基质金属蛋白酶及基质金属蛋白酶组织抑制因子在支气管哮喘发病中作用及早期预防性吸入糖皮质激素的干预研究

目的 探讨基质金属蛋白酶(MMP)及基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)与支气管哮喘(简称哮喘)气道重塑的相关性以及预防性吸入激素对气道重塑的干预作用.方法 按随机数字表法将72只清洁级雄性Wistar大鼠分为对照组、哮喘组(卵原蛋白)、干预组(布地奈德+卵原蛋白),每组大鼠24只,分别于雾化激发后第7天、第28天和第35天处死每组大鼠中8只进行气道形态学观察,并采用病理图像分析系统测量大鼠的气道形态学参数.采用免疫组织化学测定肺组织MMP-9、TIMP-1的表达及ELISA方法 检测支气管肺泡灌洗液的上清中MMP-9及TIMP-1的含量.结果 ①与相应对照组相比,28d、35 d哮喘组内管壁厚度、平滑肌厚度、胶原沉积明显增厚(P＜0.05或＜0.01);经治疗后28 d、35 d组平滑肌厚度与相应哮喘组相比差异无统计学意义;而胶原沉积在治疗28 d、35 d组与相应哮喘组相比明显减少(P＜0.01);内管壁厚度治疗35 d组与相应哮喘组相比差异开始下降,但仍高于对照组(P值均＜0.05).②哮喘组支气管肺泡灌洗液中MMP-9及MMP-9/TIMP-1在初始阶段表达上调,在后期下降(P＜0.01);TIMP-1在初始阶段表达上调,在后期亦有下降的趋势,但差异无统计学意义;应用糖皮质激素干预后,在早期MMP-9、TIMP-1及两者比值明显低于哮喘组(P＜0.05),在晚期哮喘组与治疗组无明显差异.结论 哮喘发生、发展过程中,存在MMP-9/TIMP-1的表达失衡,糖皮质激素可能通过调节MMP-9/TIMP-1的平衡,阻抑胶原沉积而干预气道重塑的发生.     

吸烟对致敏大鼠肺组织基质金属蛋白酶9及其抑制剂1表达的影响

目的 通过观察吸烟对致敏大鼠肺组织基质相关因子基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制因子1(tissue inhibitor of metallopmteinase-1,TIMP-1)表达的影响,探讨吸烟在支气管哮喘(简称哮喘)气道重塑中的作用.方法 24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、致敏组和吸烟致敏组,每组8只.后两组用卵白蛋白(OVA)致敏并长期(8周)吸人激发,制备哮喘模型,在激发第3周开始,吸烟致敏组大鼠置于自制熏箱内进行被动吸烟.采用免疫组织化学法检测大鼠气道上皮细胞MMP-9、TIMP-1的蛋白表达,同时测量支气管壁的厚度,并用逆转录-聚合酶链反应法检测各组肺组织的MMP-9 mRNA、TIMP-1 mRNA含量.结果 ①吸烟致敏组气道壁厚度[(23.28±2.38)μm2/μm]明显高于致敏组[(20.06±2.94)/μm2/μm]和对照组[(11.64±2.42)μm2/μm](P值均＜0.05),致敏组高于对照组(P＜0.05),②吸烟致敏组肺组织中MMP-9 mRNA表达(0.49±0.02)和气道上皮细胞MMP-9蛋白含量(32.78±2.60)均明显高于致敏组(0.41±0.04,23.05±2.11)和对照组(0.23±0.03,15.88±1.69)(P值均＜0.01),致敏组高于对照组(P值均＜0.01),③吸烟致敏组肺组织中TIMP-1mRNA表达(0.53±0.02)和气道上皮细胞TIMP-1蛋白含量(34.54±2.90)均高于致敏组(0.37±0.05,21.25±2.28)和对照组(0.235=0.04,15.78±1.97)(P值均＜0.01),致敏组高于对照组(P值均＜0.01);④肺组织MMP-9/TIMP-1 mRNA比值:吸烟致敏组(0.91±0.05)低于致敏组(1.12±0.06)和对照组(1.03±0.09)(P值均＜0.01).致敏组高于对照组(P＜0.01),⑤气道上皮细胞MMP-9/TIMP-1蛋白含量比值:吸烟致敏组(0.94±0.03)低于致敏组(1.09±0.07)和对照组(1.01±0.06)(P＜0.05,P＜0.01),致敏组高于对照组(P＜0.01).结论 吸烟可使致敏大鼠肺组织MMP-9和TIMP-1过度表达,比例失调,加重气道重塑.     

