大鼠严重烫伤早期应激反应中肝脏糖皮质激素受体变化的实验研究

目的 研究大鼠在严重烫伤早期应激反应中肝脏糖皮质激素受体（GR）的表达变化及意义，探讨影响GR改变的分子机制。方法 通过免疫印迹分析GR在严重烫伤后早期不同时相点肝脏中的表达变化及烫伤血清、细胞因子以及高浓度地塞米松对体外培养肝细胞GR表达的影响；应用放免和ELISA方法测定烫伤大鼠血清皮质酮和细胞因子TNF－α、IL-β的浓度变化。结果 大鼠肝脏GR的表达在严重烫伤后早期显著下调，而血清皮质酮和血清炎性细胞因子在烫伤早期均显著升高，体外实验则证实烫伤血清和TNF－α、IL－1对培养肝细胞的GR的表达有明显抑制作用，高浓度地塞米松作用则不明显。结论 严重烫伤会引起大鼠肝脏GR表达显著下调，烫伤早期分泌增多的炎性细胞因子可能是引起GR下调的主要原因之一，而烫伤早期机体内部大量生成的糖皮质激素对GR的表达并无显著影响。     

烫伤早期TNFα与IL-1增强骨骼肌蛋白质分解代谢作用机制的研究

目的 观察严重烫伤小鼠早期TNFα与IL-1对骨骼肌蛋白质分解代谢的影响及其机制。方法 建立包括背部及一侧后肢18%～20% Ⅲ度体表烫伤小鼠模型。以比目鱼肌体外温育酷氨酸净释放量反映骨骼肌蛋白质分解速率,观察72h内伤肢、未伤肢骨骼肌蛋白质分解速率、以及血浆、伤肢、未伤肢TNFα与IL-1含量及溶酶体组织蛋白酶类活性的动态变化。结果 伤后小鼠血浆、伤肢、未伤肢TNFα与IL-1水平均显著增高,48h达到峰值,伤肢增高更为明显,72h已见回落。未伤肢蛋白质分解速率48h高于正常,但72h已降至正常水平,伤肢则在72h明显高于正常与未伤肢,骨骼肌溶酶体组织蛋白酶活性与分解速率呈明显正相关。hrTNFα与hrIL-1分别对正常小鼠在体和离体比目鱼肌均可导致蛋白质分解速率与溶酶体组织蛋白酶活性增高。结论 烫伤早期TNFα、IL-1增强溶酶体内组织蛋白酶的活性导致骨骼肌蛋白质分解代谢的过度增强,从而造成机体负氮平衡是直接的,可能不受激素影响。     

严重创伤后血清内毒素、TNF—α、IL—1β、IL—6、IL—8的变化

目的 探讨严重创伤后血清内毒素、TNF-α、IL—1β、IL—6、IL-8的变化及其意义。方法 应用动态浊度法和放射免疫法检测34例严重创伤患者，动态观察伤后1周内血清内毒素、TNF-α、IL—1β、IL—6、IL—8的变化，并与正常健康人进行比较。结果 严重创伤患者伤后血清内毒素、TNF-α、IL—1β、IL-6、IL—8的的水平较正常人有明显升高，内毒素、TNF-α、IL-1β分别于伤后第2、3天达高峰，随后下降，第7天仍明显高于正常人；IL—6、IL—8早期即有升高，伤后5～7d升高明显，且有继续上升趋势；严重创伤患者伤后血清内毒素、TNF-α峰值水平、伤后第5天IL—6升高幅度与ISS评分呈显著正相关；死亡患者血清中内毒素、细胞因子较存活者相应时间显著升高。结论 创伤后能引起明显的内毒素血症和细胞因子反应，动态观察可能与病情发展程度、预后有关。     

大鼠严重烫伤后睾丸病理变化的实验研究

对大鼠体表３０％、Ⅲ＾。烫伤后３０ｄ内睾丸病理变化的动态观察表明：（１）生精细胞、支持细胞、曲细精管界膜及间质细胞均有不同程度的损伤，生精细胞的病变以精母细胞及精细胞为重，精原细胞无明显损伤；伤后３０ｄ生精上皮形态基本恢复正常。（２）间质细胞内３β－ＨＳＤ活性迅速降低，伤后３０ｄ仍保持较低水平。（３）烫伤后血清中睾酮迅速下降，伤后３０ｄ仍保持较低水平；而血清ＬＨ则无明显变化。作者认为曲细精管界膜及     

