仙九冲剂诱导肿瘤细胞凋亡及抑瘤效应的实验研究

用光镜、透射电镜和流式细胞光度术 ,观察中药仙九冲剂诱导荷S180肉瘤小鼠肿瘤细胞凋亡及抑瘤效应 ,结果显示 :仙九冲剂能有效地诱导肿瘤细胞凋亡 ,凋亡指数为 2 7 3± 2 6 2 ,凋亡峰为 32 5 ;超微结构变化表现为肿瘤细胞染色质发生边移 ,沿核膜分布 ,染色体浓缩破裂 ,并出现凋亡小体。抑瘤率为 5 8 8%,接近化疗药环磷酰胺组 ,P <0 0 5。     

达肝清对小鼠肝细胞异常凋亡的影响

目的 探讨中药复方达肝清对苯巴比妥钠诱导的小鼠肝细胞异常凋亡的影响,进一步揭示其抗肝损伤的作用机理.方法 采用撤除苯巴比妥钠(PB)诱导小鼠肝细胞凋亡的模型;通过流式细胞检测技术,TUNEL原位检测法,HE常规染色等方法,以肝细胞凋亡率、肝组织形态、原位细胞TUNEL反应、肝/体重比为指标,观察不同剂量达肝清对PB诱导肝细胞凋亡的影响.结果 流式细胞仪分析表明,达肝清高、中剂量组肝细胞凋亡率明显低于凋亡对照组;达肝清高剂量组肝/体重比回落明显低于凋亡对照组;组织学染色及TUNEL反应,凋亡对照组可见凋亡小体,凋亡现象明显,凋亡细胞明显多于达肝清高、中剂量组.结论 达肝清能明显抑制苯巴比妥钠诱导的肝细胞凋亡,进一步提示抑制肝细胞异常凋亡可能为其抗肝损伤的机理之一.     

肝细胞生长因子与心力衰竭

肝细胞生长因子具有潜在的多种生物学活性,包括促有丝分裂,抗细胞凋亡,抗纤维化,心肌肥大,血管生成,组织再生作用等,这将对心力衰竭产生保护作用。本文就近年来肝细胞生长因子在心力衰竭中的作用及其机制、实验研究、临床应用等方面的研究近况做一综述。     

吴茱萸碱对肝细胞生长因子诱导的肿瘤细胞侵袭具有抑制作用

日本学者用肝细胞生长因子（HGF）诱导的结肠癌26-L5、B16-F10黑素瘤以及Lewis肺癌细胞株研究吴茱萸碱对肿瘤侵袭和转移的影响。结果发现，吴茱萸碱对HGF诱导的肿瘤细胞侵袭具有显著的抑制作用，具浓度依赖性，30μM时，对所有的肿瘤细胞均具有抑制作用。植于覆盖有纤连蛋白的含吴茱萸碱培养基上的肿瘤细胞，其扩散受到明显抑制，而对纤连蛋白的粘附性不受影响。     

肝细胞生长因子对糖尿病肾病不同阶段的治疗作用

目的通过检测转化生长因子-β1（TGF-β1）mRNA、CTGFmRNA、c-metmRNA的表达及其病理变化,研究肝细胞生长因子（HGF）对2型糖尿病肾病不同阶段的治疗作用。方法雄性Wistar大鼠随机分为对照组、糖尿病肾病组、治疗组（HGF组）,HGF组于注射链尿佐菌素后2个月和6个月时给予HGF500μg/（kg.d）,连续1个月,处死。取一侧肾脏HE染色作病理切片,另一侧肾脏用反转录多聚酶链反应（RT-PCR）检测TGF-β1mRNA、CTGFmRNA、c-metmRNA的表达。结果在3个月和7个月时,HGF组c-metmRNA表达较DN组高,TGF-β1及CTGFmRNA表达较DN组低（P〈0.05）。结论HGF可抑制早期糖尿病肾病进一步发展,减轻临床糖尿病肾病的蛋白尿,使肾小球系膜明显变薄和系膜基质降解从而改善并逆转临床糖尿病肾病大鼠肾脏的功能和形态的变化。     

中医药诱导肿瘤细胞凋亡研究概况

目的:探讨中医药诱导肿瘤细胞凋亡的研究概况.方法:分析、总结近年来中医药诱导肿瘤细胞凋亡的相关文献,从现代医学对细胞凋亡的认识、中医基础理论对细胞凋亡的认识、中药对细胞凋亡的影响、中药与细胞凋亡的相关基因等方面进行阐述.结论:以诱导肿瘤细胞凋亡为主的治疗方法已成为肿瘤治疗的新途径.     

