肾综合征出血热病毒在革螨体内增殖的动态观察

目的：进一步观察革螨体内肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）有否增殖。方法：用直接细胞培养动态观察革螨体内ＨＦＲＳＶ滴度。结果：发现鼠肺ＨＦＲＳＶ抗原阳性和阴性革螨,均在不同子代革螨体内测出ＨＦＲＳＶ滴度（１０＾－１～１０＾－６）;动态观察发现子代革螨病毒滴度较母代革螨高１０＾－３～１０＾－５。用抗Ｍｐ和Ｎｐ结构蛋白单克隆抗体检测发现,随着病毒滴度增加而毒力增强。结论：该研究结果从病毒学和分子生物学上     

肾综合征出血热病毒在恙螨体内生存空间和时间的初步研究

目的：检测肾综合征出血热病毒（HFRSV）在恙螨体内的生存空间与时间。方法：将自然界采集的鼠体恙螨幼虫、小黑板采集的游离恙螨幼虫和饲养孵化出的若虫进行石腊包埋切片，应用IFAT检测。结果：发现HFRSV多分布于恙螨的腹部，前体部分较少，个别恙螨前足和中足亦可检测到。取不同时间饲养的恙螨幼虫和饲养孵化出的若虫进行病毒分离，20、80、100和115天后的若虫均分离到HFRSV。结果：该病毒在恙螨体内存在时间较长，并可经期传递。     

革螨、恙螨体内肾综合征出血热病毒结构蛋白及基因检测

目的：对革螨、恙螨体内ＨＦＲＳ病毒结构蛋白及基因进行检测。方法：采用免疫组化法和套式ＰＣＲ检测。结果：革螨、恙螨体内均可检测到ＨＦＲＳＶ结构蛋白ＭＰ、ＮＰ片段,而恙螨体内ＨＦＲＳＶ随滴度的增高其检出强度亦增加。结论：用分子生物学方法进一步证明革螨、恙螨体内存在ＨＦＲＳＶ。     

革螨、恙螨体内HFRSV结构蛋白基因检测

用免疫组化法和套式ＰＣＲ检测革螨、恙螨体内ＨＦＲＳＶ结构蛋白（ＭＰ、ＮＰ）。结果证明革螨、姜螨体内均可检测到ＨＦＲＳＶ结构蛋白ＭＰ、ＮＰ片段;而恙螨体内ＨＦＲＳＶ随滴度的增高其检出强度亦增加。该结果从分子生物学上进一步证明革螨、恙螨体内ＨＦＲＳＶ的存在。     

亚须纤恙螨作为肾综合征出血热传播媒介初探

目的：探讨亚须纤恙螨作为肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）传播媒介的可能性。方法：调查亚须纤恙螨幼虫的地理分布与滋生地；采集该螨分离ＨＦＲＳ病毒；用ＰＣＲ扩增检测分离ＨＦＲＳＶ－ＲＮＡ。结果：亚须纤恙螨幼虫滋生地和生境符合ＨＦＲＳ疫源地基本特征，主要分布于流行区，为疫区宿主动物体外优势螨种；其幼虫出现高峰季节（１１、１２月份），宿主带螨率为１００％，指数分别为３１４８３和２３９７５；其季节消长与人群ＨＦＲＳ发病基本一致，无宿主特异性，能主动叮刺小白鼠。从鼠肺ＨＦＲＳＶ抗原阳性鼠体所采集的亚须纤恙螨幼虫以及小黑板采集经叮刺吸食已感染ＨＦＲＳＶ小白鼠体液后的游离螨幼虫，分别分离出１株ＨＦＲＳ。结论：该螨能感染ＨＦＲＳＶ，有作为ＨＦＲＳＶ传播媒介的先决条件。     

流行性出血热病毒气溶胶在实验动物中传播的研究

将感染ＥＨＦＶ的动物和未感染ＥＨＦＶ的观察动物在同一室内分别饲养，结果在感染动物检出ＥＨＦＶ抗原后的第１５天，原未感染的动物亦检出ＥＨＦＶ抗原，并分离到ＥＨＦＶ。在实验期间，从实验室内气溶胶中分离到两株ＥＨＦＶ。结果表明ＥＨＦＶ在动物可经气溶胶传播。     

流行性出血热传播途径的研究

使用实验动物对流行性出血热（ＥＨＦ）几个可能的传播途径进行了研究。结果表明５ＩＤ＿（５０）／ｍｌ的ＥＨＦＶ悬液即可通过破损的表皮使实验鼠感染；从ＥＨＦ疫区采集的革螨和恙螨均能自然感染、叮刺传播和经卵传递ＥＨＦＶ；感染ＥＨＦＶ的实验动物排出的ＥＨＦＶ可经气溶胶的形式传播给正常实验动物；ＥＨＦＶ可经破损的消化道粘膜感染实验鼠。这些结果提示：经皮肤伤口传播是鼠间和鼠人间ＥＨＦＶ的主要传播途径；螨媒传播对鼠间ＥＨＦＶ传播和保持疫源地起了重要作用；以气溶胶的形式经呼吸道传播是特定条件下实验动物型ＥＨＦ的主要传播途径；ＥＨＦＶ在一般条件下难以通过消化道使实验鼠感染。这些研究结果为ＥＨＦ的预防提供了重要的科学依据。     

