HPLC法测定苯巴比妥钠注射液中苯巴比妥含量及5种有关物质

摘要：目的:建立苯巴比妥钠注射液中苯巴比妥含量及5种有关物质的HPLC法。方法:采用Phenomenex Luna C18（250mm×4.6 mm,5μm）色谱柱以醋酸钠溶液（取醋酸钠6.6 g、3 ml冰醋酸至1 000 ml水中,调pH至4.5±0.1）-甲醇（60:40）为流动相流速为1.0 ml·min-1,检测波长为220 nm,柱温为30℃,进样量20μl。结果:苯巴比妥的线性范围为9.97～997.00μg·ml-1（r=1.000 0）,杂质A、杂质B、杂质C、苯丁酰脲、巴比妥酸的线性范围为1～1 000μg·ml-1（r值范围0.999 9～1.000 0）;苯巴比妥的检出限为2μg·ml-1;杂质A检出限为0.2μg·ml-1;杂质B、苯丁酰脲、巴比妥酸检出限为0.5μg·ml-1;杂质C检出限为1μg·ml-1。苯巴比妥、杂质A、杂质B、杂质C、苯丁酰脲、巴比妥酸的回收率分别为100.56%,96.21%,99.39%,99.46%,101.54%,102.83%,RSD分别为0.36%,0.86%,0.37%,0.32%,0.53%,0.64%（n=9）。结论:该方法重复性好,专属性强,可以更加有效控制苯巴比妥钠注射液的质量。     

高效液相色谱法测定黄体酮注射液的有关物质

目的：建立高效液相色谱法测定黄体酮注射液有关物质。方法：采用Agela Venusil C8（4．6mm×250mm,5μm）色谱柱,甲醇-乙腈-水（25：35：40）为流动相,流速1．5ml／min,检测波长241nm,柱温40℃,自身对照法。结果：其最大杂质峰不超过对照溶液主峰面积的1／2（0．5％）,有关物质的峰面积之和不超过对照溶液主峰面积的2倍（2．0％）。结论：本方法能灵敏、准确、可靠的进行杂质检测,对黄体酮注射液有关物质的控制有一定的意义。     

高效液相色谱法测定双氯芬酸钠肠溶片中有关物质

目的建立双氯芬酸钠肠溶片中有关物质的检测方法。方法采用高效液相色谱法,用辛基硅烷键合硅胶为填充柱,以甲醇：磷酸二氢钠缓冲液（用ρ=0．1％磷酸溶液与ρ=0．16％磷酸二氢钠按1：1的体积比配置,并调节pH至2．5）=（66：34）为流动相,检测波长为254nm,进样体积为20μl,测定该制剂中有关物质的含量。结果在选定色谱条件下,有关物质与主药完全分离,双氯芬酸钠肠溶片的最小检测限为0．3μg／ml。结论该方法专属性强,操作简便,结果准确,可用于双氯芬酸钠肠溶片中有关物质的测定。     

高效液相色谱法测定头孢噻吩钠中的有关物质

目的:建立以高效液相色谱法测定头孢噻吩钠中有关物质的方法。方法:色谱柱为C18,流动相为醋酸钠溶液-乙腈(82∶18),流速为1.0ml/min,柱温为30℃,检测波长为254nm。结果:各项专属性试验中,头孢噻吩钠主峰与其它杂质峰均分离较好;3批样品中主要杂质峰面积之和均未超过对照品溶液主峰面积的2倍。结论:本方法简便、准确、重现性好。     

HPLC法测定苯巴比妥钠注射液有关物质及含量

目的:建立苯巴比妥钠注射液中含量和有关物质测定的HPLC方法.方法:色谱柱为Rainbow彩虹C18(4.6 mm×250mm,5 μm),流动相为pH 4.5缓冲盐(称取三水合醋酸钠6.6 g和3 mL冰醋酸,加水至1 000 mL,必要时用冰醋酸调节pH值至4.5±0.1).甲醇(3∶2),检测波长为254 nm,按外标法以峰面积进行计算.结果:苯巴比妥钠在393～1 967 mg·L-1浓度范围内线性关系良好,r=1.000 0;平均回收率为100.2%,RSD=1.0%.专属性试验结果表明本品在热、酸、碱、氧化和光照条件下均有不同程度的降解,各降解产物峰与主成分峰均能达到较好的分离.结论:该法专属性好,简捷、快速、准确,适用于苯巴比妥钠注射液含量测定及有关物质检查.     

