Ⅳ型胶原分子结构的研究与Alport综合征

Alport综合征(Alport syndrome，AS)为Ⅳ型胶原α链的基因突变导致的基膜损伤，临床表现为血尿、肾功能进行性减退的遗传性肾炎，常伴有感音神经性耳聋和眼部异常[1，2]。Ⅳ型胶原是哺乳动物基膜的主要成分，在肾小球基膜(glomerular basement membrane，GBM)中含量丰富。Ⅳ型胶原分子由内     

Alport综合征Ⅳ型胶原分布特点及其与临床表型的联系

目的：分析总结我国Alport综合征(AS)患者的临床表现特点，探讨Ⅳ型胶原α链分布特点与遗传方式及临床表型之间的联系。方法：收集87例临床病理诊断为AS患者的临床资料。采用特异性Ⅳ型胶原α3和α5链NCl区域的单克隆抗体，对这些患者肾组织及皮肤进行Ⅳ型胶原α链间接免疫荧光染色。结果：①该组患者以镜下血尿合并蛋白尿为最常见首发症状。57．7％的患者存在听力异常，24．3％的患者存在眼部异常。②根据Ⅳ型胶原α链免疫荧光结果进行分析，有55例遗传方式为X-性连锁显性遗传(XLAS)，发生率63．2％；8例为常染色体隐性遗传(ARAS)，发生率9．2％。其余24例患者(27．6％)尚不能根据Ⅳ型胶原α3、α5链的缺失来判断其遗传方式。③XLAS组患者临床表型较ARAS组患者为重，且XLAS组患者男性病情重于女性。④典型XLAS组患者其疾病严重程度及临床预后均重于非典型XLAS组患者。结论：①我国AS遗传方式表现为XLAS者为63．2％，ARAS者为9．2％。有27．6％临床病理诊断为AS患者其Ⅳ型胶原α链分布正常。XLAS不同性别患者以及Ⅺ赴和ARAS患者间在临床表现和预后上存在明显差异。②AS肾组织Ⅳ型胶原α链的分布方式及表达程度不仅能帮助确定遗传方式，而且能为临床判断患者病情程度、预后和进一步研究其基因突变位点，进行基因诊断和治疗提供线索。③Ⅳ型胶原α链免疫荧光染色是确诊AS的重要指标。     

Ⅳ型胶原分子结构的研究与A1port综合征

Alport综合征(Alport syndrome,AS)为Ⅳ型胶原α链的基因突变导致的基膜损伤,临床表现为血尿、肾功能进行性减退的遗传性肾炎,常伴有感音神经性耳聋和眼部异常t [1,2].Ⅳ型胶原是哺乳动物基膜的主要成分,在肾小球基膜(glomerular basementmembrane,GBM)中含量丰富.Ⅳ型胶原分子由内皮细胞和上皮细胞分泌至细胞外后,自我结合形成多边形Ⅳ型胶原网,再与层粘连蛋白网、巢蛋白、蛋白聚糖及其他糖蛋白分子一起构成基膜.     

Ⅳ型胶原α3,α5链免疫组化检测在遗传性肾炎诊断中 …

目的：分析肾组织Ⅳ型胶原α３、α５链的免疫荧光染色在Ａｌｐｏｒｔ综合征（ＡＳ）诊断中的意义。方法：采用特异笥抗Ⅳ型胶原α３和α５链ＣＮ区域的单克隆抗体,对４例正常人及４３例临床颖诊为遗传性肾炎患者的肾脏组织进行了间接免疫荧光染色。结果：抗α３和α５链的抗体我染色在１０例患者的肾组织中分布异常,并呈现三种类型在这种１０例患者中,根据α３和α５链在肾组织中异常分布的特点,对其遗传方式进行分析发现其中７     

Alport综合征一个家系基因分析研究

目的研究Alport综合征(AS)致病基因COL4A5突变情况。方法收集并抽提2005年上海地区AS患者及其所有家庭成员29例的基因组DNA,并根据致病基因设计相关引物,分别检测患者和100个正常人血液DNA以及患者皮肤的cDNA碱基序列。结果发现AS基因组DNA的COL4A5基因c.609+5G>A高度保守区存在5G>A突变,而100个正常人均无该突变,该位点尚未见文献报道;同时发现患者COL4A5基因mRNA不能正常翻译。而COL4A5基因已报道的位点,并未在本家系中发现。结论 AS患者c.609+5G高度保守存在5G>A突变,证实该变异可能使COL4A5基因剪接发生错误而导致基因mRNA不能正常翻译。     

