人IL-15基因在CHO细胞中的表达及其对鼻咽癌细胞增殖的抑制作用

目的在CHO细胞中进行人白细胞介素-15基因真核表达载体的稳定表达,并检测重组表达蛋白rhIL-15对鼻咽癌细胞体外增殖的抑制作用。方法将真核表达载体pcDNA3.1( )-hIL-15转染CHO细胞,G418筛选稳定表达株;采用RT-PCR和ELISA法对hIL-15的表达进行检测,MTT法检测rhIL-15对人鼻咽癌细胞系CNE-2Z体外增殖的抑制效应。结果人IL-15在CHO细胞中获得稳定表达,RT-PCR显示细胞的rhIL-15mRNA呈现高水平,ELISA检测到rhIL-15在细胞中的分泌性表达,浓度达(3.08±0.23)μg/ml,且所表达的人IL-15具有较强的抑制CNE-2Z鼻咽癌细胞增殖的作用。结论成功地在CHO细胞中获得了hIL-15蛋白的高效、稳定表达,重组表达蛋白rhIL-15体外能有效地抑制鼻咽癌细胞增殖,为进一步研究人IL-15抗肿瘤的分子机制及潜在的应用奠定了基础。     

氯化镉对人肝癌细胞SMMC-7721抑制作用

目的 研究氯化镉（CdCl2）对人肝癌细胞（SMMC-7721）的抑制作用并探讨其作用机制。方法应用生长曲线法、四甲基偶氮噻唑蓝法（MTT）、流式细胞术（FCM）检测CdCl2对SMMC-7721的生长抑制及对细胞周期的影响。结果CdCl2对肝癌细胞SMMC-7721有明显的生长抑制作用，且存在剂量-效应关系；影响细胞周期进程并出现G0／G1期阻滞。结论CdCl2能有效抑制肝癌细胞株的生长，其抑制作用可能与影响细胞周期进程有关。     

硒加抗癌药对人肝癌细胞生长的影响

研究亚硒酸钠（Ｎａ_２ＳｅＯ_３）和丝裂霉素（ＭＭＣ）、盐酸阿霉素（ＡＤＭ）对ＱＧＹ—７７０３人肝癌细胞生长的影响。结果表明：终浓度为１μｇ／ｍｌ的Ｎａ２ＳｅＯ３，可明显抑制肝癌细胞的生长增殖、减少细胞对甲胎蛋白（ＡＦＰ）的分泌；１μｇ／ｍｌ的Ｎａ２Ｓｅ０３与１．５μｇ／ｍｌ的ＭＭＣ或１５μｇ／ｍｌ的ＡＤＭ联合应用对肝癌细胞生长增殖的抑制作用，不论是细胞生长的抑制率、还是肝癌细胞分泌ＡＦＰ的抑制率，均明显高于各自的单独应用效果，差异有显著性意义（Ｐ＜０．０５）．并随着培养时间的延长、抑制程度持续增强。提示Ｎａ_２ＳｅＯ_３与抗癌药联合应用。具有良好的协同或相加抑癌、抗癌效应。对临床应用有一定的实际意义。     

鼻咽癌HNE1细胞与CNE1细胞的蛋白质表达谱的初步研究

目的 探讨鼻咽癌发生、发展过程中蛋白质的动态变化，为寻找鼻咽癌的分子标志物打下基础。方法 采用双向电泳结合质谱技术研究低分化鳞癌细胞系HNE1与高分化鳞癌细胞系CNE1的蛋白质表达谱的差异。结果 初步鉴定出8个在HNE1细胞中表达上调的蛋白点包括14kDabeta—galactoside—bindinglectin，four and a half LIM domains2．regulator of G—protein signalling20，Similar to hypothetcal protein，RAB9，unnamed protein product，SREC-4。结论 HNE1与CNE1细胞蛋白质表达谱有差异，该研究有助于进一步阐明鼻咽癌发生、发展的病理机制。     

硒对人羊膜细胞和猴肾细胞核酸合成的影响

作者采用细胞培养技术和同位素技术,研究了硒对人羊膜细胞和猴肾细胞的核酸合成的影响。将细胞悬液和不同浓度的亚硒酸钠溶液共同孵育24小时后,加入氚标记的DNA和RNA合成的前身物质,通过测定细胞内同位素量,可推测细胞合成DNA和RNA的速度。结果表明,硒能促进细胞的DNA和RNA合成,并且是细胞生长所必需的微量元素。     

