不同细胞移植对大鼠心肌梗死后修复的影响

目的 观察骨髓间充质干细胞(MSCs)和MSCs诱导后分别移植对急性心肌梗死(AMI)修复的影响,比较不同细胞移植的作用.方法 获取、培养大鼠骨髓MSCs;5-氮胞苷(5-aza)诱导MSCs,免疫细胞化学法和RT-PCR检测诱导后MSCs特性.结扎大鼠左冠状动脉前降支,建立急性心肌梗死模型,分三个组.对照组:梗死部位中央及四周移植磷酸盐缓冲液(PBS),50μl/点;MSCs移植组和MSCs诱导组:在上述部位分别移植MSCs、诱导的MSCs,2×106个/50μl/点.3周后,超声观察心室腔大小、室壁厚度及运动幅度,检测左室射血分数(EF%)、短轴缩短率(FS%);血流动力学测定左室收缩压(LVSP)、舒张末压(LVEDP)、压力变化最大速率(±dp/dtmax)等指标;免疫组化分析心肌组织中移植细胞情况.结果 诱导的MSCs对心肌肌钙蛋白T(cTnT)、连结蛋白43(Cx-43)表达阳性.MSCs移植组、MSCs诱导组与对照组相比,左室前壁运动增强,FS%、LVSP、±dp/dtmax均升高、LVEDP降低(P＜0.05),MSCs诱导组改变更明显(P＜0.05).MSCs移植组、MSCs诱导组心肌组织中移植细胞对cTnT、Cx-43表达阳性.结论 MSCs移植、MSCs诱导后移植对大鼠AMI均有修复作用,MSCs诱导后移植对AMI心功能的改善作用更明显.     

骨髓间充质干细胞自体移植对心功能影响的超声观测

目的应用彩色多普勒超声心动图评价骨髓问充质干细胞（MSCs）自体移植对急性心肌梗死成年兔左心室形态及收缩功能的影响。方法22只日本大耳白兔。通过结扎左冠状动脉前降支，建立息性心肌梗死模型；随机分成实验组与对照组。将经过培养的MSCs经溴氮胞苷（BruD）标记后，直接注射到实验组动物左心室游离壁正常心肌组织与梗死组织交界处的心肌内。于术前1周，术后2、4周分别行彩色多普勒超声心动图检查，观测左心室内径及左心室收缩功能。术后4周处死动物，进行组织学与α-横纹肌动蛋白免疫组织化学染色。结果术后2周时，实验组与对照组比较心功能参数差异无显著性（P〉0．05），术后4周，与对照组比较，心功能改善（P〈0．05）。缺血心肌内可见部分BruD标记的移植细胞已与宿主心肌细胞相连接，并分化为具有典型的肌小节和表达α-横纹肌动蛋白阳性的心肌细胞样的横纹肌细胞，其排列方向与宿主心肌细胞排列方向平行。结论自体移植的MSCs可在急性梗死心肌内生长、发育、分化，并逐渐分化为心肌细胞取代瘢痕组织，影响左心室重构，改善心功能。     

培哚普利对急性心肌梗死后心肌纤维化的血清指标影响

目的 :观察冠心病急性心肌梗死患者心肌纤维化的血清指标变化和血管紧张素转换酶抑制剂对心肌纤维化及心室重构的逆转作用 ,探讨血清指标作为临床判断心肌纤维化与心室重构及其逆转的临床价值。方法 :正常对照组20例 ,心肌梗死组44例 ,心肌梗死后应用培哚普利治疗12周 ,用放射免疫分析法测定血清指标PCⅢ (Ⅲ型前胶原 )、LN(层粘连蛋白 )、HA(透明质酸 )。结果 :心肌梗死2周后较正常对照组血清PCⅢ、LN、HA明显增高 (P<0 01) ,培哚普利治疗12周后血清PCⅢ、LN、HA明显下降 (P<0 01)。结论 :血清PCⅢ、LN、HA可以作为心肌梗死后心肌纤维化与心室重构的间接观察指标。     

左心室重建术对非手术区心肌组织超微结构的影响

目的研究左心室重建术对非手术区心肌组织超微结构的影响。方法对50只杂种犬建立左心室壁瘤动物模型,并根据室壁瘤的大小、部位分为实验组和对照组,实验组采用左心室重建术（Dor手术）切除室壁瘤,对照组只开胸不行左心室重建术,通过电镜观察2组非手术区心肌组织超微结构的变化。结果与正常组相比,实验组和对照组非手术区心肌组织超微结构均有心室重构和心肌损害;与对照组相比,实验组非手术区心肌组织心室重构和心肌损害程度小于对照组。结论 左心室重建术从一定程度上延缓了左心室重构的发生,有助于改善心功能。     

