RP-HPLC法测定积雪草中积雪草苷和羟基积雪草苷

积雪草Centella asiatica（L．）Urb．为伞形科积雪草属植物，全草入药。性寒，味苦、辛，具有清热利湿、解毒消肿之功效。临床上用于跌打损伤、传染性肝炎、流行性脑脊髓膜炎等。曾建国等采用梯度洗脱，肖隽等采用衍生化法测定了积雪草中有效成分。本实验采用RP—HPLC法，建立了积雪草中积雪草苷和羟基积雪草苷的测定方法。     

高效液相色谱-蒸发光散射测定积雪苷霜软膏中羟基积雪草苷和积雪草苷

积雪草为伞形科积雪草Centellaasi atica（L．）Urban的全草，含有积雪草苷、羟基积雪草苷等多种三萜类化合物，具有清热利湿、解毒消肿之功效。积雪苷霜软膏其主药为积雪草总苷，具有促进创面愈合的作用。现行标准中仅有理化及薄层鉴别，没有建立定量测定的方法。文献报道采用液相色谱-紫外检测法、毛细管区带电泳技术和柱前衍生技术一紫外检测法分析羟基积雪草苷和积雪草苷。蒸发光散射检测器（evaporative lights cattering detector，ELSD）作为新一代的通用型检测器，具有灵敏度高、不受溶剂紫外吸收的影响等优点。因此本研究采用HPLC—ELSD法测定了积雪苷霜软膏中羟基积雪草苷和积雪草苷，建立了积雪苷霜软膏的定量测定方法。     

本草中积雪草的考证

积雪草始载《本经》，历代本草多有记述。《纲目》草部十四卷积雪草《本经中品》条下有详述。[释名]有；胡薄荷(《天宝方》)，地钱草(《唐本》)，连钱草(《药图》)。在《纲目抬遗》中载记有金钱草。并云“纲目有积雪草，即此”。本草记述的积雪草，其原植物曾在现代一些中药学著作中论述过，但尚有不同结论，本文对此，加以补遗考证。     

三种中药有效成分对瘢痕成纤维细胞生长影响研究

目的 探讨积雪草甙、苦参碱、川芎嗪等中药有效成分对皮肤瘢痕成纤维细胞生长的影响。方法 体外培养瘢痕疙瘩成纤雏细胞，分别加入不同浓度的积雪草甙、苦参碱、川芎嗪。通过倒置显微镜观察、MTT法测定细胞活力、乳酸脱氢酶检测等方法分别观测三种中药有效成分对瘢痕成纤维细胞生长的影响。结果 与空白对照组相比，实验组中加入积雪草甙0.5mg/ml、苦参碱1．0mg/ml、川芎嗪1．9mg/ml后成纤维细胞数量均明显减少；OD值降低（P〈0．05）；当积雪草甙浓度高于5mg/ml时乳酸脱氢酶含量超出正常范围。结论 有效浓度下，三种中药有效成分均能抑制皮肤瘢痕成纤维细胞生长，其作用强度积雪草甙〉苦参碱〉川芎嗪。     

复方积雪草颗粒提取工艺研究

目的 研究复方积雪草颗粒最佳提取工艺。方法 采用正交试验法进行优选，HPLC法测定积雪草苷、黄芪甲苷的含量。结果 乙醇浓度、溶媒量、提取时间、提取次数对积雪草苷、黄芪甲苷提取率均有显著影响。结论最佳提取工艺为药材10倍量50％乙醇，提取2次，每次3h。     

积雪草总苷巴布膏剂透皮吸收试验

目的：研究积雪草总苷巴布膏剂中积雪草总苷的体外经皮吸收情况。方法：用改良Frans透皮吸收池进行体外透皮试验，用UV法测定积雪草总苷含量。结果：积雪草总苷巴布膏剂中积雪草总苷的透皮速率为0．3175mg／（cm^2·h）。结论：巴布膏剂中的积雪草总苷有很好的渗透性。     