氯沙坦对自发性高血压大鼠心脏保护作用与肝细胞生长因子的关系

目的:探讨氯沙坦对心脏保护作用与肝细胞生长因子(HGF)的关系.方法:实验动物为自发性高血压大鼠(SHR) 12只,14周龄.分为2组,1组为氯沙坦组(SL),另1组为对照组(SC);以Wistar大鼠为正常对照组(WC),6只,年龄和体质量配比,雌雄配对.SL组每天按30 mg/kg灌胃法喂服,对照组采用灌胃法喂服等量蒸馏水,疗程6周.实验结束后分别测量血压和左室质量,采用M-30-apoptosense ELISA法测心肌细胞凋亡数量及血浆和组织HGF浓度.结果:治疗6周后,与对照组(SC)相比,SL组血压下降,左室质量指数降低,心肌细胞凋亡数量减少,血浆HGF降低,伴有组织HGF浓度升高.结论:氯沙坦能够促进组织HGF分泌,逆转心室肥厚,减少心肌细胞凋亡.     

抗纤方抑制TGF—β诱导肝细胞凋亡的实验研究

目的：探讨抗纤对TGF－β诱导肝细胞凋亡的抑制作用。方法：采用细胞生物学等,利用TGF－β、可诱导肝细胞凋亡的特性,建立体外实验模型,观察抗纤方对TGF－β1诱导肝细胞凋亡抑制作用。结果：实验表明TGF－β1以剂量依赖关系诱导肝细胞凋亡,当TGF－β浓度在500pg/ml时可诱导2．2．15细胞凋亡达63％,而HepG2细胞凋亡只有42％,此时,用抗纤方20mg/ml可使2．2．15细胞凋亡率降至33％,HepG2细胞凋亡率至24％,抑制率均在50％左右,结论：抗纤方体外对TGF－β诱导的肝细胞凋亡有明显的抑制作用。     

左归丸对大鼠卵巢血管生成与胎盘生长因子、肝细胞生长因子及其受体关系的影响

目的?观察左归丸对初老大鼠卵巢中胎盘生长因子（PLGF）及酪氨酸激酶受体（Flt-1）和肝细胞生长因子（HGF）及间质上皮细胞转化因子（c-Met）受体表达的影响。方法?初老大鼠40只按随机数字表法分为模型组、结合雌激素组、左归丸11、33 g/kg剂量组，每组10只，另取10只4月龄大鼠作为正常对照组。正常对照组以蒸馏水20 g/kg灌胃；结合雌激素组灌胃65 μg/kg结合雌激素混悬液；左归丸11、33 g/kg组分别灌胃左归丸浸膏11、33 g/kg，1次/天，连续20天；观察大鼠生殖器官形态学变化，计算卵巢、子宫、阴道脏器指数，采用免疫组化法及Western Blot法检测大鼠卵巢 PLGF、Flt-1、HGF、c-Met 蛋白表达水平，原位杂交技术检测PLGF、Flt-1、HGF、c-Met mRNA表达水平，ELISA 法检测雌二醇（E2）、孕激素（P）、促卵泡生成激素（FSH）水平。结果?与正常对照组比较，模型组大鼠生长卵泡数、黄体数、血管数更少，闭锁卵泡数多，卵巢、子宫、阴道指数及E2、P含量明显降低，FSH含量明显升高，大鼠卵巢PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白及mRNA水平显著降低（P<0.01)；与模型组比较，左归丸11、33 g/kg组及结合雌激素组的生长卵泡数、黄体数、血管数增多，闭锁卵泡数明显减少，卵巢指数、子宫指数、阴道指数及E2、P水平明显升高，FSH水平明显降低，PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白及mRNA水平显著升高（P<0.05，P<0.01）；与结合雌激素组比较，左归丸33 g/kg组E2、P升高（P<0.05 ），左归丸11、33 g/kg组中生长卵泡数、黄体数、血管数更少，闭锁卵泡数更多，卵巢、子宫、阴道指数，FSH水平，PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白及mRNA水平比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；与左归丸11 g/kg组比较，左归丸33 g/kg组生长卵泡数、黄体数、血管数增多，锁卵泡数减少，卵巢、子宫、阴道指数及E2、P水平均有所上升，FSH水平下降，PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白及mRNA水平升高（P<0.05，P<0.01）。结论?左归丸可能通过上调 PLGF、Flt-1、HGF、c-Met 蛋白及mRNA水平，促进初老大鼠卵巢血管生成，进而改善大鼠卵巢功能，且高剂量优于低剂量。     

