藏药镰形棘豆中鼠李柠檬素对照品的制备

目的:建立镰形棘豆中鼠李柠檬素对照品的制备方法.方法:运用硅胶柱色谱、Sephndex LH-20凝胶色谱柱等分离纯化的方法制备鼠李柠檬素,采用薄层色谱法和高效液相色谱面积归一化法检测纯度,波谱法鉴定其结构.结果:制备的化合物为鼠李柠檬素,纯度＞98％.结论:该制备方法效率高,所得鼠李柠檬素对照品纯度高,符合中药化学对照品的相关技术要求,可用于大量制备中药定性、定量分析使用的对照品.     

HPLC法测定藏药镰形棘豆中鼠李柠檬素的含量

目的建立镰形棘豆中主要活性成分鼠争柠檬素的含量测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱：Lichrospher C18柱（5μm,4．6mm×250mm）;流动相：0．4％磷酸水溶液-甲醇（20：80）;流速：1．0mL／min;检测波长：350nm。结果鼠李柠檬素在4～30μg范围内线性关系良好（r＝0．9998）,平均回收率为99．7％,RSD=1．4％;5批镰形棘豆药材中鼠李柠檬素的平均含量为0.39％。结论本法操作简便,结果准确,可用于镰形棘豆药材的质量控制方法之一。     

藏药镰形棘豆鼠李柠檬素对免疫抑制小鼠非特异性免疫功能的影响

目的探讨藏药镰形棘豆提取物鼠李柠檬素增强免疫的作用机制。方法选用昆明种小鼠,随机分为空白组、模型组、阳性药组及中药高、中、低剂量组,各给药组给予相应药物灌胃,连续10 d。第8日起,除空白组腹腔注射生理盐水外,其他各组均腹腔注射环磷酰胺,连续3 d。通过巨噬细胞炭粒廓清试验、巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验、免疫抑制小鼠器官指数测定,观察鼠李柠檬素对免疫抑制小鼠非特异性免疫功能的影响。结果与模型组和空白组比较,中药各剂量组能提高免疫抑制小鼠的吞噬活性、廓清指数和吞噬系数(P0.05),增加免疫器官脏器指数;与阳性药组比较,中药各剂量组药效较低。结论藏药镰形棘豆鼠李柠檬素具有一定的免疫增强作用,可促进小鼠鸡红细胞免疫后脾细胞血清溶血素的形成。     

HPLC 同时测定藏药镰形棘豆中鼠李柠檬素和2',4'-二羟基查耳酮含量

目的 建立同时测定藏药镰形棘豆中鼠李柠檬素和2',4'-二羟基查耳酮含量的高效液相色谱方法.方法 色谱柱:Lichrospher C18 柱(5 μm,4.6 mm×250 mm);流动相:0.4%磷酸水溶液-甲醇(30:70);流速:1.0 mL/min;检测波长:266 nm;柱温:30 ℃.结果 鼠李柠檬素、2',4'-二羟基查耳酮分别在0.080～0.60 μg(r ＝0.999 8)、0.22～1.68 μg(r ＝1.000)范围内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率分别为98.8%(RSD＝1.17%)、99.0%(RSD＝1.15%).结论 本法快速、简便,结果准确、可靠,可用于镰形棘豆中鼠李柠檬素和2',4'-二羟基查耳酮的质量监控.     

HPLC法测定藏药镰形棘豆中鼠李柠檬素-3-O-β-新橙皮糖苷的含量

目的:建立镰形棘豆中鼠李柠檬素-3-O-β-新橙皮糖苷的含量测定方法,同时比较药材的不同部位经不同溶剂提取后所得含量。方法:采用HPLC法,色谱柱:Symmetry C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:1%乙酸水溶液-乙腈(79:21);流速:1.0mL/min;检测波长:350nm。结果:鼠李柠檬素-3-O-β-新橙皮糖苷在20-100μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9995),平均回收率为99.49%,RSD=1.30%。溶剂对该化合物的提取率由高至低依次为甲醇,95%乙醇、水;药材叶中含量比根高。结论:本法简便、准确、重现性好,可用于该药材或相关制剂的质量控制;药材不同部位经不同溶剂提取所得含量差别较大。     