氨茶碱对支气管哮喘气道重塑大鼠肺组织MMP-9及其基因表达的调节

目的 观察氨茶碱对支气管哮喘气道重塑大鼠气道形态学和转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其基因表达的调节作用.方法 24只SD大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组(35 mg/kg),每组8只,除正常组外以卵蛋白致敏并吸入激发法制备大鼠哮喘模型,治疗组、模型组从第1次哮喘激发开始(第15天)分别给予氨茶碱、生理盐水1次/d灌胃给药,用药4 w后处死大鼠,取肺组织HE染色,彩色图像分析仪测量支气管壁面积、支气管平滑肌面积,采用免疫组化法测定TGF-β1含量,ELISA法测定肺组织MMP-9含量,RT-PCR法测定MMP-9 mRNA含量.结果 与正常组比较,模型组大鼠支气管壁面积、平滑肌面积、肺组织MMP-9含量及MMP-9 mRNA含量明显增加(P＜0.01);与模型组相比,治疗组大鼠支气管壁面积、平滑肌面积、肺组织TGF-β1、MMP-9、MMP-9 mRNA含量均显著降低(P＜0.01).结论 氨茶碱可通过下调哮喘气道重塑大鼠肺组织MMP-9 mRNA表达、抑制MMP-9合成、抑制TGF-β1产生从而抑制支气管哮喘大鼠气道重塑.     

孟鲁司特钠、布地奈德对哮喘小鼠气道重塑及肺组织MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的观察孟鲁司特钠、布地奈德对哮喘小鼠气道重塑及肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)表达的影响。方法将40只雌性小鼠随机分为4组各10只,模型组、孟鲁司特钠组、布地奈德组采用卵蛋白(OVA)致敏及OVA连续滴鼻激发建立哮喘模型,对照组予同等剂量生理盐水;在每次激发前30 min,孟鲁司特钠组予孟鲁司特钠0.25 mL/只(0.1 mg/mL)灌服,布地奈德组用1 mg布地奈德+8 mL生理盐水雾化吸入20 min,对照组以生理盐水进行腹腔注射及雾化吸入。HE染色观察小鼠肺组织病理变化,Image-Pro Plus6.0彩色图像分析系统测定支气管壁及平滑肌厚度,免疫组化法测定肺组织MMP-9和TIMP-1。结果对照组无支气管收缩表现,支气管组织结构正常;较对照组,模型组出现支气管收缩、黏膜充血水肿及炎症细胞浸润等情况较重,孟鲁司特钠组和布地奈德组较模型组明显减轻。与对照组比较,模型组、孟鲁司特钠组、布地奈德组支气管壁、平滑肌厚度增加,MMP-9、TIMP-1阳性率增高(P<0.05或0.01);与模型组比较,孟鲁司特钠组、布地奈德组支气管壁、平滑肌厚度减小,MMP-9、TIMP-1阳性率降低(P<0.05或0.01)。结论孟鲁司特钠和布地奈德可部分改善哮喘小鼠气道重塑并降低肺组织MMP-9和TIMP-1的表达。     