自体外周血干细胞移植联合EPO对猪急性心肌梗死心肌细胞凋亡的影响

目的:观察自体外周血干细胞移植联合促红细胞生成素对猪急性心肌梗死模型心肌细胞凋亡的影响。方法:选用中国小型猪32只,均采用经皮穿刺球囊封堵冠状动脉左前降支制备猪急性心肌梗死(AMI)模型,随机分为4组。干细胞(SC)组(n=8)给予粒细胞集落刺激因子(G-CSF)皮下注射连续7天,血细胞分离机单采外周血干细胞悬液(PBSC)后,通过经皮经腔导管技术建立的梗死相关动脉(IRA)通道回输;EPO组(n=8)AMI模型制作成功后1h经耳缘静脉给予EPO3000U/Kg,于相同时间给予等体积生理盐水;实验(SC+EPO)组(n=8)同时给予EPO及干细胞移植干预,干预方法同上。另设对照组(n=8),以同样的方式输注等量生理盐水。4周后处死实验动物,取心肌梗死区域组织行苏木精-依红染色法(HE染色)观察病理组织改变;Western blot法检测各组心肌组织中凋亡蛋白Bax,Bcl-2及caspase-3的表达。结果:①组织学苏木精-依红染色结果:四组实验动物心肌组织样本中均可见心肌梗死区域,以对照组最为严重,实验组病理改变最弱。心肌梗死区域可见心肌细胞坏死崩解、组织结构破坏,梗死边缘区间大量炎性细胞浸润及新生毛细血管。②Western blot法检测结果:与对照组相比,其余三组Bcl-2蛋白表达含量均明显增高(P<0.01),Bax及Caspase-3蛋白表达量均减低(P<0.05)。与SC组和EPO组相比,实验组心肌梗死猪心肌组织中抗凋亡蛋白Bcl-2的含量显著增高(P<0.05);凋亡蛋白Bax及Caspase-3的含量则显著降低(P<0.05)。结论:自体外周血干细胞移植联合EPO治疗急性心肌梗死优于单独使用其中一种方式,通过抑制梗死区域心肌细胞的凋亡,有效防止梗死后左室重构,明显改善心功能。     

骨髓间充质干细胞移植到心肌梗死大鼠对心肝功能的影响

目的 探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,MSCs)移植到心肌梗死大鼠后在心肝脏器的分布及对其功能的影响.方法 建立心肌梗死大鼠模型,1周后将标记的MSCs通过大鼠舌下静脉注射至体内,细胞移植4周后通过组织学观察其在心肝脏器的分布,并通过心脏超声及血生化检查观察两脏器的功能情况.结果 移植细胞主要集中于心肌梗死区域,且少量迁移至肝脏组织.实验组的心功能指标LVEDD、LVESD、左心室EF、左室FS均明显优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).实验组肝功能指标ALT、AST、ALP明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),而2组之间ALB及TBIL并无明显差异(P>0.05).结论 MSCs经静脉注射可顺利分布于心肌梗死组织改善心脏功能,且可迁移至肝脏组织,可能对肝功能也具有一定的改善作用.     

骨髓间充质干细胞和骨髓单个核干细胞移植治疗大鼠心肌梗死的对比研究

目的观察髓间充质干细胞（MSCs）和骨髓单个核干细胞（BMMNCs）移植对急性心肌梗死后大鼠左心功能的影响及存活情况,比较两种干细胞移植的优劣性。方法雌性Lewis大鼠45只按随机抽签法分3组：对照组、MSCs组、BMMNCs组。结扎前降支制备心肌梗死模型,MSCs组和BMMNCs组均注射等数量（2×10^6）雄性MSCs和BMMNCs,对照组注射等体积的培养基。4周后超声检测左心功能、左心室前壁厚度,免疫原位杂交检测雄性鉴别基因sry片段的表达。结果MSCs组和BMMNCs组与对照组相比：左心室射血分数分别增加22．57％、24．09％（P=0．000）,MSCs组和BMMNCs组之间比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;左心室前壁厚度增加（2．6±0．5）mm和（2．5±0．3）mm对（1．8±0．4）mm（P=0．000）;免疫原位杂交显示MSCs组与BMMNCs组sry表达阳性,对照组阴性。阳性细胞的数量相比较,BMMNCs组高于MSCs组（66．50±6．59比46．67±4．64,P=0．000）。结论MSCs和BMMNCs移植均能改善大鼠急性心肌梗死后左心功能,减轻左心室重构;移植4周后在受体心肌内存活干细胞数量BMMNCs优于MSCs。     

