老年哮喘患者外周血淋巴细胞内IFNγ与IL4的变化

目的了解老年哮喘患者在不同病期外周血淋巴细胞表达IFN-γ、IL-4的变化.方法应用流式细胞仪,测定哮喘急性发作期、缓解期和健康老年人外周血淋巴细胞表达IFN-γ、IL-4的百分率.结果 CD3+CD8+淋巴细胞IFN-γ表达率,急性发作期组(10.5±4.6%)低于缓解期组(17.5±3.8%,p<0.05)和对照组(18.4±5.9%,p<0.05);IL-4表达率急性发作期组(2.6±2.2%)高于缓解期组(1.3±0.9%,p<0.05)和对照组(1.5±0.8%,p<0.05);CD3+、CD8+淋巴细胞IFN-γ表达率,急性发作期组(31.4±10.3%)显著高于缓解期组(20.2±12.3%,p<0.05)和对照组(21.3±10.4%,p<0.05).结论向Th2偏移的Th1/Th2失衡,可能与老年哮喘患者病情发展有关.     

哮喘患者外周血淋巴细胞IL-4Rα链的表达及其意义

为了解过敏性哮喘患者外周血淋巴细胞IL 4受体 (IL 4R )的变化规律及其影响因素。本工作将研究对象分为正常对照组 (n =12 )、过敏性哮喘患者缓解期组 (n =14 )和急性发作期组 (n =16 ) ,分离外周血单个核细胞 (PBMC ) ,取 1× 10 6个细胞加入或不加入 10ng/mlIL 3、IL 5及GM CSF培育 2 4h ,利用流式细胞仪测量PBMC中淋巴细胞亚群膜IL 4Rα的表达。结果显示 :哮喘患者缓解期B细胞IL 4Rα表达阳性率明显低于正常人及哮喘急性发作期 ,而哮喘患者急性发作期CD3+ 细胞、CD4 + 细胞和CD8+ 细胞IL 4Rα表达阳性率则较哮喘缓解期和正常人明显升高 ,差异有显著性 (P均 <0 0 5 )。经IL 3、IL 5及GM CSF刺激后 ,正常组仅见B细胞携带IL 4Rα的比例显著下降 (P <0 0 5 ) ,T细胞携带IL 4Rα的比例则无变化 ;而哮喘患者缓解期T、Th细胞携带IL 4Rα的比例有明显上升 (P均 <0 0 5 ) ,B细胞携带IL 4Rα的比例则无变化 ;哮喘患者急性发作期T细胞和B细胞携带IL 4Rα的比例均无变化。这提示CD4 + 细胞携带IL 4R比例的升高可能在过敏性哮喘发病过程中起重要作用 ,而IL 3、IL 5及GM CSF则有助于Th细胞携带IL 4R比例的上调     

肝移植自发免疫耐受大鼠CD8+CD28-T抑制细胞的生物学特性

目的　研究近交系大鼠原位肝移植自发免疫耐受模型中CD8 CD2 8- T抑制细胞的生物学特点。方法　建立大鼠原位肝移植模型 ,流式细胞技术检测自发免疫耐受模型中CD8 CD2 8- T抑制细胞含量变化 ;通过体外混合淋巴细胞反应和体内输注验证CD8 CD2 8- T细胞的抑制功能 ,并检测其增殖、细胞因子mRNA的表达和诱导靶细胞发生凋亡的情况 ,并与急性排异组相比较。结果　自发免疫耐受模型大鼠脾脏CD8 CD2 8- T细胞含量 (31.5 %± 2 .6 % )显著高于正常大鼠 (5 .4 %±1.5 % )和急性排异组大鼠 (6 .0 %± 1.3% )。自发免疫耐受组CD8 CD2 8- T细胞明显抑制体外混合淋巴细胞反应的增殖 ,体内输注显著延长皮肤移植物的存活时间 (MST :10± 0 .8dvs 15± 1.8d ,P <0 .0 5 ) ,但急性排异组大鼠脾脏CD8 CD2 8- T细胞无抑制功能。外源性IL 2 4 0U ml可逆转CD8 CD2 8- T细胞的抑制功能。CD8 CD2 8- T细胞不会增加靶细胞凋亡的发生 ,其IFN γmRNA为高表达 ,而急性排异组无表达。PHA 5 0 μg ml和IL 2 4 0U ml、PMA ion 5 0 2 5 0ng ml和IL 2 4 0U ml联合应用可有效刺激CD8 CD2 8- T细胞增殖。结论　自发耐受组大鼠脾脏CD8 CD2 8- T细胞是一种T抑制细胞 ,在自发免疫耐受的形成过程中具有重要作用 ,其抑制作用可能与IFN     