H2松弛素对慢性阻塞性肺疾病大鼠支气管平滑肌增殖的抑制作用

目的探讨H2松弛素对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠支气管平滑肌增殖的抑制作用。方法观察正常对照组、COPD模型组及松弛素治疗组大鼠肺组织的病理变化,比较各组大鼠支气管壁及平滑肌厚度,检测基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-9、基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1表达水平及MMP-1/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值。结果与正常对照组大鼠相比,COPD模型组大鼠肺支气管壁及平滑肌厚度显著增厚,且松弛素治疗组大鼠肺支气管壁厚度及平滑肌厚度与COPD模型组大鼠相比显著降低(P0.05)。COPD模型组大鼠组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1的表达水平均高于正常对照组(P0.05),且MMP-1/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值与正常对照组相比,呈现明显升高趋势(P0.05);而对比COPD模型组大鼠,松弛素治疗组大鼠组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1的表达有所降低(P0.05),且MMP-1/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值与COPD模型组相比均降低(P0.05)。结论松弛素能抑制大鼠肺组织结构病理变化,抑制COPD气道平滑肌的增殖。     

姜黄素对哮喘大鼠气道重塑及MMP-9表达的影响

目的探讨哮喘大鼠气道重塑与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的关系以及姜黄素的干预作用。方法采用随机分组的方法,将Wistar大鼠随机分成对照组、哮喘组和姜黄素干预组,6周后处死大鼠,收集肺组织标本观察病理改变,采用免疫组化技术结合计算机病理图像分析系统,测定3组大鼠气道形态学参数及支气管上皮细胞MMP-9、基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)的相对含量。结果哮喘组支气管总管壁厚度和平滑肌厚度明显高于其他两组;MMP-9、TIMP-1广泛分布于气道黏膜上皮。哮喘组MMP-9、TIMP-1的平均灰度值明显低于对照组和姜黄素组;哮喘组MMP-9/TIMP-1比例失衡。结论姜黄素可减少气道壁和平滑肌增生而抑制哮喘气道重塑,其机制可能与下调MMP-9的表达,调节MMP-9/TIMP-1之间的平衡有关。     

MMP-9、TIMP-1分别对哮喘小鼠和气道重塑小鼠作用的比较研究

目的研究基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）和基质金属蛋白酶抑制剂-1（tissue inhibitor matrix metalloproteinase-1,TIMP-1）在小鼠哮喘模型和气道重塑模型中表达作用的区别。方法30只BALB／c雌性小鼠按随机数字表法分为哮喘组（n=10）、气道重塑组（n=10）和生理盐水对照组（n=10）。通过鸡卵清白蛋白（ovabumin,OVA）滴鼻和腹腔注射的的方法分别建立小鼠哮喘模型和气道重塑模型。通过病理学观察气道炎症和气道重塑。用免疫组化法测定MMP-9和TIMP-1蛋白的表达;RT-PCR测定MMP-9和TIMP-1的基因水平表达。结果病理学显示哮喘组气道痉挛,大量炎性细胞浸润;气道重塑组呈现气道上皮指状增生,管腔内容物增多,上皮下纤维化。免疫组化结果显示哮喘组MMP-9为8868.8±3544.5,TIMP-1为4783±1508.1,二者比值为1.85;气道重塑组MMP-9为4383.1±2498.6,TIMP-1为6542.3±3026.6,气道重塑组MMP-9／TIMP-1的比值为0.67。二者有统计学意义（P〈0.01）。RT-PCR结果显示气道重塑组MMP-9 mRNA的表达低于哮喘组,而气道重塑组TIMP-1 mRNA的表达高于哮喘组。结论MMP-9主要在哮喘气道炎症中表达增高,而TIMP-1则在气道重塑过程中表达升高,二者的比例失调可能是哮喘的发病机制之一。     

