尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A1和2B7基因多态性与结直肠癌的相关性研究

目的测定我国健康人与结直肠癌患者尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（UGT）1A1和UGT2B7基因多态性分布及UGT1A1和UGT2B7基因多态性与结直肠癌的相关性。方法提取335例健康受试者和348例结直肠癌患者血样标本的DNA,确定UGT1A1和UGT2B7基因型,研究UGT1A1和UGT2B7基因多态性分布与结直肠癌的相关性。结果健康受试者和结直肠癌患者的UGT1A1＊6基因突变频率分别为8.07%和16.52%,有极显著性差异（P〈0.001）,OR值（95%CI）为3.34（2.12~6.72）;健康受试者组和结直肠癌患者组UGT1A1＊28的基因突变频率分别为7.32%和11.50%,有显著性差异（P〈0.05）,OR值（95%CI）为1.73（1.21~1.84）;表明UGT1A1＊28基因变异与结直肠癌有一定关联;UGT2B7-1和UGT2B7-2的基因突变频率两组比较均无显著性差异。结论 UGT1A1＊6和UGT1A1＊28基因变异与结直肠癌相关联,UGT1A1＊6基因变异可能增加结直肠癌的发病风险,是结直肠癌高危易感基因。     

UGT1A3基因多态性与高血压肿瘤等疾病关系的研究

目的研究UGT1A3基因多态性分布与高血压、肿瘤等疾病的关系。方法用焦磷酸测序法对UGT1A3单核苷酸多态性位点进行基因分型,研究UGT1A3基因多态性分布与高血压病、肿瘤和糖尿病的关系。结果高血压病和糖尿病患者组的UGT1A3突变基因频率与健康受试者组比较无显著性差异;肿瘤患者组UGT1A3-1、UGT1A3-2、UGT1A3-3和UGT1A3-4突变基因频率显著高于健康受试者组。提示UGT1A3-1、UGT1A3-2、UGT1A3-3和UGT1A3-4基因突变可能是肿瘤的易感基因。结论携带UGT1A3-1、UGT1A3-2、UGT1A3-3和UGT1A3-4突变基因者可能易患肿瘤;UGT1A3基因突变与高血压病和糖尿病无关。     

LC-MS-MS法测定人血浆中米格列奈浓度

目的建立液质联用色谱法（LC-MS-MS）测定人血浆中米格列奈（mitiglinide）浓度。方法空白血浆加米格列奈,用乙腈做为沉淀剂,取上清液用于LC-MS-MS分析。分析柱为日本资生堂CAPCELL PAK C18 MG5,μm150 mm×2.0 mm（ID）柱,流动相为乙腈-10 mmol/L乙酸铵（0.1%氨水）分段洗脱（0～2 min 10∶90,2.1～8 min 90∶10,8.1～10 min 10∶90）,流速为0.3 ml/min;质谱条件：电喷雾离子化电离源ESI负离子检测,喷雾电压（SP）4000 kV,鞘气（SGP）流速30 Arb,辅助气（AGP）流速0 Arb,毛细管温度（TEM）314℃;米格列奈和内标瑞格列奈的碰撞能量均分别为21 EV、23 EV;选择反应监测（SRM）分别测定米格列奈和内标瑞格列奈负离子m/z 314→189和m/z451→379.2。结果米格列奈在2.5～2000μg/L检测浓度范围内呈良好线性关系（R〉0.99）,最低定量限（LLOQ）为2.5μg/L,绝对回收率在70%以上,高中低3种浓度的日内和日间RSD≤15%。结论该方法操作简便、灵敏、准确,适用于临床米格列奈的血药浓度监测及其药动学研究。     

