抗酸-免疫组化双重染色法在结核病研究中的应用

在同一石蜡切片(结核病尸检标本及实验动物标本)上作抗酸-免疫组化双重染色,包括抗酸-HRP-SPA法和抗酸-IGSS等两种双重染色法,获得满意结果.应用这种染色能清楚地看到BCG抗原与抗酸菌,以及两者与结核病变的关系,减少了分别对照两张切片产生的误差和单用一种染色法的漏诊.该法前后两种染色互不干扰,反差分明,效果好,易于观察.     

肉芽肿性炎组织中结核分枝杆菌检出方法的对比分析及应用价值

目的 探讨肉芽肿性炎组织中结核分枝杆菌常用两种检查方法[抗酸染色和荧光定量PCR(FQ-PCR)]检出效能的大小，与其他实验室检测指标的关系及临床应用价值。方法 对373例石蜡包埋的肉芽肿性炎组织行抗酸染色和FQ-PCR检测，比较两者在各种病检组织中的阳性检出率、敏感度和特异度等方面的差异，同时分析它们与其他实验室检测指标的关系。结果 373例肉芽肿性炎的病例组织中，抗酸染色阳性率为19.57%,敏感度和特异度分别为60.38%、96.63%;结核分枝杆菌DNA(TB-DNA)的阳性率为27.35%,敏感度和特异度分别为94.34%、99.25%;在确诊结核病的病例中，CT影像、涂片抗酸染色、T-SPOT.TB、γ-干扰素释放试验(IGRAs)、TB特异性细胞免疫反应等影像和实验室检查的阳性率分别为82.47%、6.45%、96.00%、80.00%、82.35%。结论 抗酸染色和TB-DNA两者在肉芽肿性炎组织中的联合检测对早期确诊结核病有重要意义，其中TB-DNA有较高的检出率和特异性，与其他实验室检测指标一起可以提高结核分枝杆菌的检出率。     

细针吸取细胞学结合PCR法在淋巴结结核诊断中的应用及其与传统微生物检测方法的比较

目的研究对比162例淋巴结结核的诊断方法。方法选取浙江省金华市中心医院于2008年1月~2010年6月经细针穿刺细胞学诊断淋巴结结核或可疑结核的病例,穿刺组织同时进行抗酸染色、细菌培养及PCR扩增检测结核分枝杆菌DNA(TB-DNA)。结果 TB-DNA阳性117例,阳性率为72.2%;抗酸染色阳性71例,阳性率为43.8%;细菌培养阳性99例,阳性率为61.1%;在61例FNAC直接诊断结核的病例,PCR及细菌培养阳性率明显高于抗酸染色(χ2值均为13.739,P<0.01),在101例FNAC诊断为可疑结核或不排除结核的病例,PCR阳性率高于细菌培养及抗酸染色(χ2值分别为6.706、13.612,P均<0.01);抗酸染色及细菌培养阳性的病例TB-DNA均阳性;FNAC结合PCR结果可明确诊断80.9%结核。结论 FNAC是诊断淋巴结结核简便有效的方法 ,PCR扩增高效、快速、敏感、特异,可作为FNAC诊断结核很好的补充,FNAC结合PCR技术是较好的淋巴结结核的诊断方法。     

三种结核检测方法临床应用评价

目的评价目前三种检测手段在结核病临床诊断中的应用价值。方法对确诊的280例结核病人进行痰涂片抗酸染色和两种结核抗体检测,并进行比较分析。结果 280例结核病人三种方法联合检测的阳性率为82.85%(232/280)。痰涂片抗酸染色的阳性率为40.00%(112/280),胶体金法(TB-DOT)阳性检出率为74.64%(209/280),免疫层析法(TB-CHECK-1)阳性检出率为50.71%(142/280)。痰涂片抗酸染色的阳性率与TB-DOT、TB-CHECK-1比较,差异均有统计学意义(P<0.05),两种结核抗体检测方法的阳性检出率更高。而TB-DOT和TB-CHECK-1两种方法的阳性率比较差异亦有统计学意义(P<0.05),TB-DOT的阳性检出率更高。结论三种方法联合用于临床结核病检测,可以将痰涂片抗酸染色的阳性率提高1倍。TB-DOT的检测灵敏度最高。     

