As2O3对淋巴瘤Raji细胞抑制效应及其Id4基因表达的影响

目的:探讨As2O3对恶性淋巴瘤细胞的作用和对DNA结合抑制因子(Id4)基因表达的影响.方法:体外培养人Burkitt's淋巴瘤细胞株Raji细胞,设对照组和用不同浓度的As2O3作用不同时间处理Raji细胞的实验组.MTT比色法检测细胞生长;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡并分析As2O3对细胞周期的影响.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测处理前后Id4 mRNA的表达情况.结果:实验组MTT比色实验结果表明,AsO3各浓度组作用于Raji细胞24、48及72 h后抑制率为12.15%～92.17%,P<0.05;流式细胞术检测细胞凋亡结果显示.实验组As2O3各浓度组作用于Raji细胞48 h后出现明显的凋亡峰,对照组未见凋亡峰或仅有低平的凋亡峰;细胞周期分析结果显示,实验组As2O3各浓度组作用于Raji细胞48 h后,As2O3可阻滞Raji细胞于G0/G1期,且随着As2O3浓度的增加,阻滞作用增强,呈一定剂量依赖关系.随药物浓度增加,Raji细胞中Id4基因mRNA的相对表达量逐渐增加,呈一定剂量依赖关系.结论:As2O3体外对Raji淋巴瘤细胞生长具有明显的抑制作用;As2O3能诱导Raji细胞凋亡,且使G0/G1期细胞比例增加,同时S及G2/M期细胞比例减少.随着As2O3浓度增加Id4基因出现表达.     

三氧化二砷诱导卵巢癌OVCAR-3细胞周期阻滞及凋亡

目的探讨As2O3对卵巢癌细胞增殖的抑制作用及对细胞周期和凋亡的影响.方法采用MTT法及集落形成实验测定细胞的增殖活力,通过细胞形态学观察细胞分裂及凋亡,应用流式细胞仪进行细胞周期解析、凋亡及bcl-2蛋白表达的检测.结果As2O3呈剂量依赖性抑制OVCAR-3细胞增殖,抑制50%细胞生长的药物浓度(IC50)为2μmol/L.0.5～5μmol/L的As2O3作用7天,集落抑制率均在40%以上(P＜0.01).2μmol/L与5μmol/L的As2O3作用12 h后,细胞周期出现了G2/M期阻滞及亚二倍体凋亡峰,随着作用时间的延长,凋亡细胞随G2/M期细胞减少而逐渐增多.细胞形态学观察可见分裂期细胞及凋亡细胞明显增加.0.5～5μmol/L的As2O3均能下调bcl-2蛋白的表达.结论As2O3能够抑制卵巢癌OVCAR-3细胞的增殖,诱导M期阻滞及细胞凋亡.     

As2O3对人膀胱癌细胞凋亡和MDR1表达及细胞周期的影响

目的 :观察三氧化二砷 (As2 O3 )对人膀胱癌细胞株BIU 87的凋亡诱导作用及对多药耐药基因 (MDR1)蛋白表达、细胞周期的影响。方法 :采用四氮唑蓝 (MTT)法检测As2 O3 不同浓度、不同作用时间对BIU 87细胞的生长抑制率 ;流式细胞术(FCM )检测不同浓度As2 O3 作用 72h后细胞中与凋亡有关蛋白Fas、bcl 2及MDR1蛋白表达、细胞周期变化。结果 :As2 O3 可有效抑制BIU 87细胞的生长增殖 ,与浓度、时间相关 ,P <0 0 5 ;Fas、bcl 2的表达分别与浓度增高呈正、负相关 ,P <0 0 5 ,且二者随浓度增高呈负相关 ,P <0 0 5 ;MDR1蛋白表达与对照组相比As2 O3 1μmol/L作用后升高 ,P <0 0 5 ,2、5 μmol/L作用后降低 ,P <0 0 5 ;随As2 O3 浓度升高 ,细胞周期被阻滞在G0 /G1期。结论 :As2 O3 可有效抑制人膀胱癌细胞的生长增殖 ,诱导细胞凋亡及阻滞细胞周期可能起了重要作用     