诱导肿瘤细胞凋亡的天然药物及其作用机制

从天然产物中选择诱导肿瘤细胞凋亡的药物,是目前国内外寻找与研究抗肿瘤药物的一个重要方向。本文综述了国内外已发现的一些比较重要的能诱导肿瘤细胞凋亡的天然药物及其作用机制。     

黄芪促进高糖环境下肾间质成纤维细胞表达肝细胞生长因子的作用

目的体外研究高糖刺激人肾脏间质成纤维细胞时肝细胞生长因子(HGF)表达,同时进一步观测了黄芪延缓糖尿病肾病进展是否与影响 HGF 表达相关。方法将人肾脏间质成纤维细胞培养于不同浓度葡萄糖中,分不同时间段采用 RT-PCR 方法检测 HGF mRNA 转录水平,ELISA 方法检测 HGF 蛋白分泌。之后用黄芪含药血清刺激细胞,观察 HGF 表达情况。结果高浓度葡萄糖培养的细胞早期就有 HGF 表达,之后表达逐渐下降。说明 HGF 表达与高糖作用存在相关性。结果进一步证实,黄芪含药血清可以显著刺激细胞表达 HGF。结论黄芪可以通过诱导 HGF 的产生,起到抗纤维化作用,从而延缓糖尿病肾病的进展。     

Effect of Runing II on the Growth and Metastasis of Transplanted Tumor in Mammary Cancer-bearing Mice and Its Mechanism

Objective： To study the effect of Runing II （a Chinese herbal preparation for mammary cancer） on the growth and metastasis of transplanted tumor of mammary cancer MA-891-bearing TA2 mice and its mechanism. Methods： The model of mammary cancer MA-891 cell strain transplanted tumor of TA2 mice with lung metastasis were developed to observe the effect of Runing II on the growth and metastasis of the transplanted tumor. The immunohistochemical method and image analysis were adopted to detect the levels of vascular endothelial growth factor （VEGF）, vascular endothelial growth factor receptor （VEGFR）, and micro-vessel count （MVC） and micro-vessel area （MVA）. Results： In the Runing II group, the tumor weight inhibition rate and the lung metastasis inhibition rate were 37.3% and 65.4% respectively, the tumor growth and lung metastasis were obviously inhibited; And the levels of VEGF and VEGFR, MVC and MVA were significantly decreased as compared with those in the tumor-bearing control group （P〈0.05）. Conclusion： The Chinese herbal preparation Running II can inhibit the metastasis of tumor through inhibiting the angiogenesis, and the mechanism is possibly related with down-regulation of VEGF and VEGFR expression.     

鳖甲煎丸对免疫性肝纤维化大鼠肝组织HGF表达的影响

目的:观察鳖甲煎丸对免疫性肝纤维化模型大鼠肝组织肝细胞生长因子(HGF)表达的影响,分析鳖甲煎丸抗肝纤维化的治疗作用并探讨其作用机制.方法:雄性Wistar大鼠90只,随机分为6组:正常对照组、模型组、秋水仙碱预防组、秋水仙碱治疗组、鳖甲煎预防组、鳖甲煎治疗组,采用猪血清诱导免疫损伤性肝纤维化模型.各组于10周后随机取8只大鼠断头处死,取血清,检测血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C);取肝组织,免疫组化染色,用图像分析法检测HGF.结果:各预防组、治疗组血清HA,LN,PCⅢ,Ⅳ-C含量均明显降低(P＜0.01或P＜0.05),但以鳖甲煎预防组、治疗组降低最为明显;各预防组、治疗组大鼠肝脏组织HGF均有表达(P＜0.01或P＜0.05),鳖甲煎预防组、治疗组比秋水仙碱组的表达更为明显.结论:鳖甲煎丸能够抑制肝脏纤维化病理改变,增加HGF的表达,具有明显的抗肝纤维化作用.     