盐酸多西环素对心梗大鼠心肌基质金属蛋白酶的影响

目的：观察盐酸多西环素对心肌梗死后心肌基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的影响及对心室重构的作用机制。方法：选择健康雌性Wistar大鼠45只，随机分为3组。实验组和对照组结扎左冠状动脉，假手术组只挂线不结扎冠状动脉。对照组和假手术组术后给予等量生理盐水灌胃，实验组术后给予盐酸多西环素灌胃。3组大鼠于手术后7d处死。HE染色观察左室形态变化，免疫组化SP法检测心肌组织MMP-9表达。计算机图像分析系统半定量分析。结果：（1）对照组和实验组均可见心肌梗死发生，但2组梗死面积差别无统计学意义（P〉0．05）；2组梗死区MMP-9表达均增强，且对照组表达更明显。（2）对照组和实验组均较假手术组左室腔面积扩大，且对照组左室腔面积更大，梗死区厚度更薄。结论：急性心肌梗死后1周的大鼠梗死区MMP-9表达增强，并发生左室重构。盐酸多西环素可能通过抑制梗死心肌组织中MMP-9的表达而抑制心室重构。     

蝮蛇毒蛋白C激活物改善急性心肌梗死大鼠心功能的机制研究

目的:探讨皖南产蝮蛇毒(AHV)蛋白C激活物(protein C activator,PCA)改善急性心肌梗死大鼠心功能作用与机制。方法:Sprague-Daw-ly大鼠60只,随机分为假手术(SH)组、心肌梗死模型(MI)组、PCA低、中、高剂量组(0.5、2、8mg/kg)、阳性对照组(阿司匹林5mg/kg),每组10只。通过结扎冠状动脉前降支建立急性心肌梗死(AMI)模型,采用Medlab生物信号处理系统监测大鼠心脏血流动力学变化。Westernblot检测心肌基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达;光镜观察心肌组织学改变。结果:与心肌梗死组比较,PCA高、中剂量大鼠左室内压最低值(LVDP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室压力最大上升速率(+dp/dtmax)、左心室压力最大下降速率(-dp/dtmax)明显升高(P<0.05),MMP-9的蛋白表达下降(P<0.05)。病理观察显示PCA干预组较梗死模型组炎症细胞浸润显著减轻,梗死面积缩小。结论:蝮蛇毒PCA组分可以限制急性心肌梗死早期心肌梗死扩大,有效改善心脏血液动力学,抑制MMP-9表达,对急性心肌梗死后心室重构有一定的干预作用。     

骨髓间充质干细胞移植对小型猪急性心肌梗死模型治疗作用的初步研究

目的 观察自体骨髓间充质干细胞(MSC)心肌内移植对小型猪急性心肌梗死(AMI)的治疗效果。方法 30只小型猪制备AMI模型，实验组22只取骨髓分离MSC，体外培养扩增后注入至缺血坏死心肌周围，对照组8只输注等量生理盐水，1个月后比较两组的生存率、存活心肌来源和功能性蛋白质的表达。结果实验组存活率100％，存活心肌增加并检测到5溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记物，心肌钙蛋白I(cTnI)等心肌功能性蛋白质的表达。结论 AMI小型猪自体骨髓MSC心肌内移植后，梗死区出现MSC来源的新生心肌，并具有正常心肌工作特性。     

超声观察骨髓间充质干细胞移植对兔心肌梗死心功能的影响

目的应用超声评价体外不同处理方式兔骨髓间充质干细胞（MSCs）移植于缺血心肌后对心脏功能的影响。方法采用结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌梗死模型,2周后分别将自体MSCs、经5-aza诱导的MSCs、骨髓单个核细胞（BMMNCs）,Dil标记后用微量注射器注射于兔缺血心肌内,并以无血清培养基注射动物为对照组。分别在术前、细胞移植前、细胞移植后2、4周之后行M型超声心动测量：左室收缩末内径（LVESD）、左室舒张末内径（LVEDD）,计算左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS）等指标。结果细胞移植后2、4周,超声心动检查发现MSCs组和5-aza诱导的MSCs组的兔心功能（LVEF、LVFS值）比对照组显著升高（P〈0.05）,而BMMNCs组仅在移植后4周明显改善（P〈0.05）;LVESD、LVEDD细胞移植组与对照组相比无显著差异（P〉0.05）。结论 MSCs、经5-aza诱导的MSCs、BMMNCs均能存活于梗死心肌中,从而改善缺血心肌后左室收缩功能。     

