中药银杏叶提取物联合腺病毒介导神经营养素-3基因的神经干细胞移植治疗急性脊髓损伤的实验研究

目的:明确经腹腔注射中药银杏叶提取物是否对腺病毒介导NT-3基因的神经干细胞移植治疗急性脊髓损伤存在干预作用。方法:采用ALLEN打击法造模成功后随机分组:即模型对照组(A)、腺病毒介导NT-3基因的神经干细胞移植组(B)、中药银杏叶提取物联合腺病毒介导NT-3基因的神经干细胞移植组(C)、单纯腹腔注射中药银杏叶提取物组(D)。于2、6、8周各组大鼠取材,进行运动功能评分、每组5只行电生理检查、免疫组织化学染色、图像分析。结果:C组8周后大鼠BBB评分为6.24±0.15;术后2周,B组和C组的皮层体感诱发电位消失,移植后8周B、C组的波形恢复,但潜伏期延长(P0.05)。C组与B组比较潜伏期明显缩短(P0.05)。术后8周C组阳性细胞主要见于脊髓室管膜区,与B组比较染色面积较大,着色较深;术后2周,各组动物皮质脊髓束均有液化灶形成,6周后B、C组皮质脊髓束损伤区逐渐有新生的神经纤维束穿过。8周后B、C组皮质脊髓束损伤区新生的神经纤维束明显增多(P0.05)。结论:中药银杏提取物联合腺病毒介导NT-3基因的神经干细胞移植能够促进损伤神经元的修复或再生,明显改善损伤脊髓的传导功能,增加皮质脊髓束损伤区的神经纤维束数目,对急性脊髓损有临床治疗作用。     

银杏叶提取物的神经保护作用机制概述

银杏叶是我国的传统中药，银杏叶制剂在临床上，特别是心脑血管疾病方面的治疗上已经有了广泛的应用，大量研究表明，人类很多疾病都与神经损伤有相当密切的关系。神经保护制剂的作用机制研究已经成为了现代医学的研究热点，本文就银杏叶提取物在神经保护方面的作用机制作一综述。     

银杏叶提取物EGb761对中枢脱髓鞘大鼠神经保护作用的研究

目的 研究银杏叶提取物EGb761对实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）大鼠的神经行为学及脑脊髓组织病理改变.以探讨EGb761对脱髓鞘疾病的神经保护及髓鞘再生的作用.方法 将Wistar大鼠随机分为3组,正常对照（NC）组,EAE组,BGb761组.诱导Wistar大鼠BAE模型,同时以EGb761分别于免疫当日开始治疗,并观察神经行为改变;全部动物于免疫第14d取脑,脊髓,常规病理切片,HE染色.结果 与EAE组相比,EGb761组推迟了EAE发病时间,其临床评分在疾病高峰时有明显下降.BGb761组较EAE组,脑和脊髓炎性细胞浸润,神经元肿胀、变性、坏死明显减轻.正常对照组未见异常.结论 EGb761使EAE大鼠减轻了脱髓鞘症状,减轻组织中神经髓鞘及神经元的损伤,对神经有保护作用,并促进神经髓鞘的再生.     

银杏叶提取物的神经保护机制的研究进展

文章综述了银杏叶提取物具有的清除自由基、抑制血小板活化因子、抑制NO合梅、抑制谷氨酸毒性、保护线粒体等生理作用,并就其在神经保护方面的作用机制作了较详细的概述。     

银杏叶提取物对反复脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究银杏叶提取物（ＦＧＥ）对反复脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：采用清醒小鼠造成反复脑缺血再灌注模型，应用避暗法、跳台法、比色法观察了ＦＧＥ对小鼠行为、氧自由基代数有前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）含量的影响。结果：ＦＧＥ可以明显改善反复脑缺血再灌注小鼠的学习、记忆能力，同时可不同程度地抑制其脑组织中异常升高的丙二醛、一氧化氮和ＰＧＥ２含量，并可明显增强脑组织中降低的超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性     

