镁对缺血后再灌注心肌线粒体膜的影响

在大鼠离体等容收缩心脏观察缺血后再灌注对心肌线粒体的损伤及镁的保护作用。结果表明，在缺血期灌注高镁溶液可保护线粒体的谷胱甘肽过氧化物酶活性，减轻脂质过氧化反应，线粒体膜流动性维持较好，钙超载现象明显减轻。     

镁对缺血后再灌注心肌线粒体膜的影响

在大鼠离体等容收缩心脏观察缺血后再灌注对心肌线粒体的损伤及镁的保护作用。结果表明，在缺血期灌注高镁溶液可保护线粒体的谷胱甘肽过氧化物酶活性，减轻脂质过氧化反应，线粒体膜流动性维持较好，钙超载现象明显减轻。     

含甘露醇的温血停搏液控制性再灌注对缺血再灌注心肌线粒体功能的保护作用

利用猫体外循环模型观察含甘露醇的温血停搏液控制性再灌注对缺血再灌注心肌线粒体功能的影响。结果发现,缺血心肌再灌注后其线粒体功能在缺血损伤的基础上进一步加重,线粒体膜丙二醛含量明显增加,心肌超氧化物歧化酶活性明显下降。用含甘露醇的温血停搏液控制性再灌注可保护缺血后再灌注心肌的线粒体功能,降低线粒体膜丙二醛含量保护心肌超氧化物歧化酶活性。表明含甘露醇的温血停搏液控制性再灌注,可提高心肌对氧自由基的清除能力,减轻线粒体膜脂质过氧化,有利于再灌注线粒体功能的恢复。     

丹参素纳米柔性脂质体抗心肌缺血及缺血后再灌注损伤的研究

目的探讨丹参素纳米柔性脂质体贴剂抗心肌缺血及缺血后再灌注损伤。方法通过心肌超微结构,观察药物贴剂对急性缺血心肌的保护作用;TTC法测定心肌梗死范围。结果丹参素纳米柔性脂质体贴剂组细胞膜完整,线粒体结构基本清晰,肿胀轻微,糖原颗粒明显增加;药物贴剂能显著缩小随后长时间缺血所引起的心肌梗死范围,其差异具有显著性(P<0.05)。结论丹参素纳米柔性脂质体贴剂对心肌缺血的心肌细胞有保护作用,对缺血后再灌注损伤心肌同样也具有一定的保护作用。     

心肌梗塞急性期治疗中不宜应用肌苷类药物

缺血组织在再灌注再给氧时往往造成更大组织损伤的原因是自由基大量产生的结果。如果在心肌梗塞急性期大量应用肌苷类药物,不仅不能改善心肌代谢,相反,由于人为地大量增加了体内的次黄嘌呤含量,就使得缺血组织再灌法再给氧时在黄嘌呤氧化酶的催化下更大量地产生·O_2~-及其它自由基,导致组织更大损伤,加重心肌梗塞的症状。     

氧自由基致大鼠心肌线粒体损伤及维生素C对其保护作用的实验研究

目的：在大鼠心肌线粒体自由基损伤的体外实验中,观察维生素C的保护作用,为治疗心肌缺血再灌注损伤提供实验依据。方法：采用黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统产生氧自由基,对分离的心肌线粒体进行体外损伤实验,通过电镜形态学和生物化学及同位素方法检测大鼠心肌线粒体病理变化、脂质过氧化物含量及摄钙能力。结果：黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统产生的氧自由基对心肌线粒体有损伤作用,电镜可见形态学改变,线粒体悬液中脂质过氧化物含量明显升高,线粒体摄钙能力明显降低。维生素C可减少大鼠心肌线粒体的形态学损伤,改善线粒体的摄钙能力。结论：氧自由基可在体外条件下对大鼠心肌线粒体产生损伤,这种损伤表现在电镜形态学改变,线粒体摄钙能力的减弱;维生素C能保护氧自由基损伤的大鼠心肌线粒体,保护机制是能直接减少氧自由基的生成。     

