结缔组织生长因子在阿魏酸钠干预单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的表达

背景:结缔组织生长因子是转化生长因子β1的下游效应因子,其异常升高在肾纤维化发生、发展中起关键作用,干预结缔组织生长因子在肾脏的异常表达可改善肾脏的纤维化.目的;从mRNA和蛋白水平观察阿魏酸钠对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织结缔组织生长因子的影响,以及阿魏酸钠干预后大鼠肾间质纤维化的变化,并与氯沙坦进行比较.设计:随机对照动物实验.单位:四川大学华西医院肾脏科和四川大学公共卫生学院.材料:实验选用雄性成年健康SD大鼠24只,购于四川大学实验动物中心(实验用阿魏酸钠片由成都亨达药业有限公司惠赠,批号:050302).兔抗大鼠结缔组织生长因子多克隆抗体(Santa Cruz).Wcstern印迹设备购自美国BioRAD,DNA Engine OpaconTM实时荧光定量PCR仪购自美国MJResearch公司.方法:实验于2006-05/12在四川大学公共卫生学院医学检验研究室完成(生物安全级别:BSL-1).将24只大鼠随机分为4组:模型组、阿魏酸钠组、氯沙坦组和假手术组,每组6只.前3组按既往文献方法建立单侧输尿管梗阻模型,假手术行假手术.术后24 h开始.阿魏酸钠治疗组予阿魏酸钠溶液150 mg/(kg·d)灌胃;氯沙坦组予氯沙坦溶液20 mg/(kg·d)灌胃,其余2组灌胃同体积生理盐水.术后14 d处死大鼠,取部分肾组织用于分析.主要观察指标:采用荧光定量PCR,Western印迹方法从mRNA和蛋白质水平检测肾组织结缔组织生长因子的表达情况;行HE,Masson染色观察肾间质病理学改变.结果:①阿魏酸钠对肾组织结缔组织生长因子表达的影响:模型组术后14 d结缔组织生长因子mRNA和蛋白的表达较假手术组明显升高,而阿魏酸钠治疗组与模型组比较有明显的下降(P<0.05),同时,与氯沙坦组比较,差异无显著性意义(P>0.05).②阿魏酸钠干预后肾组织病理学改变:单侧输尿管梗阻术后第14天苏木精-伊红染色和Masson染色可见间质中多量炎性细胞浸润和小管、间质的改变,间质胶原的沉积等肾纤维化的病变;单侧输尿管梗阻大鼠经阿魏酸钠治疗治疗后,阿魏酸钠治疗改善了肾组织的纤维化(P<0.05),与氯沙坦组比较,差异无显著性意义(P>0.05).结论:①阿魏酸钠对单侧输尿管梗阻所致的大鼠肾脏纤维化的形成有明显的抑制作用,其作用机制可能与其降低结缔组织生长因子的表达有关.②阿魏酸钠抑制肾脏纤维化作用与氯沙坦相当.     

维甲酸对肾间质纤维化大鼠肾间质结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨全反式维甲酸对肾间质纤维化大鼠肾间质结缔组织生长因子(CTGF)的影响及其可能机制.方法采用单侧输尿管结扎(UUO)大鼠模型.将40只SD大鼠随机分为5组:假手术组(A组)、UUO组(B组)、UUO 苯那普利组(C组)、UUO 维甲酸小剂量组(D组)、UUO 维甲酸大剂量组(E组).于造模前1d分别给C、D、E组苯那普利10mg/(kg·d)、全反式维甲酸10mg/(kg·d)和20mg/(kg·d).A、B组给予同等剂量的生理盐水.于术后第14d取术侧肾组织行HE、Masson染色评定各组肾小管间质损害程度,免疫组织化学半定量检测各组肾间质CTGF、转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅲ型胶原(colⅢ)的表达.结果各造模组CTGF、TGF-β1、α-SMA及colⅢ的表达及肾小管间质损伤指数明显高于A组(P＜0.05),而全反式维甲酸或苯那普利均能明显抑制此变化.结论维甲酸及苯那普利可能通过下调CTGF而减轻肾间质纤维化.     