银杏叶提取物对Aβ诱导神经毒性的保护作用

目的:研究不同剂量银杏叶(ginkgo biloba extract,EGb761)对Aβ诱导神经元损伤的影响。方法:取高、中、低剂量的EGb761质量浓度分别为100,10,1 mg·L-1预处理Aβ1-42干预的神经元,检测神经元活力、凋亡率及NeuN染色的变化。结果:与Aβ组相比,高和低剂量EGb761组的神经元活力和NeuN+细胞数存在显著差异(P<0.05),而中剂量EGb761组神经元活力和NeuN+细胞数均存在极显著差异(P<0.01);中剂量EGb761组的对神经元凋亡的保护作用优于高、低剂量EGb761组。结论:高、中、低剂量组银杏叶制剂均可提高损伤海马神经元活力、提高NeuN+细胞数,降低神经元凋亡率;尤以中剂量组显著。提示采用预处理的给药方式可保护Aβ诱导的神经元损伤。     

银杏叶提取物的胃粘膜保护作用

采用大鼠束缚－冷冻应激模型和小鼠无水乙醇损伤模型观察银杏叶提取物对胃摹员伤指数的影响;采用幽门结扎法收集胃液,观察ＧｂＥ对胃液分泌量,胃液酸度和胃蛋白酶活性的影响;采用硫代巴比妥酸法测定胃粘膜及血清中丙二醛的含量。结果表明,ＧｂＥ可剂量依赖性地抑制束缚－冷冻应激和无水乙醇引起的胃粘膜损伤。     

银杏叶提取物对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌功能的保护作用

目的:探究银杏叶提取物对心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)大鼠心肌功能的保护作用。方法:50只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(Mod组)、银杏叶提取物高剂量组(GBE-H组,600mg/kg),银杏叶提取物剂量组(GBE-L组,300mg/kg),每组10只。连续灌胃给药7天后建立大鼠MI/RI模型。测量各组大鼠舒张末期左室内径(LVIDd)、收缩末期左室内径(LVIDs)、短轴缩短率(FS)、射血分数(EF)、每搏输出量(SV);计算心脏/体质量比及心肌梗死面积;检测血清心肌酶[谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)]含量;计算凋亡指数(AI);测定心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:与Sham组比较,Mod组大鼠LVIDd及LVIDs升高,FS、EF及SV降低(P均0.05);AI、心脏/体质量比、心肌梗死面积明显增大(P0.05);血清心肌酶含量明显升高(P0.05);心肌组织SOD及CAT活性降低,MDA含量升高(P均0.05)。与Mod组比较,GBE-H组及GBE-L组大鼠LVIDd及LVIDs降低,FS、EF及SV升高(P均0.05);AI、心脏/体质量比、心肌梗死面积明显减小(P0.05);血清心肌酶含量均明显降低(P0.05);心肌组织SOD及CAT活性升高,MDA含量降低(P均0.05)。结论:银杏叶提取物对MI/RI大鼠的心肌功能有显著的保护作用,其机制可能与银杏叶提取物提高氧自由基清除能力,降低脂质过氧化损伤,减轻心肌梗死程度有关。     