UVB对藏药镰形棘豆类黄酮积累的影响

目的:研究藏药镰形棘豆幼苗在不同B波段紫外线(ultraviolet radiation B,UVB)辐射下类黄酮的含量变化及黄酮合成相关酶的活性变化,从细胞水平探讨镰形棘豆类黄酮积累受UVB胁迫的影响及调节机制。方法:以镰形棘豆人工培养幼苗为实验材料,设置低辐照强度Q1(约2.0 W/m2)组、高辐照强度Q2(约3.0 W/m2)组及对照组,分别在UVB处理0、1、2、3、5、7 d后取样,测定总黄酮、鼠李柠檬素含量及苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonialyase,PAL)、查尔酮合酶(chalcone synthase,CHS)及查尔酮异构酶(chalcone isomerase,CHI)的活性。结果:UVB辐射能够促进镰形棘豆总黄酮和鼠李柠檬素的含量升高。UVB能够提高PAL的活性,增强效果Q1优于Q2。Q1剂量的UVB能够提高CHS和CHI的活性,Q2剂量的UVB短时间辐射能够提高CHS和CHI的活性,长时间辐射降低CHS和CHI的活性。结论:UVB辐射对镰形棘豆类黄酮物质的积累有明显的促进作用。低剂量的UVB能够刺激镰形棘豆黄酮合成相关酶的活性升高,促进类黄酮的生物合成。高剂量的UVB长时间辐射可能对镰形棘豆幼苗造成不可修复的损伤,不利于类黄酮的积累。     

镰形棘豆的化学成分研究

目的：研究镰形棘豆的化学成分。方法：90%乙醇冷浸提取，所得浸膏经柱色谱分离，通过波谱学方法鉴定化合物的结构。结果：分离鉴定了14个化合物，分别鉴定为：(-)-7-甲氧基-二氢黄酮［(-)-7-methoxy-dihydroflavone，1］，(-)-5-羟基-7-甲氧基-二氢黄酮［(-)-5-hydroxy-7-methyoxy-dihydroflavone，2］，(-)-pinocembrin(3)，(-)-7-羟基-二氢黄酮［(-)-7-hydroxy-dihydroflavone，4］，4′-甲氧基-2′-羟基-查耳酮(4′-methoxy-2′-hydroxy-chalcone，5)，2′ ,4′-二羟基-二氢查耳酮(2′,4′-dihydroxy-dihydrochalcone，6)，2′，4′ -二羟基查耳酮(2′,4′-dihydroxy-chalcone，7)，(-)-maackiain(8)，tetrahydroflemichapparin-B(9)，dalbergin(10)，N-苯甲酰基-2-苯基乙胺(N-benzoyl-2-phenylethylamine，11)，rhamnocitrin-3-O-β-neohesperidoside(12)。结论：所有化合物均为首次从该植物中分得。     

藏药镰形棘豆中化学成分研究

经硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析、ODS反相层析对镰形棘豆的乙酸乙酯部分进行分离,通过理化方法和NMR、MS鉴定7个化合物为β-sitosterol(1)、phenethylamide(2)、isoliquiritigenin(3)、genistin(4)、isorhamnetin(5)、kaempferide-3-O-β-glu(6)、kaempferol(7)。化合物2~7为首次从该植物中获得。     

镰形棘豆的化学成分研究(Ⅱ)

 目的对藏药镰形棘豆的化学成分进行研究。方法利用硅胶柱色谱法和半制备HPLC对镰形棘豆提取物的氯仿和乙酸乙酯萃取部分的化学成分进行分离和纯化,并通过NMR对得到的化合物进行结构鉴定。结果从中分离得到了6个化合物,经鉴定分别为2′-甲氧基-4′-羟基查尔酮(Ⅰ)、ψ-赝靛素(Ⅱ)、芒柄花素(Ⅲ)、4,2′-二羟基-4′-甲氧基查尔酮(Ⅳ)、7-羟基黄酮(Ⅴ)和邻苯二甲酸二异丁酯(Ⅵ)。结论化合物Ⅱ～Ⅵ均为首次从该植物中分离得到,其中化合物Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ和Ⅵ为首次从棘豆属中分离得到。     

镰形棘豆的化学成分研究(Ⅰ)