Anti-CD86 mAb干预哮喘患儿PBMC后对其产生Th源细胞因子影响的研究

目的 :探讨Th源细胞因子和CD86在哮喘发病中的作用及CD86mAb治疗哮喘的临床潜在价值。方法 :随机选择哮喘急性发作期患儿 2 8例 ,男 18例 ,女 10例 ,年龄 1岁～ 8 0 8岁 ,平均年龄 (4 83± 1 99)岁 ;对照组 15例 ,男 7例 ,女 8例 ,年龄 3 2 5岁～ 10岁 ,平均年龄 (6 6 3± 1 91)岁。ELISA检测PHA刺激并用小鼠抗人CD86mAb干预PBMC(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)后其培养上清IL 4、IL 13、IFN γ水平。结果 :小鼠抗人CD86mAb(5× 10 - 3μg ml)干预PBMC后 ,正常组和哮喘组IL 4、IL 13和IFN γ水平均降低 ,与相应小鼠IgG对照组相比差异有显著性 ,而哮喘组IL 4和IL 13降低更明显。结论 :CD86mAb的阻断是非特异性的 ,即对Th1和Th2细胞均有一定的抑制作用 ,但对Th2细胞的抑制作用尤甚 ,说明CD86信号传导在哮喘的发生和发展过程中起重要作用。     

哮喘急性发作期患儿外周血Th17水平及其功能初步研究

目的:观察哮喘急性发作期患儿外周血Th17水平和功能状态,初步探讨Th17在儿童哮喘发病中的作用.方法:以正常儿童(对照组,n=20)为对照,流式细胞术(FCM)检测哮喘急性发作期患儿(哮喘组,n=26)外周血Th17以及Th1,Th2细胞百分率,ELISA方法检测外周血单个核细胞(PBMC)体外培养上清IL-17,IFN-γ以及血浆IL-17,IL-23,IgE水平.结果:(1) 哮喘组和对照组外周血CD4+T中CD4+IL-17+T比例[(1.25±0.66)% vs (1.27±0.66)%(P>0.05)];CD4+IL-4+T比例[(2.40±2.55)% vs(2.52±1.26)%(P>0.05)];两组比较无统计学意义.哮喘组CD4+IFN-γ+T比例低于对照组[15.79±7.48 vs 24.10±12.70(P<0.05)].(2) PHA活化的PBMC体外培养72 h上清中,哮喘组IL-17水平为17.53(0～245.57)ng/L,低于对照组101.74(25.12～500.60)ng/L(P<0.01);IFN-γ水平与对照组比较无统计学意义[3507±2788 ng/L vs 3027±2737 ng/L];两组血浆中IL-17均<2 ng/L,IL-23均<15 ng/L.(3) 哮喘组血浆总IgE 499.26(2.3～945.1)IU/mL,高于对照组54.57(1.7～318.26)IU/mL(P<0.001);IgE阳性(>150 IU/mL)和阴性(<150 IU/mL)哮喘患儿体外PBMC培养上清中IL-17,IFN-γ水平比较无统计学意义.结论:哮喘急性发作期患儿外周血Th1细胞以及PHA活化的IL-17表达水平降低,Th1水平和Th17功能异常的机制及其在儿童哮喘发病中的作用值得进一步研究.     