高效液相色谱法测定泛酸钠中的有关物质

目的:建立高效液相色谱法检测泛酸钠原料中的有关物质。方法:氨基硅烷键合相色谱柱(300 mm×4．6 mm,5μm);流动相:0．05 mol·L~(-1)磷酸二氢钾溶液-乙腈(30:70),用10%磷酸溶液调节pH为5．8;检测波长: 214 nm;流速:1．5 mL·min~(-1)。结果:杂质峰与主峰能够得到有效的分离,最低检出浓度为10 ng·mL~(-1),3批泛酸钠样品经检测有关物质分别为0．10%,0．08%,0．12%。结论:该法可用于检查泛酸钠原料中的有关物质,简便、准确。     

高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚注射液有关物质

目的:建立高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚注射液的有关物质.方法:采用Alhima C18色谱柱,流动相为0.05 mol·L-1醋酸铵溶液-甲醇(85:15).检测波长245 nm.结果:对乙酰氨基酚与其杂质能完全分离,已知杂质对氨基酚在2.40～191.84 ng线性关系良好(r=0.9999),平均同收率为99.8%,RSD=0.91%(n=6).结论:所用方法简便、快速、准确,可用于对乙酰氨基酚注射液的质量控制.     

高效液相色谱-串联质谱法测定血清中的雌激素

目的 建立同位素内标-高效液相色谱-串联质谱方法测定人血清中3种雌激素的含量。方法 采用高效液相色谱-串联质谱仪,色谱柱为Phenomenex Gemini^?3μm C₁₈ 110?(50 mm×3 mm),柱温40℃。流动相为0.1%氨水溶液:甲醇,流速为0.6 ml/min。在电喷雾负离子模式下,采用多反应监测模式对血清中雌激素含量进行定量。结果 3种雌激素在相应的浓度范围内相关系数r均大于0.997,加标回收率为91.76%～105.90%,精密度为0.25%～3.04%,无携带污染。结论 该方法准确、可靠、灵敏度好、专属性强,适用于血清中雌激素的检测。     

用HPLC法检查法莫替丁氯化钠注射液有关物质时的问题和讨论

目的：用新建HPLC法考察了6个厂家18批法莫替丁氯化钠注射液中的有关物质。方法：采用Agilent Zorbax SB-C18柱，（4．6mm×250mm,5μm）；A相（0．1％二氟乙酸）-B相（乙腈）为流动相；流速：1．0mL·min^-1；梯度洗脱；检测波长为254nm；柱温为室温；结果：用本文新建方法和国家药品标准方法分别对18批样品有关物质检查结果进行了比较，结果前者检查有关物质检查总量比后者高约2％～6％。结论：本法简便、准确、专属性好，灵敏度高，可用于法莫替丁氯化钠注射液中有关物质的检查。     

替加氟有关物质的色谱-质谱结构鉴定

目的采用色谱-质谱联用技术鉴定替加氟有关物质,为其工艺和质量控制提供参考依据。方法采用十八烷基硅烷键合硅胶的填充剂,流动相为乙腈-甲醇-10 mmol·L-1醋酸铵缓冲溶液,对替加氟有关物质进行分离;采用电喷雾正离子化-飞行时间质谱法测定各有关物质的准确质量,三重四极杆质谱测定子离子特征,并经解析鉴定各杂质结构。结果与结论替加氟与其有关物质分离良好,检测出4个主要有关物质均为替加氟合成的起始原料,是母核基本未发生变化,仅5位被不同基团取代的衍生物。     

表阿霉素中有关物质的LC／ESI／MS分析

目的:检查并推证表阿霉素中的有关物质。方法:采用 LC/ESI/MS联用技术测定,在Agilent　1100 LC/MSD系统上完成,其中液相色谱条件为:柱ZorbaxSB4.6mm×75mm,3μm,柱温:35℃,流动相:A）0.5％乙酸;B）甲醇-乙腈（1:1）,含0.1％乙酸,线性梯度:0～25min,25％B～45％B。流速:1mL·min-1,柱后分流:1:1,检测:UV234nm。质谱条件:离子化方式ESI（ ）,扫描范围200～1200m/z,干燥气流速10L·min-1,温度350℃,雾化气压2.07×105Pa,毛细管电压 4 000 V,碎裂器电压 70 V、150 V。结果:从表阿霉素中分离出多个有关物质,其中 4个有关物质经质谱解析推导分别为表阿霉素二聚体、柔红霉素以及2个表阿霉素的同系物。结论:表阿霉素在生产过程中可生成多种结构类似物或聚合物,LC/ESI/MS作为一种高效分离与灵敏检测相结合的现代分析方法,为快速有效地检查和鉴定药品生产过程中可能产生的有关物质提供了有力的技术保证。     

注射用头孢地嗪钠有关物质方法学研究

目的：建立注射用头孢地嗪有关物质检查方法。方法：采用高效液相色谱法,以Diamonsil-C18（250mm×4.6mm×5μm）为色谱柱;流动相：磷酸盐缓冲液（磷酸二氢钾0.87g与无水磷酸氢二钠0.22g加水溶解并稀释至1000ml）-乙腈（90：10）;检测波长：215nm。结果：有效的分离了注射用头孢地嗪钠中的有关物质,单个最大杂质峰面积不超过对照溶液主峰面积;各杂质峰面积的和不大于对照溶液主峰面积的1.5%。结论：此方法简便、快速,可用于注射用头孢地嗪钠的质量控制。     