槲皮素对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏转化生长因子β1和结缔组织生长因子表达的调节效应

目的：观察槲皮素对大鼠梗阻肾脏间质纤维化的程度以及肾组织中转化生长因子β1、结缔组织生长因子表达的影响。方法：实验于2004-03／2005—02在吉林大学第三医院研究所完成。Wistar大鼠36只，雌雄不拘，体质量220～300g。①采用随机数字法随机分为3组，每组12只。单侧输尿管梗阻组：参照文献制备单侧输尿管梗阻肾间质纤维化大鼠动物模型。槲皮素组：即单侧输尿管梗阻模型＋槲皮素治疗组，于手术前1天开始用槲皮素，剂量100mg／kg，灌胃，1次／d，连续10d。假手术组：打开腹腔后分离左输尿管，不结扎输尿管即关闭腹腔。②3组大鼠于术后10d，麻醉处死，取术侧肾组织做肾脏病理检查，在光学显微镜下观察肾间质病变程度。应用免疫组织化学法和蛋白免疫印记分析法检测大鼠梗阻侧肾脏转化生长因子β1、结缔组织生长因子的表达部位及蛋白表达。结果：大鼠36只全部进入结果分析。①各组大鼠肾脏病理学改变：单侧输尿管梗阻引起大鼠梗阻侧肾脏的间质纤维化，经槲皮素治疗后能够明显减轻单侧输尿管梗阻导致减轻肾脏病理损害。②各组大鼠免疫组织化学结果：与假手术组比较，单侧输尿管梗阻组和槲皮素组转化生长因子β1、结缔组织生长因子染色阳性表达增多（P〈0．01）；槲皮素组转化生长因子β1、结缔组织生长因子染色阳性表达比单侧输尿管梗阻组明显降低[（7．41&;#177;0．93）％比（13．39&;#177;0．87）％，P〈0．01；（7．26&;#177;0．54）％比（10．18&;#177;0．49）％，P〈0．05]。③各组大鼠免疫印记分析结果：与假手术组大鼠相比，单侧输尿管梗阻10d，大鼠梗阻侧肾脏组织内转化生长因子1、结缔组织生长因子水平均明显增加（P〈0．01），槲皮素组转化生长因子β1、结缔组织生长因子相对表达丰度明显低于单侧输尿管梗阻组[（2．42&;#177;0．56）％比（5．50&;#177;0．87）％，（3．26&;#177;1．54）％比（6．18&;#177;1．49）％，P〈0．05]。结论：槲皮素具有抗肾间质纤维化作用，可能与其下调单侧输尿管梗阻大鼠肾脏组织中转化生长因子β1和结缔组织生长因子的表达有关。     

霉酚酸酯对2型糖尿病大鼠肾脏结缔组织生长因子表达的影响

目的:探讨霉酚酸酯对2型糖尿病大鼠肾脏结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:将实验动物分为正常对照组、糖尿病组及霉酚酸酯治疗组。霉酚酸酯组予霉酚酸酯(MMF)15m g/(kg·d)治疗。13周后检测各组大鼠尿白蛋白排泄率,内生肌酐清除率,血糖,血脂,血胰岛素;H E及PA S染色观察肾脏病理改变;免疫组化方法检测肾组织中结缔组织生长因子(CTGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIM P-1)的表达。结果:M M F可以减少2型糖尿病大鼠尿白蛋白排泄率及内生肌酐清除率;使大鼠肾脏组织中C TG F及TIM P-1的表达降低,M M P-9表达增加,并使肾脏病理改变好转。结论:霉酚酸酯对2型糖尿病大鼠肾脏有保护作用,其机制可能部分是通过下调2型糖尿病大鼠肾脏C TG F的表达及调节M M P-9和TIM P-1的平衡来实现的。     