迷迭香酸对大鼠急性脊髓损伤的神经保护作用及其机制

目的:探究迷迭香酸(RA)对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)的神经保护作用及其机制。方法:50只SD大鼠随机分为5组,即假手术组(Sham组)、急性脊髓损伤组、迷迭香酸低、中、高剂量组(RA-L、RA-M、RA-H组),除Sham组外均建立大鼠急性脊髓损伤模型,造模成功后,Sham组和急性脊髓损伤组灌胃等量生理盐水,而RA-L组、RA-M组、RA-H组灌胃5,20,40 mg/kg剂量迷迭香酸。在给药后第3,7,14,28天进行BBB评分;ELISA法检测脊髓损伤组织SOD、GSH-PX、MDA、TNF-α、IL-1β、IL-10、NO;Western Blot法检测脊髓损伤组织iNOS、BDNF、p-NF-κB、p-p38 MAPK蛋白表达。结果:与Sham组比较,急性脊髓损伤组造模后第3,7,14,28天后BBB评分降低;与急性脊髓损伤组比较,给药第3,7,14,28天后,RA-L组、RA-M组、RA-H组BBB评分升高。与Sham组比较,急性脊髓损伤组SOD、GSH-PX活性降低,MDA含量、TNF-α、IL-1β、IL-10、NO含量增加,iNOS、BDNF、p-NF-κB、p-p38 MAPK蛋白表达水平上调;与急性脊髓损伤组比较,RA-L组、RA-M组、RA-H组SOD、GSH-PX活性升高,MDA含量、TNF-α、IL-1β、IL-10、NO含量降低,iNOS、BDNF、p-NF-κB、p-p38 MAPK蛋白表达水平下调。结论:迷迭香酸可能通过抑制NF-κB、p38 MAPK信号通路减轻大鼠急性脊髓损伤组织氧化应激反应及炎症反应,对大鼠急性脊髓损伤的神经有保护作用。     

银杏叶提取物对大鼠急性肾缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的:研究银杏叶提取物对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用。方法:肾缺血45 min再灌注4 h建立大鼠急性肾缺血再灌注损伤模型,用银杏叶提取物预处理,测定肾皮质丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性、Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的活性,血浆肌酐和尿素氮的水平,并观察肾脏病理学改变。结果:缺血再灌注损伤后,肾皮质MDA含量升高,SOD,Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的活性下降;血浆BUN和Cr水平升高;肾组织出现明显的病理改变。银杏叶提取物预处理能降低肾皮质丙二醛含量;提高超氧化物歧化酶、Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的活性;降低血浆肌酐和尿素氮水平;肾组织病理改变明显减轻。结论:银杏叶提取物对大鼠急性肾缺血再灌注损伤具有保护作用。     

bFGF基因修饰骨髓间充质干细胞在大鼠脊髓损伤模型中的表达

目的：探讨bFGF基因修饰骨髓间充质干细胞（Bone Marrow—derived）。方法：96只清洁级成年雄性Sprague—Darley大鼠,随机分为目的基因bFGF修饰BMSCs组（pcDNA3．1-bFGF组）、空载质粒pcDNA3．1修饰BMSCs组（pcDNA3．1组）、骨髓间充质干细胞组（BMSCs组）和DMEM组（DMEM组）,每组24只,采用Allen氏脊髓损伤模型,于损伤点注射上述各组相关细胞及培养基DMEM,在注射后1d、7d、14d、21d取损伤脊髓组织,用免疫组织化学及RT-PCR法检测bFGF表达情况。结果：基因修饰组术后各时间点脊髓组织中bFGF表达较空载组和BMSCs组明显增高（P〈0．01）,并于7d或14d表达最明显（P〈0．01）。结论：bFGF基因修饰BMSCs移植可以在脊髓损伤模型中表达。     

甲基泼尼松龙冲击疗法对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的影响

目的观察甲基泼尼松龙(MP)对脊髓损伤大鼠脊髓胶质细胞、神经元凋亡的影响。方法将72只健康成年大鼠随机分为单纯损伤组及MP组各36只,制成脊髓损伤动物模型。MP组经大鼠尾静脉给予MP冲击治疗,单纯损伤组经大鼠尾静脉每日注射生理盐水0.2 mL。2组大鼠分批于1,3,5,8,14,21 d各处死6只,常规制成脊髓切片,行Bcl-2检测,TUNEL原位末端标记,检测大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的情况。结果单纯损伤组Bcl-2高峰发生在损伤后3 d,而MP组于伤后1 d达到高峰。此时Bcl-2蛋白在神经细胞中表达,在胶质细胞中大量表达,且一直维持到伤后14 d才开始下降,伤后21 d仅少量表达(P<0.05)。TUNEL原位标记检测单纯损伤组24 h已出现不少阳性细胞,以胶质细胞为主,3~8d达到高峰,此后逐渐回落,但21 d时仍有阳性细胞;MP组凋亡细胞明显减少(P<0.05)。结论MP在脊髓损伤中通过改善微循环,促进Bcl-2蛋白表达,清除氧自由基,抑制脊髓损伤早期神经细胞和胶质细胞的凋亡,从而减轻脊髓继发性损伤,促进脊髓神经功能的恢复。     

