染矽尘小鼠肺组织中转化生长因子β1表达的免疫组织化学检测

目的　观察染矽尘小鼠肺组织转化生长因子 β1(TGF β1)蛋白水平的改变 ,研究其在矽肺发病中的意义。方法　采用暴露式气管内注入法给小鼠一次性染矽尘 (0 .2g/kg)。染尘后第 1、3、5、7、14、2 8天每组各处死 8只小鼠 ,取肺组织 ,用免疫组织化学技术检测TGF β1在小鼠肺组织蛋白水平的表达。结果　对照组小鼠肺组织中免疫组化染色呈弱阳性 (± ) ,可见少量TGF β1蛋白 ;染尘组小鼠肺TGF β1表达明显增强 ,免疫组化染色结果为 +～ +++,染尘后第 7～ 14天达高峰。染尘组小鼠肺出现TGF β1表达阳性肺泡巨噬细胞 ,第 5天达高峰 ,其阳性肺泡巨噬细胞百分率为 93.4 %± 2 .8% ,与对照组 (42 .2 %± 12 .0 % )相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　TGF β1在矽肺早期的发生、发展过程中可能有重要作用。     

矽肺动物模型的病理观察

目的 探讨二氧化硅致大鼠及贵州小香猪肺组织纤维化的变化.方法 采用非暴露法建立SD大鼠、贵州小香猪矽肺动物模型,光学显微镜及透视电镜下观察其肺内病理变化,免疫组化法观察肺组织中细胞因子的表达.结果 (1)大鼠及猪矽肺模型主要形态学变化:染尘7～15d,在肺泡腔内可见矽尘、大量的巨噬细胞、尘细胞、肺上皮细胞及少量的中性粒白细胞,形成巨噬细胞肺泡炎及Ⅰ级结节;染尘30～90 d,肺组织的呼吸性细支气管及肺泡内、小叶间隔、血管及支气管周围、胸膜下形成Ⅰ～Ⅲ级结节,少数动物模型可见Ⅳ级结节,伴淋巴细胞浸润.(2)大鼠及贵州小香猪肺组织中细胞角蛋白(CK)、肺表面活性物质相关蛋白A( SP-A)、吞噬细胞(CD68)、碱性成纤维细胞因子(b-FGF)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子(TGF-1)、NF-κB/P50、NF-κB/P65、血管内皮生长因子(VEGF),随着染尘时间的延长,表达逐渐减弱,但仍高于对照组.60～90 d CD68仍呈阳性表达.(3)电镜观察肺泡上皮和巨噬细胞的变化:在SiO2刺激下,肺泡Ⅰ型上皮脱落,Ⅱ型上皮细胞及巨噬细胞增生,且细胞功能活跃.结论 建立的大鼠及猪肺纤维化模型符合巨噬细胞肺泡炎至纤维化的演变过程.     

实验性大鼠矽肺纤维化中核转录因子Sp1的表达及作用

目的初步探讨核转录因子Sp1在实验性矽肺发生发展中的作用。方法复制SD大鼠矽肺模型,用免疫组织化学法检测体内SiO2刺激的肺巨噬细胞、肺泡Ⅱ型上皮细胞等肺纤维化效应细胞中核转录因子Sp1蛋白表达的定位和动态变化。结果大鼠实验性矽肺模型中,SiO2刺激组与空白对照组相比,肺巨噬细胞、肺泡Ⅱ型上皮细胞、肺间质细胞中转录因子Sp1蛋白表达上调,于染尘后第14天达高峰。结论SiO2能上调肺内多种细胞Sp1的表达,Sp1可能在矽肺的发生发展过程中起重要作用。     