High-dose erythropoietin has no long-term protective effects in sheep with reperfused myocardial infarction

High-dose erythropoietin has been claimed to be cardioprotective in experimental acute myocardial infarction. In large mammals, however, results are controversial and long-term follow-up data are lacking. We thus assessed the long-term effects of high-dose erythropoietin on left ventricular infarct size and function in an ovine model of reperfused myocardial infarction. After 90 minutes of coronary occlusion followed by reperfusion, sheep received recombinant human erythropoietin (rhEPO) 3000 units/kg on 3 consecutive days (rhEPO group, n=7) or vehicle (placebo group, n=6). Ten weeks later, ventricular function was assessed by echocardiography and catheterization. Infarct size, evaluated as percent fibrotic myocardium (morphometry) and by hydroxyproline quantification, was similar in both groups (morphometry: rhEPO: 22.1 +/- 5.5%, placebo: 18.1 +/- 3.3%, P not significant; hydroxyproline: rhEPO: 6.6 +/- 1.3 microg/mg wet weight, placebo: 7.1 +/- 0.9 microg/mg, P not significant). Ventricular function was diminished in the rhEPO group, as indicated by lower septal wall thickening at the infarct border zone (rhEPO: -1.9 +/- 16.4%, placebo: 20.5 +/- 17%, P<0.04), higher end systolic volume (rhEPO: 47 +/- 14.3 mL, placebo: 32.6 +/- 7.3 mL, P<0.05), and higher end diastolic pressure (rhEPO: 17 +/- 6.5 mm Hg, placebo: 10.1 +/- 2.8 mm Hg, P<0.03). In the rhEPO group, left ventricular endocardial area was larger, suggesting dilatation. High-dose erythropoietin has no cardioprotective effects in sheep with reperfused myocardial infarction.     

姜黄素类似物H8对糖尿病大鼠心脏的保护作用

目的 探讨姜黄素类似物H8对糖尿病大鼠心脏结构及功能的影响及机制。方法 采用随机数字表法将 24只雄性SD大鼠分为对照组、模型组和H8组,每组8只。模型组和H8组通过高脂高糖饮食诱导8周后腹腔注射链 脲佐菌素（STZ）建立2型糖尿病大鼠模型。H8组大鼠用H8（6 mg/kg）连续灌胃4周,对照组和模型组用等量羧甲基纤 维素钠连续灌胃4周。第4周末采用超声心动图评价各组大鼠心脏结构及功能变化。检测各组大鼠血液生化指标, 处死大鼠后检测心肌组织病理学改变,心肌组织中乳酸脱氢酶（LDH）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）和丙二醛（MDA） 水平。结果 与对照组相比,模型组大鼠的左心室室壁运动减弱、心室重构明显、左室射血分数（LVEF）和短轴缩短 率（FS）降低,血糖、总胆固醇、三酰甘油水平明显升高,心肌细胞结构紊乱,心肌组织中LDH、MDA水平明显升高,T-SOD水平明显降低（P＜0.05）;与模型组相比,H8组大鼠左心室室壁运动增强、心室重构、LVEF和FS及心肌细胞排 列紊乱情况明显改善,血糖、总胆固醇、三酰甘油水平降低,心肌组织中LDH、MDA水平降低,T-SOD水平升高（P＜ 0.05）。结论 姜黄素类似物H8对糖尿病大鼠心肌损伤具有保护作用,其机制可能与抑制心室重构、改善心功能及 降低血糖、血脂及氧化应激因子水平有关。     

米力农对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用

目的:观察米力农注射液对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用。方法:选取SD雄性大鼠60只,随机分为对照组、假手术组、脓毒症模型组及米力农小剂量组、米力农大剂量组。建立脓毒症模型,采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)复制脓毒症模型的方法;24 h后检测血清肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)、心肌同工酶(creatine kinase-MB),CK-MB及心肌组织中的内皮素-1(endothelin-1,ET-1)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-a,TNF-α)水平。结果:模型组血清cTnI、CK-MB及心肌中ET-1和TNF-α明显高于对照组,P值均<0.01;米力农小剂量组血清cTnI、CK-MB、心肌中ET-1和TNF-α与模型组相比差异不明显,P值均>0.05;米力农大剂量组血清cTnI、CK-MB、心肌中ET-1和TNF-α明显低于模型组,P值均<0.01。结论:米力农对脓毒症心肌损伤具有一定的保护作用。     

