血管生成拟态和内皮依赖性血管在喉癌转移中的作用研究

目的 探讨血管生成拟态和内皮依赖性血管在喉鳞状细胞癌侵袭转移过程中的作用,用以评估患者的预后.方法 回顾性分析203例喉癌患者临床病理资料及随访结果.CD31和过碘酸雪夫试剂免疫组化双重染色及CD31染色标记石蜡包埋喉癌组织中血管生成拟态及内皮依赖性血管的表达,应用Kruskal-Wallis检验和单因素方差分析比较血管生成拟态和内皮依赖性血管与喉癌患者临床病理参数的关系,并应用Kaplan-Meier进行生存分析,评估患者的预后.结果 血管生成拟态与喉癌患者的淋巴转移、肿瘤分期和组织病理学分级有关(P值均＜0.05).而内皮依赖性血管与喉癌患者的发病部位、肿瘤分期、T分期和远处转移有关(P＜0.05).单因素分析表明,血管生成拟态(P=0.014)、肿瘤分期(P=0.009)、T分期(P=0.013)、淋巴转移(P=0.013)、组织病理学分级(P=0.038)、肿瘤大小(P=0.028)和放疗(P＜0.0001)与喉癌患者总生存率有关.而血管生成拟态(P=0.011)、发病部位(P=0.049)、肿瘤大小(P=0.001)和放疗(P ＜0.0001)与喉癌患者无瘤生存率有关.多因素分析结果表明,血管生成拟态是影响喉癌患者预后的独立危险因素.结论 喉癌组织中内皮依赖性血管与血管生成拟态共存.血管生成拟态可能通过促进区域淋巴转移影响喉癌患者的生存,对预测喉癌患者的转移和生存具有重要价值.     

葡萄糖转运蛋白1在人喉鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:观察葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)在人喉鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理学的关系.方法:应用免疫组织化学的方法以及RT-PCR法检测57例喉鳞状细胞癌患者的肿瘤组织、癌旁喉组织以及远离肿瘤的正常喉组织中GLUT1的蛋白和mRNA的表达,并结合喉癌患者的临床病理特征进行分析.结果:①免疫组织化学:GLUT1在喉癌组织中的表达高于癌旁喉组织和正常喉组织(P<0.01);在低分化喉癌中的表达高于高分化喉癌(P<0.05);Ⅲ期+Ⅳ期喉癌较Ⅰ期+Ⅱ期喉癌有高表达GLUT1的趋势(P<0.01);有淋巴转移的喉癌的表达高于无淋巴转移者(P<0.05);在直径≥3 cm的肿瘤中的表达高于直径＜3cm者(P<0.05).②RT-PCR结果:GLUT1在喉癌组织中的表达高于癌旁喉组织和正常喉组织(P<0.01);在低分化喉癌中的表达高于中分化和高分化喉癌(P<0.05);Ⅲ期+Ⅳ期喉癌较Ⅰ期+Ⅱ期喉癌有高表达GLUT1的趋势(P<0.05);有淋巴转移的喉癌的表达高于无淋巴转移者(P<0.05);在直径≥3 cm的肿瘤中的表达高于直径＜3 cm者(P<0.05).结论:GLUT1与喉癌发生、发展、分化、淋巴转移和转归等密切相关,可以作为喉癌的诊断、治疗和预后指标之一.     

高频超声波内窥镜在喉病变诊断中的应用

目的研究高频超声波内窥镜图像技术在喉病变,特别是喉癌诊断中的应用.方法用可屈的小内径(8-10F)高频(10-20MHz)内窥镜式超声探头,对45例患者行喉腔内无创伤检查.在频率10MHz最大探及3cm,在20MHz最大探及1.5cm.超声图上,准确测量出肿瘤垂直直径大小及位置.结果其中探查到32例喉癌,与周围组织相比,呈现出典型的反射矩阵波.在显微喉镜检查中,借助高频超声可探查到T1声带癌(n=13),最小瘤体直径约3mm的浸润癌.但13例中有6例探查不到肿瘤(假阴性),假阳性结果尚未发现.T2-T3喉癌(n=12)较易诊断,在声门上区和声门下区肿瘤较周围组织显示低回声区;T4肿瘤(n=7)侵犯甲状软骨可在超声图上较易显出,肿瘤的低回声区与甲状软骨内膜的高回声区有明显的反差;另外探及喉良性病变13例.结论运用内窥镜式高频超声可在显微镜检查中对喉病变,特别是喉肿瘤的大小及相应浸润范围,做出更为准确的诊断,对保留喉功能的喉癌术式选择有指导意义.     