Ⅳ型胶原α链异常与Alport综合征及薄基膜肾病

Ａｌｐｏｒｔ综合征 (ＡｌｐｏｒｔＳｙｎｄｒｏｍｅ ,ＡＳ)和薄基膜肾病 (ＴｈｉｎＢａｓｅｍｅｎｔＭｅｍｂｒａｎｅＮｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ ,ＴＢＭＮ)系两种遗传性疾病 ,且都与基膜 (ＢａｓｅｍｅｎｔＭｅｍｂｒａｎｅ ,ＢＭ )病变有关 ,临床并非少见。ＡＳ主要表现为持续性镜下血尿或肉眼血尿或进行性肾功能恶化 ;可伴有肾外病变如神经性耳聋、前房晶体病变等。典型电镜改变为肾小球基膜 (ＧＢＭ)弥漫性厚薄不均 ,局部有分层、断裂现象。ＴＢＭＮ以往又称为良性家族性血尿 (ＢｅｎｉｇｎＦａｍｉｌｉａｒＨｅｍａｔｕｒｉａ ,ＢＦＨ)。…     

中国Alport综合征表型和基因型特征

目的：分析并探讨我国Alport综合征（AS）患者临床表型和基因型特征。方法：以50例确诊为AS的患者（男32例,女18例;年龄1-30岁,平均10岁）及部分家系成员的主要临床表现、肾功能检查结果、家系调查情况、肾活检、以及肾和皮肤活检组织的基膜α（Ⅳ）链的表达作为临床表型分析素材。应用PCR-SSCP和PCR、直接DNA测序的方法筛查、分析基因突变。结果：本组病例显示AS患者几乎均表现有血尿（96%）,多数（84%）血尿为肾小球性;伴有蛋白尿或肾病水平蛋白尿的患者分别为82%和22%。检测到感音神经性耳聋和眼部病变的患者较国外报道相对低（31%和16%vs50%和15%-30%）。多数AS（82%）属于青少年型。94%的皮肤活检α5（Ⅳ）链染色支持X连锁型AS诊断。COL4A5基因分析显示以基因小突变为主;1例AS患儿基因为太缺失,而且缺失涉及COL4A5和OL4A6两个基因,但不伴弥漫性平滑肌瘤。结论：认识我国AS临床表型和基因型特征有助于今后提高并纠正我们对AS认识、诊断乃至治疗水平。     

免疫组化检测Alport患者基底膜Ⅳ型胶原α链分布

为了观察Ⅳ型胶原各链在Ａｌｐｏｒｔ综合征（ＡＳ）患者基底膜上分布，初步探讨ＡＳ的发病机制，评估间接免疫荧光法检测Ⅳ型胶原对ＡＳ的诊断价值，采用针对Ⅳ型胶原α１、３、４、５链ＮＣ１片段的特异性单克隆抗体，利用间接免疫荧光技术对Ⅳ型胶原在８例Ａｌｐｏｒｔ患者的肾（６例）及皮肤（５例）基底膜上的分布进行了检测。结果显示：４例Ｘ伴性显性（ＸＤ）遗传男性Ａｌｐｏｒｔ患者肾小球基底膜上有α３、４、５（Ⅳ）链共同缺失，表皮基底膜上α５（Ⅳ）链间接免疫荧光亦为阴性，而３例常染色体显性及１例常染色体隐性遗传的Ａｌｐｏｒｔ患者间接免疫荧光均为阳性，与正常结果相同。提示ＡＳ存在Ⅳ型胶原生化组成异常，ＸＤ－ＡＳ的发病与Ⅳ型胶原α５链的生成异常有关；皮肤及肾组织Ⅳ型胶原α链间接免疫荧光检测对ＸＤ－ＡＳ具重要诊断意义。     

Alport综合征基膜Ⅳ型胶原α链表达异常的临床意义

目的：了解基膜Ⅳ型胶原α链在不同遗传类型Alport综合征（AS）薄基膜肾病、家族性IgA肾病中分布特点,探讨其与上述疾病的关联和临床意义。方法：运用针对Ⅳ型胶原不同α链单抗,采用间接免疫荧光法（iIF）检测皮肤和肾组织基膜Ⅳ型胶原α1、3、5链分布。结果：8例男性X伴性显性AS（XD－AS）患者α5（Ⅳ）链在皮肤和（或）肾组织基膜上IF为阴性,肾组织α3（Ⅳ）链IF变呈阴性。4例女性XD－AS患者表皮基膜上α5（Ⅳ）链IF呈不连续沉积。4例XD－AS女性、1例常染色体隐性遗传AS和所有常染色体显性遗传AS、薄基膜病、IgA肾病患者肾组织和皮肤IF均为阳性,与正常对照相同。XD－AS患者中,皮肤α5（Ⅳ）链表达程度赵低,发病年龄和出现肾衰的时间越早,听力累及频率范围越广,表现前锥形晶体越多。结论：不同遗传方式的ASⅣ型胶原α链表达异常存在显著差异,不同组织Ⅳ型胶原α链检测对AS诊断、鉴别诊断和遗传方式判断具有重要意义,α5（Ⅳ）链表达缺失的程度与疾病严重程度相关。     