T-bet重组腺病毒对哮喘小鼠Thl/Th2免疫平衡的调节

目的探讨静脉应用T-bet重组腺病毒（AdT-bet）对哮喘模型小鼠过敏性气道炎症及Th1／Th2免疫失衡的影响。方法36只C57BL/6小鼠随机分为AdT-bet治疗组（A组）、模型对照组（B组）、正常组（C组）。以卵蛋白（OVA）、氢氧化铝免疫建立哮喘模型，A组激发前尾静脉注射100μL的AdT-bet（1×10^8 PFU/μL），各组激发后肺泡灌洗分析细胞组份，分离肺淋巴细胞测定细胞因子分泌水平，以流式细胞仪检测CD3^＋、CD4^＋ T细胞比例及表达IFNγ和IL-4的比例，比较各组肺组织学改变。结果静脉应用AdT-bet组与对照组相比：①可明显抑制抗原激发后气道内嗜酸性粒细胞的浸润（P〈0．01）；②明显抑制肺淋巴细胞产生IL-4、IL-5，增加了IFNγ的产生；③肺脏淋巴细胞CD4^＋ IFNγ百分比及IFNγ^＋/IL-4^＋明显升高（P〈0．01），而CD4^＋ IL-4^＋百分比则明显下降；④明显抑制哮喘鼠气道内及肺泡内的过敏性炎症反应。结论激发前静脉用AdT-bet对哮喘小鼠过敏性气道炎症有明显的防治作用，其机制可能与表达的T-bet上调Th1／Th2比值，从而调整了免疫平衡有关。     

不同Th1/Th2细胞免疫应答支气管肺泡灌洗液中细胞学的变化

目的 探讨不同Th细胞优势应答下支气管肺泡灌洗液（BALF）中的细胞学变化，了解Th1/Th2细胞免疫应答的细胞和分子机制。方法 用鸡卵清蛋白（OVA）致敏Wistar大鼠（每组10只），制作致敏大鼠哮喘模型；用“冻干BCG”皮内注射制作BCG免疫大鼠模型。收集BALF并做HE染色，进行细胞分类计数。采用流式细胞术，测定BALF中，CD2^ ,CD28^ 及γδTCR^ T细胞占总淋巴细胞的百分率及平均荧光密度（MIF）。用原位杂交法，检测肺组织中IL－4mRNA的IFN－γmRNA的表达。用ELISA法检测血清IL－4和IFN－γ的浓度。结果 哮喘组BALF中淋巴细胞，嗜酸性粒细胞（EOS），浆细胞和中性粒细胞的总数，均显著多于正常组（P＜0．01）；BCG免疫组BALF中，淋巴细胞和巨噬细胞的总数也显著高于正常组（P＜0．001）。哮喘组BALF中，CD2^ T 细胞的明显增加。但哮喘组CD2^ T细胞的F1显著高于正常组及BCG组（P＜0．05）；BCG组BALF中，CD^2 T细胞的百分率与正常组相比产无显著差异（P＞0．05），其CD2^ T细胞的MFI显著高于正常组(P＜0．05）。哮喘组和BCG组BALF中，CD28^ 细胞占淋巴细胞的百分率显著多于正常组（P＜0．01）；BCG组CD28^ 细胞的MFI高于哮喘组（P＜0．01）。两组的CD28^ 细胞的MF1均显著多于正常组（P＜0．05）。哮喘组和BCG组BALF中，γδTCR^ 细胞占淋巴细胞的百分率显著高于正常组（P＜0．01）。结论 支气管哮喘患者Th2细胞的优势应答，与BALF中的B细胞，EOS，浆细胞和中性粒细胞等APC数的增加及T细胞上CD2的高表达有关；而BCG免疫组中的Th1细胞的优势应答与BALF中巨噬细胞，T细胞增加及T细胞上CD28的高表达有关。γδT细胞可能存在Th1/Th2细胞免疫模式，既参与哮喘免疫也参与BCG免疫过程，可能是调节Th0细胞分化的重要始动细胞。     