肿瘤异常蛋白在喉癌临床诊断中的价值研究

目的 对喉癌患者和健康者进行肿瘤异常蛋白检测,分析肿瘤异常蛋白在喉癌诊疗中的价值.方法 选取耳鼻咽喉头颈外科2017年9月至2019年9月经病理科确诊的95例喉癌病人为实验组,同期选取95例健康者为对照组,对所有研究对象进行外周血肿瘤异常蛋白检测,探究其在喉癌患者临床诊断中的应用价值.结果 喉癌患者中肿瘤异常蛋白阳性率...     

长链非编码RNA与喉癌的相关性

长链非编码RNA (lncRNA)属于非编码RNA中的一种,通过影响染色体的重塑、转录和转录后基因表达水平来调节机体功能.近年研究发现,lncRNA与肿瘤的发生、发展有关,并有多种lncRNA在喉癌中表达异常,其可能在喉癌的发病过程中发挥重要作用.本文就lncRNA在喉癌的发生、进展中的作用及机制研究现状进行综述,对其在喉癌的诊断、治疗以及预后方面的应用前景做一展望.     

Gli1蛋白在喉癌组织中的表达与临床病理因素及PCNA表达之间的关系

目的探讨神经胶质瘤致病基因1(Glioma-associated oncogene homolog 1,Gli1)蛋白在喉癌组织中的表达与喉癌临床病理因素及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达之间的关系,为喉癌的诊断和治疗提供新思路。方法采用免疫组化法检测Gli1蛋白和PCNA在40例喉癌组织中的表达情况,对Gli1蛋白在喉癌组织中的表达与临床病理因素及PCNA表达之间的关系进行统计学分析。结果Gli 1蛋白在喉癌组织中表达阳性率为1 0 0%。其表达与喉癌患者年龄(P=0.5 7 2)、性别(P=0.8 3 7)、肿瘤生长部位(P=0.9 4 7)、肿瘤T分级(P=0.5 6 0)无相关性。而与病理分级(P=0.000)、有无淋巴结转移(P=0.001)有关。PCNA在喉癌组织中呈巢状、局灶状或呈片状分布,相关分析显示Gli1蛋白的表达与PCNA阳性表达呈明显正相关。结论 Gli1蛋白通过促进肿瘤增殖活性,在喉鳞癌发生、发展中有重要作用。     

人喉癌组织及喉癌细胞系肿瘤千细胞表面标记的差异

目的 比较细胞膜表面蛋白CD44、ABCG2(ATP-binding cassette superfamily G2,ABCG2)和CD133在人喉鳞状细胞癌(简称喉癌)组织及喉癌Hep-2、LSC-1细胞系中的表达及其差异性,从而探讨在喉癌肿瘤干细胞筛选中的价值.方法 以人喉癌组织及喉癌细胞系Hep-2、LSC-1为...     

声门型喉癌颈淋巴结转移相关因素的研究

目的　总结声门型喉癌颈淋巴结转移发生率 ,探讨影响声门型喉癌颈淋巴结转移的相关因素。方法　对 1983年 1月～ 1999年 5月年间中国医科大学第一临床学院耳鼻咽喉科收治的452例声门型喉癌进行回顾性分析。男女比例约为 10∶1,年龄 42～ 79岁之间 ,平均 59 3岁。结果声门型喉癌颈淋巴结转移发生率为 3 54% (16/ 4 52例 ) ,其中早期 (T1和T2期 )声门型癌颈淋巴结转移发生率为 0 2 9% (1/ 3 4 0例 ) ,晚期 (T3和T4期 )颈淋巴结转移发生率为 13 3 9% (15/ 112例 )。所有转移淋巴结均位于肿瘤病变侧Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ区。结论　声门型喉癌肿瘤组织对声门下、室带等处侵及率相近 ,肿瘤累及上述不同部位其颈淋巴结转移的发生率差异无显著性。对于临床诊断无颈部淋巴结转移的声门型喉癌患者 ,不需要行颈清扫术。     