加味栝楼瞿麦汤对糖尿病肾病大鼠肾组织 HGF,IGF-1及VEGF的影响

目的:探讨加味栝楼瞿麦汤对糖尿病肾病大鼠的干预作用.方法:采用单侧肾切除STZ诱导制作糖尿病肾病(DN)模型.分为正常对照组、DN模型组、加味栝楼瞿麦汤低、中、高剂量组、阳性药物(卡托普利)组.治疗组从实验开始第4周起,加味栝楼瞿麦汤高、中、低剂量组分别以5.6,2.8,1.4 g·kg-1ig,卡托普利1.8 x10-3g·kg-1ig,正常组及模型组均给予2.8 mL·kg-1蒸馏水ig,每天1次,连续8周.观察大鼠一般情况,大鼠肾组织肝细胞生长因子(HGF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及血管内皮细胞生长因子(VEGF)的变化.结果:DN模型组大鼠肾组织HGF含量(181.29 ±17.50) ng·L-1,IGF-1含量(8 235.2 ±790.0) ng·L-1,VEGF含量(2421.3±348.3) ng·L-1,均高于正常组,差异显著(P＜0.01);各治疗组中,加味栝楼瞿麦汤中剂量组HGF含量(144.21±26.363 7) ng·L-1、高、中剂量组IGF-1含量(5 303.1 ±944.0),(6 443.1±628.3) ng·L-1,高剂量组VEGF含量(1 547.7 ±566.1) ng·L-1,卡托普利组大鼠肾组织HGF含量(133.6±31.3) ng·L-1,IGF-1含量(3 804.3±604.4) ng·L-1、VEGF含量(1 482.8±299.6)ng·L-1,均低于DN组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:加味栝楼瞿麦汤能够通过下调大鼠肾组织HGF,IGF-1,VEGF的含量,取得改善微循环、增加肾脏血氧供应、加快损伤组织的修复和再生的治疗效果.     

鸦胆子油乳对肺癌 A549 细胞凋亡及血管内皮生长因子分泌的影响

 目的 观察鸦胆子油对肺癌 A549 细胞凋亡和血管内皮生长因子分泌的影响,以探讨其治疗肺癌的作用机制。 方法 用不同浓度鸦胆子油乳（ 0.5 , 1.25 , 2.5 , 3.75 g·L^-1 ）与 A549 细胞共育不同时间（ 6 , 24 , 48 h ）,采用流式细胞仪（ Annexin V 双标法、 DNA 含量测定和 凋亡细胞 DNA 片段原位末端检测等方法）检测凋亡细胞百分比,采用定量 Sandwich 酶免疫技术（ ELISA ）观察细胞血管内皮生长因子（ VEGF ）分泌量。 结果 3 种检测方法均表明, 中、高浓度鸦胆子油乳（ 2.5 , 3.75 g·L^-1 ）作用 6 h 以上,具有显著的诱导 A549 细胞凋亡的作用。 Annexin V 双标法和 DNA 凝胶电泳结果表明, 1.25 g·L^-1 的鸦胆子油乳作用 24 ~ 48 h ,也能诱导 A549 细胞凋亡。 2.5 g · L^-1 鸦胆子油乳作用 48 h 能使 A549 细胞分泌 VEGF 显著减少。 结论 鸦胆子油乳通过诱导肿瘤细胞凋亡,减少肿瘤细胞分泌 VEGF 发挥其治疗肺癌的作用。     

