聚蛋白多糖酶与骨关节炎研究进展

软骨细胞合成和降解软骨细胞外基质（ECM）大分子，而基质又可维持细胞内环境的稳定和软骨结构。骨关节炎（OA）疾病的主要病理特点是ECM的降解超过其合成，引起软骨基质净含量的减少，覆盖关节骨表面的软骨甚至可完全耗损。其中ECM的重要成分聚蛋白多糖的丢失被认为是关节炎的主要早期表现，最初发生于关节表面，以后进展至深区．随后出现胶原纤维降解和组织力学障碍。     

电针对骨关节炎软骨细胞外基质调节机制探讨

软骨细胞外基质主要包括胶原、蛋白多糖、水,软骨细胞外基质成分的过度丢失对骨关节炎的病理进展有着重要的作用,调控软骨细胞外基质的过度丢失可以起到保护软骨、促进软骨修复、维护正常的关节生物学特性的作用。通过查阅国内外相关文献,综合、分析、归纳电针治疗骨关节炎的作用机制,发现电针通过调节基质金属蛋白酶、炎症因子、碱性成纤维生长因子抑制软骨细胞外基质过度丢失,从而延缓软骨衰变。     

关节软骨损伤修复研究现状

要理解关节软骨损伤的机制,就要认识关节负荷及负荷频率是怎样影响关节软骨的。关节表面突然施压和缓慢施压的结果截然不同。关节软骨的细胞外基质(ECM)主要由水及胶原和蛋白多糖聚合体形成的大分子支架组成。胶原形成组织形态及张力强度,水和蛋白多糖聚合体相互作用形成抗压强度、弹性,可能还有韧性。     

低强度脉冲式超声对关节软骨再生作用研究进展

低强度脉冲式超声促进骨折愈合的研究发现,超声波促进透明软骨细胞分泌Ⅱ型胶原和蛋白多糖,尤其是6-硫酸软骨素,抑制X型胶原表达,有利于透明软骨细胞表型的稳定。提示低强度脉冲式超声可作为一种非侵入性手段用于加快关节软骨损伤的修复和延缓关节软骨退变。     

在培养的人胚软骨细胞中硒的抗氧自由基损伤作用观察

目的：观察自由基的对培养的人胚软骨及硒的防护作用。方法：在体外培养的人胚关节软骨细胞培养液中,加入黄嘌呤,黄嘌呤氧化酶及微量元素硒。测定软骨细胞ＤＮＡ和蛋白质及软骨基质中蛋白多糖和胶原的含量要比伸的蠕变量大结果：培养１４４ｈ,软骨细胞ＤＮＡ,蛋白质及软基质中蛋白多糖含量都明显减少,但胶原含量无明显改变,含硒组减少程度轻。结论：自由基可能和退形性关节疾病因有关,是否选择微量硒预防及治疗自由基引起的软     

力学刺激对关节软骨基质代谢的影响

关节软骨主要由软骨细胞和细胞外基质组成,软骨细胞能够感受力学环境的变化而不断调整细胞外基质的代谢活动.适当的力学刺激会促进软骨细胞外基质的代谢,不适当的力学刺激有时不但会抑制细胞外基质的代谢,而且可能引起软骨细胞的变形或破坏而导致各种骨骼疾病的发生.正常的关节软骨一直处于静态压力与动态压力交替活动的力学环境中,体外构建工程化软骨过程中必须考虑这些力学因素,选择适当的力学刺激(力的作用方式、大小、频率、持续时间等)作用于软骨基质,使之形成具有体内软骨的力学特性.认识和加深理解力学刺激的作用机制,也有助于临床骨科诊疗观念和手段的发展与进步.该文就软骨基质的功能、力学刺激对软骨基质代谢的影响及在关节软骨组织工程中的应用展望,作一综述.     