积雪草--健脑益智的天然良药

近据印度研究人员报道,积雪草有改善记忆力的神奇效果。动物实验证实,老年大鼠连续12周喂饲给“积雪草甙”可使其记忆力比对照同龄大鼠提高6～10倍。轻度、中度阿尔茨海默症(老年痴呆症)患者,每日口服12克积雪草提取物制剂,可显著改善认知能力并有助于防止病情恶化。此外,积雪草制剂对改善焦虑症症状亦有良好效果。总之,积雪草不愧为天然药物中的“多面手”。积雪草制剂对人体非常安全,即使每日口服20克以上,亦未见任何毒副作用。国外已有多种积雪草保健制剂上市,如积雪草干燥全草加工的袋泡茶、积雪草提取物胶囊、复方积雪草胶囊等。据国外…     

滴定法测定积雪草中积雪草总苷元含量

目的建立一种快速测定积雪草总苷元的方法。方法用一定体积过量的氢氧化钠乙醇标准溶液（0．1mmol／L）中和积雪草总苷元,再以酚酞为指示剂,用盐酸乙醇标准溶液（0．1mmol／L）反滴定过量的氢氧化钠,根据盐酸乙醇标准溶液的消耗量计算出积雪草总苷元含量。结果测定含量25％-80％的积雪草总苷元样品5份,平均相对标准偏差RSD=1．92％。平均加样回收率R=98．3％。结论该方法简单、准确、快捷,适用于积雪草总苷元的产品质量控制。     

积雪草苷药理作用及其机制的研究进展

积雪草苷(asiaticoside)是从伞形科植物积雪草中提取出的一种白色针状结晶,性甘、辛、凉,有清热解毒作用.文献报道其具有抗氧化、抗纤维化、促进伤口愈合、镇痛、抗肿瘤等多种治疗作用.本文即对积雪草苷的药理、药性,积雪草苷治疗癜痕、抗肿瘤等作用机制的研究进行综述,并对其未来的研究方向和应用前景做了简单评述.     

复方积雪草对肾系膜细胞增殖及Bcl-2与Caspase-3的影响

目的：观察复方积雪草对IgA1诱导的大鼠系膜细胞（GMCs）增殖及凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤－2（Bcl－2）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）蛋白表达的影响。 方法 运用高效液相色谱法测得复方积雪草煎剂溶液中主要药物的有效成分含量，按测得的比例配制复方积雪草单体组方溶液。选择合适时间和浓度的IgA1 刺激大鼠系膜细胞，将系膜细胞分为正常组、模型组、缬沙坦组和复方积雪草高中低浓度组，CCK8检测药物干预后细胞增殖情况。Western-blot法检测Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达。 结果 1、96孔板培养细胞在24h时，100ul/mlIgA1刺激系膜细胞，模型组IgA1刺激造模成功，模型组增殖高于正常组（P<0.05）；复方积雪草组、缬沙坦组有明显的抑制系膜细胞增殖作用，与模型组有差异（P<0.05）。 2、Western Blot检测Bcl-2、Caspase-3 蛋白的表达：与正常组比较，模型组Bcl-2升高，Caspase-3降低（P<0.05）；与模型组相比，复方积雪草高浓度组、缬沙坦组Bcl-2降低，复方积雪草高、低浓度组、缬沙坦组Caspase-3升高（P<0.05），复方积雪草高浓度组较缬沙坦组明显（P<0.05）。 结论 复方积雪草能够明显抑制IgA1诱导的大鼠GMCs的增殖，能够下调IgA1诱导增殖后的大鼠MCs的Bcl-2蛋白的表达，同时上调Caspase-3蛋白的表达。其机制可能与调控细胞凋亡相关蛋白Bcl-2 、Caspase-3等蛋白有关。     

积雪草苷配合针灸治疗增生性瘢痕的临床研究

目的观察积雪草苷配合针灸治疗增生性瘢痕的临床疗效。方法积雪草苷配合针灸治疗及单独应用积雪草苷治疗增生性瘢痕。结果 30例患者积雪草联合针灸治疗3个月,总有效率80%,30例患单独应用积雪草联治疗3个月,总有效率53.3%。结论 ＂应用积雪草配合针灸＂是一种安全有效地治疗增生性瘢痕的方法。     