γ-干扰素对染矽尘大鼠肺脏成纤维生长因子-b和转化生长因子-β1蛋白表达的影响

目的　研究γ -干扰素 (IFN γ)对矽肺大鼠肺成纤维生长因子 -b (FGF b)和转化生长因子 - β1(TGF β1)蛋白表达的影响。 方法　采用一次性气管内非暴露法给予雌性Wistar大鼠染尘 (石英粉尘2 0mg/鼠) ,染尘后第 2天开始每天注射IFN γ (1× 10 5IU/鼠 ) ,分别在染尘后 1个月和 2个月时处死动物。病理染色观察实验动物肺组织病理改变 ,免疫组化SABC法观察各组实验动物肺组织FGF b和TGF β1蛋白表达情况 ,并采用图像分析系统对各组蛋白表达进行定量分析。结果　IFN γ治疗组大鼠的矽肺纤维化程度明显轻于石英组。图像定量分析结果表明 ,染尘后 1个月时 ,石英组和治疗组FGF b阳性细胞积分光密度值分别为 (0 93± 0 2 6 )× 10 4,(0 97± 0 19)× 10 4,染尘后 2个月时分别为 (0 89± 0 0 8)× 10 4,(0 80± 0 17)× 10 4,两个时点与对照组比较 ,差异均无显著性。染尘后 1个月至 2个月 ,石英组和IFN γ治疗组TGF β1阳性细胞积分光密度值均呈升高趋势 ,其中治疗组升高有显著意义 (P <0 0 5 )。IFN γ治疗组大鼠肺中TGF β1阳性细胞积分光密度值明显低于石英组 (P <0 0 1)。 结论　FGF b在石英组和治疗组中未见表达增高 ,TGF β1表达增高 ,IFN γ对TGF β1的表达具有抑制作用。     

实验性糖尿病大鼠肺组织晚期糖基化终末产物、肺表面活性物质蛋白质A免疫组织化学分析

目的 探讨实验性糖尿病（diabetes mellitus,DM）大鼠肺组织晚期糖基化终末产物（advanced glycosylated endproducts,AGEs）、肺表面活性物质蛋白质A（surfactant proteins A,SP-A）的变化.方法 48只SD雄性大鼠随机分为DM组和对照组,每组24只.链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）60mg/kg尾静脉注射制造DM模型.分别于造模成功后4、12、20周末杀检.免疫组织化学方法 观察肺组织AGEs、SP-A的变化,并进行图像分析（灰度值以0为黑,最大值为白）.结果 （1）AGEs：DM大鼠肺泡上皮细胞、支气管黏膜上皮细胞、血管内皮细胞及平滑肌细胞可见大量AGEs阳性细胞,平均灰度值低于对照组（4周93.92±7.92 vs 104.75±8.20;12周76.25±6.76 vs 93.50±7.56;20周47.63±7.96 vs 142.38±19.76;P均＜0.05）,随着DM病程的增加逐渐降低.（2）SP-A：4周DM大鼠肺泡Ⅱ型细胞、肺泡巨噬细胞、克拉拉细胞可见少量阳性细胞,12、20周可见大量SP-A阳性细胞,平均灰度值均低于对照组（12周75.63±6.70 vs 110.50±13.20;20周47.38±4.84 vs 97.25±9.87;P均＜0.01）.结论 DM大鼠随着病程的增加,出现肺泡Ⅱ型细胞的损伤,可能与AGEs的沉积有关.     

支气管肺泡灌洗术治疗大鼠矽肺的组织形态学观察

目的支气管肺泡灌洗术(BAL)能否治疗矽肺仍有异议,进行其实验研究,可为临床治疗提供科学依据。方法观察各组大鼠BAL后的组织学改变,用免疫细胞化学法观察其肺巨噬细胞数量的变化。结果染尘后的大鼠肺,经灌洗后肺泡腔内容物减少,肺泡隔厚度变薄,肺组织的细胞密度较前下降(包括肺泡腔及肺泡隔中的巨噬细胞数),且差别有显著意义(P＜0．01)。肺问质的粉尘,可通过清除肺泡隔内的巨噬细胞而清出。结论BAL对延缓矽肺病变的发生、发展起积极作用。     

职业医学

03 0 68 9　矽肺纤维化体外细胞模型的建立 /马海燕…∥中华劳动卫生职业病杂志 2 0 0 1 ,1 9( 4 ) 2 89～ 2 91根据SiO2 对不同类型细胞的增殖效应 ,建立矽肺纤维化的体外细胞模型。以不同剂量的SiO2 刺激SD大鼠肺泡巨噬细胞 (PAM)及佛波酯 (TPA)诱导分化THP -1 (具有PAM特性的人血单核细胞株 )细胞的培养上清液 ,分别作用于中国仓鼠肺成纤维细胞 (CHL)和貂肺上皮细胞 (CCL_64) ,采用四唑盐 (MTT)比色法测定其增殖效应 (以A570 nm值表示 )。结果 ,在 0、5 0、1 0 0、2 0 0、5 0 0 μg mlSiO2 浓度范围内 ,用体积分数为 5 %…     