苦参素对HBsAg转基因小鼠血清Th1和Th2细胞因子水平的影响

目的　探讨苦参素对HBsAg转基因小鼠外周血Th1 Th2细胞因子水平的影响。方法　HBsAg转基因小鼠分成苦参素组和对照组 ,分别每天腹腔注射苦参素注射液 2 0 0mg kg 0 2ml和生理盐水 0 2ml,共 30d。处理前后 ,检测外周血清细胞因子水平。结果　对照组处理前后γ 干扰素(IFN γ)与白细胞介素 4 (IL 4 )水平差异无显著意义 ;苦参素组处理前后IFN γ分别为 (3 10 8± 3 172 )pg ml和 (11 0 5 9± 6 971)pg ml,IL 4分别为 (2 9 0 4 5± 13 2 35 )pg ml和 (13 0 2 4± 9 0 0 2 )pg ml(均P <0 0 0 1)。处理后对照组与苦参素组IL 2分别为 (1 0 70± 0 4 4 7)pg ml和 (5 5 37± 2 887)pg ml(P <0 0 0 0 1) ;IL 10分别为 (97 2 2 6± 73 30 6 )pg ml和 (33 6 0 7± 2 3 15 4 )pg ml(P <0 0 1)。结论　在苦参素作用后 ,HBsAg转基因小鼠体内的Th1型细胞因子明显升高 ,Th2型细胞因子明显降低。这将有助于研究苦参素临床治疗乙型肝炎的机制。     

T-bet重组腺病毒对哮喘小鼠Thl/Th2免疫平衡的调节

目的 探讨静脉应用T-bet重组腺病毒(AdT-bet)对哮喘模型小鼠过敏性气道炎症及Th1/Th2免疫失衡的影响.方法 36只C57BL/6小鼠随机分为AdT-bet治疗组(A组)、模型对照组(B组)、正常组(C组).以卵蛋白(OVA)、氢氧化铝免疫建立哮喘模型,A组激发前尾静脉注射100 μL的AdT-bet(1×108PFU/μL),各组激发后肺泡灌洗分析细胞组份,分离肺淋巴细胞测定细胞因子分泌水平,以流式细胞仪检测CD3 、CD4 T细胞比例及表达IFNγ和IL-4的比例,比较各组肺组织学改变.结果 静脉应用AdT-bet组与对照组相比:①可明显抑制抗原激发后气道内嗜酸性粒细胞的浸润(P＜0.01);②明显抑制肺淋巴细胞产生IL-4、IL-5,增加了IFNγ的产生;③肺脏淋巴细胞CD4 IFNγ 百分比及IFNγ /IL-4 明显升高(P＜0.01),而CD4 IL-4 百分比则明显下降;④明显抑制哮喘鼠气道内及肺泡内的过敏性炎症反应.结论 激发前静脉用AdT-bet对哮喘小鼠过敏性气道炎症有明显的防治作用,其机制可能与表达的T-bet上调Thl/Th2比值,从而调整了免疫平衡有关.     