喉癌组织内微血管密度的测定及其临床意义

目的 :探讨喉癌组织内微血管的形成情况及其临床意义。方法 :采用第 因子相关抗原免疫组化法定量观察 38例喉癌组织内微血管的形态和分布并计算微血管密度 (MVD)。结果 :1喉癌组织内血管形态不规则 ,血管分布具有异质性 ,在癌巢实质内存在几无血管的“空白区”。 2癌组织中的 MVD显著高于癌周正常组织 (P <0 .0 1)。 3颈部淋巴结转移组喉癌组织 MVD高于非转移组 (P <0 .0 1) ; 、 期喉癌组织 MVD高于 、 期 (P <0 .0 1)。 4声门上型喉癌组织 MVD与声门型相比较差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。 5喉癌组织内 MVD在高分化、中分化、低分化三组中分别为 (2 4.70± 6 .36 )、(2 8.6 4± 11.5 4)、(2 9.0 7± 7.84)个 / HPF。其差异无显著性意义。结论 :1喉癌组织内存在血管增生现象 ,增生血管主要位于肿瘤间质 ,分布具有异质性。 2喉癌组织内MVD与喉癌分型及组织学分级无明显关系。 3肿瘤血管的形成有利于肿瘤的侵袭转移 ,喉癌组织 MVD的测定可望作为评估预后的又一重要指标。     

血清可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅰ和受体Ⅱ在喉癌中的表达及意义

目的 通过测定喉癌患者血清可溶性肿瘤坏死因子受体（sTNFR）水平的变化,探讨其在喉癌诊断和监控中的临床意义。方法 应用双抗体夹心酶联免疫吸附测定（ABC ELISA）检测42例喉癌患者和40例健康成人的血清sTNFRI、sTNFRⅡ的水平,进行比较。结果 喉癌患者的血清sTNFR I水平(1463.34±669.07)pg/mL与健康对照组(549.30±293.29)pg/mL 比较差异有统计学意义(P<0.05),而sTNFRⅡ的水平与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05); sTNFRⅠ及sTNFRⅡ水平在喉癌组各型间差异均无统计学意义(P>0.05), sTNFRⅠ水平在喉癌各期间差异有统计学意义(P<0.05);而sTNFRⅡ水平在喉癌各期间差异无统计学意义(P>0.05)。有淋巴结转移喉癌患者sTNFRⅠ水平显著高于无淋巴结转移的喉癌患者(P<0.05);而sTNFRⅡ水平在有淋巴结转移和无淋巴结转移的患者间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 sTNFRⅠ的检测对喉癌的早期诊断和预后评估具有实用价值。     

42例喉癌患者血清microRNAlet-7a水平的变化及意义

目的探讨42例喉癌患者血清microRNAlet-7a水平的变化及其对喉癌的诊断价值。方法qRT-PCR检测42例喉癌患者(手术前后)及42例健康体检者血清miRNA let-7a的表达,分析血清let-7a水平与喉癌的临床病理因素的关系,用受试者工作曲线(ROC)分析其对喉癌的诊断效能。结果血清let-7a在实验组比正常对照组相对表达下降分别为:0.38±0.0831、0.933±0.0723,差异有统计学意义;喉癌患者术前比术后1周血清let-7a的相对表达下降为:0.38±0.0831、0.488±0.1468,差异有统计学意义。血清let-7a的相对表达量与淋巴结转移有关联(P0.05);与年龄、性别、饮酒、吸烟、浸润深度、肿瘤分型、TNM分期、分化程度无关联(P0.05)。受试者工作曲线(ROC)显示以0.765为血清let-7a相对表达量的最佳临界值诊断喉癌,其灵敏度为76.5%,特异度为76.1%,AUC为0.850,95%置信区间为0.776～0.932。结论喉癌患者血清miRNAlet-7a水平较健康者出现下调,let-7a有望成为诊断喉癌的新的分子标志物。血清let-7a水平与淋巴结转移有关,有助于肿瘤病情判断与术后病情监测,但有待进一步研究。     

幽门螺杆菌感染和喉鳞状细胞癌致病因素的研究

目的 探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)在喉鳞状细胞癌患者中的感染情况,分析HP感染是否为喉鳞癌的致病因素.方法 采用巢式聚合酶链反应(nested PCR,nPCR)技术和Hp培养、鉴定对30例喉癌患者和15例喉良性疾病(声带息肉和会厌囊肿)患者的喉黏膜进行Hp检测.结果 采用nPCR法检测Hp,喉癌患者肿瘤组织Hp阳性22例(73.3%)高于对照组3例(20.0%),两者差异有统计学意义(x2=11.520,P=0.010).在22例Hp(+)的喉癌患者的44份肿瘤和癌旁组织中,有19份癌旁正常组织检出Hp(86.4%),而10份肿瘤组织检出Hp(45.4%),两者差异有统计学意义(x2=4.697,P=0.030).所有标本Hp培养均为阴性.结论 Hp在喉癌患者中的感染率明显高于实验人群,可能是喉癌的致病因素之一.     