L型结核菌致耳后淋巴结结核16例误诊报告

对 1990～ 1995年经病理诊断为非特异性淋巴结炎的 16例患者淋巴结重新切片复查 ,用经典抗酸染色法 ( Ziehl- Neelsen ZN)、改良抗酸染色法 ( Intensifed kinyoun IK)和免疫组化染色法进行。结果发现 11例牛型结核卡介菌 ( BCG)抗体免疫组化染色阳性 ,13例抗酸染色 L型阳性。对16例患者耳后淋巴结抗酸菌 L型感染的病变特征及误诊的可能原因进行初步探讨     

结核灶内抗酸菌L型检出方法的研究和意义

本文应用Ｉｔｅｎｆｉｓｅｄ ｋｉｎｙｏｕｎ（ＩＫ）改良抗酸染色，Ｚｉｅｈｌ－Ｎｅｅｌｓｅｎ（ＺＮ）经典抗酸染色和Ｂａｃｉｌｌｕｓ Ｃａｌｍｅｔｔｅ Ｇｕｅｖｉｎ（ＢＣＧ）抗体免疫组化染色等方法对１８１例结核病组织切片进行了结核杆菌的检测。结果ＩＫ抗酸染色法Ｌ型结核菌检出率为６７．４％，ＺＮ法为２９．８％，两者差异有显著性。两种抗酸染色法均证明结核灶内主要（６７．４％、２９．８％）为抗酸菌Ｌ型；杆菌     

金胺O荧光染色与抗酸染色用于石蜡包埋组织结核杆菌检测的对比分析

目的比较金胺O荧光染色法与抗酸染色法在石蜡包埋组织中结核杆菌检测的差异。方法收集病理诊断为结核病或符合结核的石蜡包埋组织121例,每1例样本连续切片,同时采用金胺O荧光染色法和抗酸染色法进行检测。结果荧光染色组83例阳性,阳性率为68.60%,抗酸染色组45例阳性,阳性率为37.19%,对每1例标本两种染色的结果进行配对t检验,结果有非常显著性差异(P<0.01)。结论金胺O荧光染色法阳性检出率高于抗酸染色,尤其是在那些含菌量少的标本。     

声门上型喉癌N0颈淋巴结微转移灶的免疫组化检测

目的探讨免疫组化法对声门上型喉癌颈淋巴结微转移灶的检出率。方法选择25例原发病灶病理证实为声门上型喉癌患者共150枚颈淋巴结样本,均经10%多聚甲醛固定,常规石蜡包埋,4μm连续切片。对淋巴结石蜡包埋组织行常规切片两张,一张行HE染色,一张行CK19单克隆抗体免疫组化染色。结果4例（150枚淋巴结）共中5枚淋巴结中发现微转移灶。结论免疫组化法对淋巴结微转移灶的检测比临床常规HE染色病理检查更敏感。     

结核病人抗酸杆菌阳性检出率分析

目的：了解不同结核病人标本中抗酸杆菌栓出情况,并对阳性检出率进行分析.方法：涂片法,染色均采用台湾贝索公司抗酸染液进行染色,在显微镜下至少搜索300个视野.结果：肺结核患者的抗酸杆菌检出率最高（36.65%）,高于肺外结核;抗酸杆菌总阳性检出率男性高于女性（P＜0.05）.结论：标本采集和涂片质量是提高涂阳率的关键;肺结核患者痰菌涂阳率高于三分之一以上.     

