量效果好.     

甲状腺素联合多奈哌齐对成年期甲减大鼠海马内超微结构及 synaptotagmin-1表达的影响

目的：观察甲状腺素（T4）联合多奈哌齐（DON）治疗对成年期甲状腺功能减退症（简称甲减）大鼠海马内超微结构及突触结合蛋白 synaptotagmin-1（syt-1）表达的影响。方法饮0．05％丙基硫氧嘧啶（PTU）水建立成年期大鼠甲减模型共6周,第5周起,T4治疗组给予腹腔注射 T46μg／100 g 体重、DON 治疗组饮0．005％ DON 水,联合治疗组给予 T4＋DON 治疗,对照组及甲减组每日腹腔注射等量生理盐水。采用放射免疫法测定血清甲状腺素水平,透射电镜观察海马内超微结构,Western blot 方法分析海马内 syt-1的表达水平。结果甲减组、DON 治疗组大鼠血清甲状腺激素水平明显降低（P ＜0．01）,T4治疗组、联合治疗组与对照组差异无统计学意义;电镜下甲减大鼠海马内神经元中线粒体呈现明显空泡变性、游离核糖体稀疏、突触结构受损、突触小泡数量减少,T4或 DON 治疗后上述损伤有所改善,而联合治疗恢复后表现最接近对照组;甲减大鼠海马内 syt-1蛋白表达量明显降低（P ＜0．01）,单独 T4或 DON 治疗后表达仍下降（P ＜     

成年期甲减大鼠海马SynaptotagminⅠ表达和替代治疗的效果

目的 探讨成年期甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠海马内突触结合蛋白(SytⅠ)的表达及甲状腺素替代治疗后的恢复状况,探讨甲减脑损伤及恢复可能的分子基础.方法 用丙基硫氧嘧啶(PTU)建立成年期大鼠甲减模型,免疫组织化学方法分析甲减组、替代治疗组、正常对照组大鼠海马内SytⅠ的表达情况.结果 甲减组大鼠血清T3(triiodothyronine, T3)、T4(tetraiodothyronine, T4)显著低于正常对照组(P<0.05);海马CA1、CA3和齿状回(dentate gyrus,DG区)SytⅠ的蛋白表达水平显著低于正常对照组(P<0.05或P<0.01).甲状腺素替代治疗后,血清T3、T4恢复至正常水平(P>0.05);SytⅠ的蛋白表达水平在DG区分子层明显增加,达到正常水平(P>0.05);其他区域与甲减组比较无增加,仍明显低于正常对照组(P<0.05).结论 成年期甲减降低海马内SytⅠ蛋白表达,短期替代治疗可使血清甲状腺素恢复正常,部分SytⅠ的蛋白表达恢复.     

成年期甲减大鼠旷场行为的改变及左旋甲状腺素的治疗效应

目的 研究成年期甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠在新环境(旷场)中的探究活动、情绪反应和空间认知能力,同时观察比较应用常规剂量左旋甲状腺素替代治疗后大鼠旷场行为的改变.方法 30只雄性SD大鼠随机均分为对照组、甲减组、左旋甲状腺素替代治疗组(替代治疗组).用丙基硫氧嘧啶饮水共6周建立成年期大鼠甲减模型.第5周起,替代治...     

成年期甲减对大鼠额叶SNAP-25蛋白表达的影响

目的 研究成年期甲状腺功能减退症(甲减)大鼠额叶内突触相关蛋白SNAP-25的表达,探讨甲减脑损伤的分子机制.方法 用丙基硫氧嘧啶(PTU)建立成年期大鼠甲减模型,采用放射免疫法测定甲减组和正常对照组大鼠的血清甲状腺素水平,免疫组化方法 分析两组大鼠额叶内SNAP-25蛋白的表达情况.结果 甲减组大鼠血清T3、T4水平显著低于正常对照组(P＜0.01、P＜0.05);额叶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、V层SNAP-25蛋白的表达水平显著高于正常对照组(P＜0.05、P＜0.01).结论 成年期甲减大鼠额叶SNAP-25蛋白表达增多.     