骨关节炎骨赘发生过程中的分子表达特征

目的探讨Ⅰ型、Ⅱa型、Ⅱb型、Ⅹ型胶原以及氨基多糖等分子在骨关节炎骨赘发生过程中的表达特点。方法取全膝关节置换术中取下的原发性骨关节炎骨赘标本25例,男6例,女19例;平均年龄69.1岁。固定脱钙后制成石蜡切片,行HE和甲苯胺蓝染色了解基质含量、细胞数量和蛋白多糖的表达。采用S-P法进行Ⅰ型、Ⅱ型（Ⅱa和Ⅱb）、Ⅹ型胶原分子的免疫组化染色。结果根据骨赘中主要组织的细胞形态学和Ⅰ型、Ⅱa型、Ⅱb型、Ⅹ型胶原以及氨基多糖分子的表达特点,共获得五种主要不同类型的骨赘组织。Ⅰ型组织主要含有间充质细胞表达的Ⅰ型胶原;Ⅱ型组织内出现了前软骨细胞分化,并表达Ⅱa型胶原和蛋白多糖;Ⅲ型组织表达Ⅱb型胶原及多量蛋白多糖,同时也表达Ⅰ型和Ⅱa型胶原;Ⅳ型组织的软骨细胞呈明显的带状分布,表达丰富的Ⅱb型胶原和蛋白多糖,深层的肥大软骨细胞表达Ⅹ型胶原;Ⅴ型组织的成分与正常关节软骨接近,主要表达Ⅱb型胶原及丰富的氨基多糖分子。这五种组织可能分别代表骨赘发生过程中的间充质细胞期、前软骨细胞期、软骨细胞期、早期骨赘期和成熟骨赘期。结论在骨关节炎骨赘发生的不同阶段,Ⅰ型、Ⅱa型、Ⅱb型、Ⅹ型胶原分子以及氨基多糖分子存在特异的分化表达,据此可将骨赘的发生过程分期进行研究。     

三步酶消化法高效分离兔原代关节软骨细胞及体外培养观察

目的　观察设计的三步酶消化法分离原代关节软骨细胞的效果,并对体外培养不同代次细胞的生物学活性进行评价。方法　三步酶消化法设计为以培养液配制的1g/L胰蛋白酶及1g/LEDTA混合液、1g/L透明质酸酶和2g/LⅠ型胶原酶顺序消化关节软骨分离细胞,检测细胞收获效率和存活率;体外传代培养观察细胞形态、生长及胞外基质中Ⅰ型和Ⅱ型胶原、蛋白多糖聚集体等的变化。结果　(1)关节软骨经三步酶消化基质逐步解离和降解,细胞得以完全释放和分离,每克软骨的细胞收获量平均为50 3×106 个细胞,细胞存活率平均为98. 8%。(2)原代和第一代细胞附壁生长呈三角形或多角形,生长融合时呈卵圆形,Ⅱ型胶原免疫组化和甲苯胺蓝异染反应均呈阳性,原代细胞外基质有高的硫酸糖胺多糖含量为(92±10)μg/cm2;第三代后细胞逐渐变为梭形,Ⅱ型胶原免疫组化为阴性,甲苯胺蓝异染反应明显减弱,第四代细胞外基质的硫酸糖胺多糖含量为(48±12)μg/cm2。结论　(1)三步酶消化法可使关节软骨基质完全消化降解,具有高细胞收获率、高细胞存活率和操作简便等特点。(2)原代和第一代软骨细胞具有良好的生物学活性,而第三代以后的细胞生物学活性低下。     

骨关节炎的关节软骨细胞外基质的变化

骨关节炎是一种慢性关节疾病。其主要病变是关节软骨的退变及继发骨质增生。软骨是由软骨细胞和软骨基质组成。软骨细胞合成并分泌基质成分,而基质构成软骨细胞生活的微环境,所以细胞外基质既可敏感地反映细胞生命运动的变化,亦能对其产生重要影响。本文对年来骨关节炎的关节软骨细胞外基质变化的研     