纳络酮对兔缺血再灌注心肌线粒体氧耗量和游离脂肪酸含量的影响

目的　观察纳络酮对兔缺血再灌注心肌细胞线粒体呼吸耗氧量和游离脂肪酸含量的影响。方法　建立兔心肌缺血再灌注模型、分离线粒体 ,用氧电极法检测线粒体氧耗量和用气相色谱分析法测定游离脂肪酸含量。结果　单纯缺血组生理盐水和纳络酮治疗心肌线粒体呼吸氧耗量与对照组无明显差别 (P >0 .0 5 ) ;缺血再灌注组生理盐水和纳络酮治疗心肌线粒体呼吸耗氧量明显低于单纯缺血组和对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1 ) ,但纳络酮治疗组明显高于生理盐水治疗组 (P <0 .0 1 ) ;单纯缺血组、缺血再灌注组生理盐水和纳络酮治疗心肌线粒体FFA含量均明显高于对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1 ) ;再灌注时纳络酮治疗心肌线粒体FFA含量明显低于生理盐水治疗心肌 (P <0 .0 5 )。结论　纳络酮能够提高缺血再灌注后心肌细胞线粒体氧耗量、降低游离脂肪酸含量 ,说明纳络酮对心肌线粒体具有保护作用     

家兔心肌组织α_1受体和细胞膜Ca~(2+)在心肌缺血/再灌注损伤时的变化

本研究以~3H哌唑嗪为特异的标记配基定量地检测了家兔心脏α_1受体及其在心脏缺血/再灌注损伤时的变化,并结合细胞膜内Ca~(2+)含量的变化及丹参对缺血心肌的保护作用,探讨了心肌/再灌注损伤的机理。结果表明,α_1受体随心肌缺血时间的延长而明显升高,40分钟时达正常对照的2倍以上,在此基础上再灌注4分钟,受体数目稍降,但仍保持在高水平。细胞膜的Ca~(2+)在缺血时的变化与α_1受体的变化平行(随时间而增高),但缺血40分钟再灌注4分钟时明显下降。预先耳缘静脉注射丹参制剂后,缺血40分钟再灌注4分钟,上述两种指标均与对照组无差异。提示丹参对心肌细胞膜具有明显保护作用。     

大鼠心肌缺血再灌注时能量代谢及脂质过氧化变化及复方丹参滴丸的保护作用

目的探讨大鼠心肌缺血-再灌注时能量代谢及脂质过氧化变化及复方丹参滴丸的保护作用.方法采用Langendorff离体心脏灌流技术,制备心肌缺血再灌注损伤模型,分别在缺血前预灌时及缺血后再灌注时用复方丹参滴丸对心肌给予保护,观察心肌能量代谢及脂质过氧化(LPO)变化.本实验共分4组,正常对照组,单纯缺血再灌注组,复方丹参滴丸前保护组,复方丹参滴丸后保护组.结果①心肌缺血40min再灌注20min,心肌组织内高能磷酸化合物明显减少,脂质过氧化物含量明显增多,与正常对照组比P<0.01.②在缺血前预灌注时及缺血后再灌注时加入复方丹参滴丸,心肌组织中的高能磷酸化合物均高于单纯缺血再灌注组(P<0.01),两组ATP、TAN均接近正常水平(P>0.05).两组的LPO低于单纯缺血再灌注组,复方丹参滴丸前保护组的LPO与对照组比无明显差别(P>0.05).结论心肌缺血40min再灌注20min,心肌能量代谢障碍,脂质过氧化反应增强,大鼠心肌发生缺血再灌注损伤.复方丹参滴丸在缺血前预灌注时与缺血后再灌注时给予均可通过增加心肌能量储备,抑制脂质过氧化物的生成而保护心肌.     

栝蒌对家兔急性心肌缺血再灌的保护作用

以脂质过氧化物含量(MAD),超氧物歧化酶(SOD)活性及心肌出血为指标观察栝萎对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用。结果表明枯萎能减轻缺血再灌注区心肌 MAD 的升高反应,提高 SOD 活性,降低再灌后缺血心肌的出血率。     

Alterations of mitochondrial function in ischemia/reperfusion cat heart

The effect of myocardium being subjected to 60 min ischemia and 60 min reperfusion incat cardiopulmonary bypass on level of lipid peroxides(LPO),function of myocardial mitochon-dria and activity of superoxides dismutase(SOD)was studied. Myocardial mitochondrial functionwas depressed slightly 60 rain after ischemia but significantly 60 min after reperfusion.Increasedlipid peroxides content and decreased activity of SOD were observed at 60 rain after ischemia.Af-ter reperfusion,the activity of SOD continued decreasing,and LPO elevated still further.Theseresults support the hypothesis that free radicals may contribute to myocardial reperfusion injury.     