As2O3对人膀胱癌细胞凋亡和MDR1表达及细胞周期的影响

目的：观察三氧化二砷(As2O3)对人膀胱癌细胞株BIU-87的凋亡诱导作用及对多药耐药基因(MDR1)蛋白表达、细胞周期的影响。方法：采用四氮唑蓝(MTT)法检测As2O3不同浓度、不同作用时间对BIU-87细胞的生长抑制率；流式细胞术(FCM)检测不同浓度As2O3作用72h后细胞中与凋亡有关蛋白Fas、bcl-2及MDR1蛋白表达、细胞周期变化。结果：As2O3可有效抑制BIU-87细胞的生长增殖，与浓度、时间相关，P＜0．05；Fas、bcl-2的表达分别与浓度增高呈正、负相关，P＜0．05，且二者随浓度增高呈负相关，P＜0．05；MDR1蛋白表达与对照组相比As2O3 1 μmol／L作用后升高，P＜0．05，2、5 μmol／L作用后降低，P＜0．05；随As2O3浓度升高，细胞周期被阻滞在G0／G1期。结论：As2O3可有效抑制人膀胱癌细胞的生长增殖，诱导细胞凋亡及阻滞细胞周期可能起了重要作用。     

三氧化二砷联合甲磺酸伊马替尼、咖啡因对K562白血病细胞的协同作用

 目的 探讨三氧化二砷（Arsenic trioxide,As2O3）与酪氨酸激酶抑制剂甲磺酸伊马替尼（实验药物代号STI571）以及细胞周期调节剂咖啡因联合诱导K562细胞凋亡的作用及机制,为寻找克服K562细胞对As2O3抵抗的有效手段提供实验依据。方法 以As2O3与STI571、咖啡因联合作用于K562细胞,采用MTT方法检测细胞增生活性,PI染色流式细胞仪检测细胞周期,PI和Annexin V双染色流式检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞周期相关调节蛋白的表达。结果 5.0 μmol／L浓度的咖啡因对K562细胞增生无抑制作用,亦不能增强As2O3的抑制作用,单独以STI571 1.0 μmol／L处理,即可有效抑制K562细胞的生长,与As2O3联用能明显增加其抑制增生的效应;咖啡因与As2O3联合作用,不增加As2O3诱导的K562细胞凋亡率[（14.7±3.6）%vs（15.3±3.3）%,P＞0.05]; STI571具有轻度诱导K562细胞凋亡的作用[（18.3±4.5）%],与As2O3合用可显著增加诱导凋亡率[（14.7±3.6）%vs（42.8±4.2）%,P＜0.01],并明显降低As2O3诱导的G2／M期细胞比例。与单用As2O3比较,As2O3 + STI571明显抑制cdc2、cdc2-p及survivin蛋白表达,而As2O3与咖啡因合用不能诱导survivin蛋白表达下调,对cdc2、cdc2-p蛋白的表达无明显影响。结论 周期调节药物咖啡因对As2O3诱导K562细胞凋亡无增敏作用;酪氨酸激酶抑制剂STI571能协同As2O3诱导K562细胞凋亡,下调抗凋亡蛋白survivin的表达可能是其机制之一,值得深入研究其临床应用效果。     

As2O3对人膀胱癌细胞株BIU-87作用的体外研究

目的　观察三氧化二砷 (As2 O3 )对人膀胱癌细胞株BIU 87的作用 ,并探讨其作用机制。方法　采用四氮唑蓝(MTT )法检测As2 O3 不同浓度、不同作用时间对BIU 87细胞株的生长抑制率 ;流式细胞术 (FCM )检测不同浓度As2 O3 作用 72h后细胞中凋亡相关蛋白Fas、bcl 2的表达及细胞周期变化。结果　As2 O3 可有效抑制BIU 87细胞株的生长 ,具有浓度、时间依赖性特点。Fas、bcl 2的表达与As2 O3 浓度增高分别呈正、负相关 (P <0 .0 5 ) ,且随As2 O3 浓度增高Fas、bcl 2的表达呈负相关 (P <0 .0 5 )。随As2 O3 浓度增高细胞周期被阻滞在G0 /G1期。结论　As2 O3 可有效抑制人膀胱癌BIU 87细胞株的生长增殖 ,阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡可能起了重要作用     