CK19和EGFR mRNA在喉癌动物模型外周血中的表达及其与淋巴转移关系

目的:探讨循环播散肿瘤细胞(CTC)与喉癌淋巴结转移的相关性,评价细胞角蛋白(CK19)和表皮生长因子受体(EGFR)在喉癌微转移诊断中的价值.方法:从30只裸鼠中随机选择25只均分为5组建立喉肿瘤模型,剩余5只为对照组,分别于接种后2、4、6、8、10周处死1组.采用RT-PCR方法检测裸小鼠外周血及肿瘤组织中CK19 mRNA和EGFR mRNA的表达,采用连续病理切片苏木精-伊红染色观察淋巴结转移,免疫组织化学(SP)法检测肿瘤组织中EGFR的表达.结果:对照组外周血中未发现CK19 mRNA和EGFR mRNA的表达,实验组外周血和肿瘤组织中CK19 mRNA阳性率分别为48%和80%,EGFR mRNA的阳性率分别为36%和76%.淋巴结转移与外周血CTC有关(r=0.655,P<0.01),且多发生在肿瘤指数生长期,转移率为60%(15/25).免疫组织化学检测EGFR蛋白在肿瘤组织阳性率为88%(22/25),外周血中EGFR mRNA表达阳性的肿瘤组织中EGFR蛋白均阳性,肿瘤组织EGFR蛋白高表达的外周血中EGFR mRNA检出率亦高.结论:RT-PCR检测外周血CK19和EGFR mRNA的表达有助于预测淋巴结转移,EGFR mRNA有望作为肿瘤诊断和治疗的新靶点.     

喉癌、下咽癌组织中环氧化酶-2的表达与临床意义

目的研究喉癌、下咽癌中环氧化酶-2(COX-2)的表达与肿瘤临床病理参数及肿瘤预后的关系.方法应用免疫组化法检测喉癌、下咽癌组织及声带息肉组织中COX-1和COX-2的表达,并分析癌组织中COX的表达强度与肿瘤对应的各项病理参数及与预后的关系.结果喉癌、下咽癌组COX-2阳性表达率为67.5%(27/40),声带息肉组COX-2阳性表达率为0(0/30),COX-2的阳性表达与肿瘤的临床分期、病理分级及预后有关,与淋巴结转移关系不明显.结论COX-2在喉癌、下咽癌组织中表达增高,并与肿瘤的恶性度相关,表明COX-2可能在喉癌、下咽癌的发生发展中起重要的作用.     

喉癌N0期前哨淋巴结检测及其意义

喉癌外科治疗的重点在于原发灶与区域性转移的控制.自1894年Halsted提出的广为人知的Halsted原则(局部肿瘤广泛切除加上区域性淋巴结清扫)后,淋巴结的治疗就成为肿瘤治疗的一部分.颈部淋巴结清扫由Crile于1906年首先报道,到上世纪50年代,Martin等[1,2]给予规范化,叙述了解剖基础,规定了适应证及手术操作,使喉癌颈淋巴结清扫术成为一个经典手术.此后,对于就诊时有区域淋巴结转移(N1～N3)的患者,应进行颈淋巴结清扫术,已有一致意见.然而对临床大体检查无区域淋巴结转移的患者(N0病例)应如何诊断和处理却有不同意见,并已争论了近百年.     

声门型喉癌颈淋巴结转移相关因素的研究

目的 总结声门型喉癌颈淋巴结转移发生率，探讨影响声门型喉癌颈淋巴结转移的相关因素。方法 对1983年1月—1999年5月年间中国医科大学第一临床学院耳鼻咽喉科收治的452例声门型喉癌进行回顾性分析。男女比例约为10：1，年龄42—79岁之间，平均59．3岁。结果 声门型喉癌颈淋巴结转移发生率为3．54％(16／452例)，其中早期(T1和T2期)声门型癌颈淋巴结转移发生率为0．29％(1／340例)，晚期(T3和T4期)颈淋巴结转移发生率为13．39％(15／112例)。所有转移淋巴结均位于肿瘤病变侧Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ区。结论 声门型喉癌肿瘤组织对声门下、室带等处侵及率相近，肿瘤累及上述不同部位其颈淋巴结转移的发生率差异无显著性。对于临床诊断无颈部淋巴结转移的声门型喉癌患者，不需要行颈清扫术。     