 目的对藏药镰形棘豆的石油醚和氯仿萃取部分的化学成分进行研究。方法使用硅胶柱色谱对这两个部分的化学成分进行分离和纯化,通过理化方法、MS和NMR对化合物进行鉴定。结果从镰形棘豆的石油醚部分分离得到3个化合物,经鉴定分别为正二十九烷(n-nonacosane,Ⅰ)、花生酸(eicosanoic acid,Ⅱ)和β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅲ);从氯仿部分分离得到6个化合物,经鉴定分别为5-羟基-7-甲氧基二氢黄酮(pinostrobin,Ⅳ)、2′,4′-二羟基二氢查尔酮(2′,4′-dihydroxy dihydroch- alcone,Ⅴ)、2′,4′-二羟基查尔酮(2′,4′-dihydroxy chalcone,Ⅵ)、5,7-二羟基二氢黄酮(pinocembrin,Ⅶ)、豆甾醇(stigmasterol,Ⅷ)和2′-羟基-4′-甲氧基查尔酮(2′-hydroxy-4′-methoxy chalcone,Ⅸ)。结论化合物Ⅰ,Ⅷ为首次从该植物中分离得到;化合物Ⅱ,Ⅳ,Ⅶ为首次从棘豆属中分离得到。     

藏药镰形棘豆中黄酮类化学成分研究

目的：对藏药镰形棘豆Oxytropis falcata的黄酮类化学成分进行研究。方法：通过正相硅胶柱色谱,Sephadex LH-20柱色谱,ODS反相色谱分离﹑纯化,用NMR,MS鉴定结构。结果：从镰形棘豆的氯仿萃取部分分离鉴定了8个黄酮类化合物,分别为2′,4′-二羟基-4-甲氧基查尔酮(1),2′,4′-二羟基查尔酮(2),5,7-二羟基-4′-甲氧基黄酮醇(3),7-羟基-4′-甲氧基二氢黄酮(4),3′,7-二羟基-2′,4′-二甲氧基异黄烷(5),2′-羟基-4′-甲氧基查尔酮(6),2′-甲氧基-4′-羟基查尔酮(7),2′,4′-二羟基二氢查尔酮(8)。结论：这些化合物均为首次从该植物中分离得到。     

藏药镰形棘豆的化学成分研究

目的对藏药镰形棘豆Oxytropis falcata植物的化学成分进行研究。方法采用乙醇提取,硅胶柱色谱分离,并通过波谱分析技术鉴定了其化学结构。结果从藏药镰形棘豆中得到10个化合物,分别鉴定为:7-甲氧基二氢黄酮(Ⅰ)、7-羟基二氢黄酮(Ⅱ)、(S)-5-羟基-7-甲氧基二氢黄酮(Ⅲ)、(S)-5,7-二羟基二氢黄酮(Ⅳ)、2′,4′-二羟基双氢查耳酮(Ⅴ)、2′,4′,4-三羟基查耳酮(Ⅵ)、鼠李素(Ⅶ)、臭豆碱(Ⅷ)、β-谷甾醇(Ⅸ)、β-胡萝卜苷(Ⅹ)。结论以上化合物均为首次从该植物中分离得到。     

藏药镰形棘豆中黄酮类成分山柰素和鼠李素的含量测定

目的 建立藏药镰形棘豆中山柰素、鼠李素的含量测定方法.方法 高效液相色谱(HPLC)法测定镰形棘豆中山柰素和鼠李素的含量.采用C18,流动相以甲醇-0.4%磷酸溶液梯度洗脱检测波长362 nm.结果 此方法线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率山柰素为99.90%,RSD=1.83%;鼠李素为99.62%;RSD=1.14%.结论 该方法简便、稳定,能有效地控制该制剂的质量.     

藏药镰形棘豆药效学实验研究

目的:通过对藏药镰形棘豆的抗炎镇痛实验研究,探讨该药的药效学作用,为临床提供依据.方法:采用鸡蛋清致炎法、二甲苯致耳肿胀法观察藏药镰形棘豆的抗炎作用;采用扭体法观察藏药镰形棘豆的镇痛作用.结果:镰形棘豆对鸡蛋清所致的大鼠足趾肿胀、对二甲苯所致的小鼠耳肿胀均有明显的抑制作用;并能减少醋酸致痛小鼠的扭体次数.结论:镰形棘豆具有较好的抗炎和镇痛作用.     

