原位核酸杂交法探讨柯萨奇B组病毒与云南亚急型克山病的关系

用光敏生物素标记的柯萨奇 B_3病毒 cDNA 探针,与云南病区20例经临床和病理检查确诊为亚急型克山病的心肌组织切片进行原位核酸杂交,以检测柯萨奇 B 组病毒 RNA。结果有18例出现阳性杂交信号,阳性率达90%。说明云南亚急型克山病心肌组织中有柯萨奇 B 组病毒 RNA 的存在。提示云南亚急型克山病的发生与柯萨奇 B 组病毒的持续感染密切相关。     

ECHO6型肠道病毒与克山病及病毒性心肌炎的血清学研究

关于克山病病因的研究,60年代就有人提出克山病与某些肠道病毒有关。但对另一型肠道病毒——ECHO_6型病毒与这两种病之间关系的研究国内外尚未见报道。本室1975年从克山病区四川西昌市2例亚急型克山病患儿的血与便中分离出两株病毒,命名为川便_5和川血_1。经电镜证实都是微小核糖核酸肠道病毒,经血清学鉴定,两毒株同属ECHO_6。型。为探讨ECHO_6型肠道病毒与克山病和心肌炎的关系,本研究通过检测克山病病区内克山病人和健康人及非病区健康人和病毒性心肌炎4组人群对两株病毒的血清中和抗体水平,从探讨ECHO_6。型病毒在克山病的发生和流行中所起的作用,阐述其与心肌炎的关系,为克山病的病因研究及心肌炎的预防提供依据。     

长春地区10年间柯萨奇B组病毒感染的流行病学调查分析

由于地方病防治工作的发展，克山病的流行已基本得到控制，柯萨奇B组病毒在克山病研究中的致病机理已有大量报道，柯萨奇B组病毒在人群中广泛流行越来越被研究工作者重视。开展柯萨奇B组病毒的流行病学调查工作，不仅对于病毒性心肌炎的防治，而且对克山病的防治工作都具有深远的现实意义和历史意义。随着分子生物学技术的发展，运用核酸杂交方法从克山病尸检标本中发现有CoxB组病毒的RNA，进一步提示克山病与CoxB组病毒感染有关[１]，那么，非病区的长春地区柯萨奇病毒感染情况怎样呢？多年来我们一直从事柯萨奇B组病毒抗体IgM的检测…     

柯萨奇病毒RNA阳性信号在克山病心肌中形态特征及其与发病的关系

目的：探讨柯萨奇病毒RNA阳性信号在克山病心肌细胞中的特征及病毒感染与发病的关系。方法：以65例不同型别克山病尸检心肌组织蜡块为研究对象，用寡核苷酸探针与组织切片进行原位核酸杂交，以检测柯萨奇B组和A组病毒RNA。结果：急型、亚急型及慢我山病的阳性杂交信号检出率分别为83．0％、87．9％及80．0％。阳性信号在急型、亚急型克山病心肌中颗粒粗大，境界较清晰，但分布比较局限；在慢型克山病中阳性信号多散在分布于各部位心肌细胞内，但颗粒较细小，境界不清。结论：心肌组织蜡块长期保存不影响杂交结果；吉林省各型克山病均与柯萨奇病毒感染密切相关，提示病毒感染是克山病复合病因的重要组成部分。     

用原位核酸杂交法探讨柯萨奇病毒与克山病的关系

为进一步探讨柯萨奇病毒与克山病的关系，采用柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）制备的ｃＤＮＡ探针与黑龙江、山东、云南三省病区克山病尸检心肌组织及胎儿克山病心肌组织的石蜡切片进行了原位核酸杂交，并用脑外伤、ＣＯ中毒等意外死亡健康成人及冠心病、风心病尸检心肌组织和病区、非病区７～８个月引产胎儿心肌组织的石蜡包埋切片作为对照。结果急型克山病８／１３、慢型克山病３４／５０、亚急型克山病２２／２９呈现阳性杂交信号，提示有柯萨奇病毒ＲＮＡ的存在，冠心病２／１５、风心病１／１５、显著低于克山病，而健康成人对照组均为阴性，胎儿克山病一例呈阳性反应，病区引产胎儿心肌组织１０例中有２例也检出柯萨奇病毒ＲＮＡ，而非病区胎心则为阴性。结果提示在一些克山病的发生和发展过程与柯萨奇Ｂ组病毒的感染高度相关。     

克山病心肌的再生与肥大的形态学观察

很多学者对心肌再生和各种心脏疾患的心肌肥大及其机制进行了广泛的研究。克山病的心肌再生与肥大及其在疾病转归中的意义也日益引起人们的重视。但对克山病心肌再生与肥大形态学超微结构研究尚未见报导。本文拟通过对克山病心肌再生与肥大的光学及电镜的定位观察,以探讨克山病心肌再生,肥大的形态学特点及其病理意义,以便进一步加深对克山病心肌病变的修复或转归的认识。     