甲状腺素治疗对妊娠合并甲减患者妊娠结局及子代的影响

目的 探讨妊娠合并甲状腺功能减退症（甲减）患者经左旋甲状腺素钠片治疗后对妊娠结局及子代智力、发育的影 响。 方法 选择建卡、孕检并分娩的 50 例妊娠合并甲减患者作为观察组,均给予左甲状腺素钠片治疗,同时选择同期甲状腺功能正常 孕妇 50 例作为对照组。比较两组孕妇并发贫血、妊娠期高血压疾病及早产情况,以及胎儿宫内窘迫、低体重儿、畸形和死胎情况,并观察 比较婴幼儿 12 个月及 24 个月的智力和发育情况。 结果 观察组合并贫血和早产发生率均高于对照组（均 P＜0.05）,而合并高血压疾 病比例略高于对照组,但无统计学差异（P ＞0.05）,而两组间胎儿宫内窘迫发生率、低体重儿的百分率以及 12、24 个月的智力指数和 24 个月的发育指数间均无统计学差异（均 P ＞0.05）。 结论 重视妊娠前和妊娠早期的甲状腺功能筛查,及时发现甲减并予甲状腺素治 疗,可大大降低不良妊娠结局的风险及对子代智力、发育不良的影响。     

甲状腺激素联合多奈哌齐治疗对成年甲减大鼠额叶SNAP-25的影响

目的 研究甲状腺激素联合多奈哌齐治疗对成年甲减大鼠额叶突触相关蛋白25(SNAP-25)的表达的影响.方法 将50只成年健康SD大鼠随机分为5组:对照组(CON)、甲减组(Hypo)、多奈哌齐组(DON)、左甲状腺激素钠组(L-T4)、左甲状腺激素钠联合多奈哌齐组(L-T4+DON);除对照组外,其余4组通过含0.05℅丙基硫氧嘧啶(PTU)饮用水喂养6周诱导成年期甲减大鼠模型;DON组、L-T4组、L-T4+DON组分别予多奈哌齐、左甲状腺激素钠、左甲状腺激素钠联合多奈哌齐治疗2周后,放射免疫法测定血清甲状腺激素水平,免疫组化法、Western blot法观察大鼠额叶SNAP-25的表达.结果 与CON组相比,Hypo组大鼠血清三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)水平显著降低(P<0.01),促甲状腺激素(TSH)显著上升(P<0.01);额叶SNAP-25的表达水平显著高于CON组(P<0.05).L-T4组与CON组比较,血清T3、T4、TSH差异无统计学意义;SNAP-25的表达升高(P<0.05).DON组与CON组比较,血清T3、T4、TSH差异有统计学意义(P<0.01);SNAP-25的表达升高(P<0.05).L-T4+DON组与CON组比较,血清T3、T4、TSH差异无统计学意义;SNAP-25的表达差异无统计学意义.结论 甲状腺激素联合多奈哌齐治疗能有效地恢复成年甲减大鼠额叶SNAP-25的表达.     

甲状腺素联合多奈哌齐对成年期甲状腺功能减退症大鼠额叶乙酰胆碱、munc-18的影响

目的：观察甲状腺素联合多奈哌齐对成年期甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠额叶内乙酰胆碱含量以及munc-18表达的影响,探讨甲减脑额叶损伤及恢复的可能分子机制。方法采用给予含0．05%丙基硫氧嘧啶的饮用水6周建立大鼠甲减模型。自第5周起,给予多奈哌齐、甲状腺素或甲状腺素联合多奈哌齐治疗2周,采用放射免疫法检测血清甲状腺激素水平,碱性羟胺比色法测定额叶内乙酰胆碱含量,免疫组化法检测额叶内munc-18的分布与表达。结果甲减组、多奈哌齐治疗组大鼠血清三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)水平显著减低、促甲状腺激素( TSH)水平明显增加( P<0．01),甲状腺素治疗组、联合治疗组T3、T4、TSH水平与正常对照组相比差异无统计学意义;甲减组大鼠额叶内乙酰胆碱含量下降(P<0．05),多奈哌齐治疗组、甲状腺素治疗组、联合治疗组乙酰胆碱含量均恢复至正常水平,其中联合治疗组有进一步恢复趋势;甲减组、多奈哌齐治疗组大鼠munc-18在额叶内Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ层表达下降(P<0．05)。其中,以Ⅲ/Ⅴ层下降最为显著(P<0．01),甲状腺素治疗组munc-18表达仍下降(P<0．05),联合治疗组额叶内munc-18表达正常。结论多奈哌齐可以改善甲状腺功能减退引起的额叶内乙酰胆碱含量改变;甲状腺素联合多奈哌齐治疗有利于成年期甲状腺功能减退造成的额叶内胆碱含量改变和突触蛋白损伤的恢复。     