镰形棘豆总黄酮提取工艺的比较研究

目的：比较4种不同工艺对镰形棘豆总黄酮提取的影响。方法：采用水提醇沉酸解、水提、碱提酸沉及水提酸解4种工艺提取,以镰形棘豆总黄酮得率及纯度为指标,NaNO2-Al（NO3）3比色法测定镰形棘豆总黄酮含量。结果：镰形棘豆最佳提取工艺为水提酸解。该提取物中总黄酮提取率为1.6%,纯度为：11.26%。结论：该工艺可用于镰形棘豆药材中总黄酮成分的提取,方法可靠,简便易行。     

藏药镰形棘豆的化学成分及其抗肿瘤活性研究

目的:研究藏药镰形棘豆Oxytropis falcata的化学组成及其抗肿瘤活性.方法:通过硅胶柱色谱、制备TLC分离纯化镰形棘豆的化学成分,通过NMR等波谱技术解析鉴定化合物结构,通过MTT法研究化合物1,3,5抑制人肝癌细胞HepG2、小鼠黑色素瘤细胞B16F10、人肝癌细胞SMMC-7721、人肝癌细胞HuH7以及人乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖影响.结果:从镰形棘豆乙醇提取物中分离得到了5个化合物,分别为7-甲氧基二氢黄酮(7-methoxy flavanone,1),7-羟基二氢黄酮(7-hydroxy flavonone,2),2′,4′-二羟基查耳酮(2′,4′-dihydroxy chalcone,3),2′,4′-二羟基-4′-甲氧基查尔酮(2′,4′-dihydroxy-4′-methoxy chalcone,4),N-(2-苯乙基)肉桂酰胺(N-2-phenylethyl cinnamamide,5).四甲基偶氮唑盐比色(MTT)结果表明化合物3具有较好的抗肿瘤活性,其IC50分别为68.60,169.67,105.88,175.18,172.37μmol·L-1.结论:其中化合物5为首次从该种属中分离得到,化合物3对5种肿瘤细胞的增殖具有明显的抑制作用.     

镰形棘豆的化学成分研究(Ⅳ)

 目的对藏药镰形棘豆的化学成分进行研究。方法使用硅胶柱色谱对镰形棘豆提取物的氯仿和乙酸乙酯萃取部分的化学成分进行分离和纯化,通过理化方法和NMR对所得化合物的结构进行鉴定。结果从中分离得到了6个黄酮苷元类化合物,经鉴定分别为7-羟基二氢黄酮(Ⅰ)、甘草素(Ⅱ)、白杨素(Ⅲ)、芹菜素(Ⅳ)、木犀草素(Ⅴ)和槲皮素(Ⅵ)。结论化合物Ⅰ～Ⅵ均为首次从该植物中分离得到,其中化合物Ⅰ和Ⅱ为首次从棘豆属中分离得到。     

HPLC法测定青天葵中鼠李柠檬素和鼠李秦素

目的 建立青天葵中鼠李柠檬素与鼠李秦素的定量测定方法.方法 运用HPLC法测定,色谱柱为Inett-sil 0DS-3 C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(63:37),体积流量:1.0 mL/min,检测波长:368 nm,柱温:40℃.结果 鼠李柠檬素在0.2～0.7μg线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为100.04%,RSD为1.35%(n=6).鼠李秦素在2.8～9.8μg线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为100.26%,RSD为0.78%(n=6).结论 本方法简便、快速、准确.可作为青天葵药材的质量控制方法.     

镰形棘豆总黄酮软膏剂的制剂工艺研究

目的 制备具有高渗透性的镰形棘豆总黄酮软膏剂,并探讨影响其体外累积渗透量的因素.方法 首先建立2',4 '-二羟基查尔酮的体外测定方法,用体外透皮实验方法考察总黄酮的透皮性能,在单因素考察基础上,以累计透过量为考察指标,选择促渗剂(油酸)用量、载药浓度、单硬脂酸甘油酯与三乙醇胺的比例三个因素进行正交设计,优化镰形棘豆总黄酮软膏剂处方.结果 通过正交设计优化得到渗透性能良好的镰形棘豆总黄酮软膏剂,镰形棘豆总黄酮软膏剂其主要成分2 ',4 '-二羟基查尔酮的累积透皮率较溶液剂提高了2倍.结论 镰形棘豆总黄酮软膏剂具有良好的渗透能力.     

一种改良的镰形棘豆DNA提取方法

目的:建立适合DNA条形码分析的镰形棘豆DNA提取方法。方法:以镰形棘豆(Oxytropis falcate Bunge)叶片为材料,采用改良的DNA提取方法对其DNA进行提取,并用琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增对提取的DNA进行检测。结果:本方法提取的DNA,能够满足以PCR为基础的分子鉴定的基本要求。操作简便,需时短,成本低廉,适于DNA的大批量提取。结论:本方法适合DNA条形码研究的DNA提取。