用原位核酸杂交法探讨柯萨奇B组病毒与黑龙江慢型克山病的关系

克山病是原因未明的地方性心肌病，慢型克山病有关病毒病因的研究未见有关报道，作者用生物素标记的柯萨奇Ｂ３病毒的ｃＤＮＡ探针与黑龙江病区慢型克山病尸检心肌组织及非正常死亡成人心肌组织和非病区７￣８个月引产胎儿心肌组织进行了原位杂交，以检测柯萨奇Ｂ组病毒ＲＮＡ。结果１３例慢型克山病中有９例呈现阳性杂交信号，阳性率达６９．２％，两对照组均为阴性。表明黑龙江慢型克山病心肌组织中有柯萨奇Ｂ组病毒ＲＮＡ的存在，     

克山病病区和非病区猪心酸性磷酸酶和琥珀酸脱氢酶活性的组织化学对比观察

缺硒是克山病发病的一个重要因素但不是唯一原因。在缺硒情况下,一旦遇到另一种诱因,可能引起克山病的发生。克山病病因的研究,从生化、病理、超微结构等方面都作了大量的工作,组化方法的研究也有一定的进展。我们在11例亚急型克山病的尸检中曾发     

用原位核酸杂交法探讨柯萨奇B组病毒与克山病的关系──（黑龙江省急型克山病）

为探讨柯萨奇Ｂ组病毒感染与黑龙江省急型克山病的关系。本文用缺口平移法制备生物标记的柯萨奇Ｂ３病毒的ｃＤＮＡ探针与１３例急型克山病尸检心肌组织及脑外伤、ＣＯ中毒等意外死亡的正常成人心肌组织１０例，非病区７～８个月引产胎儿心肌组织１０例的石腊切片进行原位杂交。结果１３例急型克山病中有８例出现阳性杂交信号，即有柯萨奇Ｂ组病毒的ＲＮＡ存在，阳性率达６１．５％。对照组均为阴性，提示黑龙江省急型克山病有柯萨奇Ｂ组病毒感染，可能是急型克山病发病因素之一。     

柯萨奇B组病毒感染心肌炎患者血清中铜锌钙镁含量的分析

实验研究结果表明,克山病与微量元素Se、Zn、Ca、Mg等有关。近年来用原位核酸杂交和套式聚合酶联反应等技术,从各型克山病心肌标本中均发现有柯萨奇B组病毒或肠道病毒RNA的存在,其阳性率从61.5%到90%。证明很多克山病病人确有肠道感染,特别是柯萨奇B组湿病毒感染在克山病发病中的作用。本实验研究了柯萨奇B组病毒感染心肌炎患者血清中Cu、Zn、Ca、Mg等微量元素含量分析。以资在研究克山病病因及发病机制中参考。现     

用原位核酸杂交技术探讨肠道病毒与急型克山病的关系

目的 探讨肠道病毒(柯萨奇病毒)与吉林省急型克山病的关系。方法 用柯萨奇病毒B3、B4、B5、A9共同序列作寡核苷酸探针对吉林省急型克山病尸捡心肌组织12例及病区与非病区尸捡正常心肌组织各7例进行原位核酸杂交。结果 吉林省急型克山病12例中有11例出现阳性杂交信号，即有肠道病毒RNA存在，阳性率为91．66％，对照组均为阴性。结论 吉林省急型克山病病人心肌组织中有肠道病毒感染，提示急型克山病的发病可能与肠道病毒感染有关。     

“扩张型心肌病”与克山病关系的研究

1984年以来,云南省克山病发病大幅度下降,全省年发病率已降至历史最低水平。但是,近年在克山病病情监测工作中,发现楚雄、大理等地病区有较多的、主要发生于成人的、原因不明的“扩张型心肌病”(以下简称“扩心病”)。其发病特点、临床表现、病理改变等与克山病相似,为了探讨发生在克山病区的“扩心病”与克山病之间的关系,作者于1991～1994年,从流行病学、临床学、病理学及生物化学等方面对“扩心病”与克山病作了较为系统地对比研究,现将结果报道如下。     

克山病与病毒感染关系的实验研究

目的为了探讨克山病与肠道病毒特别与柯萨奇病毒(CVB)的关系.方法①选择用CVB3病毒的cDNA探针,应用原位核酸杂交的方法,检测克山病尸检心肌组织;②采用CVB5病毒VP1壳蛋白的单克隆抗体应用免疫组化法检测克山病尸检心肌组织;③用不同配方的低硒合成饲料喂养小鼠,分别感染CVB2、CVB4m'、CVB3m以及先后感染CVB4和CVB3m的病毒.结果①原位杂交法急型克山病、亚急型克山病、慢型克山病的阳性率分别为61.5%、75.8%和68%;②免疫组化法克山病阳性率分别为89.2%,两种方法阳性检出率均显著高于健康人,高于心肌炎及扩张型心肌病,但无差异;③光镜下低硒病毒组心肌病变位于心肌实质、乳头肌等.为多发性灶状坏死伴少量炎性细胞浸润,补硒组心肌病变为间质炎性细胞浸润,病变程度及检出率、低硒病毒组均重/高于补硒病毒组.结论以上实验结果均支持克山病的发生与肠道病毒,特别CVB病毒的感染高度相关.     

