立克次体感染的PCR检测

作者应用ＰＣＲ技术对３０例疑似立克次体感染或不明热患者的血液标本和／或立克次体细胞分离培养物进行立克次体特异性ＤＮＡ检测。用Ｒｒ．１９０．７０ｐ、Ｒ．ｒ．１９０６０２ｎ，Ｒｒ．１７ＫＤ，ｓｔａ５８３种引物对分别进行ＤＮＡ扩增，共检出斑点热群立克次体特异性ＤＮＡ１１份，斑疹伤寒立克次体特异性ＤＮＡ４份，恙虫病立克次体特异性ＤＮＡ４份，其中有１０份血液标本在分离前用Ｒｐ．Ｃ．Ｓ．引物进行ＰＣＲ检测，检出立克次体属ＤＮＡ７份，分离培养后再取分离培养物和阳性血液标本同法用Ｒｒ．１９０．７０ｐ、Ｒ．ｒ．１９０６０２ｎ，Ｒｒ．１７ＫＤ，ｓｔａ５８３种引物对分别进行ＰＣＲ检测，分离前后所得结果一致     

增殖细胞核杭原,雌激素受体及表皮生长因子受体在胆囊肿瘤？…

用ＬＳＡＢ免疫组化方法对３３例胆囊肿瘤作增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）、激素受体（ＥＲ）和表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）检测,结果显示,２５例胆囊癌组织中２０例ＰＣＮＡ阳性（８０％）,腺癌与鳞癌阳性率无显著差异。１５例ＥＲ阳性（６０．０％）,与相应病例ＰＣＮＡ表达等级相关（Ｐ〈０．０１）。７例ＥＧＦＲ阳性（２８．０％）,ＥＧＦＲ阳性病例的ＥＲ表达多阴性。在８例腺瘤组织中,５例局部ＰＣＮＡ有阳性表达,其中     

巢式聚合酶链反应检测脑脊液中单纯疱疹病毒的DNA

应用巢式（ｎｅｓｔｅｄ）聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测患者脑脊液中单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）ＤＮＡ，２５份经鞘内ＩｇＧ抗体确诊的“单纯疱疹病毒性脑炎（ＨＳＥ）”患者的ＣＳＦ标本中２３份ＰＣＲ阳性；１０５份ＩｇＧ阴性的“散发性脑炎”患者ＣＳＦ中１５份ＰＣＲ阳性，其中７份阳性标本为发病１周内所取，２份取于发病当日。提示ＰＣＲ更适于ＨＳＥ的早期诊断。     

海南岛立克次体病血清学和病原学调查

作者从海南岛的东、南、西、北、中五个地区收集一般人群血清５６１份，不明热患者血液标本２０份，应用恙虫病、、斑疹伤寒、斑点热三种立克次体抗原片对血清标本同时进行ｍＩＦＡ测定。发现ＩｇＧ抗体阳性率分别为１３．５５％，１８．７７％，３０．８３％。ＩｇＧ滴度≥１∶８０的血清中，ＩｇＭ抗体也≥１∶８０者，斑疹伤寒为３２．０８％，斑点热为４６．３０％。２０份患者血液标本应用Ｌ９２９细胞进行立克次体分离培养，共分出１２株立克次体。用ｍＩＦＡ和ＰＣＲ初步鉴定出７株斑点热群立克次体。首次从血清学、病原学、遗传学上证实海南岛斑点热群立克次体病的存在。     

SIV模型猴石蜡包埋淋巴结组织DNA的提取及病毒基因检查

从取材于３只ＳＩＶ感染治疗猴和４只ＳＩＶ艾滋病模型猴治疗前后的１１份石蜡包埋淋巴结活检组织中提成基因组ＤＮＡ，分别用ＰＣＲ和巢式ＰＣＲ方法检测ＳＩＶ病毒基因，ＰＣＲ共检出１０份阳性，巢式ＰＣＲ检测１１价样品均阳性，而同期采样的猴外周血标本病毒分离仅３份阳性，ＰＣＲ扩增产物的特异性用限制性内切酶酶切反应得到证实。实验说明，从淋巴结组织中检测ＳＩＶ的病毒基因较外周血病毒分离更能真实地反映病毒感染状况，本研究将对全面和正确评价艾滋病药吻和疫苗治疗效果提供帮助。     