正常关节软骨的胶原表型与骨关节炎关节软骨的表型异常

正常关节软骨细胞特异性表达及形成Ⅱ、Ⅸ、和Ⅺ型胶原,关节软骨胶原的正常表型和含量是关节软骨力学特征的基础。业已证明,关节软骨细胞表型表达改变所致胶原代谢及成分的异常,是骨关节炎发生、发展的主要因素之一。     

硒锌对培养兔和人胚软骨细胞生长的影响

本实验在培养液中加入一定量的硒，锌对一代兔和人胚关节软骨细胞进行培养１９２小时。结果显示：补充适量的硒或锌均能促进培养软骨细胞的生长代谢，但硒过量则损害于软骨细胞，若同时补给适量的锌和硒，其效果有相加的作用。补锌和补硒的效果可能为硒＋锌＞锌＞硒。同时表明体外培养软骨细胞的基质代谢能很快进入平衡状态。人胚软骨细胞生长慢于兔，基质胶原代谢慢于蛋白多糖     

正常关节软骨的胶原表型与骨关节炎关节软骨的表型…

正常关节软骨细胞特异性表达及形成Ⅱ，Ⅸ，和Ⅺ型胶原，关节软骨胶原的正常表型和含量是关节软骨力学特征的基础。业已证明，关节软骨细胞表型表达改变所致胶原代谢及成分的异常，是骨关节炎发生，发展的主要因素之一。     

影响关节软骨细胞外基质的生物力学因素研究进展

关节软骨（articular cartilage,AC）指覆盖于关节表面的一层软骨,属于透明软骨。它主要由软骨细胞和细胞外基质（extracellular matrix,ECM）组成,其中软骨细胞是AC的特有细胞,可分泌合成ECM。AC表面光滑,主要由其ECM特性提供功能,     

髓核细胞表型标记的研究进展

目的综述髓核细胞表型标记的研究进展。方法广泛查阅近年关于髓核细胞表型标记的文献,并对其进行分析。结果由于不同的生物力学特性,髓核细胞和关节软骨细胞的形态及细胞外基质组分如蛋白多糖与Ⅱ型胶原α1的比率存在差异;通过髓核细胞的表面标记(CD24)、基因标记(低氧诱导因子1α、葡萄糖转运蛋白1、基质金属蛋白酶、VEGF-A等)及细胞内各种分子标记(角蛋白19和磷脂酰肌醇聚糖3、配对盒1、叉头蛋白和整联蛋白涎蛋白等)可以初步鉴别髓核细胞。结论髓核细胞与关节软骨细胞表型标记存在差异,但仍缺乏特异性标记物。     

骨性关节炎发病机制研究进展

骨性关节炎(osteoarthritis,OA)是一种慢性全身性进展性关节疾病,临床上最常表现为受累关节的慢性疼痛,伴活动受限,严重者关节肿大僵硬甚至畸形,主要病理改变为关节软骨退行性改变及其局部骨质硬化增生,但其具体发病机制不明。过去普遍认为骨内压增高在OA的病机中发挥重要作用,然而随着临床的迫切需求和分子生物学、免疫学等相关学科的飞速发展,对其发病机制的研究有了新的认识,逐渐认为基质金属蛋白酶降解、细胞凋亡、细胞因子、水通道蛋白等也参与到OA的发生发展全过程中,尤其是后两者值得关注。细胞因子是由多种细胞产生的具有调控免疫应答反应的多肽分子,其中以白细胞介素1和胰岛素样生长因子在OA中作用显著,前者抑制软骨聚糖蛋白和胶原的合成并促进其水解,后者促进软骨细胞增殖及软骨基质合成;水通道蛋白(aquaporins,AQPs)通过调控关节软骨细胞中水的进出而调节其内环境,维持软骨细胞渗透压稳定并调节细胞外基质的合成及降解平衡,目前研究发现表达于软骨细胞的AQPs亚型为AQP1和AQP3,它们与关节软骨退变密切相关,而具体作用机制需要进一步研究。     