MMP-9及TIMP-1在支气管哮喘发病中作用及雷公藤多甙干预研究

目的观察支气管哮喘（简称哮喘）大鼠肺组织中细胞外基质（ECM）代谢相关因子基质金属蛋白酶9（MMP-9）及其抑制剂组织金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）的表达,研究雷公藤多甙在哮喘肺组织ECM重塑中可能的作用及其机制。方法建立大鼠哮喘模型,采用逆转录-聚合酶链反应技术（RT-PCR）测定肺组织中MMP-9、TIMP-1mRNA的表达。结果哮喘组MMP-9、TIMP-1在肺组织中的蛋白表达明显高于对照组（P〈0．01）,应用药物雷公藤多甙干预后,MMP-9、TIMP-1蛋白表达明显低于哮喘组（P〈0．05）。哮喘组MMP-9、TIMP-1在肺组织的mRNA表达也高于对照组（P〈0．01）,应用雷公藤多甙药物干预后,MMP-9、TIMP．1在肺组织的mRNA表达明显低于哮喘组（P〈0．01）。哮喘组肺组织中MMP-9／TIMP-1〉1,明显高于对照组（P〈0．05）,应用药物雷公藤多甙干预后,MMP-9／TIMP．1〈1,明显低于对照组（P〈0．05）和哮喘组（P〈0．01）。结论雷公藤多甙可能下调MMP-9的表达,调节MMP-9／TIMP-1的平衡,干预细胞外基质重塑。     

基质金属蛋白酶9及金属蛋白酶组织抑制剂1在肺血栓栓塞相关肺血管重构中的作用探讨

目的 通过颈外静脉注入自体血凝块并应用氨甲环酸建立大鼠肺血栓栓塞症(PTE)相关肺血管重构动物模型,探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)在PTE相关肺血管重构中的作用.方法 将56只SD大鼠随机分为PTE组及假手术组(Sham组).PTE组用注入血栓及抑制纤溶方法 制作PTE模型.Sham组用生理盐水代替血栓及抗纤溶药物.每组分别于制模后1、3、7、14 d各取7只鼠处死,留血检测 MMP-9、TIMP-1 含量.取左肺做苏木素伊红染色、磷钨酸苏木素(PTAH)染色及α- 平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组织化学(IH)染色,并做 MMP-9、TIMP-1 IH 及原位杂交(ISH)染色.结果 ①PTE组制模第7天见到栓塞部位肺血管重构,14 d 时更加明显.②PTE组血清 MMP-9 浓度及 MMP-9/TIMP-1 比值均高Sham(P0.01),TIMP-1在1 d 及3 d 时显著高于Sham组(P＜0.05,P＜0.01),7 d与14 d 时降至 Sham 组水平.③PTE 组 IH 染色显示栓塞部位的血管及新生内膜中的平滑肌细胞内皮细胞及浸润的单核一巨噬细胞,MMP-9 染色阳性.栓塞部位的血管内皮细胞及平滑肌细胞 TIMP-1染色阳性.Sham 组 MMP-9及 TIMP-1 染色阴性或弱阳性.MMP-9 及 TIMP-1 ISH染色结果与 IH 染色结果 基本一致.④α-SMA染色显示平滑肌细胞是新生内膜的主要成分.结论 颈外静脉注入自体血栓并重复应用抗纤溶药物可成功建立大鼠PTE相关肺血管重构模型,PTE相关肺血管重构的主要病理改变为新生内膜生成.MMP-9/TIMP-1失调参与了PTE相关肺血管重构过程.     

吸入布地奈德对支气管哮喘患者支气管肺泡灌洗液MMP-9和TIMP-1的影响

目的观察吸入布地奈德治疗支气管哮喘患者前后支气管肺泡灌洗液（BALF）基质金属蛋白酶9（MMP-9）和金属蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）的变化,探讨MMP-9/TIMP-1比例与哮喘的关系以及吸入糖皮质激素对哮喘的作用机制。方法选择支气管哮喘患者42例,随机分为布地奈德治疗组和对照组,检测治疗前和治疗后8周患者BALF中的MMP-9和TIMP-1水平。结果布地奈德治疗8周后,MMP-9、TIMP-1及MMP-9/TIMP-1比值与治疗前及对照组比较差异均有统计学意义（P均〈0.05）,且每周哮喘发作次数减少,FEV1占预计值百分比增加,呼气流量峰值（PEF）变异率降低（P均〈0.05）。结论布地奈德能抑制MMP-9的过度表达,调节MMP-9/TIMP-1的平衡,从而调节哮喘患者气道的重构过程。     