RP-HPLC法测定羟苯磺酸钙的有关物质

目的：对试行标准中羟苯磺酸钙反相高效液相色谱法有关物质进行讨论,并利用LC—Ms对其光降解产物进行初步分析。方法：色谱条件：色谱柱：SHIMADZU VP—ODS C18（4．6mm×150mm,5μm）;流动相：0．05mol·L^-1磷酸二氢铵-乙腈（98：2）;流速：1．0mL·min^-1;进样量为10斗L;检测波长为300nm;柱温：30℃。质谱条件：负离子电离（ESI-）方式,毛细管电压：2．5kv;椎孔电压：20V;源温：105℃;脱溶剂温度：400℃;脱溶剂气流速：400L·h^-1;二级扫描时碰撞能量：20eV（降解产物）,10ev和20eV（羟苯磺酸钙）。结果：此条件下,羟苯磺酸钙中已知杂质氢醌和其他各降解产物与主成分的分离度和检测灵敏度均可满足试验要求,羟苯磺酸钙和已知杂质氢醌的检测限均为5ng。采用LC—MS／MS初步推断了羟苯磺酸钙光降解产物的化学结构。结论：本方法简便、快捷,可用于羟苯磺酸钙中有关物质的检查。     

硫普罗宁注射液有关物质的分离与测定

目的优化反相高效液相色谱法分离测定硫普罗宁注射液有关物质并进行方法学验证。方法以各杂质峰的对称性、相对保留时间及分离度等因素为指标,优化了pH、流动相缓冲盐浓度、温度等因素,建立HPLC色谱条件:色谱柱:Waters Symmetry-C18柱;流动相:0.05moL.L-1磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH值至3.2)-乙腈(95∶5);检测波长:210nm;柱温:30℃;流速:1.0mL.min-1。结果优化后的方法具有简便快速、灵敏度高、专属性强的特性;杂质A、B及杂质C、杂质D的相对响应因子(相对于硫普罗宁)分别为0.73、2.32和1.18;硫普罗宁注射液中含有这4个杂质,且含量均大于0.1%。结论采用加相对响应因子的1%主成分自身对照法以及杂质对照外标法更能准确反映杂质含量。     

Determination of Cefixime by a Validated Stability-Indicating HPLC Method and Identification of its Related Substances by LC-MS/MS Studies

Cefixime is an important cephalosporin antibiotic that easily decomposes and releases different related substances in preparation and storage steps. The objective of the current study was to develop a simple, precise, and accurate isocratic liquid chromatography (LC) method for the determination of cefixime in the presence of its related substances generated from thermal stress in the bulk drug. The chromatographic conditions were comprised of a reversed-phase C18 column (4.6 × 250 mm, 5 μm) with a mobile phase composed of water: acetonitrile (85:15 v/v, with 0.5% formic acid) and ultraviolet detection (UV). Some thermal degradation products were identified using a proposed liquid chromatography-mass spectrometry method. Five peaks (A, B, C, D, and E impurities based on British Pharmacopoeia) were known and a few unknown peaks appeared in the thermal stress solution of cefixime. The linear regression analysis data for the calibration plot of the LC-UV method showed a good linear relationship in the concentration range 0.9–1000.0 μg mL⁻¹. The recovery of the optimized method was between 94.6 and 98.4% and the inter- and intra-day relative standard deviations were less than 3.3%. The obtained results shown in the LC-UV proposed method can be conveniently used in a quality control laboratory for routine analysis of cefixime for the assay and related substances, as well as for the evaluation of stability samples of bulk drugs.     

HPLC测定磺胺醋酰钠有关物质方法的建立

目的：建立HPLC法测定磺胺醋酰钠中磺胺及其他有关物质方法。方法：采用岛津VP-ODSC18柱（4．6mm×150mm，5μm），磷酸盐缓冲液（0．025mol·L^-1磷酸二氢钠溶液，用磷酸调pH为3．0）-甲醇[90：10]为流动相；流速：1．0mL·min^-1；检测波长：254nm；柱温为室温；结果：磺胺醋酰钠和磺胺及其他有关物质分离度良好，磺胺醋酰钠及磺胺的最低定量限分别为5和2ng。结论：本法简便、准确、专属性好，灵敏度高，可用于磺胺醋酰钠中磺胺及其他有关物质的检查。     

反相高效液相色谱法测定利巴韦林注射液的有关物质

目的建立测定利巴韦林注射液有关物质的反相高效液相色谱（RP-HPLC）法。方法采用Hypersil C18色谱柱（250mm×4．6mm,10μm）,以水为流动相,检测波长为207nm。结果利巴韦林及其有关物质达到基线分离,方法的最低检测量为2．5ng。结论方法简便、快速、准确,适用于利巴韦林及其制剂的质量控制。