关节软骨磁共振生理性成像临床应用

关节软骨主要由软骨细胞和细胞外基质组成,软骨基质构建了稳定而复杂的耐压框架结构.关节软骨磁共振生理性成像是评价关节软骨基质成分变化的新型影像学技术.按照观察对象不同,可将其分为蛋白多糖相关技术(延迟动态增强、T1ρ成像和Na谱成像)、胶原含量相关技术(T2地图成像和磁化转移成像)、软骨基质内水含量相关技术(质子密度地图成像和弥散加权成像).延迟动态增强和T2地图成像已开始应用于软骨病变的早期诊断和治疗评价中.随着磁共振设备和分析软件的不断进步,关节软骨磁共振生理性成像将成为骨关节影像研究的重点之一.     

以Ⅱ型胶原为基质长期传代培养软骨细胞

目的：建立以Ⅱ型胶原为基质的软骨细胞培养系统。方法：分离兔关节软骨细胞,于Ⅱ型胶原包被的培养板上培养。通过光镜和电镜检查、Ｓ－１００蛋白及尿酸检测,分析细胞的生物学特性。结果：原代软骨细胞接种４８ｈ贴壁,传代细胞８ｈ贴壁。连续培养至２３代,存活时间达５个月。前６代细胞增殖快,呈圆形或多角形,可见异染物沉积,多数细胞有Ｓ－１００蛋白表达。６代以后的细胞呈现反分化现象,增殖速度下降,异染物合成减少,Ｓ－１００蛋白的表达逐渐丧失。结论：以Ⅱ型胶原为基质培养软骨细胞是较理想的培养系统。     

胶原蛋白酶对兔离体椎间盘类软骨细胞形态学的影响

胶原蛋白酶化学溶解术是一种微创技术,已广泛用于慢性颈腰痛的治疗.椎间盘组织在大体结构上由软骨终板、纤维环和中央的髓核构成;在组织学上由丰富的细胞外基质和散在其中的类软骨细胞构成.细胞外基质主要由水、蛋白多糖和胶原构成,而胶原和蛋白多糖均由类软骨细胞分泌.本课题组前期研究表明,胶原蛋白酶可有效溶解椎间盘组织中的胶原纤维[1].但其对椎间盘组织内细胞学的影响尚不清楚.本研究旨在观察胶原蛋白酶对体外培养的椎问盘类软骨细胞形态学的影响,以探讨胶原蛋白酶的作用机制.     

miRNAs在关节软骨生长发育过程中作用的研究进展

关节软骨属结缔组织,起源于胚胎时期中胚层的间充质,随着间充质细胞数量的增多,在粘附分子的作用下聚集形成肢体雏形[1].其中大多数的间充质细胞分化为类圆形的软骨细胞,在SOX9和其他转录因子的作用下启动特征性的基因程序,分泌丰富的Ⅱ型胶原和蛋白多糖.随后关节软骨模型中心的软骨细胞,停止增殖开始肥大化,改变其基因程序而分泌X型胶原.同时肥大软骨细胞完成募集破软骨细胞,在血管内皮生长因子及其他因子的作用下诱导生成血管,调节周围基质的矿化等任务.之后肥大软骨细胞凋亡,留下起支架作用的基质,以利于骨母细胞的侵入,为成骨提供有利环境[2].而软骨生长发育异常时会发生与骨生长有关的疾病,如:肢体的不等长和侏儒症等.随年龄的增长,软骨细胞经历类似于软骨内成骨过程中软骨细胞分化过程:肥大分化、终末分化、矿化、最后发生凋亡,最终导致OA的形成[1].     

关节软骨缺损修复研究进展

关节软骨是滑膜关节重要的结构和功能单位,一旦关节软骨发生损伤,由于软骨组织本身缺乏血管,缺乏修复损伤和缺损的未分化细胞,软骨细胞包埋于致密的胶原一蛋白多糖基质中,限制了细胞的增殖和迁移能力,所以自身修复能力非常有限,若治疗不及时或不恰当,难以形成正常的关节软骨,因而无法满足正常关节的功能需求,将会导致严重的关节功能障碍。