青蒿琥酯抑制TGF-β1-smad2/3信号通路和改善支气管哮喘大鼠模型气道重塑关系的研究

目的 通过观察青蒿琥酯对支气管哮喘 (简称哮喘)大鼠气道重塑的影响,并探讨其作用与TGF-β1-smad2/3信号通路的关系.方法 采用卵白蛋白激发和雾化吸入的方式建立哮喘模型,并给予药物治疗.观察各组大鼠肺组织的病理形态改变并用 Image-Pro plus 6.0图像分析软件测量大鼠支气管壁厚度和平滑肌厚度;用免疫组织化学法检测大鼠肺组织 smad2/3表达情况,RT-PCR法检测大鼠肺组织TGF-β1、smad2、smad3表达情况;ELISA法检测大鼠血清及 BALF中 TGF-β1的表达情况.结果 青蒿琥酯干预哮喘组大鼠支气管壁厚度、平滑肌厚度均明显低于哮喘组大鼠,差异有统计学意义 (P<0.01).青蒿琥酯干预哮喘组大鼠肺组织 TGF-β1、smad2、smad3 mRNA 的表达均明显低于哮喘组,差异有统计学意义 (P<0.01).青蒿琥酯干预哮喘组大鼠肺组织 smad2/smad3蛋白表达、血清及BALF中TGF-β1的表达水平均明显低于哮喘组,差异有统计学意义 (P<0.01).结论 青蒿琥酯改善哮喘大鼠气道重塑的机制可能与抑制TGF-β1-smad2/3信号通路活性有关.     

支气管哮喘大鼠气道重塑中肺泡巨噬细胞的作用

目的研究支气管哮喘(简称哮喘)大鼠气道重塑过程中肺泡巨噬细胞(AM)的变化及其作用。方法48只清洁级雄性幼年SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组(A组)、哮喘3d组(B组)、哮喘14d组(C组)和哮喘30d组(D组),每组12只。应用鸡卵白蛋白(OVA)建立哮喘大鼠模型,纯化支气管肺泡灌洗液(BALF)中的AM,测定AM中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)的含量和基质金属蛋白酶9基因(MMP-9mRNA)及其组织抑制物1基因(TIMP-1mRNA)的表达,并测量大鼠支气管壁总面积和平滑肌面积,计算单位基底膜周径(Pbm)的支气管壁厚度(WAt)和平滑肌厚度(WAm)。结果D组WAt和WAm[(85±9)μm2/μm、(28.6±4.9)μm2/μm]与A组[(67±10)μm2/μm、(16.8±2.4)μm2/μm]比较差异有统计学意义(t值分别为2.938、3.227,P均<0.01);D组AM中TNF-α和PGE2含量[(0.68±0.25)μg/L、(0.122±0.030)μg/L]与A组[(0.37±0.09)μg/L、(0.079±0.018)μg/L]比较差异有统计学意义(t值分别为2.683、3.016,P均<0.01),与B组[(0.74±0.29)μg/L、(0.120±0.028)μg/L]、C组[(0.71±0.23)μg/L、(0.117±0.028)μg/L]比较差异无统计学意义(t值分别为1.624、0.472、0.935、0.533,P均>0.05);D组AM中MMP-9mRNA及TIMP-1mRNA含量吸光度(A)值分别为0.346±0.033、0.361±0.040,与C组(0.279±0.015、0.259±0.015)比较差异有统计学意义(t值分别为2.574、2.716,P均<0.01),D组(0.183±0.025)与B组(0.136±0.014)比较差异有统计学意义(t值分别为2.913、3.017,P均<0.01),D组(0.104±0.007)与A组(0.109±0.008)比较差异有统计学意义(t值分别为3.632、3.487,P均<0.01);各组AM中MMP-9mRNA含量与WAt、WAm呈正相关(r值分别为0.693、0.738,P均<0.01),AM中TIMP-1mRNA含量与WAt、WAm呈正相关(r值分别为0.823、0.876,P均<0.01)。结论哮喘大鼠AM及其分泌的一些细胞因子与气道重塑关系密切。     