低氧下三氧化二砷对食管癌Eca109细胞放射敏感性的影响

目的： 观察三氧化二砷（As 2O 3）在低氧条件下对食管癌Eca109细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响,探讨其发挥放射增敏作用的可能机制。 方法： CoCl 2处理模拟肿瘤细胞模拟低氧微环境,MTT法分别检测常氧和低氧条件下不同浓度As2O3及不同剂量放射线对食管癌Eca109细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测低氧下As 2O 3、放射线单独及两者联合对细胞周期及凋亡的影响,Western blotting检测经As 2O 3、放射线单独及两者联合作用后Eca109细胞中HIF-1α、p27蛋白的表达情况。 结果： 在常氧和低氧两种条件下,As2O3均呈时间和剂量依赖方式抑制Eca109细胞增殖,相同时间和相同剂量条件下,其抑制水平相当（P>0.05）;而低氧下放射线对Eca109细胞增殖的抑制作用较常氧下明显减弱（P<0.05）。低氧下Eca109细胞周期出现G 0/G 1期阻滞、G 2/M期细胞比例明显减少（P<0.05）,As 2O 3在低氧条件下可诱导G 2/M期阻滞、G 0/G 1期细胞比例减少。As 2O 3与放射线联合作用时,Eca109细胞的凋亡率大于两者单独作用之和。低氧条件下,Eca109细胞HIF-1α、p27蛋白表达均明显增强,As 2O 3可逆转HIF-1α、p27表达水平的升高。 结论： 低氧条件下,As 2O 3对食管癌Eca109细胞有放射增敏作用,其机制可能与下调HIF-1α进而降低p27表达水平、解除G 0/G 1期细胞周期阻滞和促进细胞凋亡有关。     

砷剂对肺腺癌细胞凋亡及LRP、C—myc基因表达的影响

目的：研究三氧化二砷（arsenictrioxide,As2O3）对人肺腺癌的抑制和诱导凋亡作用及对肺耐药蛋白基因（1ungresistance protein,LRP）、C—myc基因表达的影响及可能机制。方法：选用人肺腺癌A549细胞株,运用体外细胞培养法,MTF法,流式细胞术检测As2O3,对人肺腺癌的抑制和诱导凋亡作用;用反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测LRP、C—mycmRNA的表达。结果：As2O3对人肺腺癌A549细胞具有抑制作用,其抑制率呈时间-剂量依赖关系。不同浓度的As2O3均可诱导凋亡。1．0μmol／L、2．0μmol／L的As2O3可下调LRP的表达。结论：As2O3具有抑制肿瘤细胞增殖作用,主要是通过诱导细胞凋亡实现的,其机制与下调LRP、C—myc表达有密切关系。     

三氧化二砷和胂酸基乙酸体外抗癌作用的比较

背景与目的:近来,有研究表明某些有机砷诱导细胞凋亡的能力强于无机砷,胂酸基乙酸(arsacetyl,ASAC)为有机砷的一种。本研究比较三氧化二砷(As2O3)和ASAC对肝癌细胞的抑制作用及诱导凋亡作用。方法:采用MTT(methythiazolyltetrazolium)法和细胞凋亡检测法观察As2O3和ASAC对SMMC-7721细胞增殖的影响及作用机制;用MTT法检测药物对正常血管内皮细胞(VEC)毒副作用。结果:As2O3和ASAC都明显抑制细胞增殖,抑制作用呈时间和浓度依赖性,且ASAC的抑制作用明显强于As2O3。如药物作用48h,0.1μmol/LAs2O3组抑制率为(14.2±1.5)%,0.1μmol/LASAC组为(27.1±3.0)%。1μmol/LAs2O3和0.1μmol/LASAC对VEC几乎无毒副作用,同样条件下作用于SMMC-7721细胞株,有凋亡小体生成,凝胶电泳出现DNA梯度图谱,流式细胞检查见明显的凋亡峰出现,并使细胞周期阻滞在S+G2/M期。结论:As2O3和ASAC都可以在体外诱导肝癌细胞凋亡,且ASAC诱导凋亡的能力强于As2O3,两者都作用于G0/G1期细胞。     