槲皮素对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏转化生长因子β1和结缔组织生长因子表达的调节效应

目的:观察槲皮素对大鼠梗阻肾脏间质纤维化的程度以及肾组织中转化生长因子β1、结缔组织生长因子表达的影响。方法:实验于2004-03/2005-02在吉林大学第三医院研究所完成。Wistar大鼠36只,雌雄不拘,体质量220～300g。①采用随机数字法随机分为3组,每组12只。单侧输尿管梗阻组:参照文献制备单侧输尿管梗阻肾间质纤维化大鼠动物模型。槲皮素组:即单侧输尿管梗阻模型 槲皮素治疗组,于手术前1天开始用槲皮素,剂量100mg/kg,灌胃,1次/d,连续10d。假手术组:打开腹腔后分离左输尿管,不结扎输尿管即关闭腹腔。②3组大鼠于术后10d,麻醉处死,取术侧肾组织做肾脏病理检查,在光学显微镜下观察肾间质病变程度。应用免疫组织化学法和蛋白免疫印记分析法检测大鼠梗阻侧肾脏转化生长因子β1、结缔组织生长因子的表达部位及蛋白表达。结果:大鼠36只全部进入结果分析。①各组大鼠肾脏病理学改变:单侧输尿管梗阻引起大鼠梗阻侧肾脏的间质纤维化,经槲皮素治疗后能够明显减轻单侧输尿管梗阻导致减轻肾脏病理损害。②各组大鼠免疫组织化学结果:与假手术组比较,单侧输尿管梗阻组和槲皮素组转化生长因子β1、结缔组织生长因子染色阳性表达增多(P<0.01);槲皮素组转化生长因子β1、结缔组织生长因子染色阳性表达比单侧输尿管梗阻组明显降低[(7.41±0.93)%比(13.39±0.87)%,P<0.01;(7.26±0.54)%比(10.18±0.49)%,P<0.05]。③各组大鼠免疫印记分析结果:与假手术组大鼠相比,单侧输尿管梗阻10d,大鼠梗阻侧肾脏组织内转化生长因子β1、结缔组织生长因子水平均明显增加(P<0.01),槲皮素组转化生长因子β1、结缔组织生长因子相对表达丰度明显低于单侧输尿管梗阻组[(2.42±0.56)%比(5.50±0.87)%,(3.26±1.54)%比(6.18±1.49)%,P<0.05]。结论:槲皮素具有抗肾间质纤维化作用,可能与其下调单侧输尿管梗阻大鼠肾脏组织中转化生长因子β1和结缔组织生长因子的表达有关。     

结缔组织生长因子在大鼠心脏移植慢性排斥反应中的表达及意义

背景：慢性排斥反应限制了心脏移植患者的长期存活．有报道结缔组织生长因子因其与细胞增殖和胶原合成有关，似乎参与了此过程。 目的：假设结缔组织生长因子在大鼠心脏移植慢性排斥反应中发挥作用，实验拟验证其表达与心脏慢性排斥反应病理过程的关系。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2007—04／08在中南大学湘雅二医院动物实验中心完成。 材料：取20只Wistar大鼠作为供体，20只SD大鼠作为受体，制作腹部异位心脏移植模型20例次；另选择10只Wistar大鼠作为对照。 方法：大鼠腹部异位心脏移植术后，给予环孢素A、霉酚酸酯和甲泼尼龙三联免疫抑制治疗。移植后2．8周分别按随机数字表法麻醉后处死10只受体大鼠．取心脏；10只Wistar大鼠心脏作为对照。 主要观察指标：采用苏木精-伊红染色及Van Gieson染色观察心肌病理形态、心肌血管密度及心脏血管狭窄程度：并进行心肌纤维化半定量评分。采用免疫组织化学法检测心肌组织结缔组织生长因予蛋自的表达：并分析结缔组织生长因子表达与慢性排斥反应过程中心肌血管病变及纤维化的相关性。 结果：①术后8周移植心脏血管狭窄程度、心肌纤维化评分及结缔组织生长因子蛋白表达量明显高于术后2周及正常心脏（P〈0．05-0．01）；术后8周移植心脏血管密度低于正常心脏（P〈0．05）；结缔组织生长因子在正常心脏基本没有表达。②心肌组织结缔组织生长因子蛋白表达灰度值与心肌纤维化、血管狭窄程度均呈负相关（r=0．734，-0．713，P〈0．01），表明结缔组织生长因子表达与心肌纤维化及血管狭窄程度呈正相关。结论：结缔组织生长因子在有心肌血管病变的移植心畦心肌组织中表达增强，其表达与心肌纤维化和心肌血管病变形成有关，在心肌移植排斥反应的病理过程中起重要作用。     

