晚期炎症介质HMGB1在肝衰竭过程中的作用

<正>1973年,Goodwin和Johns成功地从小牛胸腺中分离出一种非组蛋白染色质蛋白,基于这种蛋白在聚丙烯酰胺凝胶电泳中迁移率较快,该蛋白被命名为高迁移率族蛋白(high mobility group protein,HMG)。因为其具有结合DNA的能力,最初的研究主要集中于它们在细胞核内所发挥的作用,随着研究的深入,它们在胞外的功能也逐渐地为人们所了解。近来,高迁移率族蛋白B1(high mobility group     

骨髓间充质干细胞分泌因子抑制急性肝衰竭肝细胞HMGB1的胞浆移位

目的:骨髓间充质干细胞分泌的因子(mesenchymal stem cell-derived molecules,MSC-CM)对急性肝衰竭小鼠高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1,HMGB1)肝细胞胞浆移位和释放的影响.方法:D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GaIN)和脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导建立Balb/c小鼠急性肝衰竭模型;贴壁筛选法培养纯化小鼠BMSCs,传至第2-3代更换0.05%胎牛血清培养液24h获得MSC-CM.36只健康Balb/c小鼠随机均分为肝衰竭对照组和MSC-CM治疗组.Kaplan-meier法进行生存分析,生化检测1wk内不同时间点各实验组丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)/谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST),24h取肝脏进行肝脏病理检测.ELISA检测血清HMGB1、白介素-1(interleukin-1,IL-1、肿瘤坏死因子-(tumor necrosis factor-,TNF-、IL-6和IL-10水平,免疫组织化学分析HMGB1的肝细胞表达和胞浆移位.结果:MSC-CM治疗组1wk生存率为88.9%,显著高于对照组的16.7%(P<0.05),MSC-CM治疗组24h的ALT/AST峰值显著低于对照组(P<0.01).MSC-CM治疗组在6、12和24hHMGB1水平以及24h的TNF-、IL-1、IL-6水平显著低于肝衰竭对照组(P<0.01),而抗炎因子IL-10显著高于对照组(P<0.01).MSC-CM治疗组肝脏炎症坏死和肝细胞HMGB1胞浆移位较对照组明显减轻.结论:MSC-CM治疗抑制急性肝衰竭肝细胞HMGB1胞浆移位和释放,减轻肝脏炎症反应,降低死亡率.     

急性肝衰竭大鼠高迁移率族蛋白B1的变化和意义

目的:比较高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)与其他炎症因子在急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)大鼠肝组织和血清中出现时间及持续时间,探讨其来源及作用.方法:采用腹腔内注射D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-Gal)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)制备大鼠ALF模型,以腹腔内注射生理盐水作为对照组.于注射后3、6、12、24、48、72 h检测血清中肝功能的变化,观察肝组织病理,实时荧光定量PCR检测肝组织中HMGB1、白介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,T N F-α)m R N A变化,E L I S A法检测血清中HMGB1、IL-1β、IL-6、TNF-α水平变化,免疫组织化学检测肝组织中H M G B 1表达变化.使用重组高迁移率族蛋白B1(recombinant high mobility group protein 1,r HMGB1)单独尾静脉注射或联合D-G a l、L P S腹腔内注射,观察大鼠的一般情况并计算生存率.结果:采用D-Gal和LPS成功建立大鼠ALF模型.ALF大鼠肝组织中HMGB1 m RNA表达和血清中HMGB1水平高峰均较IL-1β、I L-6、T N F-α出现晚,但其高峰持续时间更长.D-Gal和LPS注射后的3 h,免疫组织化学可见肝细胞中HMGB1由细胞核转移到细胞质中;注射后24-48 h,肝脏正常组织结构消失,HMGB1蛋白自坏死的肝细胞被动释放.添加外源性r HMGB1使大鼠死亡时间提前,ALF大鼠在相同时间点死亡率升高.结论:大鼠ALF过程中HMGB1由坏死的肝细胞被动释放,其出现时间较其他炎症因子为晚.HMGB1与其他炎症因子相互作用,可能进一步促进ALF中的炎症反应.     