从相关基因突变再看Alport综合征和薄基膜肾病

Alport综合征(Alport syndrome,AS)和薄基膜肾病(thin basement membrane nephropathy,TBMN)是两种均表现为慢性血尿的遗传性肾小球基膜(glomeru-lar basement membrane,GBM)疾病,人们对前者的认识较后者早约40年[1～3].     

Alport综合征基膜Ⅳ型胶原α链表达异常的临床意义

目的了解基膜Ⅳ型胶原α链在不同遗传类型Alport综合征(AS)、薄基膜肾病、家族性IgA肾病中分布特点,探讨其与上述疾病的关联和临床意义.方法运用针对Ⅳ型胶原不同α链单抗,采用间接免疫荧光法(iIF)检测皮肤和肾组织基膜Ⅳ型胶原α1、3、5链分布.结果8例男性X伴性显性AS(XD-AS)患者α5(Ⅳ)链在皮肤和(或)肾组织基膜上IF为阴性,肾组织α3(Ⅳ)链IF亦呈阴性.4例女性XD-AS患者表皮基膜上α5(Ⅳ)链IF呈不连续沉积.4例XD-AS女性、1例常染色体隐性遗传AS和所有常染色体显性遗传AS、薄基膜病、IgA肾病患者肾组织和皮肤IF均为阳性,与正常对照相同.XD-AS患者中,皮肤α5(Ⅳ)链表达程度越低,发病年龄和出现肾衰的时间越早,听力累及频率范围越广,表现前锥形晶体越多.结论不同遗传方式的ASⅣ型胶原α链表达异常存在显著差异,不同组织Ⅳ型胶原α链检测对AS诊断、鉴别诊断和遗传方式判断具有重要意义,α5(Ⅳ)链表达缺失的程度与疾病严重程度相关.     

病毒性肝炎血清透明质酸和Ⅳ型胶原检测与病理的关系

肝纤维化是各种细胞外基质成分(ECM)在肝内异常增生和过渡沉积的结果,主要由肝活检而确诊,但肝活检难以进行动态观察。透明质酸(HA)和Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)是血清ECM的重要成分,本文通过对95例各型病毒性肝炎患者血清HA和C-Ⅳ的测定(其中31例作肝脏活检),来探讨HA、C-Ⅳ在病毒性肝炎中的意义及其与病理的关系。 1 材料与方法 1.1 对象 全部病例均为1996～1997年的住院患者,共95例,男性81例,女性14例,年龄42.5±28岁。根据1995年全国传染病寄生虫病学术会议(北京)修订的诊断标准,急性     

狼疮性肾炎患者40例临床病理分析

目的 探讨狼疮性肾炎(LN)的病理类型与临床及实验室检查的关系.方法 对40例狼疮性肾炎患者进行肾活检(其中9例重复肾活检)及病理分型,分析各病理类型的临床特点、实验室检查特点、临床活动性及肾脏病理活动性.结果 所有患者均有病理学异常,Ⅳ型最多见(占42.5%),Ⅳ型LN高血压、肾功能不全及血液系统损害发生率高,血清补体C3下降明显;临床活动性及肾脏病理活动性明显;Ⅳ型、Ⅴ型LN肾病综合征发生率高.结论 狼疮性肾炎的病理类型与临床表现、实验室检查有一定联系;根据狼疮性肾炎的临床表现、实验室检查可以大致推测其病理类型,估计肾损害的严重程度;恰当地治疗可以缓解病情,改善预后.     

Goodpasture综合征和Alport综合征的分子基础--Ⅳ型胶原家族

肾小球基膜（GBM）是肾脏滤过屏障的重要组成成分，既往研究发现，Alport综合征（AS）、Goodpasture（GP）综合征和糖尿病肾病等肾脏疾病存在GBM异常。为此，人们对GBM的化学及生物特性进行了大量研究，以探讨这些疾病的发病机制。     

16例Gilbert综合征患者的临床、病理特征和基因分析

目的 总结Gilbert综合征的临床和病理特征.方法 对16例有肝活组织检查的Gilbert综合征患者的临床病理资料进行总结,并对其中2例进行基因检测. 结果 16例Gilbert综合征患者中,男13例,女3例,年龄14～40岁.间断黄疸、非结合性胆红素升高.肝活组织检查中央静脉周围肝细胞内可见脂褐素沉积.2例患者的基因分析,致病基因为第1外显子突变(Gly71Arg),为显性遗传. 结论 Gilbert综合征发病以青少年多见,并有间断出现非结合性胆红素升高.肝组织病理学检查有助于排除其他与非结合性胆红素升高有关的肝脏疾病的诊断.开展相关的基因检测有助于总结我国Gilbert综合征的遗传基因特点.     