三氧化二砷诱导K562细胞凋亡过程中Par-4及WT1基因表达的变化

 目的　探讨三氧化二砷（As2O3）诱导K562细胞凋亡过程中前列腺凋亡反应因子-4（Par-4）和WT1基因表达的变化。方法　用不同浓度As2O3（2～10 μmol／L）处理K562细胞24～72 h,MTT法测定细胞增生活力,流式细胞术检测细胞凋亡,采用荧光定量RT-PCR检测Par-4和WT1基因 mRNA表达变化,Western blotting检测Par-4和WT1蛋白表达的变化。结果　不同浓度As2O3作用于K562细胞,随浓度增加能明显抑制细胞的生长,诱导细胞发生凋亡。同时Par-4基因mRNA和蛋白表达逐渐增加;而WT1基因mRNA及蛋白表达逐渐下降。结论　As2O3可抑制K562细胞生长,诱导细胞凋亡,Par-4与WT1基因可能参与As2O3诱导K562细胞凋亡的调控。     

APE1表达变化对人非小细胞肺癌细胞A549增殖的影响

目的:探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(apurinic/apyrimidinic endonuclease 1,APE1)对人非小细胞肺癌细胞A549增殖能力的影响,为肺癌的个性化靶向治疗提供理论依据。方法:使用脂质体转染法将重组表达质粒pSIREN-RetroQ-APE1-shRNA和pOZN-HA-APE1导入A549细胞,免疫印迹检测APE1表达情况。MTT、平板克隆实验、免疫印迹检测APE1对非小细胞肺癌细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果:重组载体pSIREN-RetroQ-APE1-shRNA转染细胞后,显著抑制A549细胞中APE1蛋白的表达,与对照组相比,增殖速率明显下降(P＜0.05),平板克隆形成显著减少(P＜0.05),并阻止细胞周期G0/G1期向S期转化,降低CDK2表达。而过表达APE1可增加A549细胞活力,促进细胞增殖,促进细胞周期G0/G1期向S期转化。结论:APE1表达下调对非小细胞肺癌细胞A549生长具有抑制作用,为临床抑制肿瘤生长提供了新的作用靶点。     

Landscape of immune cell infiltration in clear cell renal cell carcinoma to aid immunotherapy

The tumor microenvironment, comprised of tumor cells and tumor-infiltrating immune cells, is closely associated with the clinical outcome of clear cell renal cell carcinoma (ccRCC) patients. However, the landscape of immune infiltration in ccRCC has not been fully elucidated. Herein, we applied multiple computational methods and various datasets to reveal the immune infiltrative landscape of ccRCC patients. The tumor immune infiltration (TII) levels of 525 ccRCC patients using a single-sample gene were examined and further categorized into immune infiltration subgroups. The TII score was characterized by distinct clinical traits and showed a significant divergence based on gender, grade, and stage. A high TII score was associated with the ERBB signaling pathway, the TGF-β signaling pathway, and the MTOR signaling pathway, as well as a better prognosis. Furthermore, patients with high TII scores exhibited greater sensitivity to pazopanib. The low TII score was characterized by a high immune infiltration level of CD8⁺ T cells, T follicular helper cells, and regulatory T cells (Tregs). Moreover, the immune check point genes, including CTLA-4, LAG3, PD-1, and IDO1, presented a high expression level in the low TII score group. Patients in the high TII score group demonstrated significant therapeutic advantages and clinical benefits. The findings in this study have the potential to assist in the strategic design of immunotherapeutic treatments for ccRCC.     

Hematopoietic stem cell transplantation in mantle cell lymphoma.

BACKGROUND: Patients with mantle cell lymphoma (MCL) have in general, lower response rates and overall survival (OS) than those with other B-cell non-Hodgkin's lymphomas. The role of hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) in MCL is unclear. Hence we decided to study the clinical course of patients who received autologous and allogeneic HSCT for MCL. METHODS: Ninety-seven patients, (80 patients-autologous; 17 patients-allogeneic) who received a HSCT for mantle cell lymphoma were included in the study. RESULTS: The complete response rates at day 100 between the two groups were similar (73% vs. 62%). Day-100 mortality was higher in the allogeneic HSCT group (19% vs. 0%) (P < 0.01). The estimated 5-year relapse rates, 5-year event-free survival (EFS) and 5-year OS among the allogeneic HSCT patients were 21%, 44% and 49%, respectively, similar to 56%, 39% and 47% in the autologous group. Ten patients received HyperCVAD (hyperfractionated cyclophosphamide, vincristine, doxorubicin and dexamethasone + high-dose methotrexate and cytarabine) +/- rituximab prior to transplant. There have been no relapses or deaths amongst these patients at a median follow-up of 16 months. CONCLUSIONS: Patients treated with allogeneic HSCT had a lower relapse rate, but similar EFS and OS to autologous HSCT. Treatment of MCL with HyperCVAD +/- rituximab followed by HSCT seems promising.     