幽门螺杆菌感染对胃粘膜上皮细胞增殖的影响

用免疫组织化学染色方法，对３０例幽门螺杆菌（Ｈｐ）相关慢性胃炎和１５例Ｈｐ阴性胃粘膜基本正常胃占膜中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）标记指数（ＬＩ％）和表皮生长因子受体（ＥＧＦ－Ｒ）的表达进行了检测，结果表明：Ｈｐ阳性患ＰＣＮＡＬＩ％为１３．９４±１．６４，Ｈｐ阴性对照组为７．７１±０．９２，有显差别（Ｐ〈０．００１）。ＥＧＦ－Ｒ表达与ＰＣＮＡ呈正相关（ｒ＝０．４４８７，Ｐ〈０．０１），ＰＣＮＡＬＩ     

应用PCR检测恶性淋巴瘤骨髓浸润及其临床意义

目的：检测恶性淋巴瘤（ＭＬ）的骨髓浸润（ＩＢＭ）并探讨其与临床分期、疗效和预后的关系。方法：以克隆性ＩｇＨ和ＴＣＲγ基因重排分别作为Ｂ和Ｔ细胞淋巴瘤克隆基因标志，应用ＰＣＲ基因扩增技术检测ＭＬ患者ＩＢＭ。结果：（１）３４份ＭＬ患者骨髓标本ＩＢＭ检出率为７０．６％（２４／３４），明显高于形态学检测方法（３８．６％，Ｐ＜０．０５）。（２）１９例形态学检测正常的非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）骨髓标本，ＩＢＭ阳性率５７．９％（１１／１９），其中８例Ｂ－ＮＨＬ（８／１４）检测到克隆性ＩｇＨ基因重排；５例同时还检测到克隆性ＴＣＲγ基因重排，２例Ｔ－ＮＨＬ（２／３）检测到克隆性ＴＣＲγ基因重排，无克隆性ＩｇＨ基因重排；２例免疫分型不明确ＮＨＬ患老中１例（１／２）检测到克隆性ＩｇＨ基因重排，无克隆性ＴＣＲ，基因重排。２例霍奇金病（ＨＤ）和１０例非淋巴系肿瘤骨髓ＩＢＭ均阴性。（３）Ⅲ，Ⅳ期ＮＨＬ患者ＩＢＭ检出率显著高于ＩＩ期（ｐ＜０．０１），初诊未治及复发患者也显著高于部分或完全缓解患者（Ｐ＜０．０１）。（４）ＩＢＭ阳性组ＮＨＬ２年死亡率５４．５％（６／１１），明显高于ＩＢＭ阴性（ｐ＜０．０５）。结论：ＰＣＲ方法检测ＩＢＭ有助于估     

ELISA检测HBsAg中阴性对照吸光值的探讨

为了探讨酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阴性对照吸光值（Ｎ）小于０．０５时，以０．０５作Ｎ值对实验结果的影响，用实际阴性对照吸光值（Ｎ实）和０．０５分别计算阳性对照吸光值（Ｐ）与Ｎ的比值（Ｐ／Ｎ），并用放射免疫法（ＲＩＡ）和聚合酶链法（ＰＣＲ）作进一步检测。结果：ＥＬＩＳＡ所测３３例标本中，Ｐ／０．０５小于２．１的标本１８例，Ｐ／Ｎ实小于２．１的８例，ＲＩＡ检测上述Ｐ／０．０５小于２．１的１８例标本中，５例阳性，ＰＣＲ检测的ＨＢＶＤＮＡ７例阳性。结论：ＥＬＩＳＡ检测ＨＢｓＡｇ，当Ｎ小于０．０５时，以０．０５计算Ｐ／Ｎ值，可导致结果的假阴性     