火针对大鼠脊髓损伤后运动功能及BDNF表达的影响

[目的]探讨火针对脊髓损伤后运动功能及脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。[方法]将60只SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组和火针组。采用改良Allen法制作脊髓损伤动物模型。火针组术后即刻及其后每隔24 h火针针刺大鼠脊髓损伤部位上下端的棘突间隙,另两组相应时间点行相同抓握。于伤后1、3、5、7 d采用大鼠脊髓损伤后运动功能(BBB)评分标准进行不同时段的行为学评分并取材。通过免疫组化法观察各组大鼠脊髓损伤后BDNF表达的变化。[结果]BBB评分显示,火针组的各时间点评分均高于模型组,特别是在造模并干预7 d后效果更加显著(P<0.05)。与假手术组相比,模型组和火针组的BDNF表达在各时间点均增加,火针组3、5、7 d的BDNF表达均高于模型组,差异具统计学意义(P<0.05)。BBB评分与BDNF表达量相关性分析显示两者呈高度相关。[结论]火针可促进大鼠脊髓损伤后运动功能恢复,其机制与促进BDNF表达有关。     

复方丹参注射液对大鼠脊髓损伤后肢体运动功能的影响

目的 :观察复方丹参注射液治疗脊髓损伤后肢体运动功能的变化 ,探讨丹参对大鼠脊髓损伤的保护和促进修复作用及其作用机理。方法 :大鼠按Allen改良法制备脊髓损伤动物模型 ,分别在术前和术后用复方丹参注射液腹腔注射。用斜板试验法和BBB(Bosso ,BeattieandBresnahan )评分法观察大鼠脊髓损伤后运动功能的变化。结果 :用药组大鼠脊髓损伤后肢体运动功能恢复较快 ,术前与术后用药组动物的运动功能恢复程度无显著性差异。结论 :丹参对大鼠实验性急性脊髓损伤后运动功能的恢复有促进作用。     

针灸治疗脊髓损伤机制研究进展

脊髓损伤是多种外伤所致中枢神经系统损伤的一种疾病,针灸可有效治疗脊髓损伤造成的一系列并发症.随着实验技术的发展,研究人员发现部分针灸治疗脊髓损伤的机制,但尚不明确.文章总结了近年来针灸疗法治疗该病的机制研究文献,通过抑制神经细胞凋亡、改善脊髓损伤区域微环境、促进轴突细胞延伸及神经纤维再生等作用机制对针灸治疗脊髓损伤的机...     

脊髓损伤致截瘫病人生存质量与家庭支持的相关性研究

目的：探讨脊髓损伤致截瘫病人生存质量与家庭支持的相关性。方法采用MOS—SF36、SSRS量表对25例脊髓损伤致截瘫病人进行调查。结果：生存质量与家庭支持的关系总分及各因子评分呈正相关系,差异有显著性（rT=0．227、rI=0．109、rS=0．226、rU=0．194;P〈0．05）。配偶健在的患者家庭支持总分高于离婚或丧偶者（F=21．202,〈0．01）。患者文化程度越高获得的家庭支持总分也越高（F=2．786,〈0．01）。结论：脊髓损伤致截瘫病人的家庭支持可提高其生存质量。     

脊髓损伤致截瘫病人生存质量与家庭支持的相关性研究

目的探讨脊髓损伤致截瘫病人生存质量与家庭支持的相关性。方法采用MOS—SF36、SSRS量表对25例脊髓损伤致截瘫病人进行调查。结果生存质量与家庭支持的关系总分及各因子评分呈正相关系,差异有显著性（rT=0．227、rI=0．109、rS=0．226、rU=0．194;P〈0．05）。配偶健在的患者家庭支持总分高于离婚或丧偶者（r=21．202,〈0．01）。患者文化程度越高获得的家庭支持总分也越高（F=2．786,〈0．01）。结论脊髓损伤致截瘫病人的家庭支持可提高其生存质量。     