CYP2C9基因多态性对美洛昔康代谢动力学的影响

目的研究CYP2C9基因多态性对美洛昔康代谢动力学的影响。方法用焦磷酸测序法对24名健康受试者进行CYP2C9基因多态性检测;用LC-MS-MS法测定美洛昔康的血药浓度;用DAS2.0软件进行房室拟合及药代动力学参数计算,分析美洛昔康人体药代动力学特征,并比较CYP2C9*3突变型和野生型个体对美洛昔康代谢动力学特性的差异。结果 24名受试者中CYP2C9*3等位基因有2种表型(A/A,A/C),其中2名受试者为CYP2C9*3杂合突变型(A/C),其余为野生型(A/A);CYP2C9*3代谢美洛昔康的酶活性A/A﹥A/C。结论 CYP2C9基因多态性对美洛昔康的代谢具有显著影响,CYP2C9*3代谢美洛昔康的酶活性是A/A﹥A/C。检测突变型个体对指导美洛昔康临床个体化用药具有重要意义。     

依据CYP2C19基因型调整首次PCI术后患者氯吡格雷给药剂量初步研究

目的本研究旨在探讨CYP2C19基因多态性与二磷酸腺苷（ADP）抑制率之间的关系,以期能够早期预测氯吡格雷抵抗,为氯吡格雷的个体化用药提供参考依据。方法选取127例诊断为急性冠脉综合症并首次接受经皮冠状动脉介入治疗术（PCI）的患者为研究对象,采取血标本并提取外周血基因组DNA,将提取后的总DNA进行PCR扩增,扩增产物经纯化后进行双向测序确定基因型,根据不同的基因型对患者进行分组;使用血栓弹力图测定ADP诱导的血小板聚集抑制率;多组均数间比较采用方差分析,多组均数间两两比较采用LSD-t检验,所有数据应用SPSS 13.0软件进行统计学处理。结果 127例患者中各基因型所占比例：CYP2C19＊1/＊1为41.7%,CYP2C19＊1/＊2为35.4%,CYP2C19＊1/＊3为11.8%,CYP2C19＊2/＊2为5.5%,CYP2C19＊2/＊3为5.5%,CYP2C19＊3/＊3为0%。携带正常基因纯合子（CYP2C19＊1/＊1）的A组患者与携带有正常基因与突变基因杂合子（CYP2C19＊1/＊2或CYP2C19＊1/＊3）的B组患者ADP抑制率并无显著性差异,携带突变基因纯合子或杂合子的C组患者与B组和A组均有显著性差异（P〈0.05和P〈0.01）。结论首次PCI术后携带CYP2C19突变基因纯合子或杂合子（CYP2C19＊2/＊2、CYP2C19＊3/＊3或CYP2C19＊2/＊3）的患者建议使用联合抗凝治疗。     

中国人COMT,DBH,DAT 和MAOB基因多态性与帕金森病易感性的关系

目的：探讨4种多巴胺递质代谢相关蛋白COMT，DBH，DAT和MAOB基因的多态性与上海地区居民帕金森病易感性的关系。方法：用聚合酶链反应和限制性长度片段多态性(PCR/RFLP)技术检测4种多巴胺能递质代谢相关蛋白基因多态性.对144名原发性帕金森病患者和188名年龄相匹配的健康人进行相关性分析。结果：与健康人相比，帕金森病患者DBH基因型或等位基因的分布不同，两组之间的差异有统计学意义(DBH等位基因：χ2=6．202，df=1，P=0．013，A2／A2基因型：OR=2．086，95％CI：1．225～3．552)；其余3个基因的结果如下：COMT Metl08Val多态性(等位基因：χ2=0．035，df=1，P=0．852；基因型χ2=1．546，dr=2，P=0．462)；DAT基因40bp可变数目串联重复多态性(等位基因：χ2=4．091，df=3，P=0．25；基因型：χ2=7．173，df=6，P=0．31)；MA0B(GT)n重复序列多态性(χ2=14．799，df=9，P=0．097)。结论：DBH基因多态性在中国汉族人帕金森病的易感性中可能起作用。     

中国北方抑郁症与OPRM1基因多态性的相关性研究

 