两种检测抗双链DNA抗体方法的比较

目的 比较斑点免疫金胶体渗滤法（ＤＩＧＦＡ）和间接免疫荧光法（ＩＩＦ）检测抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体。方法 采集内科仍和住院患者血标本２１００份,其中同期住院的系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）１１８例１５５份标本、类风湿关节炎（ＲＡ）４４例４４份标本。同时检测ＡＮＡ（ＩＩＦ法）、抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体（ＩＩＦ法和ＤＩＧＦＡ法）。结果 ２１００份标本、住院ＳＬＥ和ＲＡ患者ＤＩＧＦＡ法检测抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体的检出率均显著     

应用聚合酶链反应快速诊断巨细胞病毒感染

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测学龄前儿童尿标本中的巨细胞病毒（ＨＣＭＶ），并和常规细胞培养（ＣＣＣ）、早期抗原检测（ＤＥＡ）两法进行了比较。结果表明，１０５份尿标本中有４１份ＣＣＣ出现ＨＣＭＶ特征性细胞病变（ＣＰＥ），其中３８份标本ＰＣＲ检测为阳性，敏感性为９２．７％；其余６４份ＣＣＣ阴性，有６份ＰＣＲ检测阳性，特异性为９０．６％。与ＤＥＡ相比，ＰＣＲ检测的特异性和敏感性分别为９３．６％，９５．２％；提示ＰＣＲ检测临床标本中ＨＣＭＶ，不仅敏感特异，而且与ＣＣＣ，ＤＥＡ两法相比快速简便。     

海南省680例不明原因发热患者恙虫病东方体感染调查

目的 了解海南省不明原因发热患者的恙虫病东方体检感染情况,为不明原因发热患者恙虫病防治提供指导。方法 收集2018—2021年海南医学院第一附属医院、海南医学院第二附属医院、海口市人民医院和琼中黎族苗族自治县人民医院临床诊断为不明原因发热患者血液样本,利用胶体金免疫层析法和PCR方法分别对样本进行恙虫病东方体特异性IgM、IgG抗体和恙虫病东方体56kD型特异性抗原基因检测,同时收集样本的临床及流行病学信息,并进行流行病学分析。结果 共收集临床不明原因发热患者血样680份,恙虫病东方体IgM、IgG抗体和56kD型特异性抗原PCR阳性率分别为23.97%(163/680)、36.62%(249/680)和20.88%(142/680),焦痂或皮疹率为12.06%(82/680)。根据诊断标准,最终诊断为恙虫病的患者为223例,其中男性111例（49.78%）,女性109例（48.88%）,平均年龄（53.14±15.12）岁,其中40～<60岁98例（占43.95%）,感染人群民族中汉族136例（占60.99%）,农民93例（41.70%）,秋季发病114例（51.12%）。临床...     

恙虫病合并慢性血吸虫病发病特点及恙虫病的分型

目的了解恙虫病合并血吸虫病的发病特点以及恙虫病的分型情况。方法收集病例资料并对其进行分析,采用外斐反应和间接免疫荧光方法（IFA）检测患者血清中的恙虫病东方体（Ot）IgG抗体,用巢式PCR法扩增患者血液中的Ot 56kD蛋白基因,并进行核酸序列测定和分析。结果患者有血吸虫肝改变、肝功能受损、脾肿大、焦痂。外斐氏反应检测OXk 1：40,IFA检测Ot IgG抗体Kato型1：160、Karp型1：40,PCR检测Ot 56kD蛋白基因片断阳性,其序列分析结果与PG9、P25、CM438等一些泰国Ot株同源性最高（98%）,与Ot Karp、Gilliam、Kawasaki、TA678、Kato株同源性均在95%以下。结论证实了该患者为恙虫病合并慢性血吸虫病,其Ot血清型可能为Kato＋Karp,遗传进化关系与一些泰国Ot株关系较为密切。     