褪黑素通过抑制挛缩减轻大鼠离体心脏的缺血再灌注损伤

目的 探讨褪黑素（Mel）抑制挛缩改善大鼠离体心脏缺血再灌注（IR）损伤的作用及机制。方法 采用Langendorff离体心脏灌流方法模拟缺血再灌注模型,40只SD大鼠按随机数字表法分为4组（10只/组）。正常对照组（Control）：正常灌注175 min;IR组：全心缺血45 min,再灌注120 min;Mel+IR组：用Mel（5 μmol/L）灌注1 min,全心缺血45 min,用Mel（5 μmol/L）再灌注5 min,Krebs-Henseleit液再灌注115 min;挛缩抑制剂2,3-丁二酮单肟（BDM）干预缺血再灌注组（BDM+IR）：用BDM（20 mmol/L）灌注1 min,全心缺血45 min,用BDM（20 mmol/L）再灌注5 min,KH液再灌注115 min。以心肌死亡面积、caspase-3活性、细胞色素c（cytochrome c）和cleaved caspase-3蛋白表达检测各组心肌损伤程度;以HE染色、冠脉流出液中乳酸脱氢酶（LDH）活性、肌钙蛋白（I cTnI）含量、左心室舒张末压（LVEDP）和电镜观察肌原纤维收缩带的形成评价各组心脏挛缩程度;检测心肌组织中ATP含量的变化。结果 与Control组相比,IR组心肌死亡面积、caspase-3活性、cytochrome c和cleaved caspase-3蛋白表达显著增加（P<0.01）;同时,冠脉流出液中LDH活性和cTnI含量明显增加,再灌注末LVEDP显著抬升,HE染色显示心肌纤维发生明显断裂,ELISA检测发现ATP含量显著降低（P<0.01）;另外,透射电镜结果表明IR组肌节过度收缩,形成明显的肌原纤维收缩带;而给予Mel和BDM处理后,可显著减小心肌死亡面积、aspase-3活性、cytochrome c和cleaved caspase-3蛋白表达,还可明显抑制LDH活性、cTnI含量和LVEDP,减少心肌纤维断裂,并增加胞内ATP含量;更为重要地是,Mel和BDM能减轻IR引起的肌节过度收缩,并抑制收缩带的形成。结论 Mel可通过抑制挛缩明显改善心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与增加心肌细胞内ATP含量,减轻心肌机械性损伤引起的肌膜撕裂,减少细胞内容物的漏出有关。     

线粒体Slo1通道激活引起的心肌保护作用涉及线粒体渗透性转换机制

目的: 研究线粒体大电导钙激活钾通道(mitoSlo1通道)开放是否具有心肌保护作用及其是否与抑制线粒体渗透性转换孔的开放有关.方法: 采用离体大鼠心脏灌流方法,结扎冠状动脉左前降支30 min和复灌120 min复制局部缺血/复灌损伤模型,测定心肌梗死面积、冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)含量及各项心室力学指标.提取大鼠心肌线粒体,分光光度法测定钙诱导下520 nm吸光度的改变.结果: 与单纯缺血/复灌组相比,Slo1通道激动剂NS1619预处理组明显降低离体心脏缺血/复灌后的梗死面积[(17.21±5.59 vs 46.54±3.60)%]和复灌期冠脉流出液中LDH含量[(69.21±8.30 vs 253.79±15.85) U/L],促进左室动力学的恢复;线粒体渗透转换孔开放剂atractyloside拮抗了NS1619的作用.在分离的心脏线粒体,NS1619预处理组520 nm处吸光度的下降明显低于单纯加钙组[(10.70±3.22 vs 21.53±2.57)%].结论: mitoSlo1通道激活具有抗心肌缺血/复灌损伤的保护作用,其机制可能与抑制线粒体渗透转换孔开放有关.     