Panax notoginsenoside produces neuroprotective effects in rat model of acute spinal cord ischemia-reperfusion injury

Ethnopharmacological relevance

Acute spinal cord ischemia-reperfusion injury (SCII) is associated with pathological changes, including inflammation, edema, and neuronal apoptosis. Panax notoginsenoside (PNS), an important traditional Chinese medicine, has shown a variety of beneficial effects, including homeostasis maintenance, anti-myocardial ischemia activities, and neuroprotective functions. However, whether it can produce neuroprotective effects in SCII and the underlying mechanisms remain largely elusive.

Aim of the study

In the present study, we investigated the effects of PNS on neurological and histopathological changes after SCII as well as the underlying mechanisms.

Materials and methods

Sixty-four adult rats were randomly assigned into one of the four groups: the sham group, the ischemic group, the PNS group, and the Methylprednisolone group. A rat model of SCII was adopted from a commonly used protocol that was initially proposed by Zivin. Neurological function was evaluated with the Basso, Beattie and Bresnahan (BBB) locomotor rating scale. Histopathological changes were examined with hematoxylin and eosin staining as well as Nissl staining. Immunohistochemistry and Western blot were conducted to compare the changes in tumor necrosis factor-α, interleukin-1β, interleukin-10, aquaporin-4 (AQP-4), member 6 of the TNF receptor superfamily (Fas), and Fas ligand (FasL) in the spinal cord. Finally, neuronal apoptosis was measured by electron microscopy.

Results

The BBB scores of the PNS-treated injured animals were significantly increased. The gross histopathological examination showed restored neuronal morphology and increased number of neurons after the PNS treatment. The PNS treatment decreased SCII-induced up-regulation of cytokine levels. In addition, PNS suppressed the increased expression of AQP-4 after SCII, suggesting an anti-edema effect. Finally, PNS treatment inhibited injury-induced apoptosis and reduced the expression levels of apoptosis-related proteins, Fas and FasL, confirming its anti-apoptosis effects against SCII.

Conclusion

The current findings suggest that PNS produces robust neuroprotective effects in spinal cord ischemia-reperfusion injury, and this role may be mediated by its anti-inflammation, anti-edema, and anti-apoptosis actions.     

The effect of electroacupuncture on the protein expression levels of Cyt-C,Caspase-3 and Caspase-9 in the bladder tissue of rats with neurogenic bladder after suprasacral spinal cord injury

Objective

To observe the effect of electroacupuncture on the morphological change of the bladder tissue and the protein expression levels of cytochrome C, Caspase-3 and Caspase-9 in the bladder tissue of rats with neurogenic bladder after suprasacral spinal cord injury, and to preliminarily explore its partial mechanism of action.

川芎嗪对脊髓急性损伤大鼠神经营养因子表达的影响

目的探讨川芎嗪(TMP)对大鼠脊髓急性损伤(ASCI)模型脊髓神经生长因子(NGF)、脑源性神经生长因子(BDNF)表达的影响及其对脊髓损伤后脊髓功能的保护作用。方法取SD大鼠随机分为正常对照组、假治疗组和川芎嗪组并给予相应处理。采用改良Allen’s法造模,BBB评分对实验大鼠脊髓功能进行行为学评分;SABC法检测造模后大鼠损伤段脊髓NGF和BDNF的表达。结果随时间延长,术后SD大鼠BBB评分逐渐升高,术后7 d、14 d和21 d川芎嗪组BBB评分值均较假治疗组高(P均0.05);川芎嗪组术后3 d7、d和14 d时NGF、BDNF阳性细胞数表达均较假治疗组明显增加(P均0.05)。结论川芎嗪对脊髓继发性损伤有保护作用,这种保护作用可能与其能促进损伤段脊髓NGF、BDNF的表达有关。