NMDA受体亚单位NR1在离体人神经干细胞中的表达

目的研究离体培养的人海马神经干细胞（NSCs）中NMDA受体亚单位NR1的表达。方法分离培养胎龄8-12周人胚脑海马神经干细胞,对NSCs进行Nestin和分化鉴定。用免疫细胞化学、Western blot免疫印迹和RT—PCR等方法检测原代、传代1次、传代2次的人胚胎海马NSCs中NR1蛋白和mRNA的表达。结果在孕8～12周人胚脑海马分离培养的NSCs中,NMDA受体亚单位NRI免疫细胞化学反应呈阳性,该受体亚单位的蛋白和mRNA均被检测钊。结论体外培养的早期人胚胎海马NSCs能稳定表达NMDA受体亚单位NR1。     

高压氧对正常大鼠海马神经元结构的影响

目的　观察不同高压氧及停止高压氧处置后 2 0d大鼠海马神经元结构的变化。方法　将正常成年大鼠暴露于 2 .5ATA高压氧环境中 ,每日 1次 ,每次给氧 30min× 2 + 10min ,连续 1～ 3个疗程 (10次为1疗程 )。结果　高压氧 1疗程时海马组织内毛细血管与神经元结构未见明显变化 ,2疗程时部分线粒体稍肿胀 ,3疗程时线粒体进一步肿胀、嵴模糊 ,部分粗面内质网轻度扩张、脱颗粒 ,毛细血管扩张 ,停高压氧处置后 2 0d上述变化恢复正常。高压空气组结构无明显改变。结论　高压氧可引起海马组织毛细血管扩张与神经元超微结构损伤 ,这种变化主要与高氧有关 ,非高气压所致 ,而且是可逆的。     

重组免疫毒素hlL-2-Luffin P1的构建及表达

目的构建人分泌型IL-2与免疫毒素Luffin P1的重组基因原核表达载体,并对其产物进行鉴定及纯化.方法采用基因工程原理,将IL-2-Luffin P1的重组基因片段克隆入表达载体pET20b( )中,经酶切及DNA序列测定鉴定正确,转化表达宿主菌Origami(DE3)pLysS中,经IPTG诱导表达含His标签的融合蛋白-重组免疫毒素hlL-2-Luffin P1.结果成功构建了免疫毒素表达载体pET20b( )-hIL-2-Luffin P1,获得纯化的重组免疫毒素,并经Western blot鉴定正确.结论hIL-2-Luffin P1的成功构建,为进一步研究它在抗移植排斥中的作用奠定了基础.     

GluR1在大鼠海马结构的表达

目的：观察AMPA受体亚单位GluR1在大鼠海马的表达．方法：在多聚甲醛固定的海马切片上，用免疫组化SP法观察GluR1在正常成年大鼠海马结构的表达与分布。结果：GluR1在正常大鼠海马有广泛表达，在CA3区的起层、锥体细胞层和透明层及齿状回门区内的中间神经元表达最强，阳性表达在CA1区主要见于神经元的胞膜和突起，而在CA3区还可见于胞质。结论：GluR1在海马CA1区和CA3区的表达不同，这种差异可能与海马不同区域具有不同功能有关。     

实验性肝纤维化过程中基质分解素-1酶原的表达变化

目的：研究实验性肝纤维化过程中基质分解素-1(MMP-3)酶原蛋白表达的动态变化。方法：建立四氯化碳中毒性大鼠肝纤维化模型，采用半定量Western免疫印迹方法，对肝纤维化不同阶段肝内MMP-3的酶原蛋白的表达水平进行了检测。结果：在正常大鼠肝组织中有MMP-3的酶原表达。在肝纤维化发生发展过程中MMP-3酶原蛋白表达水平逐渐增强，至肝纤维化中期到达最高峰，到肝纤维化晚期及肝硬化阶段其表达较中期下降，但仍高于正常对照水平。结论：MMP-3在肝纤维化的发生、发展直至肝硬化形成过程中可能发挥着重要作用。     

小剂量3-硝基丙酸预处理后鼠脑海马脑源性促红细胞生成素的表达

目的：探讨小剂量3-硝基丙酸(3-nitropropionic acid，3-NPA)预处理后鼠脑海马脑源性促红细胞生成素(Epo)的表达变化，揭示3-NPA预处理的机制。方法：雄性沙土鼠48只，随机分为正常对照组(n=12)和3-NPA预处理组(n=36)。3-NPA预处理组腹腔一次性注射3-NPA 5mg／kg后1d、3d、5d，应用免疫组织化学和免疫印迹法观察海马脑源性Epo的表达变化。结果：腹腔注射3-NPA后ld、3d，海马区可检测到脑源性Epo的表达，腹腔注射3-NPA后5d，海马区Epo的表达极低，正常对照组无Epo表达。结论：脑源性Epo的表达变化和3-NPA预处理诱导脑缺血耐受的时间相一致，提示Epo的表达与小剂量3-NPA预处理相关。