积雪草苷对增生性瘢痕中肿瘤坏死因子αmRNA及Ⅰ型胶原表达的影响

目的 探讨积雪草苷(Asiaticoside)对人增生性瘢痕中肿瘤坏死因子α(Tumour Necrosis Factor alpha,TNF-α)mRNA及Ⅰ型胶原(Type I Collogen)表达的影响.方法 临床上收集烧伤后5-8个月增生性瘢痕标本18例,其中经积雪草苷治疗组和非积雪草苷治疗组各9例.采用原位杂交和免疫组织化学方法,分别检测增生性瘢痕中TNF-αmRNA及I型胶原的表达水平,并利用图象分析.结果 进行结果分析.结果 TNF-α mRNA在增生性瘢痕中主要表达于单核吞噬细胞胞浆,仅少部分表达于基底层细胞胞浆.经积雪草苷治疗的增生性瘢痕中TNF-αmRNA表达明显增多,胞浆浓染,统计学上明显高于非积雪草苷治疗组TNF-α mRNA表达(P＜0.01).Ⅰ型胶原表达于增生性瘢痕中,经积雪草苷治疗的增生性瘢痕中Ⅰ型胶原含量较少,排列整齐,与非积雪草苷治疗组有显著差异(P＜0.05).结论 积雪草苷能促进增生性瘢痕中TNF-α mRNA的表达,减少Ⅰ型胶原合成,达到减轻瘢痕增生的作用.     

含积雪草提取物的药物和化妆品用于抗炎和预防皮肤衰老等

积雪草提取物含羟基积雪草苷和terminoloside。积雪草地上部分用乙醇提取，提取液过阴离子树脂，用脱脂洗脱液洗脱，浓缩挥尽醇后过滤，滤液依次经阳离子树脂和阴离子树脂处理，加醇稳定，色谱分析，得到含量大于95％的羟基积雪草苷和terminoloside混合物，其中积雪草苷的含量为30％～70％。该提取物具抗炎活性。用于自身免疫病、慢性炎症和肠胃病，也用于治疗牛皮癣、     

积雪草总苷巴布膏剂透皮吸收试验

目的:研究积雪草总苷巴布膏剂中积雪草总苷的体外经皮吸收情况。方法:用改良Frans透皮吸收池进行体外透皮试验,用UV法测定积雪草总苷含量。结果:积雪草总苷巴布膏剂中积雪草总苷的透皮速率为0.3175mg/(cm2·h)。结论:巴布膏剂中的积雪草总苷有很好的渗透性。     

积雪草甙对实验大鼠乳腺增生的防治

目的：研究积雪草甙对实验大鼠乳腺增生症的预防和治疗作用。方法：应用苯甲酸雌二醇，黄体酮制备大鼠乳腺增生症模型。在制备模型同时或之后，灌服积雪草甙，于给予受试药后第32天测量左右两个乳房直径，高度和乳头直径；放射免疫测定血清雌二醇（E2）和孕酮（P）浓度；镜下观察乳腺增生的病理改变，计算乳腺增生率和增生程度。结果：积雪草甙能显著降低实验性大鼠乳腺增生症的发生率，抑制乳腺增生程度，调节血清E2和P浓度，改善E2／P比值，积雪草甙能降低乳腺增生程度，减少乳腺增生症的发生率，有望成为预防和治疗乳腺增生症的候选药物。     

HPLC-ELSD法测定积雪草中积雪草苷的含量

目的:建立积雪草中主要生物活性成分积雪草苷的HPLC-ELSD含量测定方法.方法:应用LabAlliance ELSD MODEL-200蒸发光散射检测器;色谱柱为Aichrom Reliasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水(55:45)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温为35℃,测定积雪草苷的含量.结果:积雪草苷在1.216～6.08 μg之间呈良好的线性关系(r=0.9994),精密度、重现性RSD均小于2%,平均回收率为97.1%.结论:此方法简便快速、选择性好,适用于积雪草中积雪草苷的质量分析.     