大豆皂甙对人肝癌细胞QGY-7703的生长抑制作用研究

目的:观察大豆皂甙对人肝癌QGY-7703细胞的生长抑制作用。方法:大豆皂甙作用于肝癌QGY-7703细胞,用MTT法、荧光倒置显微镜观察等研究细胞生长与细胞凋亡,激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察细胞凋亡及细胞内Ca2+浓度变化。结果:MTT实验表明0.1～0.8mg/ml大豆皂甙对QGY-7703细胞增殖有明显抑制作用。荧光显微镜和CLSM观察到细胞核浓缩等典型的细胞凋亡形态特征。CLSM检测还表明大豆皂甙使肝癌细胞胞内Ca2+浓度显著增大。结论:大豆皂甙对人肝癌QGY-7703细胞有生长抑制作用,诱导细胞凋亡是这种作用的主要形式,胞内Ca2+浓度升高可能是细胞凋亡的作用机制之一。     

共轭亚油酸对人胃腺癌细胞的抑制作用

采用体外细胞培养方法，研究共轭亚油酸（ＣＬＡ）对人胃腺癌细胞（ＳＧＣ－７９０１）生长的影响。ＣＬＡ的剂量分别为２５、５０、１００和２００μｍ ｏｌ／Ｌ，以乙醇为溶剂对照。结果表明：ＣＬＡ 能抑制ＳＧＣ－７９０１细胞的增殖、细胞核分裂、集落形成和细胞ＤＮＡ的合成，并诱导ＳＧＣ－７９０１细胞的分化     

褪黑素及其联合5-氟尿嘧啶对鼻咽癌细胞增值的影响

目的探讨褪黑素单药及与5-氟尿嘧啶(5-FU)联合用药对鼻咽癌细胞的体外抑制作用。方法体外培养人鼻咽癌细胞,经不同浓度褪黑素单药及与5-FU联合处理48h后,用CCK-8法测定细胞增殖情况。结果褪黑素对鼻咽癌细胞的生长具有较强的抑制作用,呈明显的剂量依赖性(P<0.01)。两药联合应用后,与5-FU单独用药相比,对鼻咽癌细胞的增值抑制作用明显增强(P<0.01),呈现相加效应(0.85相似文献   

氢气联合5-FU对人结肠腺癌细胞抑制作用及机制探讨

目的氢气可抑制鼠大肠癌细胞colon 26的增殖活性,并增强5-氟尿嘧啶(fluorouracil,5-FU)的抗癌作用。本研究进一步探讨氢气对原代人结肠腺癌细胞作用以及氢气与5-FU协同抑癌作用的机制。方法 2018-06-09-2019-04-10于临沂市肿瘤医院获取新鲜的结肠腺癌手术切除标本6例,取结肠腺癌组织块经胰蛋白酶消化后进行原代培养;0.4MPa压力下制备饱和氢气培养液;实验分为对照组、氢气组、5-FU组和氢气+5-FU组。采用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)法和四甲基偶氮唑盐(methylthiazoletetrazolium,MTT)检测细胞活性;平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;比色法检测谷胱甘肽(glutathione,GSH)与氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathion,GSSG)比值、Caspases-8和Caspases-9的酶活性;蛋白质印迹法检测NFκB蛋白表达。结果对照组MTT吸光度和形成克隆数分别为0.56±0.153和155±13.2,5-FU组分别为0.413±0.090和113±9.6,氢气+5FU组分别为0.323±0.085和86±6.5,两两比较,均P0.05。对照组、5-FU组和氢气+5-FU组细胞的凋亡率分别为(3.62±0.29)%、(21.95±2.02)%和(32.11±3.54)%,两两比较,均P0.05;细胞内ROS水平分别为3.63±0.21、5.62±0.44和4.32±0.36,两两比较,均P0.05;细胞的NFκB p65蛋白相对表达量分别为0.15±0.01、0.67±0.76和0.43±0.31,两两比较,均P0.05。以上检测指标对照组与氢气组比较,均P0.05。结论氢气与5-FU联合应用具有协调抗癌作用,其机制可能是氢气抑制了5-FU诱导的细胞内ROS水平升高和NFκB表达增强。     

植酸对人胃癌细胞增殖抑制作用的体外实验

目的:研究植酸对人胃癌细胞的生长抑制作用及机制。方法:采用MTT实验、Hoechst33342荧光染色法观察不同剂量植酸对SGC-7901细胞增殖的影响,免疫组化法检测Bcl-2蛋白的表达。结果:植酸对SGC-7901细胞增殖具有抑制作用,且存在剂量-效应关系。荧光染色可见,植酸作用组细胞出现典型的细胞核浓缩、边集、裂解的凋亡特征。植酸处理组细胞中Bcl-2蛋白表达较对照组降低。结论:植酸对SGC-7901细胞增殖具有抑制作用和诱导凋亡作用。     