高迁移率族蛋白-1在实验性急性肝衰竭中的作用

高迁移率族蛋白-1（HMGB1）是广泛存在于真核细胞内高度保守的非组蛋白染色体蛋白。研究表明HMGB1可由巨噬细胞等主动分泌或由坏死细胞被动释放到细胞外基质内。作为晚期炎症因子参与脓毒症、关节炎等病理生理反应过程，并认为它有可能是肿瘤坏死因子α（TNFα）、白细胞介素-1（IL-1）的下游因子。急性肝衰竭（AHF）往往导致严重的肠源性内毒素血症，并介导TNFα等细胞因子释放。但HMGB1在急性肝衰竭中是否参与其病理生理过程，目前尚不清楚。本实验通过D-氨基半乳糖和内毒素诱导的大鼠急性肝损伤模型，探讨了HMGB1在AHF中的变化和意义。     

抗肝衰复方对急性肝衰竭大鼠高迁移率族蛋白-1和增殖细胞核抗原表达的影响

目的:观察抗肝衰复方对急性肝衰竭大鼠肝组织高迁移率族蛋白-1(HMGB1)和增殖细胞核抗原(PCNA)的影响,探讨抗肝衰复方对大鼠急性肝衰竭的作用机制.方法:健康雄性Wistar大鼠110只,随机分为正常组10只、模型组20只、促肝细胞生长素(PHGF)对照组20只、茵陈蒿汤(YCHT)组20只、抗肝衰复方小剂量组20只、抗肝衰复方大剂量组20只.除正常组外其余各组分别给予D-氨基半乳糖(D-GalN)800mg/kg和内毒素脂多糖(LPS)0.1mg/kg的剂量,腹腔注射1次成模.正常组给予等量生理盐水腹腔注射.各组均于造模后2小时用药,按每次1.5mg/100g,每天2次灌胃.模型组和正常组均分别按1.5ml/100g灌服生理盐水,2次/d,连用3天.造模后72小时取材.观察造模后72小时内大鼠病死率.检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)与总胆红素(TBil)含量.HE染色观察肝组织病理变化,蛋白印迹法分析肝组织HMGB1表达,免疫组织化学染色法检测肝组织PCNA蛋白表达.结果:抗肝衰复方大剂量组病死率及血清ALT、AST、TBil含量降低;肝细胞坏死、炎性浸润程度显著改善;HMGB1表达水平明显降低,PCNA表达水平明显升高,与模型组相比P＜0.01或P＜0.05.结论:抗肝衰复方对急性肝衰竭大鼠模型的防护作用,可能与抑制HMGB1的释放,降低内毒素血症,促进肝组织PCNA表达有关.     

HMGB1及HMGB2与冠状动脉钙化相关性的分析

目的:探讨血清高迁移率族蛋白1(HMGB1)、血清高迁移率族蛋白2(HMGB2)水平与冠状动脉钙化(CAC)的关系.方法:入选2020年1月-2021年1月于华中阜外医院住院的156例冠心病患者作为试验对象,记录所有患者病史资料、HMGB1以及HMGB2等指标,并进行CAC的分析.将冠心病患者分为非CAC组(62例)与...     

HMGB1在呼吸系统疾病中的作用

高迁移率族（HMGB）蛋白是1973年由Goodwin等首先发现的,它是HMG家族成员之一。2001年,Bustin建立命名法将HMGB进一步分为HMGB1、HMGB2和HMGB3等。大量文献报道,HMGB1在炎症性疾病的发病机理中发挥重要作用。本文对HMGB1在呼吸系统疾病特别是在急性肺损伤中的作用综述如下。     

HMGB1、VEGF—C在肺癌组织中的表达及临床意义

采用免疫组织化学染色方法检测肺癌组织中高迁移率族蛋白1（HMGB1）及血管内皮生长因子C（VEGF-C）的表达。结果发现,非小细胞肺癌（NSCLC）组织HMGB1及VEGF-C阳性率明显高于癌旁组织（P〈0．05）。HMGB1在肺鳞癌组织中阳性表达率明显低于腺癌组织,而其癌旁组织阳性表达率明显高于腺癌癌旁组织（P均〈0．05）。肺鳞癌组织中VEGF-C阳性表达率明显低于腺癌组织（P〈0．05）;有淋巴结转移NSCLC组织HMGB1及VEGF-C阳性率明显高于无淋巴结转移NSCLC（P均〈0．05）;VEGF-C表达与HMGB1表达呈正相关（P〈0．05）。认为HMGB1和VEGF—C的表达与肺癌组织病理类型和淋巴结转移相关,可作为肺癌转移、治疗和预后判断指标。     