大黄素对人胃癌细胞MKN45增殖抑制及诱导凋亡的研究

目的：研究大黄素（Emodin）对人胃癌细胞MKN45增殖及诱导凋亡的作用。方法：用噻唑蓝（MTT）法观察Emodin对MKN45的生长抑制作用;用DNA Ladder凝胶电泳法、荧光染色法、流式细胞仪法分析Emodin的诱导凋亡作用。结果：与对照组相比,Emodin能明显抑制MKN45细胞的生长且与浓度、时间呈依赖性,其IC50（48小时）为（47.5±0.3）μmol/L;Emodin处理胃癌细胞后,DNA凝胶电泳结果显示呈明显的梯状条带;吖啶橙（AO）染色观察示细胞核内可见浓染致密的颗粒荧光、新月型改变、核固缩或片段化及凋亡小体的形成;流式细胞仪分析Emodin能浓度依赖性诱导MKN45细胞凋亡和G2/M期阻滞。结论：Emodin对人胃癌细胞MKN45有明显的生长抑制作用,且该作用与诱导细胞凋亡有关。     

熊果酸抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长及凋亡的实验研究

目的:探讨熊果酸对人肝癌细胞株SMMC-7721的抑制作用.方法:将不同浓度的熊果酸分别与人肝癌细胞SMMC-7721共同培养24,72 h后,采用中性红染色法测定吸光度(A),评定熊果酸对肝癌细胞株的增殖抑制作用;流式细胞术测定其对肝癌细胞凋亡及细胞周期的影响.结果:不同浓度熊果酸对SMMC-7721细胞的增殖有明显的抑制作用(P＜0.05或P＜0.01),呈时间和剂量依赖关系;24,72 h的半数抑制浓度(IC50)为12.59,8.32 mg·L-1.流式细胞仪检测结果表明,熊果酸12.5 mg·L-1对肝癌SMMC-7721细胞凋亡率14.07％,凋亡率随药物浓度的增加而上升;SMMC-7721细胞阻滞S期,作用与药物剂量呈正相关.结论:熊果酸对肝癌细胞株SMMC-7721增殖有明显的抑制作用,抗肿瘤作用机制可能与诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞于S期有关.     

子宫肌瘤表皮生长因子及其受体临床观察分析

目的：探讨子宫肌瘤患者血清表皮生长因子及肌瘤组织表皮生长因子受体的基因变化。方法：收集子宫肌瘤患者,采用清热化瘀法治疗1个疗程共37例,在治疗前后对比症状、体征、肌瘤体积、血清EGF变化。同时对部分切除子宫肌瘤患者的肌瘤组织及血清做免疫组化基因表达测定表皮生长因子受体（EGFR）。结果：治疗前后症状积分降低〉50%,P〈0.05;肌瘤体积在治疗前后稍有改善,但P〉0.05。EGF在治疗前平均（1.25±0.28）μg/L,治疗后平均（1.07±0.16）μg/L,前后对比P〈0.05。基因测序检测EGFR,观察到肌瘤组织EGFR可发生第19外显子的E746-I759缺失性突变,突变频率为6.2%,而相应病人的血液细胞未能查出突变。结论：清热化瘀药可能下调血清EGF水平,控制子宫肌瘤的发展;通过基因测序可以判断肌瘤的生物学行为。     

人参皂甙与肝细胞生长因子诱导骨髓间质干细胞分化为肝细胞的实验研究

目的探讨人参皂甙(CS)与肝细胞生长因子(HGF)体外诱导骨髓间质干细胞(MSC)分化为肝细胞的协同效应及分子机制。方法采用 Ficoll-Paque 液离心分离鼠 MSC,体外扩增,在 LDMEM 培养液中加入 HGF 和 GS 进行诱导分化。通过细胞形态学观察、免疫组化检测白蛋白、CK8/18的表达以及 RT-PCR 检测白蛋白、CK18等肝细胞特征性蛋白的 mRNA 转录水平、糖原染色等来分析诱导分化的效果。结果鼠MSC 体外扩增3代,细胞数可达(1～2)×10~7左右。加入 HGF 和 GS 诱导后,MSC 形态逐渐分化为肝细胞样,免疫组化染色见胞浆内出现棕黄色颗粒,表达肝细胞特有的白蛋白以及 CK8/18等蛋白。RT-PCR 显示有白蛋白、CK18等的 mRNA 转录。糖原染色亦呈阳性反应。结论人参皂甙与肝细胞生长因子在体外可以诱导骨髓间质干细胞分化为肝细胞样细胞。