黄芪多糖对鼻咽癌CNE-2细胞增殖抑制作用的研究

[目的]研究黄芪多糖(APS)对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的影响。[方法]设不同浓度APS(12.5,25.0,50.0,100.0μg/ml)、二甲基亚砜2‰为空白对照组,顺铂2μg/ml为顺铂组。应用MTT法检测APS对鼻咽癌CNE-2细胞的增殖抑制作用。[结果]与空白对照组比较,不同浓度的APS组在12、24、48、72h作用时吸光度均表现为上升的趋势,在48h时达到最大值,随后下降。不同浓度的APS组经不同的作用时间后,其吸光度与空白对照组比较差异均有统计学意义(P﹤0.05)。与顺铂组比较,12.5、25.0μg/mlAPS作用鼻咽癌CNE-2细胞12h时细胞的增殖没有明显的抑制作用(P﹥0.05),但作用24、48、72h时对鼻咽癌CNE-2细胞的增殖有明显的抑制作用(P﹤0.05);50.0、100.0μg/mlAPS在不同的作用时间对鼻咽癌CNE-2细胞的增殖均有明显的抑制作用(P﹤0.05)。[结论]APS可以明显地抑制鼻咽癌CEN-2细胞的生长,且存在剂量-时间的关系。     

Rb基因在染料木黄酮抑制人乳腺癌细胞生长中的作用

目的:研究Rb基因在染料木黄酮(genistein,Gen)抑制人乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖中的作用。方法:采用MTT实验和集落形成实验观察Gen对人乳腺癌细胞增殖影响,Westernblotting检测Rb基因、细胞周期素cyclinE蛋白表达情况,RT-PCR检测Rb基因mRNA的表达。结果:Gen显著抑制MCF-7细胞生长,促进细胞Rb基因在蛋白及mRNA水平的表达,抑制cyclinE蛋白的表达。结论:Gen抑制人乳腺癌细胞增殖,其机制可能通过上调Rb基因表达,下调cyclinE蛋白表达。     

有机硒对大鼠胸部γ射线照射所致肺损伤的防护效应

目的研究有机硒对大鼠放射性肺损伤的防护作用。方法取2月龄雌性Wistar大鼠45只,随机分为正常对照组(C)、单纯照射组(I)和硒防护组(S),每组15只。S组动物在60Coγ(20 Gy)照射前7 d灌胃给富硒麦芽,用量为每只每天4 000 mg.kg-1。C组和I组动物灌胃同体积的蒸馏水,于照射当天停止给药。在不同时间点处死动物称鼠重、鲜肺湿重,测肺组织MDA含量及SOD、GSH-PX活力。结果照射后15 d3、0 d、60 d时,S组体重增长百分率都明显高于I组,如60 d时两组分别为(43.9±0.3)%和(18.5±0.2)%(P<0.05);照射后15 d3、0 d时,S组肺湿重有低于I组的趋势;照射后15 d,S组MDA含量〔(16.64±0.65)nmol.mg pro-1〕明显低于I组〔(24.24±2.61)nmol.mg pro-1,P<0.05〕,S组SOD活力〔(75.69±3.72)NU.mg pro-1〕明显高于I组〔(52.03±6.43)NU.mg pro-1,P<0.05〕;S组GSH-Px活力有高于I组的趋势。结论补硒对放射性引起的肺损伤有一定的防护作用。     

c-myc在植酸诱导人胃癌细胞凋亡中的作用研究

目的研究植酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用及其机制。方法采用MTT实验法观察植酸对SGC-7901细胞的增殖抑制作用;倒置显微镜下观察植酸对细胞形态的改变;免疫组化法和Westernblot法检测凋亡调控基因c-myc的表达。结果MTT实验结果显示,植酸对SGC-7901细胞具有生长抑制作用,并呈现剂量与时间的效应关系;倒置显微镜下的形态学观察表明加药组细胞的生长受到抑制;植酸组细胞中c-myc蛋白比对照组表达降低,且呈现剂量-反应关系。结论植酸对人胃癌SGC-7901细胞具有诱导凋亡作用,c-myc参与了植酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用机制。     