高尿酸血症与IgA肾病临床病理的相关性分析

目的 探讨高尿酸血症与IgA肾病临床病理的相关性.方法 选取2007年1月至2010年12月在吉林大学第一医院肾内科肾活检确诊为IgA肾病患者148例,根据血尿酸水平分为血尿酸正常组(107例)和血尿酸增高组(41例),并对两组年龄、性别、高血压、病程、体重指数、生化指标及病理情况进行比较.结果 二组患者间性别、年龄等差异均无统计学意义(P>0.05).血尿酸增高组患者高血乐发病率、病程(月)、体重指数(kg/m2)、血尿素氮(mmol/L)、肌酐(μmol/L)、TG (mmol/L)及24 h尿蛋白定量(mg/24 h)分别为63.4%、18.90 ±10.12、22.81±3.60、8.93±4.28、155.96±107.72、2.11±1.06和4328.16±1434.25,而血尿酸止常组分别为38.3%、9.46±3.91、15.32±2.54、5.21±2.18、79.52±40.01、1.86±1.20和2885.10±1388.15,两组患者差异均有统计学意义(P值均<0.05).Lee's分级血尿酸增高组I+Ⅱ级占12.2%、IV+V级占39.0%,而血尿酸正常组I+Ⅱ级占25.2%、IV+V级占16.9%,两组患者差异均有统计学意义(P值均<0.05).肾小管间质损害(TIL)分级血尿酸增高组以Ⅲ十Ⅳ级多见,占68.3%,而血尿酸正常组以Ⅱ级多见,占76.6%.肾小动脉病变分级血尿酸增高组以Ⅱ+Ⅲ级多见,占73.2%,而血尿酸止常组以0+I级多见,占69.2%.结论 IgA肾病患者血尿酸水平与24 h尿蛋白定量、血压、肾功能损害相关,血尿酸升高者Lee's分级、TIL分级及肾小动脉病变分级较差.

Abstract：

objective To analyze the correlation between the level of serum uric acid and the clinical and pathological features of IgA nephropathy.Methods Totally 148 patients diagnosed as IgA nephropathy by renal biopsy in our hospital from January 2007 to December 2010 were divided into hyperuricaemic group(41 cases)and non-hyperuricaemic group(107 cases)according to the level of serum uric acid.The clinical parameters and renal pathology grade were compared.Results There were significant differences between hyperuricaemic group and non-hyperuricaemic group in the incidences of hypertension(63.4%vs 38.3%),disease duration[(18.90±10.12)months vs(9.46±3.91)months]and body mass index[(22.81±3.60)kg/m2vs(15.32±2.54)kg/m2](all P<0.05),while no differences in age and sex(both P>0.05).The blood urea nitrogen(BUN)[(8.93±4.28)mmol/L vs (5.21±2.18)mmol/L],creatinine(Cr)[(155.96±107.72)μmol/L vs(79.52±40.01)μmol/L],serum triglycerides[(2.11±1.06)mmoVL vs(1.86±1.20)mmol/L]and 24-hour urine protein amount [(4328.16±1434.25)mg/24 h vs(2885.10±1388.15)mg/24 h]were significantly different between the two groups(all P<0.05).The percentage of Lee's grade I+Ⅱin hyperuricaemic group was 12.2%,and IV+V grade was 39.0%,while percentage of Lee's grade I+Ⅱin non-hyperuricaemic group was 25.2%,and IV+V grade was 16.9%(P<0.05).Tubulointerstitial lesions(TIL)gradeⅢ+IV was more in hyperuricaemic group,which was 68.3%,while TIL grade II was more in non-hyperuricaemic group,which was 76.6%.Renal artery damage grade II+Ⅲ was more in hyperuricaemic group.which was 73.2%,while renal artery damage grade 0+1 was more in non-hyperuricaemic group,which was 69.2%.Conclusion The level of serum uric acid was related with 24-hour urine protein amount,blood pressure and kidney function in IgA nephropathy,and Lee's grade,TIL grade and renal artery damage grade were severe in hyperuricaemic group.     