野鼠型肾综合征出血热的流行病学与预防研究

选择１３个点进行调查共捕鼠９种４３８６只,以黑线姬鼠和褐家鼠为优势种,ＨＦＲＳ病毒（ＨＶ）抗原阳性率分别为７．８％和５．４％,共采集健康人血清３４６８份,ＨＶ抗体阳性率为１．４５％。首次证明狗、猪、灰麝鼠句、紫貂是ＨＦＲＳ的宿主动物。对５种传播途径的研究证明：ＨＶ较易通过伤口实现传播,在气溶胶中达到一定剂量时,可通过呼吸道传播;较难经消化道感染;在流行病学和病毒学的基础上,又采用分子生物学方法证明恙螨体内有ＨＶ的存在并有增殖现象,鼠、螨、人所分离的ＨＶ的抗原性一致,又进一步确定恙螨为ＨＦＲＳ的传播媒介。在证明灭鼠可有效控制ＨＦＲＳ流行的基础上,提出了有效控制疫源地的５项指标     

猪感染流行性出血热病毒的流行病学与实验研究

为了解猪在流行性出血热（ＥＨＦ）疫区的流行病学意义，探讨猪的感染与人群发现的关系，采用病原学、血清学和ＰＣＲ技术对猪感染ＥＨＦ病毒（ＥＨＦＶ）进行流行病学调查与研究。结果：猪不仅存在自然感染，而对ＥＨＦＶ感染，随血液行播及多种脏器组织，在体内增殖并随排泄物排出感染性病毒。作者认为猪具有具备作为ＥＨＦ传染源的条件。     

恙螨体内出血热病毒检测增殖及其定位

目的 用分子生物学方法研究小盾纤恙螨的媒介意义。方法 聚合酶锭反应和原位分子杂交法。结果 从恙螨体内检测到肾综合征出血热病毒ＲＮＡ;取恙螨幼虫、若虫定期做肾综合征出血热病毒ＴＣＩＤ５０／ｍｌ滴定,证明恙螨体内肾综合征了血热病毒可传播并有增殖现象;用原位分子杂交技术在恙螨的卵巢细胞、支肠细胞等组织 检测到肾综合征出血热病毒ＲＮＡ。结论 研究结果为恙螨的媒介意义提供了具有分子水平的直接证据。对肾综合征     

流行性出血热病毒在柏氏禽刺螨体内生存空间和时间的初步研究

将感染性柏氏禽刺螨进行冰冻切片,以IFAT检测,结果首次证明革螨的肠组织及生殖器官(卵巢、及子宫孕卵)等部位的细胞内有流行性出血热病毒(EHFV)特异性荧光颗粒,而对照组则阴性。两个感染后的柏氏禽刺螨群体,一个是在第一若螨期感染的,另一个是感染成螨后,挑出其第2代若螨,均在适宜条件下饲养,不仅在饲养15天、25天叮刺乳鼠获阳性结果,而且在158天时将螨洗涤、研磨制成悬液接种乳鼠后,经IFAT检测鼠肺,也均获阳性结果。首次证明此螨群体能维持EHFV158天(约5个月)以上。以上的试验从螨体组织切片上和感染后进行繁殖的螨群体中证明EHFV的存在和维持,都说明此螨确系EHFV的适宜媒介和贮存宿主。     

螨媒传播汉坦病毒的实验研究

目的 研究革螨、恙螨在肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome，HPRS)传播中的媒介作用。方法 采集自然界鼠窝革螨及饲养繁殖的子代革螨和鼠体恙螨幼虫以及从小黑板采集游离恙螨幼虫及饲养孵化的若虫；进行螨细胞培养分别观察螨细胞传播汉坦病毒(Hataan virus，HV)的效能。结果 发现螨细胞培养第15d和第20d可从螨细胞内检测到HV；其中HV检出数和荧光强度在革螨子4代、子3代和恙螨若虫均多于和强于子1代、子2代及恙螨幼虫。经原位RT-PCR检测，HV-RNA在革螨子3代、子4代和恙螨若虫细胞内的阳性颗粒较革螨子1代、2代和恙螨幼虫多且密集。结论 革螨、恙螨对HV的传播有一定的媒介作用，在维持HV的自然循环中起重要作用。     