博莱霉素致大鼠肺纤维化及与肺血管内皮细胞损伤的关系

目的 探讨血管内皮损伤与博莱霉素(BLM)致大鼠肺纤维化发生间的关系。方法 实验组大鼠经气管灌注BLM制作肺纤维化模型,采用免疫组化及图像分析系统对其肺组织中血管内皮细胞生长因子(VEGF)进行定性、定量分析。结果 (1)组织学观察:染BLM后3、7 d,大鼠肺泡腔及间隔水肿,炎细胞渗出,肺泡Ⅰ型及Ⅱ型上皮细胞变性、坏死,肺泡上皮细胞基底膜断裂,血管内皮细胞肿胀,核浓缩;7、14 d,大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞增生,肺泡间隔有较多成纤维细胞及新生毛细血管形成;28 d,大鼠肺泡间隔增厚,肺泡结构破坏,肺组织明显纤维化样改变。(2)VEGF免疫组化染色:对照组大鼠肺组织呈弱表达,主要分布于肺泡Ⅱ型上皮细胞、支气管黏膜上皮细胞、肺泡巨噬细胞及肺间质细胞。染BLM组大鼠VEGF呈明显高表达,其中,3 d至28 d,大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞VEGF持续高表达,表达量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);7、14、28 d,大鼠肺间质细胞VEGF呈高表达;3 d至28 d,大鼠肺泡巨噬细胞VEGF表达均升高,与对照组的差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 VEGF持续高表达与大鼠血管内皮细胞损伤有关,而血管内皮细胞的损伤可能是BLM诱发大鼠肺纤维化的重要启动因素之一。     

实验性矽肺早期病变中肺泡Ⅱ型细胞增生的病理学意义

目的 探讨肺泡Ⅱ型细胞增生在矽肺纤维化中的意义。方法 建立大鼠实验性矽肺早期病变模型,光镜和电镜观察其肺内病变及肺泡Ⅱ型细胞增生;用免疫组织化学、原位杂交、免疫电镜、原位杂交与免疫组织化学双标技术检测其肺泡Ⅱ型细胞内转化生长因子β（TGFβ1）和血小板源性生长因子－B（PDGF－B）的基因表达。结果 （1）大鼠矽肺模型主要形态学改变：灶性间质性炎症,细胞结节和轻度纤维组织增生,肺泡Ⅱ型细胞明显增生。（2）实验组大鼠增生的 肺泡Ⅱ型细胞TGFβ1mRNA呈弱阳性,未见TGFβ1蛋白、PDGF－BmRNA和蛋白表达。结论 肺泡Ⅱ型细胞增生是矽肺早期的病变之一;增生的肺泡Ⅱ型细胞TGFβ1和PDGF－B基因表达上调,在矽肺纤维化的早期病变中可能起重要作用。     

熊果酸对矽肺大鼠肺泡巨噬细胞数量和波形蛋白表达的影响

目的研究熊果酸对矽肺大鼠肺泡巨噬细胞(AM)数量和波形蛋白表达的影响。方法将无特定病原体级Wistar大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、矽肺组和熊果酸组,每组20只。空白对照组大鼠不予任何处理,其余3组大鼠均通过非暴露式气管滴注法一次性予剂量为250 mg/kg体质量的游离二氧化硅混悬液。其后,空白对照组和矽肺组大鼠灌胃剂量为10 m L/kg体质量的0. 9%氯化钠溶液,溶剂对照组大鼠灌胃10 m L/kg体质量为0. 6%的羧甲基纤维素钠溶液,熊果酸组大鼠灌胃剂量为40 mg/kg体质量的熊果酸,1次/d,连续56 d。在灌胃第7、14、28、56天时各组分别处死5只大鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)检测AM数量,采用免疫组织化学法和免疫印迹法检测肺组织中波形蛋白的表达。结果溶剂对照组和矽肺组大鼠4个时间点BALF中AM数量和肺组织中波形蛋白相对表达水平均高于同时间点空白对照组(P 0. 05)。熊果酸组大鼠BALF中AM数量在4个时间点分别低于同时间点溶剂对照组和矽肺组(P 0. 05),在第7和14天均高于同时间点空白对照组(P 0. 05),但在第28和56天分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P 0. 05)。熊果酸组大鼠4个时间点肺组织中波形蛋白相对表达水平分别低于同时间点溶剂对照组和矽肺组(P 0. 05),高于同时间点空白对照组(P 0. 05)。免疫组织化学法结果显示:建立矽肺模型后,溶剂对照组和矽肺组大鼠肺组织纤维化程度逐渐加重,波形蛋白阳性表达在各时点有不同程度增加;熊果酸组大鼠肺组织中波形蛋白表达趋势与上述2组相似,但肺组织纤维化程度和肺泡结构破坏程度均相对较轻,波形蛋白阳性表达相对减弱。结论熊果酸可减少矽肺大鼠肺泡巨噬细胞的数量,下调波形蛋白的表达。     