地塞米松对哮喘大鼠Th1/Th2失衡及嗜酸性粒细胞凋亡的作用

目的　观察地塞米松对哮喘大鼠Th1/Th2 (T辅助细胞 1/T辅助细胞 2 )平衡、嗜酸性粒细胞 (EOS)凋亡率的影响作用 ,探讨糖皮质激素治疗哮喘的机制。方法　清洁级雄性SD大鼠 30只 ,随机分为 3组 :正常对照组 (C)、哮喘组 (A)、地塞米松治疗组 (T)。卵清白蛋白复制大鼠哮喘模型 ,检测大鼠血、支气管肺泡灌洗液 (BALF)中IL 4、IFN γ水平及气道壁EOS凋亡率。结果　A组大鼠BALF中IFN γ水平明显低于C组 (P <0 0 1) ,血中及BALF中的IL 4水平则明显高于C组 (均为P<0 0 1) ,表现出明显的Th1/Th2失衡。T组大鼠IL 4的表达明显低于A组而IFN γ的表达则明显高于A组 (均为P <0 0 1)。在A组 ,大鼠气道壁EOS的浸润明显增多 ,但凋亡细胞却很少看到 ,EOS凋亡率明显低于C组 (P <0 0 1) ,T组EOS凋亡率则明显高于A组 (P <0 0 1)。结论　纠正哮喘Th1/Th2失衡和促进气道壁EOS凋亡可能是糖皮质激素减轻哮喘气道炎症的重要机制之一。     

IL—4、IL—12、IL／6STAT／SOCS途径对Th细胞分化调节机制的研究进展

Th细胞分化为Th1和Th2细胞是受多种细胞因子调控的。已有研究:IL－4、IL－12和IL／6通过STAT／SOCS信号途径经对Th细胞的分化进行调节。IL－12／STAT4／SOCS3使CD4^ 和Th2和Th1分化和极化，IL－4／STAT6／SOCS1使Th0B向Th2分化。IL－6则通过STAT3可以上调CD4^ T细胞SOCS－1的表达，这是由于IL－6干扰IFN－γ受体的信号转导，阻断了IFN－γ对IFN－γ基因的自我调节，因此实现了IL－6对Th1细胞的负性调控。据此认为IL－6启动CD4^ T细胞分化与抑制CD4^ T分化为Th1细胞是两种独立的分子机制，它在平衡Th1/Th2的免疫反应中起着重要的调节作用。     

细胞信号转导介导与日本血吸虫特异性Th1/Th2免疫偏移

分别于小鼠感染日本血吸虫后 0、 4、 6、 8和 12周 ,取脾淋巴细胞体外培养 ,进行细胞信号转导抑制试验 ,观察酪氨酸蛋白激酶 (TPK )、蛋白激酶C (PKC )和磷酯酰肌醇 3 激酶 (PI 3 K )特异性抑制剂 (Tyrphostin 2 5、D sphingosine和Wort mannin )分别特异性抑制和不同组合抑制TPK、PKC和PI 3K后 ,对小鼠脾淋巴细胞经虫卵可溶性抗原 (SEA )诱生IL 2、IFN γ和IL 4的表达水平及对Th1/Th2免疫偏移的影响。结果发现Tyrphostin 2 5对IL 2、IFN γ和IL 4水平的抑制作用均非常显著(P <0 0 1) ,D sphingosine主要影响IL 4的表达 (P <0 0 1) ,而Wortmannin则主要影响IFN γ的表达 (P <0 0 1) ,Tyrphostin 2 5和Wortmannin联合应用可完全阻断IL 2的表达及增强对IFN γ的抑制作用 ,Tyrphostin 2 5和D sphingosine联合应用可完全阻断IL 4的表达。对反映Th1/Th2免疫平衡的Th2分化指数分析表明 ,D sphingosine可使Th2免疫应答优势减弱 ,而Wort mannin则可使Th2免疫应答优势增强。研究结果表明 ,干预细胞信号转导可调节日本血吸虫特异性Th1/Th2细胞因子表达水平及Th1/Th2免疫偏移 ,为探索控制日本血吸虫卵肉芽肿病变的潜在新途径 ,提供了实验依据。     