烫伤后大鼠肝糖皮质激素受体减少的机理——肾上腺部分切除动物的研究

部分去除肾上腺的大鼠烫伤后,血清糖皮质激素无明显升高,而肝胞液糖皮质激素受体(GR)却有升高的趋势,其中烫伤后6 h组和对照组的相差有非常显著的意义。进一步用打点杂交进行的研究表明,部分去腺大鼠烫伤后6h肝GR mRNA也有增加。这些结果提示,完整动物烫伤时肝胞液GR的减少依赖于血中糖皮质激素的升高。     

降钙素基因相关肽对严重烫伤大鼠心肌脂质过氧化的影响

目的 探讨降钙素基因相关肽（CGRP）对严重烫伤大鼠心肌损伤的保护作用。方法复制大鼠30％TBSAⅢ度烫伤动物模型,观察烫伤后单纯液体复苏组和液体复苏加静脉用CGRP组不同时相点血清心肌钙蛋白T（cTnT）和心肌丙二酪（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）变化。结果 烫伤后单纯液体复苏组大鼠血清cTnT升高,心肌组织MDA升高,SOD下降;液体复苏加静脉用CGRP组cTnT、MDA、SOD的变化幅度均显著小于单纯液体复苏组;同时各组间cTnT变化与MDA呈正相关,与SOD呈负相关。结论 CGRP对严重烫伤大鼠心肌损伤有保护作用,抗脂质过氧化可能是其主要机制。     

冬眠合剂对严重烫伤大鼠早期肺组织的保护作用

目的探讨冬眠合剂对严重烫伤大鼠早期肺组织的保护作用及可能机制。方法 66只雄性SD大鼠随机分为假烫伤组（n=6,模拟烫伤＋12mL/kg生理盐水皮下注射）、单纯烫伤组（n=30,Ⅲ度烫伤＋12mL/kg生理盐水皮下注射）和烫伤＋冬眠合剂组（n=30,Ⅲ度烫伤＋12mL/kg冬眠合剂皮下注射）。于模拟烫伤后3h（假烫伤组）和烫伤后3、6、12、24、48h时点（单纯烫伤组和烫伤＋冬眠合剂组）分批采集大鼠血样,处死动物后留取并制备肺组织标本。ELISA法测定血浆致炎因子白介素1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）、抑炎因子白介素10（IL-10）及内皮细胞表面标志物可溶性细胞间黏附分子1（sICAM-1）和内皮素1（ET-1）水平;酶学分光光度法和免疫组织化学法分别检测肺组织中性粒细胞髓过氧化物酶（MPO）活性和巨噬细胞表面标志物CD68表达。HE染色光学显微镜观察肺组织病理学改变。结果血清IL-1β、TNF-α、sICAM-1和ET-1水平及肺组织MPO活性和CD68阳性表达率,单纯烫伤组〉烫伤＋冬眠合剂组〉假烫伤组;血清IL-10水平,烫伤＋冬眠合剂组〉单纯烫伤组〉假烫伤组;部分时点检测指标组间比较差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。与单纯烫伤组烫伤后24h比较,烫伤＋冬眠合剂组相应时点的肺间质水肿程度较轻。结论冬眠合剂可显著减轻严重烫伤早期大鼠肺间质水肿和炎症反应程度,其机制可能与调节炎症反应,减少内皮细胞的活化与损伤有关。     

冬眠合剂对严重烫伤大鼠早期肺组织的保护作用

目的 探讨冬眠合剂对严重烫伤大鼠早期肺组织的保护作用及可能机制。方法 66只雄性SD大鼠随机分为假烫伤组（n=6,模拟烫伤+12 mL/kg生理盐水皮下注射）、单纯烫伤组（n=30,Ⅲ度烫伤+12 mL/kg生理盐水皮下注射）和烫伤+冬眠合剂组（n=30,Ⅲ度烫伤+12 mL/kg冬眠合剂皮下注射）。于模拟烫伤后3 h（假烫伤组）和烫伤后3、6、12、24、48 h时点（单纯烫伤组和烫伤+冬眠合剂组）分批采集大鼠血样,处死动物后留取并制备肺组织标本。ELISA法测定血浆致炎因子白介素1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）、抑炎因子白介素10（IL-10）及内皮细胞表面标志物可溶性细胞间黏附分子1（sICAM-1）和内皮素1（ET-1）水平;酶学分光光度法和免疫组织化学法分别检测肺组织中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)活性和巨噬细胞表面标志物CD68表达。HE染色光学显微镜观察肺组织病理学改变。结果 血清IL-1β、TNF-α、sICAM-1和ET-1水平及肺组织MPO活性和CD68阳性表达率,单纯烫伤组>烫伤+冬眠合剂组>假烫伤组;血清IL-10水平,烫伤+冬眠合剂组>单纯烫伤组>假烫伤组;部分时点检测指标组间比较差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。与单纯烫伤组烫伤后24 h比较,烫伤+冬眠合剂组相应时点的肺间质水肿程度较轻。结论 冬眠合剂可显著减轻严重烫伤早期大鼠肺间质水肿和炎症反应程度,其机制可能与调节炎症反应,减少内皮细胞的活化与损伤有关。     