虫草肾茶颗粒对单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠肾脏影响的研究

目的观察虫草肾茶颗粒对单侧输尿管结扎致肾间质纤维化模型大鼠的肾脏保护作用,并探讨其机制。方法将60只雄性wistar大鼠随机分为五组,分别为假手术组、模型组、中药对照组、西药对照组、治疗组,每组12只。采用单侧输尿管结扎法制作肾间质纤维化模型,治疗组给予虫草肾茶为4ml·d-1·只-1;西药对照组给予福辛普利为1.5mg·d-1·只-1(浓度为0.375mg/ml)的水溶液;中药对照组给予肾衰宁胶囊4ml·d-1·只-1(相当于生药0.9g·ml·只-1),每日1次给药;假手术组及模型组给予相同体积的生理盐水灌胃,每日1次。实验期间每周称一次体重,并观察大鼠生存状况。分别于第2周、4周、6周采血,进行血肌酐(Scr)、尿素氯(BUN)检测。于第6周末处死大鼠,观察肾脏组织形态学变化,通过免疫组织化学方法检测各组大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)、核因子-κB(NF-κB)的表达。结果 (1)治疗组大鼠生存质量优于模型组;(2)治疗组大鼠各时间点BUN、Scr水平低于模型组,与中药对照组、西药对照组相比也有所降低;(3)治疗组大鼠肾组织CTGF、NF-κB的表达与模型组相比明显下调。结论虫草肾茶颗粒可通过减少CTGF、NF-κB在单侧输尿管结扎大鼠肾组织的表达,部分抑制肾间质纤维化的发生,保护肾脏,并能明显改善单侧输尿管结扎大鼠的生存质量,总体疗效优于肾衰宁及福辛普利。     

虫草肾茶颗粒对单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化模型CTGFmRNA的影响

目的观察虫草肾茶颗粒对单侧输尿管结扎致肾间质纤维化模型大鼠肾组织CTGFmRNA的影响。方法将60只雄性wistar大鼠随机分为五组,分别为假手术组、模型组、中药对照组、西药对照组、治疗组,每组12只。采用单侧输尿管结扎法制作肾间质纤维化模型,治疗组给予虫草肾茶为4ml.d-1.只-1;西药对照组给予福辛普利为1.5ml.d-1.只-1的水溶液;中药对照组给予肾衰宁胶囊4ml.d-1.只-1,1次/d给药;假手术组及模型组给予相同体积的生理盐水灌胃,1次/d。实验期间每周称一次体重,并观察大鼠生存状况。于第6周末处死大鼠,留取肾组织,应用realtime-PCR检测各组肾组织CTGFmRNA的表达。结果治疗组大鼠肾组织CTGFmRNA的表达与模型组相比明显下调。结论虫草肾茶颗粒可以部分抑制CTGF在单侧输尿管结扎大鼠肾组织的表达。     