肾怡对狼疮小鼠免疫器官内Th1/Th2细胞比例的调节作用

目的：探讨复方中药肾怡对MRL/lpr小鼠免疫器官内Th1/Th2细胞比例的调节作用。方法：将MRL/lpr狼疮小鼠随机分成对照组和中药治疗组，从12周观察到28周后于实验终点处死小鼠。通过流式细胞术分别检测胸腺和脾脏中CD4^ CD30^-(Th1)、CD4^ CD30^ (Th2)淋巴细胞所占百分比，进一步对脾细胞进行CD^ T淋巴细胞分选，并于体外利用PHA—P进行刺激后，通过RT—PCR方法检测IL-4(Th2细胞因子)和IFN—γ(Th1细胞因子)的表达丰度，比较二者的比值在对照组和中药治疗组之间的差别。结果：胸腺中几乎检测不到CD4^ CD30^ T淋巴细胞；脾脏中虽可检测到CD4^ CD30^ T淋巴细胞，但在未加入PHA-P的条件下，CD4^ CD30^ T淋巴细胞在对照组和中药治疗组中所占的比例没有显著差异；经PHAP刺激后对照组和治疗组脾细胞中CD4^ CD30^ T淋巴细胞所占百分比均明显增加，但治疗组中CD4^ CD30^ T淋巴细胞所占百分比的增加程度明显低于对照组；将脾细胞中CD4^ T淋巴细胞分选出来后进行RT-PCR检测，结果显示中药治疗组CD^ T淋巴细胞所表达IL-4／IFN—γ(Th2／Th1)比值明显低于对照组。结论：复方中药肾怡能够纠正MRL/lpr狼疮小鼠脾脏中CD^ T淋巴细胞在PHA-P刺激的条件下朝向Th2过度分化的倾向性。     

过敏性哮喘患者调节性T细胞对Th17细胞和Th9细胞的影响

目的:深入研究过敏性哮喘病人(轻到中度)急性发作期的调节性T细胞对Th17和Th9细胞功能影响的异常。方法:招募30例过敏性哮喘病人(轻到中度)急性发作期和30例健康者,采集外周静脉血30 ml,分离PBMC,然后应用磁珠法体外分离CD4+CD25+CD127-/low调节性T细胞(Tregs)和CD4+CD25-效应T细胞(选取分离纯度90%以上的标本继续下一步试验)。在PHA刺激下体外培养,检测效应T细胞增殖情况和Th17细胞、Th9细胞特异性基因(RORC和PU.1)表达及特异性细胞因子(IL-17和IL-9)分泌情况,检测哮喘病人Th17细胞和Th9细胞的异常情况;并给予Tregs干预,检测Tregs对Th17细胞和Th9细胞分化的影响。结果:哮喘组和健康对照组的Tregs均可以抑制CD4+CD25-效应细胞增殖反应,但哮喘组Tregs的抑制功能较健康对照组明显下降(P=0.03)。哮喘病人RORC表达和IL-17分泌均高于对照组(P0.05),Tregs对RORC表达的抑制能力在哮喘组有所下降(P0.05),但对IL-17分泌的抑制能力在哮喘组和对照组没有显著差别(P0.05);哮喘病人IL-9分泌无论是否加入Tregs干预均高于对照组(P0.05),但PU.1表达只有在加入Tregs干预后才高于对照组(P=0.04);Tregs对PU.1表达和IL-9分泌的抑制能力在哮喘组和对照组没有显著差别(P0.05)。结论:过敏性哮喘病人(轻到中度)急性发作期Tregs数量和功能下降,而Th17细胞和Th9细胞的特异性基因表达和特异性细胞因子生成增加,哮喘病人的Tregs在体外对Th17细胞的抑制功能有所下降,但尚未发现Tregs对Th9细胞的抑制功能明显降低。     