抗纤维化短肽对大鼠矽肺纤维化MCP-1、ED-1表达的影响

目的探讨抗纤维化短肽N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对大鼠肺内单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、ED-1表达的影响在拮抗矽肺纤维化形成过程中的作用。方法气管内灌尘法制作大鼠矽肺纤维化动物模型,实验大鼠随机分为6组,包括:对照1组,对照2组和矽肺模型1组,矽肺模型2组,矽肺抗纤维化治疗组,矽肺预防治疗组。采用HE染色对矽肺纤维化病变及其变化特点进行形态学观察;采用羟脯氨酸法对矽肺大鼠肺内胶原含量进行检测;采用免疫组织化学方法检测各组大鼠肺组织中MCP-1的表达与巨噬细胞(ED-1阳性)的数量。结果抗纤维化治疗组与矽肺模型1组与2组相比,矽结节面积下降到84.28%和67.93%,羟脯氨酸含量下降到70.89%和58.18%,MCP-1蛋白表达下降到82.3%和84.1%,MCP-1阳性细胞数下降到67.4%和72.5%,ED-1蛋白表达下降到78.7%和79.3%,ED-1阳性细胞数下降到54.4%和66.8%;预防治疗组与矽肺模型2组相比,矽结节面积下降到61.13%,羟脯氨酸含量下降到60.27%,MCP-1蛋白表达和阳性细胞数分别下降到85.2%和86.3%,ED-1蛋白表达和阳性细胞数分别下降到87.2%和74.9%。结论AcSDKP具有拮抗矽肺纤维化的作用,这可能与其抑制巨噬细胞在肺内的浸润、聚集,减轻了尘性肺泡炎的程度相关。     

γ-干扰素对矽肺大鼠肺脏白介素-4和转化生长因子-β1蛋白表达的影响

目的 研究γ-干扰素(IFN-γ)对矽肺大鼠肺中白介素-4(IL-4)和转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白表达的影响。方法 气管内非暴露法给大鼠染石英粉尘20 mg,第2天开始每日注射IFN-γ(1×105IU),分别在染尘后1个月和2个月时每组各处死半数动物,HE和VG染色观察其肺组织病理改变,免疫组化SABC法观察其肺组织IL-4和TGF-β1蛋白表达情况,用图像分析系统进行定量分析。结果 (1)IFN-γ治疗组大鼠的矽肺纤维化程度明显轻于石英对照组,病理分级较石英对照组减轻半级-1级。(2)图像定量分析结果表明,染尘后1个月,石英对照组IL-4阳性细胞积分光密度值为(3.33±1.27)×104,染尘后2个月降至(1.99±0.80)×104,TGF-β1阳性细胞积分光密度值从(3.67±0.63)×104升至(4.90±1.11)× 104;IFN-γ治疗组IL-4阳性细胞积分光密度值从(2.19±0.90)×104降至(0.61±0.22)× 104,TGF-β1阳性细胞积分光密度值从(1.37±0.31)×104升至(1.76±0.72)×104,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。在这两个时点,IFN-γ治疗组大鼠肺中IL-4、TGF-β1阳性细胞积分光密度值均低于石英对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 IFN-γ对矽肺大鼠肺中IL-4和TGF-β1的表达具有一定的抑制作用。     

经SiO2活化的硅肺患者肺泡巨噬细胞对肺成纤维细胞的增殖作用

[目的]探讨硅肺患者肺灌洗液中巨噬细胞(AM)经SiO2粉尘刺激,得到的AM培养上清对肺成纤维细胞(FB)增殖的作用。[方法]收集硅肺患者支气管肺泡灌洗液中的AM,进行SiO2再次染尘,取得培养上清,刺激肺成纤维细胞。应用MTT法检测FB的增殖情况,流式细胞仪法分析FB各期细胞分布比例(即细胞增殖情况)的改变。[结果]经SiO2刺激硅肺患者AM培养上清,可使FB增殖活性增强,细胞增殖指数(proliferous index,PI)明显增加。[结论]经SiO2活化的硅肺患者肺泡AM对肺成纤维细胞有促增殖作用。     