L-精氨酸对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响

目的 观察L-精氨酸（L-Arg）对哮喘气道重构大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）的细胞周期分布及细胞周期调节蛋白（CCRP）表达水平的影响,探讨L-Arg体内干预哮喘大鼠ASMC增殖的可能作用机制。方法实验分成对照组、哮喘组、L-Arg组,建立大鼠哮喘气道重构模型,检测血清NO2^-／NO3^-含量、肺内支气管内管壁和平滑肌层厚度及ASMC核数、ASMC的细胞周期分布以及ASMC内细胞周期素E（cyclin E）、cyclinA、cyclinB、蛋白27^kip1（P27^kip1）的表达。结果 哮喘组大鼠支气管内管壁、平滑肌层的厚度和ASMC数目显著大于对照组（P〈0．05）;L-Arg组大鼠支气管内管壁的厚度、平滑肌层的厚度和ASMC数目显著小于哮喘组（P〈0．05）。哮喘组血清一氧化氮（nitricoxide,NO）水平显著低于对照组（P〈0．05）;L-Arg组血清NO水平显著高于哮喘组（P〈0．01）。哮喘组G0／G1期ASMC比例及P27^kip1表达水平显著低于对照组（P〈0．01）,G2／M＋S期ASMC比例及cyclinE、cyclinA和cyclinB表达水平显著高于对照组（P〈0．01）;L-Arg组G0／G1期ASMC比例及P27^kip1表达水平显著高于哮喘组（P〈0．05）,G2／M＋S期ASMC比例及cyclinE和cyclinA表达水平显著低于哮喘组（P〈0．05）。结论 L-Arg通过调控CCRP的表达水平阻滞细胞从G1期进入S期而抑制哮喘ASMC的增殖。     

罗红霉素和地塞米松对支气管哮喘大鼠气道重塑中成肌纤维细胞的影响

目的探讨成肌纤维细胞（myofibroblast,MF）在支气管哮喘（简称哮喘）气道重塑中的作用。观察罗红霉素对哮喘气道重塑的影响,并与地塞米松作对照。方法SD大鼠40只,随机分为哮喘组（A组）、生理盐水对照组（C组）、地塞米松治疗组（D组）和罗红霉素治疗组（R组）,每组10只。利用卵白蛋白（ovalbumin,OVA）/Al（OH）3致敏与OVA雾化吸入激发建立大鼠哮喘模型。免疫组织化学测定肺组织中支气管上皮下MF的α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）表达含量,并使用图象分析技术进行积分光密度（integral optical density,IOD）定量分析测定。光镜观察肺组织病理结构变化,图像分析软件分析,并测定肺内支气管总管壁厚度、内管壁厚度、平滑肌层厚度等指标。结果免疫组织化学和图像分析结果：A组与C组相比,总管壁厚度、内管壁厚度、平滑肌层厚度显著增厚（P〈0.01）。D组和R组中的内管壁厚度、平滑肌层厚度与A组相比,均显著变薄（P〈0.01）。R组的总管壁厚度、内管壁厚度、平滑肌层厚度与D组相比差异无统计学意义。定量分析测定的IOD值显示A组支气管上皮下MFα-SMA表达含量较C组显著增加（P〈0.01）,D组和R组表达含量较A组均减少（P〈0.05）,R组表达含量与D组相比差异无统计学意义。相关分析结果：支气管上皮下MFα-SMA表达含量（用IOD值表示）和内管壁厚度呈正相关（r=0.913,P〈0.01,n=40）,和平滑肌层厚度也呈正相关（r=0.626,P〈0.01,n=40）。结论MF在气道重塑形成中起重要作用。罗红霉素和地塞米松均可能通过抑制MF增殖和表达起到抗哮喘气道重塑作用。     

慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中基质金属蛋白酶抑制剂-1及基质金属蛋白酶-9与细胞黏附因子表达的关系

目的 研究COPD患者肺组织中基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、细胞黏附因子-1(ICAM-1)蛋白和mRNA的分布和表达,探讨其与气流阻塞的关系及吸烟对其影响.方法 取39例因肺癌行肺叶切除的癌旁肺组织标本,其中不吸烟不伴COPD组(A组)9例、吸烟不伴COPD组(B组)11例、吸烟伴COPD组(C组)19例.用免疫组化和逆转录聚合酶链反应方法检测TIMP-1、MMP-9、ICAM-1的蛋白和mRNA表达,并进行相关性分析.结果 MMP-9表达于肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞、血管平滑肌细胞、肺泡巨噬细胞、间质细胞,C组MMP-9免疫组化阳性细胞数(54.0±15.0)明显高于A组和B组(1.2±0.7和1.4±0.8);TIMP-1蛋白表达的主要部位为肺泡巨噬细胞、肺泡上皮细胞、毛细血管内皮细胞、血管平滑肌细胞,C组弱表达,A组和B组无表达;ICAM-1主要表达于肺泡上皮细胞,C组ICAM-1免疫组化阳性细胞数(52.1±13.4)明显高于A组和B组(2.1±1.1和4.5±2.4).C组MMP-9、TIMP-1、ICAM-1的mRNA平均吸光度值(0.71±0.16、0.47±0.10、0.62±0.15)明显高于A组(0.17±0.05、0.20±0.06、0.37±0.11)和B组(0.20±0.08、0.26±0.08、0.44±0.12).C组肺组织TIMP-1、MMP-9与ICAM-1的mRNA表达水平呈直线正相关,MMP-9与ICAM-1蛋白表达水平呈显著正相关.MMP-9和ICAM-1的mRNA及蛋白表达水平、TIMP-1的mRNA表达水平与FEV1占预计值%、FEV1/FVC占预计值%均呈显著负相关.结论 TIMP-1、MMP-9和ICAM-1在促进炎性细胞迁移进入细胞外基底膜及气道上皮细胞,导致肺组织破坏和重塑,引起及加重COPD患者的气流阻塞中起着重要作用.     

地塞米松对哮喘大鼠气道重建、肥大细胞及IL-10的影响

目的观察地塞米松对哮喘大鼠模型气道重建和肺组织肥大细胞、IL-10的影响,探讨地塞米松在气道炎症和气道重塑中的作用机制,为临床治疗提供依据。方法采用卵白蛋白（OVA）腹腔注射致敏和雾化吸入激发建立哮喘大鼠模型,30只SD大鼠随机分为3组,正常对照组（A）、哮喘组（B）、地塞米松干预组（C）,每组10只。对肺组织切片行苏木精-伊红（HE）染色观察气道重塑情况。采用免疫组化和图像分析技术测定各组大鼠肺组织肥大细胞、IL-10的表达。结果哮喘组动物出现管壁增厚、平滑肌增生、黏液分泌增加等气道重塑的特征性改变,免疫组化染色显示气道各层细胞及炎性细胞均有IL-10表达减少。地塞米松干预组与哮喘组比较,炎症反应轻微,平滑肌增生、黏液分泌不明显,免疫组化染色显示各类细胞IL-10表达增高,与对照组比较差异有统计学意义。结论长期吸入变应原可导致气道重塑,肥大细胞、IL-10在气道重塑中发挥重要作用,地塞米松可通过抑制肥大细胞脱颗粒、增加IL-10表达发挥抑制炎症作用,进而缓解哮喘大鼠气道重塑的发生。     