重组人生长激素对烧伤大鼠肠粘膜细胞凋亡的作用

 目的 观察早期应用重组人生长激素（rhGH）对严重烧伤大鼠小肠粘膜上皮细胞凋亡的作用并探讨其可能的作用机制。  方法 42只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组（n=6只）、烧伤组（n=18只）和GH组（n=18只）。后两组造成25%总体表面积Ⅲ度烫伤,立即腹腔注射地塞米松80mg/kg,从伤后2h开始连续3d分别皮下注射等渗盐水和rhGH［1.33U/（kg·d）］。于伤后12、24和72h,HE染色观察末端回肠粘膜组织形态,TUNEL法检测小肠粘膜上皮细胞凋亡形态及凋亡率,荧光法检测肠粘膜细胞Caspase-3酶活性变化。  结果 烧伤组肠粘膜形态结构及上皮细胞损伤严重,GH组明显减轻,基本接近对照组。在伤后各时相点,烧伤组及GH组肠粘膜上皮细胞凋亡率均较对照组显著增加(P<0.01),但GH组显著低于烧伤组（P<0.01）,两组均于伤后24h达高峰［（15.40±3.21）% vs （38.80±6.98）%］;烧伤组及GH组Caspase-3酶活性亦明显高于对照组（P<0.05）,GH组明显低于烧伤组（P<0.05）,亦于伤后24h达高峰［（156.13±4.66）U/mg vs （214.60±9.29）U/mg］。结论  早期应用rhGH能明显抑制严重烧伤大鼠肠粘膜上皮细胞凋亡,可能通过下调Caspase-3酶活性抑制肠粘膜细胞凋亡,减轻肠粘膜损伤,维护其形态结构与屏障功能。     

严重烫伤大鼠肝脏热休克蛋白90α的表达变化及意义

目的 研究严重烫伤早期大鼠肝脏组织中糖皮质激素受体分子伴侣热休克蛋白90α(HSP90α)的表达变化及意义。方法 用免疫印迹技术分析严重烫伤后不同时相肝脏组织中HSP90α的表达量改变，通过免疫组化进一步观察HSP90α在肝细胞胞核中的表达变化。结果 大鼠严重烫伤后72h内肝脏HSP90α的表达明显升高，尤其以12～48h更为显著，在48h左右肝细胞核内还出现HSP90α的异位高表达。结论 严重烫伤可以引起肝脏HSP90α异常高表达，这可能是严重创伤早期糖皮质激素受体表达和功能发生改变的原因之一。     

丙戊酸钠对重度烫伤大鼠肺微血管内皮屏障的保护作用和机制研究

背景 严重烧伤后患者出现全身炎症反应综合征,可引起毛细血管渗漏症,最终导致多器官功能障碍,严重影响预后.组蛋白乙酰化在毛细血管渗漏的进展过程中发挥重要作用.丙戊酸钠作为去乙酰化的抑制剂,可能保护烧伤患者器官功能.目的 研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠(valproic acid,VPA)对烫伤大鼠肺微血管内皮屏障的保护作用及其机制.方法 SD大鼠随机分为假烫+0.9％氯化钠注射液组(NN组)、假烫+VPA组(NV组)、烫伤+0.9％氯化钠注射液组(SN组)、烫伤+VPA组(SV组),每组16只.分别于伤后2 h和6 h处死大鼠.取肺组织测定肺微血管通透性、组织含水率和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)含量、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性和组蛋白H3K9位赖氨酸的乙酰化(Ac-H3K9)水平.结果 与NN组相比,SN组2 h和6 h大鼠肺微血管通透性和肺组织含水率均显著增加(P均<0.05);同时VEGF水平、MPO活性及Ac-H3K9表达也明显增高.伤后6 h,与SN组相比,SV组大鼠肺微血管通透性降低,肺组织含水率减少,VEGF水平、MPO活性、Ac-H3K9表达降低(P均<0.05).结论 VPA可显著减轻严重烫伤引起的肺微血管内皮屏障损害,其作用机制可能与丙戊酸钠对VEGF和MPO的抑制作用有关.     