卡托普利对实验大鼠左室肥厚的干预作用

目的观察卡托普利逆转压力负荷增加大鼠左室肥厚的作用。方法采用腹主动脉狭窄所致压力负荷增加大鼠左室肥厚模型,将雄性SD大鼠36只随机分为假手术组、模型组、卡托普利组,观察用药4周后左室重量指数（LVMI）、左室心肌病理形态HE染色、左室心肌细胞超微结构等指标的改变。结果模型组LVMI明显高于假手术组（P〈0．01）,卡托普利组（2．32±0．35）明显低于模型组（2．98±0．36）,P〈0．01;左室心肌病理形态HE染色、左室心肌细胞超微结构的改变与LVMI的改变基本一致。结论卡托普利具有逆转心肌肥厚的作用。     

肝细胞生长因子基因修饰的骨髓间充质干细胞对扩心病大鼠心肌纤维化和凋亡的影响

目的通过移植人肝细胞生长因子（hHGF）基因修饰的骨髓间充质干细胞（MSCs）和未经修饰的MSCs来比较二者对扩张型心肌病（DCM）心力衰竭大鼠心功能的影响,并比较它们对心肌纤维化和凋亡的影响。方法 50只12周龄清洁级雄性SD大鼠随机抽取14只作为对照组,其余36只大鼠腹腔注射盐酸阿霉素制作DCM心力衰竭大鼠。存活大鼠（n=24）再随机平分为3组：DCM模型组、MSCs移植组和hHGF基因修饰的MSCs（MSCs-hHGF）移植组。经尾静脉移植干细胞4周后,分别检测左室收缩峰压（LVSP）、左室舒张末期压（LVEDP）、左室内压最大变化速率（±dp/dtmax）,然后比较各组心功能改变情况;免疫组化检测心肌hHGF含量;天狼猩红染色评价心肌胶原含量和TUNEL法检测心肌凋亡指数（AI）。结果与模型组相比,MSCs组和MSCs-hHGF组的左室收缩峰压（LVSP）均升高,左室舒张末期压（LVEDP）均降低,心肌胶原含量均降低,AI均下降;与MSCs组相比,MSCs-hHGF组LVSP升高,LV-EDP降低,心肌胶原含量降低,AI无明显差异。MSCs-hHGF组心肌hHGF含量显著高于其他各组,其他组间无差异。结论 MSCs-hHGF组比MSCs组能更加显著地改善DCM心力衰竭大鼠心功能,可能与MSCs-hHGF分泌的hHGF能够进一步抑制心肌纤维化有关;心功能的进一步提高不能归因于hHGF可能存在的抗心肌凋亡效应。     

磷酸二酯酶5的短发夹RNA对肌细胞纤维化的作用抑制研究

目的 通过短发夹RNA(shRNA)延长对磷酸二酯酶5(PDE5)的抑制作用,探索shRNA-PDE5对细胞存活率的影响以及对心肌梗死后心功能及心室重构的作用及其机制.方法 (1)细胞实验:分离SD大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),将Ad-shRNA-PDE5和Ad-Null分别感染体外培养的MSCs,嘌呤霉素筛选稳定...     

不同类型急性心肌梗死早期介入治疗效果的比较

目的:比较急性非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)和急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者接受早期再灌注治疗后冠脉血流、心肌灌注及心功能情况的差异。方法:接受早期再灌注治疗的急性心肌梗死患者共168例,分为NSTEMI组55例和STEMI组113例,比较2组患者的术后心肌呈色分级(MBG),术前及术后的溶栓治疗(TIMI)血流分级、左室舒张末期容积(LVEDV)、左室收缩末期容积(LVESV),左室质量(LVW)、左室质量指数(LVWI)及左室射血分数(LVEF)。结果:2组术后TIMI血流情况、LVEDV、LVW及LVWI差异无统计学意义(P>0.05),但NSTEMI组术前TIMI血流3级的比例、术后MBG3级比例和LVEF明显优于STEMI组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:NSTEMI患者接受早期介入治疗术后的心肌再灌注情况以及左室收缩功能优于STEMI患者。     

Ghrelin对慢性充血性心力衰竭兔三层心肌间Cx43表达的影响

目的 观察生长激素释放肽(ghrelin)对慢性充血性心力衰竭(chronic congestive heart failure,CHF)兔左心室三层心肌间跨室壁缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)表达的影响,为CHF恶性室性心律失常(malignant ventricular arrhythmia,MV...