反义基质金属蛋白酶抑制剂-1基因转染对氧化应激反应介导的肺纤维化大鼠的影响

目的:探讨反义基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1cDNA)基因转染对氧化应激反应介导的肺纤维化大鼠的影响。方法:取40只大鼠,其中30只建立肺纤维化模型,随机分为模型组、反义组和空载组,其余10只为对照组。术后第1天,反义组和空载组向气管分别注入反义TIMP-1cDNA逆转录病毒载体和空载体,模型组和对照组注入生理盐水溶液。观察4组大鼠一般体征和肺组织病理学变化,对比肺系数、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平及谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)比值;对比肺组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、TIMP-1、Ⅳ型胶原mRNA和蛋白相对表达量及MMP-9/TIMP-1比值。结果:对照组大鼠一般状态良好,但模型组和空载组状态逐渐变差,反义组有所改善;对照组肺组织正常,模型组和空载组肺纤维化及组织结构损伤严重,反义组较模型组减轻,但仍有炎症细胞。肺系数、肺组织MDA水平、TIMP-1、Ⅳ型胶原mRNA和蛋白相对表达量对照组最低,反义组其次,模型组和空载组最高;肺组织SOD水平、GSH/GSSG对照组最高,反义组其次,模型组和空载组最低;肺组织MMP-9/TIMP-1 mRNA相对表达量及MMP-9/TIMP-1比值组间比较,反义组最高,模型组和空载组其次,对照组最低。上述指标模型组和空载组均相近(P0.05),其余每2组间比较差异均显著(均P0.05)。结论:反义TIMP-1基因转染可减轻氧化应激反应介导的肺纤维化,可能与下调TIMP-1、上调MMP-9 mRNA和蛋白表达有关。     

急性冠状动脉综合征患者颈动脉斑块与血浆基质金属蛋白酶的相关性

目的研究急性冠状动脉综合征患者颈动脉斑块与血浆基质金属蛋白酶的相关性。方法采用高分辨率超声，测定30例急性冠状动脉综合征患者、29例稳定型心绞痛患者和17例正常对照者的颈动脉内膜中膜厚度及斑块积分，同时采用夹心酶联免疫分析法测定血浆基质金属蛋白酶9和组织型金属蛋白酶抑制因子1的变化。结果三组间的年龄、性别、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇无显著性差异。急性冠状动脉综合征组血浆基质金属蛋白酶9、组织型金属蛋白酶抑制剂、基质金属蛋白酶9，组织型金属蛋白酶抑制剂1及颈动脉内膜中膜厚度、总斑块积分、软斑块积分和硬斑块积分显著高于稳定型心绞痛组和正常对照组。基质金属蛋白酶9与颈动脉内膜中膜厚度、总斑块积分、软斑块积分呈正相关（r=0．468，P〈0．01；r=0．592，P〈0．01；r=0．677，P〈0．01）；组织型金属蛋白酶抑制剂与颈动脉内膜中膜厚度、总斑块积分、软斑块积分、硬斑块积分呈正相关（r=0．449，P〈0．01；r=0．493，P〈0．01；r=0．435，P〈0．01；r=0．227，P〈0.05）；基质金属蛋白酶9，组织型金属蛋白酶抑制剂1与颈动脉内膜中膜厚度、总斑块积分、软斑块积分呈正相关（r=0．253，P〈0．05；r=0．431，P〈0．01；r=0．547，P〈0．01）。去除年龄因素后，偏相关分析显示颈动脉内膜中膜厚度与基质金属蛋白酶9（r=0．461，P〈0．001）、组织型金属蛋白酶抑制剂1（r=0．441，P〈0.001）、基质金属蛋白酶9，组织型金属蛋白酶抑制剂1（r=0．241，P〈0．01）呈正相关关系。结论急性冠状动脉综合征患者血浆基质金属蛋白酶9、组织型金属蛋白酶抑制剂1、基质金属蛋白酶9，组织型金属蛋白酶抑制剂1及颈动脉内膜中膜厚度、总斑块积分、软斑块积分和硬斑块积分显著高于稳定型心绞痛患者和正常对照。血浆基质金属蛋白酶9、组织型金属蛋白酶抑制剂1、基质金属蛋白酶9，组织型金属蛋白酶抑制剂1与颈动脉内膜中膜厚度、总斑块积分、软斑块积分呈正相关关系。