非诺贝特改善严重烫伤小鼠应激状态下胰岛素抵抗作用的效果观察

目的：观察非诺贝特对严重烫伤小鼠应激状态下胰岛素抵抗的作用.方法：130只SPF级昆明小鼠,随机分为：低剂量组（Ⅰ）、高剂量组（Ⅱ）和对照组（Ⅲ）各40只,正常组10只.将小鼠制成Ⅲ°30％全身体表面积（TBSA）烫伤模型,正常组不烫伤,烫伤后Ⅰ、Ⅱ组分别予以30 mg·kg-1· d-1、100 mg·kg-1·d-1非诺贝特灌胃,Ⅲ组予以0.5 mL· d-1生理盐水灌胃.各组分别于第1、3、7、14天随机抽取10只小鼠（正常组一次性处死）,处死收集血清,测定空腹血糖、血清胰岛素、TNF-α、游离脂肪酸（FFA）水平,运用稳态模式法（HOMA）计算胰岛素抵抗（IR）指数,同时切取肝脏组织光镜下观察其病理变化.结果：烫伤后各组小鼠在第1、3、7天HOMA-IR值均高于正常组,Ⅰ组和Ⅱ组HOMA-IR值均低于Ⅲ组.Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各组小鼠血清TNF-α、FFA水平在伤后不同时间点均高于正常组,Ⅰ组和Ⅱ组均低于Ⅲ组（P＜0.05或P＜0.01）,但Ⅰ组和Ⅱ组在同一时间点均值比较差异无统计学意义（P＞0.05）.各组不同时间点比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.烫伤后小鼠肝脏有不同程度的脂肪变性,给予诺贝特干预后,肝脏脂肪变性有所改善.结论：非诺贝特可以改善烧（烫）伤后小鼠应激状态下IR,其可能与降低严重烫伤小鼠血清TNF-α和FFA水平,减轻肝脏脂肪变性有关.     

重度烫伤小鼠脾脏树突状细胞的变化及意义

目的 探讨30％烫伤小鼠脾脏树突状细胞(DC)含量、活性变化及意义.方法 复制C57BL/6小鼠30％烫伤实验模型,分为正常对照组和实验组,实验组又分为4h、12h、24 h、48h及72 h组,每组10只小鼠.免疫荧光标记观察CD11c和共刺激分子CD86在脾脏DC中的表达,流式细胞术检测各组脾脏CD11c+DC含量变化.结果 正常对照组小鼠脾脏中见少量CD11c+DC;实验4h和12h组,脾脏CD11c+DC与CD86+DC含量均较正常对照组明显增加(P＜0.05);自实验24h组,DC含量开始减少,其中反映DC活性的CD86+DC含量较正常对照组明显下降(P＜0.05).结论 脾脏DC在烧伤后短时间内一过性数量增多、活性增强,而后DC活性明显减弱且数量减少,提示烧伤后脾脏DC的变化与细胞免疫功能密切相关.     

TNFα对烫伤大鼠骨骼肌26S蛋白酶复合体及19S调节复合体的作用

目的 为阐明及防治烧伤后负氨平衡提供理论依据。方法在接近体内环境下于体外分别用免疫沉淀扣除法和间接ELISA法检测TNFα对30％体表皮肤全层烫伤大鼠烧伤后第1、2、3、5、7天内骨骼肌中26S蛋白酶复合体及19S调节复合体的活性和蛋白水平的影响。结果 TNFα可以刺激烧伤后大鼠骨筋肌中26S蛋白酶复合体及19S调节复合体的活性和蛋白表达水平明显升高。结论 TNFα对烧伤后大鼠骨骼肌中26S蛋白酶复合体系统的激活具有重要作用，从而加强蛋白质的分解代谢，这可能与烧伤后负氮平衡的发生密切相关。     

严重烫伤早期兔血脑屏障病理学观察

目的探讨严重烫伤兔(50%Ⅲ度烫伤)早期,血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的病理学变化.方法雄性大白兔10只,均制成50%Ⅲ度烫伤模型,随机分为烫伤前、烫伤后1、2、3、4 h 5个时相点组,每个时相点组分别取2只兔,取脑组织进行大体、光镜与电镜观察.结果烫伤后2 h,内皮细胞肿胀,BBB开放.随着病变时间的延长,内皮细胞紧密连接开始模糊,BBB进一步开放.结论随病变时间的延长,内皮细胞的损伤逐渐加重,BBB的开放逐渐增大,最终导致脑水肿的形成.