目的 为探索抑郁症的发病机制及其基因诊断和治疗提供科学的依据。方法 分析药物效应动力学Mμ阿片受体基因OPRM1(Mμ-Opioid receptor,OPRM1)的遗传多态性数据。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)分析技术检测369例抑郁症患者与738例健康部队官兵OPRM1基因第一外显子区rs1799971C/T与第三内含子区rs648893G/A两个多态性位点的基因型和等位基因频率。运用SPSS13.0和Haploview等软件进行统计学分析。结果 OPRM1基因位点的基因型及等位基因频率分布在抑郁症组与正常对照组间存在统计学意义(P<0.05)。其中,rs1799971A/G的等位基因频率只在男性34～49岁抑郁症组与对照组间存在统计学差异(OR=0.564,95%CI:0.196～0.837,P=0.001),而rs648893C/T位点的等位基因频率在不同年龄的病例组与对照组间不存在统计学意义差异(OR=0.853,95%CI:0.649～1.121,P=0.139)。结论 OPRM1基因第一外显子区rs1799971位点多态性可能是中国北方汉族抑郁症患者的风险因素,可能与抑郁症的发病存在关联。

     

UGTIA1 G71R基因突变对母乳性黄疸发病的影响

目的 探讨葡萄糖醛酸转移酶UGT1A1 G71R基因突变对母乳性黄疸发病的影响.方法 采用病例对照研究方法,收集母乳性黄疸56例（黄疸组）和对照40例（对照组）.用套式PCR后限制性片段长度多态性分析（RFLP）确定UGT1A1 G71R基因型.通过全自动生化分析仪测定胆红素水平.分析 UGT1A1 G71R突变与母乳性黄疸发病的关系.结果 黄疽组中,UGT1 A1 GT1R突变纯合子5例、杂合子24例、野生型27例,UGT1A1 G71R等位基因频率为30.36%.对照组中,UGT1A1 G71R突变纯合子1例、杂合子9例、野生型30例,UGT1A1 G71R等位基因频率为13.75%.等位基因频率前者明显高于后者,且有统计学意义（X2=7.17,P=0.01）.UGT1A1 G71R突变纯合子或杂合子组婴儿发生母乳性黄疸的OR（95%CI）为3.2（1.32,7.77）.结论 UGT1A1 G71R基因突变可能是晚发性母乳性黄疸发病的促发因素之一.     

NRF2基因多态性与中国北方地区汉族男性有氧能力的关联

目的探讨核呼吸因子2(NRF2)基因多态性与中国北方平原地区汉族男性有氧能力的关联性。方法102名无训练史的健康男子进行18周有氧耐力训练,测试训练前后的最大摄氧量(VO2max)和12km/h跑速下的跑节省化(RE)。用PCR-RFLP分析NRF2基因的rs12594956、rs7181866和rs8031031多态性。结果(1)三个多态位点均符合H-W平衡。rs8031031和rs7181866强连锁不平衡(D’=0.966,r2=0.903);(2)三个单点多态性及其构成的单体型与VO2max的初始值及训练敏感性均不关联;(3)rs8031031多态性与RE/VO2(L/min)关联,CT基因型显著高于CC基因型;rs7181866和rs8031031的多态性与△RE/VO2(L/min,ml/min/LBM)关联,AG或CT基因型比相应的其他基因型有更高的训练敏感性;单体型分析表明携带ATG单体型群体的RE/VO2(L/min)训练敏感性最高(P=0.006),比其他群体高57.54%。提示NRF2基因的多态性可能预测部分中国北方地区汉族男性有氧能力的差异。     