105例恙虫病疑似患者巢式PCR检测结果分析

目的对泰州市靖江105例恙虫病疑似患者全血进行恙虫病东方体(Ot)检测,分析该地区恙虫病感染情况,为恙虫病预防控制提供科学依据。方法采集靖江市2013年10~11月的105例恙虫病疑似患者全血样品进行巢式PCR检测,并进行个案调查,记录结果,用描述性分析方法对检测结果及个案资料进行分析。结果 105例疑似患者中62例检出恙虫病东方体核酸阳性(阳性率59.0%)。发病人群年龄以50~80岁为主,占69.4%,实验室诊断病例中农民占82.3%,男女性别之比1:1.7。结论靖江市恙虫病发病率较高,应针对流行特征采取综合防制措施。     

海南省琼中黎族苗族自治县2019年恙虫病东方体分子流行病学及遗传进化分析

目的 通过分析海南省琼中黎族苗族自治县（简称“琼中”）98例不明原因发热患者的恙虫病流行特点,了解该地区恙虫病东方体菌株流行的情况,为该地区制定恙虫病防治策略和控制措施提供科学依据。方法 收集2019年 1月1日至2019年12月31日琼中黎族苗族自治县人民医院诊断为疑似恙虫病和不明原因发热患者血液样本,利用胶体金免疫层析法和巢式PCR方法对样本进行恙虫病东方体特异性IgM、IgG抗体和恙虫病东方体56kD型特异性抗原基因检测,同时使用预先设计的样本信息表收集患者的临床表现及流行病学信息。针对巢式PCR检测结果为阳性的样本,进行克隆及Sanger测序。对获得的患者临床信息及检测结果进行流行病学分析,将测序得到的序列进行基因遗传进化分析。结果 98例样本中,恙虫病IgM抗体阳性率为24.49%（24/98）,恙虫病IgG抗体阳性率为46.94%（46/98）,恙虫病PCR阳性率26.53%（26/98）,焦痂或皮疹13.27%（13/98）。根据诊断标准,最终诊断为恙虫病的患者为33例。感染人群主要以31~50岁的青壮年为主,职业主要为农民。该地区恙虫病的流行以营根镇、长征镇和红毛镇为主并涉及9个乡镇。流行时间有明细的季节性,以7月和11月为主要高发期。流行的基因型主要为Karp型和Gilliam型。结论 琼中为恙虫病的自然疫源地,该地区流行的恙虫病东方体基因型主要为Karp和Gilliam型,具有基因多态性。     

Molecular epidemic survey on co-prevalence of scrub typhus and marine typhus in Yuxi city, Yunnan province of China

Background Human rickettsioses are worldwide zoonoses and it is not easy to differentiate them from other infectious diseases because of their atypical manifestation. In recent years the number of patients with fever of unknown causes from Hongta District CDC, Yuxi city of Yunnan Province has been increasing significantly in the summer. Diagnosis of scrub typhus was made by local clinicians. In order to ascertain the disease, we undertook a laboratory investigation for such patients from August 18 to 26, 2005.Methods Active surveillance was conducted by Hongta District CDC Yuxi city of Yunnan Province from 2002 to 2004 and basic data were obtained from cases confirmed according to clinical definitions. Average incidences and town-level incidences were calculated during the study periods. Blood samples were analyzed by PCR and serological test. Based on the groEL gene sequences a paired general outer primers (Gro-1 and Gro-2) targeting typhus, spotted fever as well as scrub typhus and two paired inner primers (SF1, SR2 and TF1, TR2) for typhus together with spotted fever and scrub typhus, respectively, were designed to perform a multiplex-nested PCR. Serological assay was carried out by indirect immunofluorescence assay with 7 different rickettsial antigens, i.e., R.mossori, R.sibirica, R.conorii, O.tsutsugamushi, B.quintana, B.henselae and Coxilella burnetii phase II Ag.Results Epidemiological surveillance showed that from 2002 to 2004, the average incidences of the scrub typhus or scrub typhus with murine typhus were 222.1/10(5), 204.3/10(5) and 109.6/10(5), respectively. Of 13 blood samples taken during acute stage of illness, 6 showed the amplified products for scrub typhus and the sequenced products showed 100%, 99%, 99%, 99%, 99%, 99% similarity to O.tsutsugamushi Karp but they shared the same deduced amino acid sequences, which indicated 100% identity with the heat shock protein of the O.tsutsugamushi Karp strain. Five yielded PCR products for murine typhus and their corresponding nucleotide sequences exhibited 100%, 100%, 99%, 99% and 99% similarity to R. mossori Wilmington and the analyses of predicted amino acid sequences indicated 100%, 100%, 98%, 98% and 98% identity with the heat shock protein of R. mossori Wilmington strain. Of the 8 PCR positive patients, 3 showed a co-infection of scrub typhus with murine typhus. All the 13 serum samples from febrile patients were positive against O. tsutsugamushi and 8 of them were positive against R. mossori. All of the 8 paired specimens had four-fold elevation of antibody against O. tsutsugamushi, and seroconversion for typhus was demonstrated in 3 paired serum samples. Another finding in the study was that a high seropositive prevalence (76.9%) of Q fever was detected.Conclusion It’s confirmed that co-prevalence of scrub typhus with murine typhus are occurring in Yuxi city of Yunnan province, China. Other rickettsial diseases also need to be investigated in these areas.     