代谢综合征与肾透明细胞癌相关性研究

目的 代谢综合征(metabolic syndrome,MS)是一组临床症候群,MS及其相关组分与癌症发生发展及病理特征具有密切关系.本研究旨在分析MS及其相关组分与肾透明细胞癌(clear cell cenal cell carcinoma,CCRCC)分期、分级及肿瘤大小的相关性.方法 回顾性分析2013-01-01-2015-12-30于山西医科大学第一医院就诊且病理诊断为CCRCC的375例患者的临床资料,包括年龄、性别、身高、体质量、血压、空腹血糖、生化结果、病理分期分级和肿瘤大小等.计数资料采用x2检验,计量资料以(x)±s表示,组间比较采用t检验,多因素分析采用Logistic回归分析.结果 MS组56例患者,其中男性患者32例,女性患者24例;非MS组319例患者,其中男性患者206例,女性患者113例.男女患者比较,差异无统计学意义,P=0.287.MS组与非MS组相比,年龄、吸烟、饮酒等差异无统计学意义,P值分别为0.100、0.691和0.269;而BMI指数、收缩压、空腹血糖、TG、HDL-C等差异均有统计学意义,均P＜0.001.在病理特点方面,MS与非MS相比,CCRCC病理分期(P=0.018)、分级(P=0.026)及肿瘤大小(P=0.026),差异均有统计学意义.MS相关疾病与CCRCC分期分析,糖尿病(P＜0.001)、高血压(P=0.015)、血脂紊乱(P=0.006)与CCRCC的分期有关.结论 CCRCC合并MS者病理分期较高、分级较低、肿瘤更大,糖尿病、高血压和血脂紊乱都可增加CCRCC的病理分期.     

阿霉素诱导粘液表皮样癌细胞凋亡时细胞周期的变化

 在证明10ug／ml阿霉素诱导粘液表皮样癌MEC—1细胞凋亡的基础上，研究细胞凋亡过程中细胞周期变化，以利于临床用药。方法：通过显微镜观察细胞的形态变化和DNA电泳来观察图形，并依靠流式细胞术准确了解用药后细胞周期的变化。结果：光镜下见癌细胞凋亡改变，DNA电泳是典型梯状条图；流式细胞仪测得阿霉素作用5h时，细胞阻于G₂期，24h时细胞阻于G₁期。结论：阿霉素诱导MEC—1细胞凋亡初期，细胞阻于G₂期，后期细胞阻于G₁期。     

Natural killer cell neoplasms

Natural killer (NK) cell tumors are an uncommon and heterogeneous group of disorders. The World Health Organization (WHO) classified mature NK cell neoplasms into 2 types: 1) extranodal NK cell lymphoma, nasal type and 2) aggressive NK cell leukemia. The mature NK cell tumors are prevalent in Asia and Central and South America. These tumors show polymorphic neoplastic infiltrate with angioinvasion and/or angiodestruction, cytoplasmic azurophilic granules, CD2-positive (CD2+)/CD3-negative (CD3-)/cCD3epsilon+/CD56+ phenotype, and strong association with Epstein-Barr virus (EBV). Loss of chromosomes 6q, 11q, 13q, and 17p are recurrent aberrations. Although blastic NK cell lymphoma, currently referred to as CD4+/CD56+ hematodermic neoplasm, also was included in the NK cell lymphoma category in the WHO classification scheme, existing evidence indicates a plasmacytoid dendritic cell derivation as opposed to an NK cell origin. Recently, rare cases of CD56+ immature lymphoid tumors have been reported in the literature. These tumors are characterized by blastic appearance, CD3-/CD4-/CD56+/CD13-/CD33- phenotype, T-cell receptor and immunoglobulin genes in germline configuration, and no evidence of EBV, suggesting a true immature NK cell derivation. For this article, the authors reviewed the recent concepts and progress in clinicopathologic features, pathogenesis, genetic characteristics, diagnosis, differential diagnosis, treatment approaches, and outcomes of all subtypes of NK cell neoplasms.     