染铅大鼠肾脏纤维化相关基因的表达

目的通过观察染铅大鼠肾脏纤维化相关基因核因子κB(NFκB)、转化生长因子β(TGFβ)和纤维连接蛋白(FN)的表达,探讨铅导致大鼠肾脏纤维化的分子机制。方法将32只大鼠分为4组:对照组、1个月染铅组、2个月染铅组、3个月染铅组,分别以蒸馏水、质量分数为0.5%的醋酸铅喂饮。应用免疫组化的方法检测肾皮质NFκB、TGFβ及FN的表达情况,并用逆转录-聚合酶链式反应(RTPCR)的方法检测肾皮质中上述指标mRNA的表达。结果染铅组NFκB蛋白的表达增加(1、2、3个月染铅组分别为0.2315±0.0624、0.3213±0.0740、0.4729±0.0839),与对照组(0.1464±0.0624)相比,差异有统计学意义(P<0.05);3组染铅组NFκBmRNA的表达也明显增加,其与相应内参照的灰度比分别为0.4370±0.0841、0.5465±0.0503、0.6443±0.0538,与对照组(0.3608±0.0550)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。3个月染铅组TGFβmRNA表达(0.5225±0.0416)明显增强,与对照组的差异有统计学意义(P<0.05),其余组与对照组(0.4645±0.0461)相比,差异无统计学意义(P>0.05),免疫组化结果显示,TGFβ在各组中的差异无统计学意义(P<0.05)。FN蛋白的表达在2个月组(0.4243±0.0595)和3个月组(0.4917±0.0891)与对照组(0.3530±0.0490)比较,差异有统计学意义(P<0.05);其mRNA的表达同样在2个月组(0.8650±0.0880)和3个月组(0.8714±0.0980)与对照组(0.7432±0.0639)的差异有统计学意义(P<0.05)。结论染铅大鼠肾脏NFκB、TGFβ及FN表达增加可能为铅所导致肾脏纤维化的重要环节。     

单核细胞株在矽肺体外研究中的应用

目的 探索具有肺泡巨噬细胞特性的人血单核细胞株（ＴＨＰ－１细胞）在矽肺发生机制体外研究中的应和。方法 观察二氧化硅（ＳｉＯ２）刺激ＴＨＰ－１细胞或佛波酯（ＰＭＡ）诱导分化的ＴＨＰ－１细胞培养上清液对成纤维细胞（ＣＨＬ）增殖和核仁组成区相关的嗜银蛋白（Ａｇ－ＮＯＲｓ）形成,肺泡上皮细胞（ＣＣＬ－６４）迁移以及大鼠矽肺样病变发生的影响。同时对ＰＭＡ诱导分化的ＴＨＰ－１细胞受ＳｉＯ２刺激的化学发光进行研     

矽肺肺泡巨噬细胞对肺成纤维细胞基质金属蛋白酶及其组织抑制因子表达的影响

目的 探讨矽肺患者的肺泡巨噬细胞(AM)是否通过影响肺成纤维细胞(FB)基质金属蛋白酶(MMPs)/金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)系统参与矽肺纤维化的发生发展。方法 收集矽肺患者AM培养上清,与人胚肺FB共同孵育6、12、18、24、36、48 h,用免疫细胞化学的方法检测FB中MMP-1和TIMP-1的表达。结果 未经SiO2刺激的矽肺患者AM培养上清作用于FB 24 h,FB中MMP-1的表达较空白对照组减少(积分光密度值分别为0.103±0.014、0.133±0.023),TIMP-1的表达增多(积分光密度值分别为0.108±0.012、0.065±0.006);经SiO2刺激24 h的矽肺患者AM培养上清作用于FB后,FB中MMP-1的表达量进一步减少(积分光密度值分别为0.062±0.008、0.133±0.023),而TIMP-1的表达量进一步增加(积分光密度值分别为0.143±0.015、0.065±0.006)。结论 SiO2可能通过AM的介导影响了FB中MMP-1/TIMP-1系统的表达,参与了肺纤维化的形成。     