2012～2013年广州市人感染恙虫病东方体基因型分析

目的了解广州市人感染恙虫病东方体基因型的分布及特点。方法收集2012~2013年广州市恙虫病临床诊断病人全血,测定型特异性抗原基因部分序列,并进行基因序列同源性及系统进化分析。结果 133份标本中检测到40份阳性,其中Karp型21株,Kato型10株,Gilliam型5株,TA763型3株,未知型别1株。同源性分析显示其传播来源可能与台湾、日本、泰国等有关。结论广州市恙虫病东方体流行型别具多样性,来源复杂,开展更多分子流行病学研究将有助于其防控。     

Scrub typhus in north Queensland.

Scrub typhus was once common in north Queensland, but no reports from this region have been published for nearly 30 years, and the focus has turned to cases from the Northern Territory and Western Australia. In 1996, diagnosis of scrub typhus in a Queensland soldier led to recognition of an earlier outbreak with up to 17 cases. Another outbreak occurred a year later with 11 confirmed cases. All cases were in soldiers who had visited a training area near Innisfail. Review of other laboratory diagnoses of scrub typhus shows it is still prevalent in north Queensland, with several "hot spots".     

恙虫病70例临床表现及影像分析

目的 探讨恙虫病心肺、头颅影像表现与临床表现相关性.方法 对近期70例确诊为恙虫病患者进行临床及影像表现进行回顾性分析.结果 患者临床主要表现为发热、抽搐、皮肤焦痂和溃疡、皮疹、全身酸痛或浅表淋巴结肿大、头痛、心悸,但小儿与成年人表现有一定差异.其中做胸部平片30例,异常24例.头颅CT平扫7例,2例异常.经治疗后69...     

小儿恙虫病的皮损与临床-附26例报告

皮肤焦痂及皮疹是恙虫病的重要临床特征之一，对本病的早期诊断与鉴别诊断有一定意义。本文对２６例小儿恙虫病进行了临床分析，结果：入院时有焦痂者１１例（４２．３％），出现过皮疹者１０例（３８．５％），双下肢有出血点３例（１１．５％），误诊１４例。同时提示焦痂与皮疹的发生率较低可能与部份患者求诊时间较晚及焦痂多位于身体隐蔽部位而易漏诊、误诊有关。氯霉素对本病有特效。     

恙虫病的影像表现价值分析

目的探讨恙虫病的影像学资料,评价其诊断价值。方法回顾性分析124例恙虫病的临床及影像学表现。结果符合诊断标准的男72例,女52例,年龄18~65岁(平均32岁),多有野外作业史。常见症状为高热、皮肤焦痂和溃疡、皮疹及淋巴结肿大。实验室检查外菲氏试验阳性,血细胞减少等。影像学表现:胸部异常36%,以肺门阴影增大,肺纹理增多、小斑点状模糊影为常见,少数可有含液面空洞,胸腔积液及脑出血。结论恙虫病诊断主要依靠临床、实验室及流行病学检查,影像诊断为非特异性的,但在判断并发症和辅助诊断上必不可少。