雷帕霉素抑制JAK/STAT通路对急性肝损伤大鼠肝组织HMGB1表达的影响

目的：探讨雷帕霉素抑制JAK/STAT通路对急性肝损伤大鼠肝组织HMGB1表达的影响．方法：采用D-Galn/LPS复制急性肝损伤(ALI)模型．大鼠随机分为正常对照组(n=30)、ALI组(n=30)、STAT抑制剂雷帕霉素(RPM)处理组(n=30)．用Western blot方法测定肝组织HMGB41蛋白,全自动生化分析仪测定肝功能指标．结果：与正常对照组HMGB1表达水平(1．00±0．02)相比,ALI组24．72 h HMGB1表达显著升高(3．12±0．06,3．9±0．08,2．83±0．04,t值分别为16．01,3．86,10．46,均P＜0．01),血清丙氨酸转氨酶(ALT)6和24 h有两个峰值,且24 h峰值高于6 h．与ALI组相比,RPM预处理组24-72h HMGB1蛋白表达均显著抑制(1．67±0．05 vs 3．12±0．06：1．93±0．06 vs 3．9±0．08：1．47±0．04 vs 2．83±0．04：t值分别为20．11,41．90,26．02,均P＜0．01),ALT在24,48,72 h也均有不同程度下降(P＜0．01)．ALT与HMGB1呈正相关(r=0．741,P＜0．01)．结论：抑制JAK/STAT可明显下调肝组织中HMGB1蛋白表达,并有助于减轻D-Galn/LPS所致的急性肝损伤．     

同种异体骨髓间充质干细胞对急性肝衰竭HMGB1的影响

目的:探讨同种异体骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对急性肝衰竭动物高迁移率族蛋白B1(high mobility group Box1,HMGB1)的影响.方法:D-氨基半乳糖(D-GaIN)和脂多糖(LPS)诱导建立小鼠急性肝衰竭模型;贴壁筛选法培养纯化Balb/c小鼠BMSCs,传至第4代使用.90只健康Balb/c小鼠随机均分为3组:正常组、肝衰竭组、BMSCs治疗组.分别于12、24、48h检测各实验组ALT/AST水平,48h取各组肝脏行病理学检查.Western blot检测动物血清HMGB1含量.结果:急性肝功能衰竭小鼠经BMSCs移植治疗后生存率为83.3%,与肝衰竭组小鼠存活率16.7%相比差异有显著性意义(P<0.05).肝衰竭组与BMSCs治疗组12hALT/AST水平显著上升,24h达到高峰,48h开始下降,肝衰竭组与BMSCs治疗组12、24、48hALT/AST水平显著高于正常组(P<0.01),BMSCs治疗组12、24、48hALT/AST水平明显低于肝衰竭组,差异有显著性意义(P<0.05).肝脏组织病理学结果显示BMSCs治疗组肝细胞变性及坏死程度以及炎症浸润程度轻于肝衰竭组.免疫印迹显示,正常组血清中测不到HMGB1,肝衰竭组血清中HMGB1的含量显著高于BMSCs移植组血清中HMGB1的含量(P<0.01).结论:BMSCs移植能够抑制肝衰竭中HMGB1水平,BMSCs通过抑制HMGB1减轻肝脏炎症反应治疗急性肝衰竭,降低肝衰竭死亡率.     

类风湿关节炎患者外周血高迁移率族蛋白1表达

目的通过检测类风湿关节炎（RA）患者外周血单个核细胞（PBMC）、血浆中高迁移率族蛋白1（HMGB1）表达,为寻找治疗RA的新靶点提供依据。方法采集38例活动期RA患者、24例相对稳定期RA患者和20例健康对照者外周血。RT．PCR检测PBMC HMGB1mRNA表达,Western blot检测PBMC、血浆HMGB1蛋白表达。结果与相对稳定期RA患者、健康对照者相比,活动期RA患者PBMC HMGB1mRNA表达水平差异无统计学意义（F=1．23,P〉0．05）,而HMGB1蛋白表达水平下降（F=70．91,P〈0．01）,血浆HMGB1水平显著增高（P〈0．001）。相对稳定期RA患者与健康对照者之间差异无统计学意义（P〉0．05）。活动期RA患者血浆HMGB1水平与ESR（r．=0．478。P〈0．001）、C-反应蛋白（rs=0．574,P〈0．05）呈正相关。结论HMGB1与RA发病密切相关,并可能成为新的治疗靶点。     