组织切片抗酸染色法的改良和应用体会

目的 探讨在组织切片病理诊断中抗酸染色方法的改良和应用,提高结核病的诊断率.方法 选取病理诊断为肺结核的患者60例,每例选出病变蜡块1块,每块蜡块切片2张,1张用传统Ziehl-Neelsen抗酸染色法染色,另1张用改良抗酸染色法染色,比较两种染色方法的阳性率和染色效果.结果 60例患者中,应用传统抗酸染色方法检出抗酸杆菌28例,阳性率为46.67%,应用改良抗酸染色方法检出抗酸杆菌49例,阳性率为81.67%.两种方法检测结果阳性率比较差异有显著统计学意义(P<0.01);与传统抗酸染色方法相比,改良抗酸染色方法检出的结核杆菌细菌量多,菌体粗且着色深.结论 改良的抗酸染色法提高了结核杆菌的检出率,值得临床推广应用.     

人肝癌组织中黄曲霉毒素和肝炎病毒基因检测分析

以肝细胞场（ＨＣＣ）患者手术切除标本为研究材料，采用高效液相色谱荧光法检测组织中的黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１），嵌套式多聚酶链反应技术检测组织中的ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。在６９．２％（１８／２６例）的ＨＣＣ患者中检出了３．６５－８９．０６ｎｇ不等的ＡＦＢ１／ｇ肝组织；ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ检出率分别为９０．５％（５７／６３例）和１２．７％（８／６３例）。其中，ＡＦＢ１和ＨＢＶＤＮＡ重叠检出率为６１．５％（１６／２６例），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ重叠检出率为７．９％（５／６３例），４例ＨＣＣ患者重叠检出了ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ；同步检测对照组５例，无１例出现这种情况。结果表明，上述３种因素均与人类肝癌密切相关，并且可能存在协同致癌效应。     

γ-干扰素释放试验在肺结核和肺外结核诊断中的应用

目的:探讨γ-干扰素释放试验(IGRA)在肺结核和肺外结核诊断中的应用价值。方法:收集273例结核病患者与45例健康体检者肝素钠抗凝全血,采用国产IGRA试剂检测其血浆γ-干扰素含量,同时与结核菌素皮肤试验(TST)结果进行平行分析比较;采用抗酸染色(AFB染色)法对结核病患者痰液标本进行染色。结果:国产的IGRA试剂和TST实验的敏感性分别为85.35%和72.53%,特异性分别为86.54%和53.33%,阳性预测值分别为97.08%和90.41%,阴性预测值分别为52.94%和24.24%,准确性分别为85.22%和69.81%。两种方法对肺结核的检出率分别为85.71%(180/210)和74.76%(157/210),二者相比较,差异有统计学意义(χ2=7.943,P<0.01);两种方法对肺外结核的检出率分别为84.13%(53/63)和68.25%(43/63),二者相比较,差异也有统计学意义(χ2=4.375,P=0.036);但两种方法各自对肺结核与肺外结核的检测效果无显著差异。210例肺结核患者中AFB阳性73例,AFB阴性者137例,其中AFB阳性肺结核患者中IGRA阳性率为89.04%(65/73),AFB阴性肺结核患者阳性率为83.94%(115/137);肺外结核63例患者AFB均阴性,IGRA阳性率为84.13%(53/63)。结论:IGRA比TST对诊断结核病有较高的敏感性与特异性,尤其是对AFB阴性的肺结核和肺外结核有80%以上的检出率,有很好的临床应用前景。     

一步法检测AFB和斑点法检测LAM-IgG诊断结核性脑膜炎

目的 :评估联合应用一步法检测抗酸杆菌 (AFB)和斑点法检测抗阿拉伯糖甘露糖脂 Ig G抗体(L AM- Ig G)方法诊断结核性脑膜炎 (结脑 )的价值。方法 :结脑患者为实验组 ,采集脑脊液本本 (CSF)为标本 ,应用一步法检测 AFB、斑点法检测 LAB- Ig G。结果 :实验组 ,一步法检测 AFB阳性率为 6 7.4 %(6 2 /92 )、斑点法检测 LAM- Ig G阳性率为 5 7.6 % (5 3/92 )、两者联检的阳性率为 71.7% (6 6 /92 ) ,较常规方法的阳性率有显著性提高 (ρ<0 .0 0 1)。结论 :对 CSF标本联合应用一步法检测 AFB和斑点法检测LAM- Ig G,在诊断结脑方面有较高的应用价值     