天麻素抗大鼠离体心肌缺血/再灌注损伤的作用

目的：观察天麻素对离体大鼠心肌缺血/再灌注（I/R）损伤的影响。方法：应用Langendorff离体心脏灌注系统建立心肌缺血/再灌注损伤模型。40只SD大鼠随机分为正常对照组、缺血/再灌注组、天麻素0.1、0.025mmol·L^-1组。除正常对照组外,各组分别平衡灌注、全心停灌和再灌注各30min,观察天麻素对左室发展压（LVDP）、冠状动脉流量（CF）、心肌组织超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）含量以及超微结构的影响。结果：天麻素明显抑制I/R引起的LVDP和CF的下降,显著改善缺血/再灌注后的心功能,且有明显的量效关系。提高心肌SOD活力和降低MDA含量。显著减轻I/R引起的心肌超微结构的损伤性改变。结论：天麻素对I/R引起的心肌损伤有显著的拮抗作用,其机制可能与其增强清除自由基能力,减轻生物膜脂质过氧化反应,维持心肌细胞膜和线粒体的正常功能,改善能量代谢有关。     

右美托咪定预处理减轻离体大鼠心脏缺血/再灌注损伤的线粒体相关机制

目的：研究右美托咪定（dexmedetomidine,Dex）预处理对心肌缺血/再灌注（I/R）损伤的作用及其与线粒体渗透性转换孔（mPTP）和/或线粒体ATP敏感性钾通道（mitoK_ATP）的关系。方法：分离SD雄性大鼠心脏置于Langendorff系统行全心停灌30 min,再灌注120 min建立心肌I/R损伤模型,停灌前15 min给予Dex（10 nmol/L）处理。测定左心室动力学、再灌注期间冠脉流量及再灌注5 min时中乳酸脱氢酶（LDH）含量,实验结束测定心肌组织formazan含量以反映心肌梗死状况。结果：与正常对照组相比,I/R组明显降低了再灌注期间的左室发展压、冠脉流量及再灌注末心肌组织formazan含量,显著升高了再灌注左室舒张末压、心肌LDH渗出;Dex预处理明显改善了I/R心脏功能及心肌组织活性（P<0.01）;mPTP开放剂苍术苷（20 μmol/L,再灌注前给药20 min）及mitoK_ATP抑制剂5-羟基癸酸（100 μmol/L,停灌前给药20 min）可取消Dex预处理产生的抗心脏I/R损伤作用。结论：围手术期常用的辅助麻醉药Dex具有减轻离体大鼠心脏I/R损伤作用,且该心肌保护作用可能与Dex促进缺血前mitoKATP的开放,抑制再灌注早期mPTP的开放有关。     

辣椒素降低线粒体氧化应激水平拮抗心脏缺血再灌注损伤的研究

目的 探讨辣椒素（CAP）对心脏缺血再灌注损伤的保护作用及可能机制。方法 24只SD雄性大鼠随机分为4组（ n=6):①对照组,②缺血再灌注组（IR组）,③CAP干预缺血再灌注组（CAP+IR组）,④辣椒素受体拮抗剂辣椒平（CAPZ）预处理后加CAP干预缺血再灌注组（CAPZ+CAP+IR组）。采用大鼠离体心脏Langendorff灌流方法,再灌注30 min末以左室发展压（LVDP）和左室舒张末压（LVEDP）评价心脏功能。测定再灌注开始后前5 min冠脉流出液中乳酸脱氢酶（LDH）的含量。再灌注120 min后取心脏,采用2、3、5氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法评价心肌梗死面积的变化;HE染色观察心肌纤维形态学变化;线粒体氧化应激检测试剂盒检测超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）。再灌注10 min取心脏组织,Western blot检测细胞色素c和caspase3蛋白表达。结果 与对照组相比,IR组LVEDP升高、LVDP降低（ P<0.01）,心肌梗死面积增大（ P<0.01）,心肌纤维排列紊乱,线粒体SOD活性降低、MDA质量摩尔浓度增加（ P<0.01）,冠脉流出液中LDH含量增多（ P<0.01）,caspase3、细胞色素c蛋白的表达量增加（ P<0.01）;与IR组比较,CAP+IR组LVEDP降低、LVDP部分恢复（ P<0.01）,心肌梗死面积减小（ P<0.01）,心肌纤维断裂减少,线粒体SOD活性增加,MDA质量摩尔浓度减少（ P<0.01）,冠脉流出液中LDH含量减少（ P<0.01）,caspase3和细胞色素c蛋白表达量降低（ P<0.01）;但CAPZ可阻断CAP的上述保护作用。结论 CAP可通过降低线粒体氧化应激减少缺血再灌注引起的细胞坏死和凋亡,改善心脏功能,减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤。     