遗传性非息肉病性结直肠癌家系及临床病理特征分析

目的 分析比较不同遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)临床诊断标准和指导纲要所筛选家系的临床病理特征。方法 58个家系[符合Amsterdam标准(AC)家系24个、日本标准(JC)家系15个、Bethesda指导纲要(BG)患者19例]收入本项临床病理研究。结果 24个符合AC的家系共有恶性肿瘤患者116例，含结直肠癌患者90例。15个符合JC的家系共有恶性肿瘤患者54例，含结直肠癌患者33例。两组家系表现相似的临床特征，发生第1例结直肠癌的平均年龄分别为46．1岁和51．4岁，右半结肠癌分别占55．4％和44.8％，同时或异时结直肠癌发生率分别为25．6％和18．2％。两组共有肠外肿瘤患者55例，以胃癌最多(12例)，子宫内膜癌次之(8例)。两组39个家系中34例临床病理资料完整的结直肠癌与散发性结直肠癌比较显示，外生性生长较多、低分化癌比例高、克罗恩病样淋巴反应常见，并以Dukes分期A／B为主(P＜0．05)。家系先证者中18例术后随访存活时间超过5年，最长达28年。结论 用AC和JC可将临床表现有别于散发性结直肠癌的亚群——HNPCC筛选出来。这部分患者临床病理特点与散发性者明显不同。肠外肿瘤以胃癌、子宫内膜癌为常见。HNPCC患者预后较好。     

肾小球基膜Ⅳ型胶原亚链定量分析在Alport综合征诊断中的意义

目的:通过对肾组织Ⅳ型胶原亚链免疫组化染色未见异常的Alport综合征 (AS)患者进行Ⅳ型胶原亚链构成比的定量分析,探讨不典型AS的发病机制,提高AS的诊断水平。　方法:选取临床、病理及电镜符合AS、但肾组织Ⅳ型胶原亚链染色未见异常的患者 14例,运用免疫荧光双套色法,通过激光共聚焦荧光显微镜定量分析肾小球基膜(GBM)Ⅳ型胶原中α3链、α5链的含量。并选取 4例薄基膜肾病及 10例肾活检病理诊断为轻度系膜增生性病变(MsPGN)患者的组织切片作为对照。　结果:入选的 14例患者在电镜下皆以GBM病变为主。通过定量分析GBMⅣ型胶原亚链构成比,我们发现,AS患者GBMα3链和α5链在Ⅳ型胶原总体分布中所占的比例明显减少(P<0. 05, P<0. 01vsMsPGN)。根据肾组织Ⅳ型胶原亚链构成比的不同,可以将这 14例患者分为三组:①2例患者α5链 /Ⅳ型胶原比值降低,α3链 /Ⅳ型胶原比值正常。这组患者男女各 1例,无明确家族史;②9例患者α3 /Ⅳ及α5 /Ⅳ比值同时降低。这组患者女性发病明显多于男性,家系分析显示遗传方式为X性连锁显性遗传。③3例患者α3 /Ⅳ及α5 /Ⅳ比值皆正常。这组患者男性 2例,女性 1例。家系分析显示遗传方式亦为X性连锁显性遗传。我们还发现,蛋白尿的发生与α5链 /Ⅳ型胶原比值的降低程度密切相关,存在     

发根DNA检测Alport综合征COL4A5基因突变

目的：通过发根DNA提取分析Alport综合征（Alport syndrome，AS）一家系中COL4A5基因突变，试图通过该方法简化AS家系的收集工作和推广COL4A5基因检测。方法：通过PCR和直接测序的方法，对先证者外周血DNA COL4A5基因所有51个外显子及其相邻内含子的DNA序列进行检测。发现突变位点后，提取6份该家系成员发根部DNA进行该突变位点检测。结果：①成功地从发根部提取DNA，进行了PCR和直接测序。②在COL4A5基因第50号外显子4944位点发现一错义突变，碱基G被T取代，导致其编码1648位氨基酸由色氨酸变为半胱氨酸（4944G＞TW1648C），男性患者为纯合突变，女性患者为杂合突变，正常家系成员和92例对照中均未发现此位点异常，说明W1648C为引起该家系临床病变的突变位点，并非多态性位点。在性连锁Alport综合征中，COL4A5基因此突变位点为首次报道。结论：通过毛发收集、DNA提取，可使家系收集工作更为简便易行，可帮助未开展基因检测的地Ⅸ进行基因诊断。本研究通过发根DNA提取检测Alport综合征一家系中新的COL4A5基因突变，遗传方式符合性连锁显性遗传。