VIRAL ETIOLOGY OF CERVICAL CARCINOMA HUMAN PAPILLOMA VIRUS AND HERPES SIMPLEX VIRUS TYPB 2

The possible role of human papilloma virus (HPV) and herpes simplex virus type 2 (HSV-2) in the viral etiology of cervical carcinoma was investigated a series of cervical lesions were studied for the presence of HPV and HSV-2 DNA sequences as well as HPV and HSV-2 antigens by DNA dot blot hybridization technique and high-specificity PAP staining method. The results obtained were correlated with the histologic diagnosis. HPV 16 DNA sequences detected in cervical carcinoma biopsies were 43%, whereas HSV-2 DNA sequences were only 8%. HPV antigens detected in cervical dysplasia were 31%, whereas those detected in cervical carcinoma and cervicitis were the least. HSV-2 antigens were detected in chronic cervicitis, dysplasia and cervical carcinoma. The difference in positive rate between the cervical carcinoma and cervicitis groups was statistically significant, (chi-square test, P less than 0.01). No HPV DNA and HSV-2 DNA sequences were found in the same specimen, although both HPV DNA sequences and HSV-2 antigens were found in the same sample in some cases. The results indicate that the viral etiology of cervical carcinoma may be multifactorial. Both HSV-2 and HPV may be associated with cervical carcinoma, but the mechanisms involved are different. HSV-2 and HPV may act synergistically in the development of cervical carcinoma.     

黄曲霉毒素的酶联免疫测定法及其在肝癌流行病学研究中的应用评价

作者对黄曲霉毒素(Aflatoxin,AFT)B_1和M_1(AFB_1和AFM_1)的酶联免疫测定法(ELISA),AFB_1摄入量和尿中AFM_1排出量与原发性肝癌死亡率间的关系;AFB_1-辣根过氧化物酶(AFB_1-HRP)的合成及其应用于AFB_1和AFM_1的ELISA检测进行了研究。指出ELISA对样品中AFM_1、AFB_1测定最佳范围分别为0.5～10、0.5～21ng/ml。 与薄层层析法(TLC)相比,ELISA有检出率高、重复性好及专一的特点。用C_(18) Seppak处理样品不仅有效且简便快速。用ELISA检查了220份食品和230份尿液样本,证明了AFT的摄入和排泄间有很好的正相关。提示在流行病调查中,尿中AFM_1可作为人群AFB_1摄入的指标。     

结核分枝杆菌rpoB基因和突变检测技术在结核性脑膜炎中的诊断价值

目的 评价结核分枝杆菌rpoB基因和突变(GeneXpertMTB/RIF)检测技术对结核性脑膜炎(tuberculous meningitis,TBM)的诊断价值。方法 回顾性分析2019年1月至2020年6月陕西省结核病防治院收治的同时采用抗酸杆菌(AFB)涂片镜检(简称“AFB涂片”)、BECTECMGIT960液体培养(简称“MGIT960培养”)和GeneXpertMTB/RIF(简称“GeneXpert”)检测的142例疑似TBM患者,其中确诊TBM患者82例、非TBM患者60例。以临床确诊TBM患者为参考标准评价AFB涂片、MGIT960培养和GeneXpert检测对TBM的诊断效能。结果 AFB涂片、MGIT960培养和GeneXpert检测的敏感度分别为3.7%(3/82),24.4%(20/82)和40.2%(33/82);特异度均为100.0%(60/60);符合率分别为44.4%(63/142),56.3%(80/142)和65.5%(93/142)。结论 AFB涂片技术在诊断TBM时的敏感度很低,MGIT960培养检测技术在诊断TBM时的敏感度较高,而GeneXpert检测技术在诊断TBM时的敏感度更高。     