缺血和再灌注心肌NHE－1mRNA表达的变化

目的探讨缺血再灌注心肌钠氢交换蛋白-1(NHE-1)mRNA表达的变化.方法成年大鼠心脏Langendorff离体灌流,随机分为六组(n=6),给予(1)正常灌流30min;(2)低灌流缺血60min;(3)低灌流缺血60min及再灌注30min;(4)预处理后低灌流缺血60min(5)预处理后低灌流缺血60min再灌注30min;(6)老龄大鼠离体心脏低灌流缺血60min等不同条件处理.保留心肌,使用RT-PCR方法对比不同处理条件下心肌NHE-1表达的变化.结果(1)缺血组心肌(Ⅰ)NHE-1mRNA水平(0.734±0.053)较正常对照组(N)(0.300±0.007)明显升高(P＜0.05),再灌注组心肌(R)NHE-1的mRNA水平(0.281±0.019)较缺血组降低(P＜0.05),与正常组无明显差异(P＞0.05);(2)预处理缺血组心肌(Pi)NHE-1 mRNA水平(0.256±0.011)较缺血组心肌(0.734±0.053)明显降低(P＜0.05),预处理再灌注组心肌(Pr)NHE-1 mRNA水平(0.135±0.011)较再灌注组心肌(0.281±0. 019)降低(P＜0.05);(3)老龄大鼠低灌流缺血心肌(S)NHE-1的mRNA表达(0.787±0.021)与成年大鼠低灌流缺血心肌(Ⅰ)NHE-1的mRNA表达无明显统计学差异.结论低灌流缺血心肌NHE-1表达较正常灌流心肌明显升高,预处理可以明显降低缺血及再灌注心肌NHE-1的表达.     

Ⅱ.五氧化二钒对膜脂流动性的影响

本文采用DPH荧光偏振技术研究了五氧化二钒(V_2O_5)对大鼠肾皮质线粒体和微粒体膜脂流动性的影响。结果表明,V_2O_5在体外能降低线粒体和微粒体膜脂流动性,但在体内主要作用于微粒体。醋酸锌和EDTA在体外对 V_2O_5的这种作用有拮抗作用。作者讨论了膜脂流动性降低与脂质过氧化的关系及其意义。     

吡那地尔后处理对缺血/再灌注大鼠离体心脏超微结构的影响

目的观察吡那地尔后处理对缺血/再灌注成年大鼠离体心脏超微结构和线粒体评分的影响。方法 24只健康雄性SD大鼠,采用Langendorff离体心脏灌流系统,建立缺血/再灌注损伤模型,随机分为4组（n=6）,正常组（N）、缺血/再灌注组（I/R）、缺血后处理组（IPO）、吡那地尔后处理组（Pi）,使用透射电子显微镜,观察各组心肌组织超微结构变化,并进行线粒体评分。结果电镜显示心肌细胞N组结构正常,I/R组损伤最严重,IPO组及Pi组损伤程度相似,介于N组与I/R组之间。N组、IPO组、Pi组线粒体评分均低于I/R组（P〈0.05）。IPO组和Pi组线粒体评分无统计学意义（P=0.247）。结论缺血/再灌注可对心肌细胞超微结构造成严重损伤,使线粒体评分分值增加,造成心肌损害,缺血及吡那地尔后处理均可减轻再灌注所致心肌细胞超微结构损伤,降低线粒体评分分值,可能产生心肌保护作用。