利奈唑胺多药联合对患者血小板影响回顾性分析

目的：回顾性分析利奈唑胺与其他抗感染药物联合抗感染治疗期间,多药应用对患者血小板的影响。方法：以利奈唑胺应用起点及终点时间为主要筛选标准,筛选应用利奈唑胺时间〉7 d的患者共82例,分为4组：A=利奈唑胺;B=利奈唑胺＋抗细菌药;C=利奈唑胺＋抗细菌药＋抗真菌药;D=利奈唑胺＋抗真菌药。对各组血小板行统计分析,观察利奈唑胺对各组的影响。结果：用药时间对B组与C组血小板计数值的影响无显著性差异,但B组与C组应用利奈唑胺前血小板的计数值存在基线差异（P〈0.05）,其后各时间点血小板计数值也存在统计学差异（P〈0.05）,但各组血小板计数均在正常值范围。结论：在利奈唑胺多药应用过程中血小板计数虽有所降低,但该影响较小。     

An in vitro approach to estimate putative inhibition of buprenorphine and norbuprenorphine glucuronidation

An in vitro inhibition study was performed to investigate potential drug–drug interactions on glucuronidation of buprenorphine (BUP) and norbuprenorphine (NBUP), which represents the major elimination pathway of the drug using cDNA-expressed uridine 5′-diphosphate glucuronosyltransferases (UGTs) and human liver microsomes (HLMs). Following identification of major UGT enzymes for BUP and NBUP glucuronidation, substrates were incubated with drugs (amitriptyline, nortriptyline, lamotrigine, oxazepam, and temazepam), which are extensively cleared by glucuronidation as well as are often used during maintenance treatment. To evaluate the inhibitory potential, the half maximal inhibitor concentration (IC₅₀), the inhibition constant (K _i), and the inhibitor concentration (K _I) that yield half the maximum rate of inactivation and the enzyme inactivation rate constant (k _inact) were determined, if appropriate. Amitriptyline and temazepam are inhibitors of NBUP glucuronidation (UGT1A3, HLMs), whereas BUP glucuronidation was affected by amitriptyline (HLMs), oxazepam, and temazepam (UGT2B7). Additionally, BUP inhibits NBUP glucuronidation (UGT1A1, 1A3, HLMs) and vice versa (UGT1A3). A decrease in the metabolic clearance of NBUP may increase the risk of adverse effects such as respiratory depression. Further investigations are needed to evaluate whether inhibition of BUP and NBUP glucuronidation contributes to adverse events.     

Pilot Study Comparing Systemic and Tissue Pharmacokinetics of Irinotecan and Metabolites after Hepatic Drug-Eluting Chemoembolization

Differences in drug metabolism associated with UGT1A1 polymorphism could result in individualized local response to hepatic chemoembolization with irinotecan-eluting beads (DEBIRI) or predictable toxicities. Five patients with inoperable hepatic metastases from colorectal or anal malignancies treated with DEBIRI were assessed for UGT1A1 mutations. No difference in area under the curve (AUC) for SN38 in normal liver and tumor tissue samples was noted with variant or wild-type UBT1A1 (P = .16 and P = .05, respectively). Plasma SN-38 AUC was significantly lower in wild-type compared to variant patients (P < .0001). UGT1A1 genotype may not be predictive of hematologic toxicity after DEBIRI.     

Steroid profile analysis and UGT2B17 genotyping of the same urine sample to determine testosterone abuse

When testing a urine sample for testosterone abuse, a ratio of testosterone glucuronide (T) to epitestosterone glucuronide (ET) of 4.0 or above is considered suspicious. A degree of variation, however, has been observed in T/ET ratio between individuals from both the same and different ethnic backgrounds. The majority of this variation might be due to UGT2B17 deletion genotype (UGT2B17 deletion-type). The aim of this study was to investigate the use of the same urine sample for the analysis of T/ET ratio and UGT2B17 deletion-type. Japanese men were deletion-typed via a UGT2B17 copy number assay using DNA from blood. Urinary T and ET levels were determined using gas chromatography–mass spectrometry before (n = 112) and after a testosterone injection (n = 25). Basal T level and the increase in T/ET ratio after injection were dependent on UGT2B17 deletion-type, being lower in subjects with deletion (del/del) than nondeletion (ins/del or ins/ins) genotype. UGT2B17 deletion-typing was first performed using DNA from urine cryopreserved for 1–1.5 years (n = 66). The concentration of DNA required for discrimination between the deletion and nondeletion genotype by copy number assay was more than 0.1 ng/ml urine. Discrimination was possible in 94.0 % of urine samples (5–7 ml each). These findings show that T/ET ratio and UGT 2B17 deletion-type can be analyzed exclusively via urine samples, removing the need for the collection of other samples, such as blood or buccal cells. The combination of T/ET ratio and UGT 2B17 deletion-type may help inform decisions regarding a genotype-specific T/ET cutoff ratio.     