克山病病区的白喉性心肌病

１９８１年晚秋和翌年秋冬，昭通地区绥江县克山病病区发生白喉性心肌病流行。由于发病分布的特点与克山病相同，在临床症状体征和心电方面又有许多相似之处，初曾疑为克山病，后经病原病理确诊。提示尤其是克山病病区散发的白喉性心肌病更应注意鉴别。     

57例小几克山病死亡病例分析

本文报告了大理地区57例小儿克山病死亡病例,其中亚急型克山病46例,慢型克山病11例。由于小儿表述能力差而且克山病的症状和体征易被呼吸道或消化道感染等夹杂症所掩盖,从而延误了诊断和治疗。作者认为早期诊断和治疗亚急型克山病防止转为慢型是降低克山病病死率的重要措施。25例有明显的营养不良,25例有偏食习惯,18例为人工喂养儿,可见调节膳食防止偏食、改善小儿营养状况是预防克山病的重要措施。血清磷酸肌酸激酶(CPK)活性升高与病理上的心肌新旧病变并存是亚急型克山病早期病例的重要特点之一。     

用原位核酸杂交法探讨慢型克山病与柯萨奇B组病毒的关系

为探讨山东慢型克山病与柯萨奇Ｂ组病毒的关系，用缺口平移法制备生物素标记ＣｏｘＢ３病毒的ｃＤＮＡ探针与慢型克山病１４例尸检心肌组织及１０例脑外伤，ＣＯ中毒等意外死亡的正常成人心肌组织及１０例非病区７￣８个月引产胎儿的心肌组织切片进行原位杂交，１４例慢克中有９例检测到柯萨奇Ｂ组病毒的ＫＮＡ，阳性率达６４％，而对照组均为阴性。提示柯萨奇Ｂ组病毒感染可能是山东慢型克山病发病因素之一。     

克山病与病毒性心肌炎患者血清中T_3、T_4的测定——克山病病毒病因的剖析

本文采用放射免疫分析法(RIA)测定克山病和病毒性心肌炎患者血清中三碘甲腺原氨酸(T_3)和甲状腺(T_4)的含量,同时采用免疫酶染色法检测患者血清中柯萨奇B组病毒的特异性抗体IgM,以克山病病区及非病区健康儿童做对照。结果发现:亚急型克山病患儿血清中T_4含量明显增高,而病毒性心肌炎、病区及非病区健康儿童血清T_4含量则无明显改变。克山病与病毒性心肌炎血清中T_3无改变;且两者CoxB组病毒IgM抗体阳性率大致相同,但前者T_4含量明显增高,表明克山病患者血清中T_4增高,与病毒感染无直接关系。     

一例胎儿克山病心肌检出肠道病毒RNA及凋亡细胞的探讨

一例胎儿克山病心肌检出肠道病毒ＲＮＡ及凋亡细胞的探讨周令望钟学宽牛美娟于祖熙既往研究报道母亲因患克山病可在其胎儿心肌上检出病变程度和性质相对应的病理改变，称其为胎儿克山病［１］。为探讨胎儿克山病与肠道病毒感染的关系，我们应用柯萨奇Ｂ３病毒的ｃＤＮＡ探...     

长春地区1992～1996年病毒性心肌炎柯萨奇B组病毒感染情况的调查

近年来用原位核酸杂交和套式聚合酶反应等技术,从各型克山病心肌标本中均发现有柯萨奇B组(CBV)病毒RNA的存在,其阳性率从61.5％到90.0％不等。证明很多克山病病人确有肠道感染,重新提出重视肠道病毒,特别是柯萨奇B组病毒感染在克山病发病中的作用。 作者对克山病非病区——长春地区近年来柯萨奇病毒感染引起的心肌炎给予特别关注。对1992～1996年临床拟诊为急性病毒性心肌炎患者进行了CBV特异性IgM抗体的检验,结果报告如下。     

克山病尸检心肌标本柯萨奇B组病毒RNA片段的序列分析

目的通过原位核酸杂交技术和RT-PCR技术探讨柯萨奇B组病毒感染与吉林亚急型克山病的关系.方法以柯萨奇B组病毒基因组的一段共同序列做寡核苷酸探针,于5′端行生物素标记,检测亚急型克山病患者尸检心肌组织标本中柯萨奇病毒的感染率;选取阳性标本做RT-PCR,并对PCR产物进行核苷酸序列分析,比较其与柯萨奇B组病毒各血清型之间的差异.结果 9例亚急型克山病患者尸检心肌组织标本中有7例原位核酸杂交结果阳性,阳性率为77.78%;所选3例原位核酸杂交结果阳性标本RT-PCR均有长541 bp的DNA条带出现,测序结果表明该片段与柯萨奇病毒B3同区域序列一致,与B1、B4、B5的同源性较大.结论亚急型克山病患者体内有柯萨奇B组病毒RNA存在,柯萨奇病毒可能在克山病的发生发展中扮演重要的角色.