人高迁移率族蛋白B1在风湿免疫性疾病中的研究进展

人高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是细胞核内典型的非组蛋白。HMGB1在细胞和组织中分布十分广泛,受到炎症刺激后能从坏死或损伤细胞被动释放,并可诱导树突状细胞上调其成熟的表面抗原。本文详细介绍了HMGB1的结构、功能特点及HMGB1在系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、肌炎、系统性硬化症、干燥综合征等风湿免疫性疾病中的表达情况。随着对HMGB1研究的不断深入,HMGB1在风湿性疾病诊断、治疗等中的潜力将进一步得到发展。     

血清高迁移率族蛋白1在乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者中的特点及其临床意义

目的 探讨血清高迁移率族蛋白1 (HMGB1)在HBV相关的慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者中的特点及其临床意义.方法 对60例HBV-ACLF患者血清HMGB1水平进行检测分析,并与30例慢性乙型肝炎患者和24例健康查体者进行对照研究,分析其与患者肝功能生物化学指标的相关性,并分析其与患者预后的关系.两组间比较采用独立样本的t检验或非参数检验,多组间比较采用方差分析,相关性分析采用多元线性回归法.结果 HBV-ACLF患者血清HMGB1水平高于慢性乙型肝炎患者[(10.03±3.08) μg/L比对(7.47+2.06) μg/L,t=2.667,P＜0.01],晚期HBV-ACLF患者血清HMGB1水平高于早期患者[(11.68±1.93) μg/L比对(9.11±3.15)μ g/L,t=2.214,P＜0.01],HBV-ACLF患者血清HMGB1水平与AST水平呈正相关(r=0.655,P＜0.01).随访2个月,感染组患者的HMGB1水平高于非感染组[(11.85±2.21)μ g/L比对(9.83±2.75) μg/L,Z=4.027,P＜0.05],死亡组患者的HMGB1水平高于生存组[(11.03±2.31)μg/L比对(9.52±3.01)μg/L,t=2.428,P＜0.05].结论 HBV-ACLF患者血清HMGB1水平随病情进展呈进行性升高,并可部分预测HBV-ACLF患者的预后.     

骨关节炎患者软骨及滑膜高迁移率族蛋白1的表达

目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)与骨关节炎(OA)发生和发展的关系。方法采用免疫组织化学方法观察42例老年 OA 患者关节软骨、滑膜和3例未累及关节的创伤患者正常关节软骨和滑膜 HMGB1的表达规律与分布特点及其与 C 反应蛋白(CRP)的关系。结果 42例OA 中,35例软骨 HMGB1染色阳性,占83.3%;30例滑膜 HMGB1染色阳性.占71.4%,其表达以胞浆分布为主,胞核中较少,3例正常关节软骨和滑膜 HMGB1标记均为阳性。其表达以胞核分布为主,胞浆中极少分布。OA 患者关节软骨和滑膜 HMGB1细胞内分布与关节正常者有明显的不同。OA 患者 HMGB1阳性的软骨细胞数占软骨细胞总数的70.2%,HMGB1阳性的滑膜上皮细胞数占滑膜上皮细胞总数的60.5%,与关节正常者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。OA 患者外周血CRP 含量[(20.4±16.7)ng/L]明显升高(P<0.01)。结论 OA 患者关节软骨及滑膜中核外HMGB1可能在 OA 组织损伤的病理过程中发挥作用,OA 患者关节软骨及滑膜上皮细胞中核外HMGB1作为晚期炎症因子参与了 OA 的疾病过程。     

心房颤动患者高迁移率族蛋白1血清水平

目的探讨心房颤动(AF)患者血清高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平是否升高。方法入选的55例阵发性AF患者,33例持续性AF患者,选择36例年龄和性别匹配的无AF体检者作为对照组,采用ELISA法检测血清HMGB1和高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。结果持续性AF患者血清HMGB1水平较对照组和阵发性AF患者显著增高(8.62±2.18 ng/m l vs 2.22±0.63 ng/m l,5.29±1.43 ng/m l,P均<0.05)。阵发性AF患者血清HMGB1水平较对照组高(P<0.05)。AF患者血清HMGB1水平与hs-CRP水平呈显著正相关(n=88,r=0.629,P<0.05)。结论 AF患者血清HMGB1水平显著上升。     

冠心病患者高迁移率族蛋白1的表达与意义

目的 探讨冠心病患者危险程度与血清高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)的相关性.方法 ELISA法检测冠心病患者及健康对照人群血清HMGB1蛋白水平.结果 急性冠脉综合征(ACS)患者中HMGB1蛋白水平明显高于稳定型心绞痛(SAP)患者(P<0.05)及健康对照人群(P<0.05),SAP患者HMGB1蛋白水平明显高于健康对照人群(P<0.05).结论 血清HMGB1水平可作为评价冠心病危险程度的指标之一.     