盐酸格拉司琼片剂人体内药动学的研究

目的研究盐酸格拉司琼片剂的人体药代动力学。方法采用甲醇-0．05M醋酸钠缓冲液（70：30,pH=6．0,含0．25％三乙胺）为流动相,以HPLC法测定30名男性健康志愿者单剂量口服2mg受试片剂后的血药浓度。结果药-时数据经3p87程序处理,得到格拉斯琼的Cmax为10．6±4．0μg·L^-1;达峰时间tmax分别为1．37±10．2h;消除相半衰期t1／2ke为7．19±4．11h;AUC0→36h为79．9±51．1μL·h^-1;AUC0→∞为85．0±54．5μg·L^-1·h。结论本HPLC方法可快速测定药物血药浓度。操作简洁,分析快速准确。格拉司琼片剂药动学参数表明,血药浓度和药代动力学参数个体变异较大,建议临床使用此药时应根据病人的具体情况采用个性化用药方案,以达到最佳疗效。     

普卢利沙星片在健康人体的药代动力学研究

目的研究单剂量口服普卢利沙星片在中国健康志愿者体内的药代动力学。方法12名健康成年受试者按3×3拉丁方随机分组,分别单次口服100、200、400mg普卢利沙星片,采用LC/MS/MS法测定给药后普卢利沙星代谢产物NM394的血药浓度,应用DAS ver2.0软件进行房室拟合及参数计算。结果血样中未检测到普卢利沙星,只能测定其代谢产物NM394。低、中、高3个剂量组均符合二室模型,在人体内的药动学过程符合一级动力学。男女受试者的主要药动学参数无显著性差异。试验期间未发现明显不良反应。结论普卢利沙星片单次3剂量口服给药后,其代谢产物NM394的Cmax和AUC呈良好的剂量依赖性,主要代谢参数在我国健康成人中无性别差异。检测方法灵敏、准确、可靠、特异性强,可满足普卢利沙星临床药动学试验要求。     

氨溴特罗片在健康人体的药代动力学研究

目的研究单剂量及多剂量口服氨溴特罗片在中国健康成年志愿者人体药代动力学。方法 9名健康成年受试者单次口服氨溴特罗片2片（含盐酸氨溴索60mg,盐酸克仑特罗40μg）,单次给药试验结束后进行多次口服给药,每日早晨给药2片,共给药9d,达稳态后进行多次给药临床药代动力学研究,采用液相色谱-串联质谱联用分别测定给药后氨溴索及克仑特罗的血药浓度,应用DASver2.0软件进行房室拟合及参数计算。结果血中氨溴索和克仑特罗的血药浓度-时间数据均符合二室药物动力学模型,氨溴索的单次与多次给药的药代动力学参数无统计学差异,而克仑特罗多次口服达稳态后的清除率（CL/F）和表观分布容积（V/F）降低,峰浓度（Cmax）、曲线下面积（AUC（0-t）、AUC（0-∞））、消除速率常数K10、平均滞留时间（MRT）均明显增加。男女受试者的主要药动学参数无显著性差异。试验期间未发现明显不良反应。结论受试者连续口服氨溴特罗片,氨溴索在体内无药物蓄积作用,而克仑特罗有明显药物蓄积。主要代谢参数在我国健康成人中无性别差异。所建立的检测方法灵敏、准确、可靠、特异性强,可满足氨溴索和克仑特罗临床药动学试验要求。