小盾纤恙螨自然感染、叮刺传播和经卵传递流行性出血热病毒的研究

为查明小盾纤恙螨在传播流行性出血热(EHF)上的媒介意义,我们于1988年10~11月,在陕西EHF疫区捕鼠,取459份鼠肺用IFAT检测EHFV抗原,阳性26份,阳性率为5.7%,并从鼠体采集的小盾纤恙螨分离到EHFV6株。1989年10月,将捕自非疫区的黑线姬鼠28只置放于疫区草地上,所有的鼠均诱集到游离的小盾纤恙螨幼虫,并从鼠分离到EHFV3株。以上结果证明小盾纤恙螨能自然感染和叮刺传播EHFV,并提示有经卵传递EHFV的能力,表明小盾纤恙螨具有作为EHF传播媒介的条件。     

实验动物型流行性出血热传播途径探讨

为观察EHFV气溶胶在动物间的传播情况,将攻毒组和对照组实验动物在同一室内分别饲养,结果:从攻毒组实验动物检出EHFV抗原后第15天,从对照组实验动物中亦检出EHFV抗原,表明两者间有一定的伴随关系。在攻毒组实验动物检出EHFV抗原阳性率高峰期间,从该室内气溶胶中分离出2株EHFV,研究结果证明,EHFV在动物间可经气溶胶传播,这对EHF传播途径的研究有重要的理论意义和实用价值。     

柏禽刺螨叮刺传播和经期、经卵传递流行性出血热病毒的实验研究

首先接种EHFV苏-163株于乳小鼠,再以柏禽刺螨若螨和成螨叮刺此感染性鼠,经10天,15天和25天将这些螨及其子代若螨分别叮刺健康乳鼠,然后以间接免疫荧光技术检测,结果除10天子代组阴性外,其余均获EHF特异性荧光颗粒,而对照乳鼠阴性。与呼肠孤病毒Ⅰ、Ⅱ型抗血清呈阴性,且EHF免疫血清可阻断特异性荧光反应。因此,我们首次证明柏禽刺螨不仅能经叮刺传播,而且能经期传递和经卵传递EHF。病毒在螨体内能生存和繁殖26天以上。
由于柏禽刺螨是家鼠和大、小白鼠寄生革螨的优势种,分布广、数量大、专性吸血、经常侵袭人群,其季节消长与发病季节相符。所以我们认为,此螨在城市型和实验动物型EHF的传播和维持中起重要作用。     

革螨及恙螨体内肾综合征出血热病毒定位的研究

目的 确定紧综合征出血热病毒（HFRSV）在螨体内的定位。方法 用原位RT－PCR技术检测HFRSV在螨体内的分布。结果 HFRSV多见于革螨及恙螨的卵巢卵细胞、中肠及中肠支囊上皮细胞的细胞核周围,呈弥散分布,前体组织细胞少,其他组织细胞未见。革螨子4代、子3代和恙螨若虫阳性颗粒多于革螨子2代、子1代和恙螨幼虫。结论 从分子生物学水平进一步证明革螨及恙螨可作为紧综合征出血热的传播媒介。     

革螨自然感染 叮刺传播和经卵传递流行性出血热病毒的实验研究

1984~1985年,我们经实验研究证明格氏血厉螨和厩真厉螨有EHFV的自然感染,可通过叮刺传播和经卵传递EHFV。这两种螨可作为野鼠型EHF鼠间的传播媒介,并可能兼有储存宿主的作用,对在野鼠间传播EHF和维持疫源地方面起了重要的作用,还可能是鼠-人间EHF传播途径之一。     

流行性出血热疫区鼠、螨带毒调查

1984年11~12月从江苏和安徽两个EHF疫区208个鼠窝中共捕鼠603只。在四种鼠中,以黑线姬鼠为优势种,其EHF抗原阳性率最高。在采集的革螨中,以革氏血厉螨、厩真厉螨为优势种,并有EHFV的自然感染。在每窝鼠数多和窝螨指数高的组的鼠EHF抗原和抗体阳性率均较高。调查结果表明黑线姬鼠是两疫区EHF的重要储存宿主,格氏血厉螨和厩真厉螨可能是EHF的传播媒介。     

革螨与流行性出血热关系的调查研究

为探索EHF的传播途径,我所对革螨与EHF的关系进行了一系列调查研究。结果证明,格氏血厉螨和厩真厉螨是黑线姬鼠(EHF的主要储存宿主)鼠窝中的优势螨种,其季节消长与发病相关,可通过鼠和人的正常皮肤叮刺吸血,有EHFV的自然感染,能通过叮刺在鼠间传播和在螨体内经卵传递EHFV。且与从鼠和螨所分离EHFV的抗原性一致。表明这两种螨可作为野鼠型EHF鼠间的传播媒介,并可能兼有储存宿主的作用。