细胞外信号调节激酶通路对二氧化硅活化的肺成纤维细胞增殖的影响

目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK)信号转导通路对经SiO2活化的矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)条件上清刺激的人胚肺成纤维细胞(HELF)增殖的影响.方法 将矽肺患者支气管肺泡灌洗液中的AM体外再次染尘,取其上清与HELF共同孵育,用特异性阻断剂PD98059进行干预,实验分为空白对照组、AM对照组、SiO2处理组、PD98059干预组,通过噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术法及免疫印迹(Western blot)法观察成纤维细胞细胞增殖活性及p-ERK1/2蛋白表达情况.结果　SiO2处理组及AM对照组细胞增殖的吸光度(A值)增高,分别是空白对照组的2.6和2.0倍,差异有统计学意义(P＜0.05).25和50 μmol/L PD98059组HELF细胞增殖的A值分别是SiO2处理组的72.1%和48.5%,差异有统计学意义(P＜0.05).经SiO2粉尘刺激的AM培养上清作用于HELF后,p-ERK1/2表达明显上调,15min时已有表达,30min时活化明显,表达最强(A值为0.4653±0.0265),60min后仍处于较高的状态而表达有所减弱.除15 min外,SiO2处理组各时间点ERK1/2的蛋白表达分别是同期AM对照组的1.25、1.23、1.25倍,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 加尘AM培养上清可能通过ERK1/2信号途径促进HELF的增殖及ERK1/2的活化,而参与矽肺的发生发展.     

矽肺肺泡巨噬细胞对肺成纤维细胞基质金属蛋白酶及其抑制因子和胶原表达的影响

目的 探讨经SiO2刺激的肺泡巨噬细胞(AM)通过人胚肺成纤维细胞(HELF)对基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其抑制因子(TIMP-1)和Ⅲ型胶原表达的影响.方法 收集矽肺患者AM,将其分为加入SiO2粉尘悬液的处理组和仅加入无血清培养液的对照组.培养18 h后吸出培养上清.将原代培养的HELF分为4组:(1)处理组:加入经SiO2刺激的AM上清;(2)对照组:加人未经SiO2刺激的AM上清;(3)10%血清组:仅加入含体积分数为10%胎牛血清的DMEM;(4)空白对照组:仅加入含体积分数为3%胎牛血清的DMEM.4组均分别于6、12、18、24、36、48 h取出细胞爬片,吸出上清,用免疫细胞化学方法 检测HELF中MMP-1和TIMP-1的表达,用Western blot法检测HELF条件培养上清中Ⅲ型胶原的表达.结果 处理组18、24、36、48 h MMP-1表达分别为0.0605±0.0201,0.0519±0.0117,0.0412±0.0105,0.0213±0.0106,较对照组和空白对照组明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).与对照组和空白对照组相比,处理组各时间点TIMP-1表达和Ⅲ型胶原含量明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),TIMP-1/MMP-1与Ⅲ型胶原呈正相关(r=0.88,P<0.01).结论 SiO2经AM的介导可促进FB表达TIMP-1和Ⅲ型胶原,抑制HELF表达TIMP-1,TIMP-1/MMP-1的失衡与Ⅲ型胶原的病理性累积有关.     

矽肺肺泡巨噬细胞对人胚肺成纤维细胞Ⅰ型胶原表达的体外研究

目的探讨矽肺患者的肺泡巨噬细胞(AM)是否通过影响肺成纤维细胞(FB)胶原的表达,参与矽肺纤维化的发生发展。方法收集矽肺患者AM,经SiO_2体外刺激18 h收集培养上清,与人胚肺FB共同孵育6、12、18、24、36、48、72 h,用~3H-脯氨酸掺入检测48 h胶原的合成与分泌,免疫细胞化学方法、Western blot方法检测各时间点Ⅰ型胶原表达。结果经SiO_2刺激矽肺患者AM培养上清,可使FB中Ⅰ型胶原的表达增高,实验组48 h细胞内、外3H-脯氨酸掺入值分别为1259.500±73.879、790.500±70.315,免疫细胞化学染色的积分光密度值为0.341±0.011,Western blot条带扫描灰度值为14.218±0.342,均明显高于空白对照组及AM对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论SiO_2可通过AM介导影响FB中Ⅰ型胶原表达,参与肺纤维化的形成。