Serum high mobility group box chromosomal protein 1 is associated with clinicopathologic features in patients with hepatocellular carcinoma

BACKGROUND/AIMS: The role of high mobility group box chromosomal protein 1 in hepatocellular carcinoma is unknown. The aim of study was to evaluate contributions of high mobility group box chromosomal protein 1 in hepatocellular carcinoma, and analyse the correlation between high mobility group box chromosomal protein 1 and clinicopathologic outcomes. PATIENTS/METHODS: High mobility group box chromosomal protein 1 levels were analysed by Western blot analysis. Edmondson grade, TNM stage and the Cancer of the Liver Italian Program score were used as analysis variables. RESULTS: The serum high mobility group box chromosomal protein 1 levels in hepatocellular carcinoma (84.2 +/- 50.4 ng/ml) was significantly higher than those in chronic hepatitis (39.8 +/- 10.5 ng/ml), liver cirrhosis (40.2 +/- 11.6 ng/ml) and healthy control (7.0 +/- 5.9 ng/ml, p < 0.0001, respectively), and positive correlation were found between high mobility group box chromosomal protein 1 and alpha-fetoprotein (r = 0.952, p < 0.0001), and between high mobility group box chromosomal protein 1 and the size of tumour (r = 0.904, p < 0.0001). High mobility group box chromosomal protein 1 were significant differences among Edmondson grade I, II, III, IV; TNM stage I, II, III, IV and Cancer of the Liver Italian Program score 0-1 points, 2-4 points, > 4 points (p < 0.0001, respectively). CONCLUSIONS: These results suggest that high mobility group box chromosomal protein 1 may be a useful marker for evaluating the tumour stage and predicting prognosis in hepatocellular carcinoma. Targeting high mobility group box chromosomal protein 1 production or release might have potential approaches for hepatocellular carcinoma treatment.     

丙酮酸乙酯对实验性结肠炎大鼠结肠组织HMGB1表达及细胞因子的影响

目的:观察丙酮酸乙酯(EP)对实验性结肠炎大鼠结肠组织HMGB1表达及炎症因子的影响.方法:SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、EP治疗组,每组12只;模型组、治疗组大鼠用DSS溶液复制实验性结肠炎大鼠模型,观察各组实验大鼠DAI评分、大体形态学及组织病理学评分(HPS)改变,采用应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法(Westernblot)检测结肠组织HMGB1表达;酶联免疫吸附法检测细胞因子(TNF-α、IL-6)的含量.结果:DAI和HPS在DSS模型组中高于空白对照组(7.20±2.28vs0.45±0.16,13.60±0.72vs6.4±0.85,P<0.01),在空白对照组结肠组织中HMGB1低表达,但在模型组表达显著上调(P<0.01);模型组血清TNF-α、IL-6水平高于空白对照组(190.40±24.55vs43.65±8.79,238.75±26.58vs74.3±7.92,P<0.01);与DSS模型组相比,EP可以缓解大鼠体质量的减轻,减少腹泻及便血的发生,并且能够显著下调结肠组织DAI、HPS、HMGB1mRNA和蛋白的表达,下调血清TNF-α、IL-6水平(P<0.05).结论:HMGB1参与了实验性结肠炎大鼠的发病过程,应用EP治疗可有效抑制实验性结肠炎大鼠结肠组织HMGB1的表达,可以明显下调TNF-α、IL-6等促炎因子的水平,有助于减轻实验性结肠炎大鼠炎症反应.     

自身免疫性肝炎肝穿标本中高迁移率族蛋白B1免疫组织化学研究

目的观察自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis,AIH）患者和健康供肝标本中人高迁移率族蛋白B1（high mobility group box-1 protein,HMGB1）的表达情况,探讨HMGB1蛋白与AIH发病的相互作用。方法免疫组织化学方法观察55例AIH患者肝穿组织标本和10例健康肝移植供肝标本中HMGB1蛋白表达情况。结果AIH患者的肝穿标本与健康肝脏标本相比,肝细胞中HMGB1阳性表达明显增多,HMGB1阳性颗粒主要分布在肝细胞核和Kuffer细胞核中,在点灶状坏死区和界面炎症区浸润的炎性细胞细胞核和细胞浆内可见HMGB1阳性颗粒。结论HMGB1是AIH发生发展中一个重要的炎症蛋白。