解毒通络保肾胶囊保护糖尿病大鼠肾脏及影响结缔组织生长因子mRNA的表达效应

背景：结缔组织生长因子对。肾细胞的分化、增生及细胞外基质的合成和降解具有很强的调控作用，其异常表达在各种类型肾脏疾病包括糖尿病。肾病纤维化进程中起着至关重要的作用。目的：观察解毒通络保。肾胶囊对糖尿病大鼠。肾脏病变的保护作用及其对。肾脏结缔组织生长因子mRNA表达的影响。设计：以动物为观察对象。随机对照实验。单位：长春中医学院中医研究所，吉林大学再生医学科学研究所病理研究室。材料：选用清洁级Wistar大鼠46只，雌雄各半，体质量150—200g。解毒通络保肾胶囊由吉林省中医院制剂室提供（批号：2002101，由人参、黄芪、生地、枸杞子、知母、地骨皮、黄连、榛花、金银花、大黄、丹参、益母草等药物组成，0．25g／粒）；苯那普利（北京诺华制药有限公司提供，批号01046）。方法：实验于2002～05／2003～01在吉林大学再生医学科学研究所病理研究室完成。④选用Wistar大鼠46只，按随机数字表法分为4组：正常对照组（10只），模型组（12只），苯那普利治疗组（12只），中药治疗组（12只）。正常对照组：腹腔内注射等体积枸橼酸钠缓冲液；其余大鼠单次腹腔注射链脲佐菌素50mg／kg，临用前用0．1mol／L枸橼酸缓冲液溶解，pH4．2。造模72h后，尾静脉采血测空腹血糖并同时测尿糖，血糖≥16．7mmol／L，尿糖卅以上者为糖尿病模型造模成功。苯那普利治疗组：灌胃苯那普利混悬液15mg／（kg&;#183;d）；中药治疗组：灌胃解毒通络保肾胶囊混悬液5g／（kg&;#183;d）；正常对照组和模型组每日上午灌胃等体积自来水，1次／d，共12周。②用药12周后检测血糖、尿素氮、血肌酐、尿白蛋白排泄率；用放免法检测。肾组织血管紧张素Ⅱ；免疫组化法检测。肾脏纤维连接蛋白和Ⅳ型胶原蛋白表达水平；应用反转录聚合酶链反应检测。肾皮质结缔组织生长因子基因表达，并进行。肾脏组织学观察。④组间比较采用方差分析。主要观察指标：各组大鼠血和尿生化学指标和肾组织血管紧张素Ⅱ、病理形态、纤维连接蛋白和兔抗鼠Ⅳ型胶原蛋白表达、结缔组织生长因子mRNA表达比较。结果：实验过程中模型组、苯那普利治疗组、中药治疗组分别死亡5，4，3只，最终进人结果分析正常对照组、模型组、苯那普利治疗组、中药治疗组分别为10，7，8，9只。①体质量与肾质量比值：模型组明显高于正常对照组（P〈0．05）；苯那普利治疗组和中药治疗组明显低于模型组（P〈0．01）。②空腹血糖：模型组明显高于正常对照组（P〈0．01），中药治疗组明显低于模型组和苯那普利治疗组（P〈0．01）。③尿素氮、血肌酐、内生肌酐清除率、尿白蛋白排泄率和肾组织中血管紧张素Ⅱ含量：模型组均明显高于正常对照组（P〈0．01），苯那普利治疗组和中药治疗组明显低于模型组（P〈0．05～0．01）。④肾组织病理形态学改变：模型组较严重，苯那普利治疗组和中药治疗组均较轻。⑤纤维连接蛋白、兔抗鼠Ⅳ型胶原蛋白表达：模型组明显高于正常对照组（P〈0．01），苯那普利治疗组和中药治疗组明显低于模型组，高于正常对照组（P〈0．01）。⑥结缔组织生长因子mRNA表达：与正常对照组（0．43&;#177;0．10）比较，模型组肾皮质中结缔组织生长因子mRNA表达为其2．65倍。苯那普利治疗组和中药治疗组较模型组结缔组织生长因子mRNA表达下降23．68％和26．32％（P〈0．05，0．01）。结论：解毒通络保肾胶囊对糖尿病肾脏病变有保护作用，该作用发挥可能是减少肾组织中血管紧张素Ⅱ含量，下调糖尿病大鼠肾皮质结缔组织生长因子mRNA表达，从而减少细胞外基质的沉积实现的。     