硒和维生素E抑制镍诱导人肺成纤维细胞的转化

目的 :　探讨三氧化二镍 ( Ni2 O3)诱导人肺成纤维细胞 ( HLF)恶性转化以及硒和维生素 E的抑制作用。方法 :　在体外用不同浓度的 Ni2 O3处理 HLF细胞 4次 ,利用刀豆凝集素 A( Con A)凝集试验和软琼脂集落形成试验进行转化细胞的恶性鉴定 ;同时添加亚硒酸钠和维生素E,观察其对 Ni2 O3转化作用的影响。结果 :　Ni2 O3可诱导 HLF恶性转化 ,转化细胞生长速度加快 ,排列紊乱 ,失去接触抑制 ,呈交叉重叠生长 ,转化率呈剂量 -反应关系。转化细胞可被低浓度 ConA凝集 ,并在软琼脂内生长。添加硒和维生素 E的处理组与 Ni2 O3组比较 ,转化率显著下降 ( P<0 .0 5 ) ,处理后细胞 Con A凝集反应阴性 ,不能在软琼脂内生长。结论 :　 Ni2 O3有较强的诱导HLF细胞恶性转化的能力 ,具有致癌性。硒和维生素 E对于镍诱导人肺成纤维细胞恶性转化具有抑制作用。     

葡多酚对人乳腺癌细胞增殖的抑制作用研究

目的研究葡多酚(GPC)对人乳腺癌(MCF-7)细胞增殖活性的影响及雌激素受体(ER)的调节作用。方法将GPC与MCF-7细胞共同培养,共设肿瘤细胞对照组、高、中、低(200、100、10μg/ml)剂量GPC组、ER阻断剂对照组(ICI10-6mol/L)和ER阻断剂(ICI10-6mol/L)+GPC(200μg/ml)6个组。用MTT法测定各组乳腺癌细胞的增殖活性水平,用免疫组化方法检测乳腺癌细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)和Bax蛋白的表达水平。结果与肿瘤细胞对照组比,高剂量GPC组乳腺癌细胞的增殖活性水平和PCNA阳性表达率降低,Bax蛋白阳性表达率升高(P<0.05);ER阻断剂+GPC组乳腺癌细胞的增殖活性水平、PCNA阳性表达率,均较高剂量GPC组升高,Bax蛋白阳性表达率降低,各项差别均有显著性意义(P<0.05)。结论GPC可有效抑制人乳腺癌细胞的增殖,并促进其凋亡;其作用与ER调节有密切关系。     

微量元素硒抗脂质过氧化作用的研究

加高脂血清对小牛主动脉平滑肌细胞的笫31代老化细胞培养两周以加强平滑肌细胞的脂质过氧化作用,并在培养液中添加不同浓度的亚硒酸钠,以VE作对照比较。结果表明,高脂培养的平滑肌细胞内过氧化脂质含量显著高于对照组,加硒剂及VE组,平滑肌细胞内过氧化脂含量均显著低于高脂组及对照组。不同剂量的硒剂显示出剂量效应关系。昆明种小鼠预服硒剂3周,然后用~(60)钴一次照射,继续服硒剂1周后测全血谷胱甘肽过氧化物酶活性。放射损伤小鼠全血谷胱甘肽过氧化物酶活性显著低于对照组;服硒组则接近对照组水平。结果显示,硒通过提高谷胱甘肽过氧化物酶活性具有抗脂质过氧化的作用。     

氟对体外培养血管内皮细胞影响及硒干预作用研究

目的研究不同浓度氟对体外培养血管内皮细胞的影响及硒的干预作用。方法人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)置于37℃,5%CO2,饱和湿度条件下培养。在培养液中加入氟化钠,氟浓度分别为0、100、400、700、1000、2000μmol/L,同时加入硒,浓度为100 nmol/L。连续培养48 h后,收集细胞培养液与细胞。应用瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态,吖啶橙荧光染色测定细胞凋亡,四唑氮蓝(MTT)比色法检测细胞活性;检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量;检测细胞培养液诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性、细胞iNOSmRNA、eNOSmRNA表达;检测细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)含量。结果在氟浓度100~700μmol/L加硒100 nmol/L,可明显减轻氟对细胞生长的抑制,恢复细胞形态的改变;使SOD、GSH-Px活性升高(P<0.05)、MDA含量下降(P<0.05);降低iNOS活性和iNOSmRNA表达(P<0.05),升高eNOS的活性和eNOSmRNA表达(P<0.05);减少CAM-1和VCAM-1含量(P<0.05,P<0.01)。结论氟可致血管内皮细胞形态改变、功能异常。适宜剂量硒补充可通过提高抗氧化功能,调整NO代谢,抑制粘附分子异常表达等途径拮抗高氟所致的血管内皮损伤。