复方积雪草对FGS鼠肾细胞因子mRNA表达影响的实验研究

目的：观察复方积雪草的抗肾纤维化作用及其对FGS实验鼠肾细胞因子mRNA表达的影响。方法 BALB／C小鼠尾静脉一次性注射阿霉素诱导FGS肾炎模型，以复方积雪草制剂灌胃治疗4周。分别观察尿蛋白和肾脏病理化，同时提取肾组织总RNA，通过逆转录掺入荧光素，再与细胞因子表达谱基因芯片杂交，并行扫描分析。结果：复方积雪草治疗组蛋白尿较模型明显减轻，同时实验鼠肾小球硬化的病理明显改善：芯片检测证实，复方积雪草可下调PDGF-α、PDGF-β、PDGF受体、VEGF、IL-9、IL-7R2、MIP、c-myc、Jun等细胞因子mRNA的表达，上调GM—CSF的表达。结论：复方积雪草具有抗肾纤维化作用，其作用效应可能是通过对多种细胞因子mRNA共同调控的结果。     

应用反相高效液相色谱法同时测定积雪草提取物中羟基积雪草苷、积雪草苷及其苷元

目的：采用反相高效液相色谱建立同时测定积雪草提取物中羟基积雪草苷、积雪草苷、羟基积雪草酸及积雪草酸4种主要成分的分析方法。方法：采用Agilent 1100 高效液相色谱仪系统,ZORBAX Eclipse XDB-C8色谱柱(4.6 mm×150 mm, 5 μm);流动相为1 mmol/L 磷酸二氢钾水溶液-乙腈,梯度洗脱;检测波长205 nm。结果：羟基积雪草苷、积雪草苷、羟基积雪草酸及积雪草酸的色谱响应线性范围良好（R²≥0.9998）;平均回收率分别为97.4%、93.7%、97.5%、99.8%,相对标准偏差值分别为3.4%、1.4%、4.7%、4.4%（n=9）。结论：采用反相高效液相色谱建立同时测定羟基积雪草苷、积雪草苷及其苷元的方法高效灵敏、重现性好,可以作为积雪草提取物质量控制的检测方法。     

天胡荽亚科药用植物化学成分及药理作用

我国分布有伞形科天胡荽亚科（Hydrocotyloideae）3个属共22种植物。目前,本亚科可入药用的植物开发主要集中在积雪草Centella asiatica（L.）Urb.、肾叶天胡荽Hydrocotyle wilfordi Maxim.、天胡荽Hydrocotylesibthorpioides Lam.及其变种破铜钱Hydrocotyle sibthor-pioides var.batrachium（Hance）.-Mazz.ex Shan。     

积雪草总苷治疗糖尿病大鼠皮肤溃疡的研究

目的：1. 研究积雪草苷对糖尿病大鼠皮肤溃疡创面修复的作用;2. 探索积雪草苷对糖尿病大鼠皮肤溃疡的效应机制;3. 观察给药后大鼠创面愈合率与病理结构的变化。方法：SPF级SD雄性大鼠,体重280（±10）g,一次性腹腔注射链脲佐菌素50mg/kg,建立糖尿病模型72小时后血糖值达到16.7 mmol•L-1即为糖尿病造模成功。按照全程皮肤缺损的办法在大鼠背部剪4个直径1.8cm的圆形创面,自然暴露一天,视为糖尿病溃疡模型建立成功。分别用高中低三种剂量的积雪草总苷干预创面,于3D、7D、14D、21D观察创面愈合率及皮肤病理组织变化,各脏器的病理变化。Western blot 、PCR检测创面的生长因子及炎症因子的变化情况。结果：三种剂量积雪草总苷均可以促进皮肤创面的愈合。结论：积雪草总苷可促进糖尿病大鼠溃疡的愈合。