阿托伐他汀对高血压大鼠血管纤维化及结缔组织生长因子的影响

目的:探究阿托伐他汀(atorvastatin)对肾血管性高血压血管纤维化及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:24只SD大鼠随机分为假手术组(N组)、高血压组(RH组)、阿托伐他汀组(他汀组)各8只;将RH组及他汀组大鼠建立二肾一夹肾血管性高血压(2K1C-RH)大鼠模型。术后4周末,他汀组开始以阿托伐他汀(10mg.Kg-1.d-1)灌胃,共8周。治疗前后RT-PCR法检测各组大鼠收缩压、胸主动脉CTGF、纤维连接蛋白(FN)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)的表达,并用免疫组化显示CTGF的表达。结果:与N组比较,RH组大鼠胸主动脉CTG-FmRNA、FNmRNA、ColⅢmRNA显著增加(P0.01);他汀组与RH组比较则3项指标明显下调(P0.05)。结论:阿托伐他汀能抑制高血压血管纤维化,可能与下调CTGF的表达有关。     

姜黄素对哮喘大鼠肺内胶原沉积、结缔组织生长因子表达及气道重构的影响

目的:通过观察姜黄素对哮喘大鼠肺内胶原沉积、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)表达的影响,探讨姜黄素对哮喘气道重构的治疗作用。方法:36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、姜黄素治疗组(C组)各12只,采用卵蛋白致敏大鼠哮喘模型,观察3组动物哮喘发作症状、胶原沉积情况及SABC免疫组化法检测CTGF在肺组织的表达变化。结果:B组大鼠哮喘发作症状明显重于C组,A组无症状。B组支气管黏膜下、血管壁及周围、肺泡壁、肺间质均有胶原大量沉积,C组胶原沉积程度明显轻于B组。A组胶原沉积不明显。免疫组化发现B组CTGF表达最强,C组较弱,A组微弱表达。结论:姜黄素可抑制哮喘大鼠肺组织的胶原沉积,在延缓气道重建中起重要作用,其作用机制可能是通过抑制CTGF的表达来实现。     

苯那普利对大鼠阿霉素肾病结缔组织生长因子表达的影响

目的 :探讨苯那普利对阿霉素肾病大鼠结缔组织生长因子 (CTGF)和转化生长因子 β1(TGF β1)表达的影响。方法 :3 6只大鼠随机分为正常组、肾病组和苯那普利治疗组 ,建立单次阿霉素尾静脉注射的模型 ,分别于4、7周后留取标本 ,检测 2 4h蛋白尿、血肌酐 ,肾组织分别行透射电镜、HE、PAS染色 ,应用免疫组织化学方法检测肾组织中的CTGF、TGF β1表达。结果 :肾病组大鼠尿蛋白排泄明显高于对照组 (P <0 0 5 ) ,肾小球与肾小管有明显病理改变 ,CTGF和TGF β1第 7周表达明显上调 (P <0 0 5 ) ,苯那普利治疗组CTGF和TGF β1表达下降 (P <0 0 5 )。结论 :在阿霉素肾病中 ,苯那普利可以减少尿蛋白 ,下调肾组织CTGF和TGF β1的表达 ,对肾脏呈保护作用。     