胸苷磷酸化酶、中期因子及CD105在喉癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨胸苷磷酸化酶(TP)、中期因子(MK)和CD105在喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义.方法:采用免疫组织化学方法检测43例喉鳞状细胞癌组织中TP、MK的表达和CD105标记的微血管密度(MVD)情况.结果:TP的阳性表达率为67.4%,MK的阳性表达率为60.5%,CD105标记的MVD值为6.01±1.78.TP和MK均为阳性时CD105标记的MVD值(7.07±3.26)明显高于TP和MK均为阴性时的MVD值(4.03±1.90)(P＜0.05).三者表达均与临床分期、淋巴结转移有关.单因素分析显示TP、MK表达和高MVD(≥6)均影响喉癌患者的生存期,但通过多因素分析显示只有淋巴结转移和MVD是影响喉癌患者生存期的预后因素.结论:TP、MK表达与喉癌血管生成关系密切,是喉癌肿瘤血管生成的重要因子,三者与喉癌进展、淋巴结转移密切相关.淋巴结转移和CD105标记的MVD是影响喉癌预后的因素;TP、MK可能通过促肿瘤血管生成作用对喉癌预后产生影响;TP、MK及CD105可作为一组有价值的肿瘤标记和预后指标.     

抑癌基因Runx3启动子甲基化与喉癌发生和转移的关系

目的:探讨 Runx3基因启动子甲基化与喉癌发生发展过程的关系.方法:采用RT-PCR检测40例喉癌组织及肿瘤周围黏膜组织中Runx3 mRNA 的表达,同时采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测Runx3基因启动子甲基化情况.结果:40例喉癌组织标本中Runx3基因的表达(1.62±1.01)较肿瘤周围组织中表达(5.66±2.07)明显下调, 差异有统计学意义(P<0.01).正常黏膜组织中未发现有Runx3基因启动子的甲基化,40例喉癌组织中有38例检测到Runx3基因启动子的甲基化,喉癌组织Runx3基因启动子甲基化率显著增高(P<0.01).喉癌标本中Runx3 mRNA 的表达与其病理临床特征密切相关,在低分化和有淋巴结转移喉癌组织标本中Runx3 mRNA 的表达显著下调(P<0.01).结论:Runx3 基因启动子甲基化是导致Runx3基因失活的主要原因之一并且与喉癌的发生、发展密切相关.     

PDTC对喉癌裸鼠模型中循环肿瘤细胞的影响

目的:探讨核因子κB(NF-κB)与喉癌循环肿瘤细胞(CTC)发生之间的相关性,并观察NF-κB抑制剂PDTC对CTC的影响及可能机制.方法:裸鼠皮下接种喉癌Hep-2细胞,建立喉癌裸鼠模型.将60只裸鼠随机分为实验组(PDTC预处理组)、对照组(生理盐水组)及空白组(不接种喉癌细胞),每组各20只.肿瘤接种成功8周后处死裸鼠,采用RT-PCR法,以CK19mRNA为标记物检测各组中CTC的表达;取出肿瘤组织,测定其体积,免疫组织化学方法观察喉癌组织NF-κB的表达及激活情况,实时荧光定量PCR检测各组喉癌组织中血管内皮生长因子-C和基质金属蛋白酶-9 mRNA的表达.结果:CTC发生与NF-κB的表达率无明显关联,在CTC 表达阳性的喉癌组织中,NF-κB阳性率为90%,而在CTC表达阴性的喉癌组织中,NF-κB阳性率为56.7%(P>0.05),但其与NF-κB的活性有关;PDTC可抑制NF-κB的激活.减少喉癌裸鼠模型中CTC的发生率,PDTC组CTC阳性率为5%,明显低于对照组CTC的阳性率45%(P<0.01).结论:PDTC可减少喉癌裸鼠模型中CTC 的发生率,其作用可能得益于PDTC降低了喉癌发生转移的能力,其机制町能为PDTC通过抑制NF-κB活性而使血管内皮生长因子-C和基质金属蛋白酶-9表达下调,减少肿瘤组织新生血管形成及降低喉癌侵袭力有关.     

基质金属蛋白酶与喉癌、下咽癌的浸润转移

侵袭转移是喉癌、下咽癌的主要生物学行为之一,也是喉癌、下咽癌患者致死的主要原因.研究喉癌、下咽癌的侵袭和转移对喉癌、下咽癌的治疗有着重要的意义.基质金属蛋白酶(matrix mettallo-proteinases,MMPs)在肿瘤侵袭和转移中发挥着重要作用,不同的MMPs在喉癌、下咽癌分布和表达不同,因而对喉癌、下咽癌的侵袭和转移的作用也不同.不同的MMPs在喉癌、下咽癌分布和表达不同,有可能成为探索个体化治疗喉癌、下咽癌的理论依据.