乳腺某些良恶性疾病CEA免疫组织化学的定位研究

本实验研究用 PAP 免疫组织化学方法观察了84例乳腺癌和24例乳腺良性病变组织石蜡切片中 CEA 的存在情况及其分布形式。结果表明:乳腺癌69例为阳性,阳性率为82.1%,导管浸润癌比特殊类型癌 CEA 阳性率为高(P<0.01).CEA 的分布呈两种形式,一种为胞质为主型,多见于导管特殊类型癌,另一种为胞膜为主型,多见于特殊类型癌。8例伴有导管上皮增生的乳腺结构不良症,增生性导管上皮全部为 CEA 阳性,其余良性乳腺疾病均为 CEA阴性。乳腺癌 CEA 阳性与患者年龄、间质淋巴细胞浸润、组织学分级以及组织在蜡块中的保存年限(26年内)无明显关系.乳腺癌间质弹力纤维增生组比无弹力纤维增生组 CEA 阳性率为高(P<0.01),但与弹力纤维增生程度无关。     

人麻风杆菌在裸鼠中的增殖

本文报告了麻风杆菌在裸鼠(NIH/nu/nu)体内的大量增殖。麻风杆菌经足垫皮下接种(1.0×10~4)后,菌在裸鼠足垫中出现持续增高。至感染后21个月,足垫乎均菌量大于1.08×10~9,菌数增长了108000倍,每克组织含菌量大于5.4×10~(10);而平行接种的CFW系免疫正常小鼠的足垫平均菌量为3.68×10~?,表现为局限性增殖.麻风菌在裸鼠体内的生长对数期明显延长.对裸鼠体内增殖的抗酸杆菌(AFB)进行鉴定的结果表明;①不能在可培养分枝杆菌的培养基上生长;②吡啶提取试验失去抗酸性;③在鼠足垫试验中呈典型的麻风杆菌生长曲线,并对抗麻风药物如氨苯砜,利福平完全敏感。这些实验结果证明了在裸鼠体内增殖的AFB是人麻风杆菌. 从受感染的裸鼠组织病理学检查所见.被感染了的麻风杆菌也能播散到其他脏器和非接种部位;又从接种麻风菌的足垫部位的组织切片中见许多大小菌团;呈现瘤型麻风病变. 上述结果证明了裸鼠实验麻风模型的建立是成功的.对今后开展麻风病的防治研究工作更有促进作用.     

窄带成像联合自体荧光支气管镜在重度吸烟人群中筛查早期中央型肺癌的研究

目的为了提高中央型肺癌的早期检出率改善预后,寻找一种补充检查方案。方法选取我院2016年1月～2019年12月符合本研究要求的重度吸烟者1821例,使用窄带成像联合自体荧光支气管镜技术与常规低剂量CT检查,比较两者早期中央型肺癌的检出率;同时比较普通白光支气管镜与自体荧光支气管镜(AFB)、窄带成像(NBI)联合自体荧光支气管镜三者间的阳性率与病理学阳性率的差别。结果 (1)共入组患者1821例。入组患者中,胸部CT报告气道可疑结节或占位者共69例,经气管镜检查后68例未发现CT提示部位新生物,1例为气道异物;16例病理阳性的患者,胸部CT检查均为阴性结果。(2)入组患者中发现普通白光支气管镜下黏膜异常9例(0.49%),AFB异常27例(1.48%),AFB、NBI均异常19例(1.04%),病理阳性16例(0.88%)。在27例AFB异常患者中,病理阳性16例,病理阴性11例,阳性率为59.30%;在19例AFB、NBI均异常患者中,病理阳性15例,阴性4例,阳性率为78.95%,因阳性例数少,统计学未得到显著性差异。结论低剂量螺旋CT对于早期中央型肺癌及癌前病变的筛查效能低,自体荧光支气管镜联合窄带成像技术应能弥补CT的不足,提高中央型肺癌的早期诊断率。