环氧合酶-2抑制剂对梗阻性肾病大鼠肾组织结缔组织生长因子表达的影响

目的：探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib)对梗阻性肾病大鼠模型肾组织结缔组织生长因子(CTGF)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响及机制。方法：采用单侧输尿管结扎(UUO)建立梗阻性肾病模型,并随机分为模型组和治疗组,另设假手术组作对照。治疗组每日给予塞来昔布100mg／kg,模型组、假手术组每日给予等体积的生理盐水于造模前1d至造模后14d灌胃,分别于UUO后3d、7d、14d分批处死,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TGF-β1、CTGF的基因表达,免疫组化技术检测TGF-β1、CTGF、α-SMA、FN的蛋白表达,放免法检测组织内cAMP的水平。结果：与假手术组相比,模型组TGF-β1、CTGF的基因表达显著上调,cAMP的水平下降(P<0．001)。塞来昔布对梗阻肾TGF-β1的表达无显著改变,但能升高组织内cAMP水平,抑制CTGF的表达,纤维化程度减轻。结论：在梗阻性肾病大鼠中TGF-β1、CTGF的表达均显著升高,选择性COX-2抑制剂通过升高组织内cAMP的水平来抑制TGF-β1的下游因子——CTGF的表达延缓肾间质纤维化。     

双醋瑞因干预体外培养关节软骨结缔组织生长因子的表达

背景:在骨关节炎软骨退变中结缔组织生长因子作为一种重要的效应分子在软骨细胞的增殖、分化方面发挥重要作用。临床应用双醋瑞因治疗骨关节炎已取得了良好的效果,但其治疗的确切机制尚不清楚。目的:观察不同浓度双醋瑞因对体外白细胞介素1β诱导下软骨细胞中结缔组织生长因子的影响。方法:体外培养SD大鼠关节软骨细胞,重组人白细胞介素1β刺激软骨细胞制备体外骨关节炎模型。实验分组:正常对照组不给予任何处理因素;模型对照组给予重组人白细胞介素1β;实验组给予不同浓度双醋瑞因+10μg/L重组人白细胞介素1β。利用MTT比色法观察软骨细胞的增殖情况,Western Blot法检测结缔组织生长因子的表达。以上实验均重复3次。结果与结论:MTT结果显示,与正常对照组比较,双醋瑞因能促进软骨细胞MTT增殖活性,以浓度为10-5 mol/L更明显(P<0.01),白细胞介素1β作用后各实验组软骨细胞增殖能力下降(P<0.05);但与正常对照组比较,无论是否加白细胞介素1β,浓度为10-4 mol/L和10-5 mol/L双醋瑞因仍能促进软骨细胞MTT增殖活性(P<0.05)。Western Blot检测结果显示,白细胞介素1β能够降低结缔组织生长因子的表达(P<0.01),浓度为10-5 mol/L双醋瑞因能够显著促进白细胞介素1β诱导下结缔组织生长因子的表达,显著高于模型对照组(P<0.01)。提示双醋瑞因可以促进白细胞介素1β诱导下结缔组织生长因子的高表达,其可能是双醋瑞因促进软骨细胞的分化增殖,治疗骨关节炎的作用机制之一。     

苦杏仁甙抑制大鼠肾脏纤维化的实验研究

目的:观察苦杏仁甙治疗单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的效果。方法:用单侧输尿管梗阻的方法建立大鼠肾脏间质纤维化模型。60只Wistar大鼠随机分为假手术组、单侧输尿管梗阻组、苦杏仁甙3mg腹腔注射组和苦杏仁甙5mg腹腔注射组,分别于术后7、14、21d处死动物,观察各组大鼠肾脏病理损害程度。结果:除假手术组外其余各组随着时间的延长,肾间质纤维化的程度越来越严重。苦杏仁甙治疗组在7、14d时与单侧输尿管梗阻组差异无统计意义,在21d时大鼠肾脏纤维化程度明显低于单侧输尿管梗阻组。结论:苦杏仁甙具有明显抑制大鼠肾间质纤维化作用。     