Pygopus2的表达下调抑制肺癌细胞的增殖能力

目的:探讨肺癌细胞中Pygopus2（Pygo2）的表达及意义。方法:Western Blot明确肺癌细胞系中Pygo 2的表达后,应用 siRNA、MTT、流式细胞术等方法检测及其表达对肺癌细胞增殖凋亡能力的影响。结果:肺癌细胞系中存在Pygo2的过表达,其表达下调能够通过阻滞细胞周期及促进细胞凋亡,进而抑制肺癌细胞的增殖能力。结论:Pygo2的异常表达是导致肺癌发生发展的重要因素。     

VEGF-C在宫颈癌细胞中的表达及与细胞增殖的关系

目的:研究VEGF-C在宫颈癌细胞中的表达及其对宫颈癌细胞增殖的影响。方法:采用反义技术,脂质体介导VEGF-C反义寡核苷酸转染人宫颈癌Hela细胞。应用荧光定量RT-PCR法、间接免疫荧光标记法,检测转染后细胞内VEGF-C在mRNA、蛋白水平的变化。MTT比色法检测细胞生长的变化。结果:脂质体介导VEGF-C反义寡核苷酸,转染宫颈癌Hela细胞的转染效率大于90％。转染了反义寡核苷酸的反义组VEGF-C在mRNA和蛋白水平上,较未转染组和正义组均明显下降（P<0.05）。MTT法检测转染了VEGF-C反义寡核苷酸的细胞,明显看到反义组细胞的生长受到明显抑制。结论:VEGF-C可影响人宫颈癌Hela细胞增殖,本实验通过抑制VEGF-C,进而可阻断宫颈癌的淋巴转移,为实现靶向性基因治疗的可行性,提供了实验依据。     

miR-27a下调肾癌细胞FOXO1表达并促进其细胞增殖

目的 探讨microRNA-27a(miR-27a)在肾癌细胞中的作用及调控机制.方法 应用miR-27a反义寡核苷酸(ASO)在体外转染786-O和Caki-1细胞;qRT-PCR法检测miR-27a及FOXO1 mRNA的表达情况,Western blot检测FOXO1蛋白的表达水平;CCK8检测miR-27a ASO对细胞增殖的影响.结果 786-O和Caki-1细胞中miR-27a表达高于HK2正常肾小管上皮细胞(P<0.05);利用miR-27a ASO抑制786-O和Caki-1细胞miR-27a表达后,发现两个细胞株FOXO1 mRNA和蛋白表达的升高及增殖能力的降低(P<0.05).结论 miR-27a 可能通过调控FOXO1表达在肾癌中起致癌作用.miR-27a ASO可抑制肾癌细胞的增殖,因此miR-27a有可能作为肾癌基因治疗的候选靶点.     

miR-27a下调肾癌细胞FOXO1表达并促进其细胞增殖

目的：探讨microRNA-27a（miR-27a）在肾癌细胞中的作用及调控机制。方法：应用miR-27a反义寡核苷酸（ASO）在体外转染786-O和Caki-1细胞;qRT-PCR法检测miR-27a及FOXO1 mRNA的表达情况,Western blot检测FOXO1蛋白的表达水平;CCK8检测miR-27a ASO对细胞增殖的影响。结果：786-O和Caki-1细胞中miR-27a表达高于HK2正常肾小管上皮细胞（P〈0.05）;利用miR-27a ASO抑制786-O和Caki-1细胞miR-27a表达后,发现两个细胞株FOXO1 mRNA和蛋白表达的升高及增殖能力的降低（P〈0.05）。结论：miR-27a可能通过调控FOXO1表达在肾癌中起致癌作用。miR-27a ASO可抑制肾癌细胞的增殖,因此miR-27a有可能作为肾癌基因治疗的候选靶点。