高糖透析液对大鼠腹膜结缔组织生长因子表达的作用

目的探讨腹膜透析液对大鼠腹膜结缔组织生长因子（CTGF）的表达及细胞外基质（ECM）合成的影响。方法将中南大学湘雅二医院动物实验中心提供的SD大鼠随机分为4组：正常对照组（Con）、生理盐水组（NS）、低糖透析液组（LG）、高糖透析液组（HG）。4周后,评价腹膜的功能。VG染色镜下测量腹膜胶原组织厚度。免疫组织化学方法检测CTGF、TGF-β1及纤连蛋白（FN）蛋白质的表达。采用RT-PCR检测大鼠腹膜组织中CTGF和TGF-β1mRNA的表达。结果LG、HG组与Con、NS组相比较,超滤量均显著下降（P〈0.05）;HG组与LG组比较,其超滤量明显减少（P〈0.05）。D/Pcr的比较：HG组比Con、NS组升高（P〈0.05）;D/DO的比较：HG组比Con、NS组明显下降（P〈0.05）,LG组比Con组低（P〈0.05）。HG组腹膜胶原厚度比与其余各组均增厚（P〈0.05）;LG组比Con组增厚（P〈0.05）;HG组CTGF、TGF-β1、FN蛋白表达水平显著高于其他各组（P〈0.05）;LG组显著高于Con、NS组（P〈0.05）。在Con及NS组中,TGF-β1、CTGFmRNA呈低水平表达,TGF-β1、CTGFmRNA在HG组中表达最高（P〈0.05）。结论腹膜透析液尤其是高糖腹膜透析液,能明显诱导大鼠腹膜CTGF的表达增强,并促使腹膜纤维化发生。     

结缔组织生长因子在糖尿病大鼠肾脏中的表达

目的 通过观察结缔组织生长因子（CTGF）在糖尿病大鼠肾脏中表达的动态改变,探讨CTGF在糖尿病肾病发生发展中的作用。方法 尾静脉内注射链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病大鼠模型。采用RT-PCR和Western blot检测1个月、3个月和6个月时糖尿病大鼠肾脏组织中CTGF的mRNA和蛋白的表达。光镜下观察糖尿病大鼠不同时期肾脏组织形态学的改变。结果 糖尿病大鼠1个月、3个月和6个月与同期对照大鼠相比,肾脏CTGF的mRNA表达上调,分别为对照组的1.56倍、2.05倍和3.74倍（P〈0.01）;同时蛋白表达亦上调,分别为对照组的2.48倍、2.93倍和5.82倍（P〈0.01）;此外,糖尿病6个月大鼠的CTGF mRNA和蛋白的表达明显高于糖尿病1个月和3个月大鼠的表达水平（P〈0.01）。组织形态学观察表明,糖尿病大鼠3个月时肾脏出现基膜增厚、肾小球扩张等糖尿病肾病早期的病理改变,随着病程的延长,病理改变越严重;6个月时出现肾小球硬化、肾间质纤维化等晚期的改变。结论 糖尿病大鼠早期肾脏已存在CTGF基因表达上调,在糖尿病肾病的发展过程中,CTGF基因表达上调仍持续存在。因此,CTGF基因表达上调在糖尿病肾病的发生发展中起着重要作用。     

强直性脊柱炎患者血清和骶髂关节结缔组织生长因子的表达——附30例检测分析

目的：了解AS患者血清和骶髂关节中结缔组织生长因子（CTGF）的表达情况。方法：选择30例AS患者和20名健康志愿者,分为AS组和健康对照组。采用ELISA法检测两组的血清CTGF水平,AS组患者行CT引导下骶髂关节细针穿刺活组织检查术,组织标本应用免疫组织化学染色检测CTGF的表达情况。结果：AS组骶髂关节组织的CTGF在血管翳炎症细胞及骨髓细胞的胞浆中高度表达,其阳性细胞数为（57．9±42．4）／HP,明显多于正常骶髂关节组织（2．7±2．5）／HP（P〈0．05）,AS组血清CTGF水平略低于健康对照组,但比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：AS骶髂关节中存在CTGF的高表达,提示CTGF可能在AS关节软骨纤维化、关节强直中起重要的作用。