不明原因习惯性流产患者主动免疫治疗前后Th1/Th2型细胞因子水平的变化

为探讨主动免疫治疗对不明原因习惯性流产 (UHA )患者Th1/Th2型细胞因子水平的影响。采用酶联免疫吸附法检测15例正常非妊娠妇女、 35例UHA患者淋巴细胞主动免疫治疗前后经滋养细胞抗原刺激的外周血单个核细胞 (PBMC )培养上清液中IL 2、IFN γ、IL 4、IL 10的水平。结果发现 :(1)在最佳诱导时间下 ,UHA组治疗前PBMC产生IL 2、IFN γ的水平明显高于正常对照组 (P <0 0 5 ) ,IL 4、IL 10水平明显低于正常对照组 (P <0 0 5 )。UHA组治疗后PBMC产生IL 2、IFN γ的水平较治疗前明显降低 (P <0 0 5 ) ,IL 4、IL 10水平较治疗前明显升高 (P <0 0 5 )。UHA组治疗后PBMC产生各细胞因子的水平与正常对照组比较 ,差异均无显著性 (P >0 0 5 ) ;(2 )UHA组 35例患者主动免疫治疗后半年内 2 8例妊娠 ,其中 9例又出现自然流产。 9例自然流产者治疗后IL 2、IFN γ水平未明显下降 ,IL 10水平未明显上升。 19例妊娠成功者治疗后IL 2、IFN γ水平较治疗前明显下降 (P <0 0 5 ) ,IL 4、IL 10水平明显上升 (P <0 0 5 )。以上结果表明UHA患者对滋养细胞抗原产生以Th1型反应为主的免疫应答 ,产生大量Th1型细胞因子 ,主动免疫治疗有助于上调Th2型细胞因子及下调Th1型细胞因子 ,利于UHA患者妊娠成功。     

Th1/Th2、Tc1/Tc2亚群在乙肝肝硬化患者中的作用

目的 :探讨乙肝肝硬化患者外周血 (PBMC)中CD4 和CD8 T细胞内Th1和Th2类细胞的平衡状态 ,探明Th1、Th2类细胞在乙肝肝硬化中的作用。方法 :乙肝肝硬化患者CD4 T细胞和CD8 T细胞中IFN γ 和IL 4 细胞的百分率 ,观察乙肝肝硬化患者Th1 Th2、Tc1 Tc2比例的变化。结果 :乙肝肝硬化患者PBMC中CD4 ,CD8细胞 ,CD4 CD8比值与健康对照者相比无统计学差异 (P >0 0 5 ) ,Th1细胞及Tc1细胞百分率为 8 8% ,9 0 % ,较健康对照者 7 5 % ,7 7%升高 (P <0 0 5 )。结论 :乙肝肝硬化患者外周血T细胞亚群发生Th1类偏移 ,在乙肝肝硬化的发生和发展中可能起重要作用     

卡介菌多糖核酸提高复发性生殖器疱疹患者CD8+ T细胞的细胞因子表达

目的　研究卡介菌多糖核酸 (BCG PSN)对复发性生殖器疱疹 (RGH)患者外周血CD8 T细胞IL 12、IFN γ、IL 4表达的影响。方法　应用流式细胞仪对 4 5例RGH患者和 15名健康志愿者外周血CD8 T细胞IL 12、IFN γ和IL 4的表达进行检测。结果　治疗前RGH患者外周血IFN γ和IL 12阳性CD8 T细胞百分率均显著下降 (P <0 .0 5 ) ,Tc1 Tc2平衡失调 (P <0 .0 5 )。治疗后BCG PSN组外周血IL 12和IFN γ阳性CD8 T细胞百分率显著升高 (P <0 .0 5 ) ,Tc1 Tc2恢复平衡。病例对照组IL 12、IFN γ及IL 4阳性CD8 T细胞百分率于治疗前后变化差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。BCG PSN组与病例对照组治疗前后IL 12、IFN γ阳性CD8 T细胞百分率间差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。BCG PSN组复发率较低 ,复发病情较轻。结论　RGH患者存在以Tc1水平低下为主的Tc1 Tc2比例失衡和IL 12表达水平低下 ;BCG PSN通过上调外周血CD8 T细胞IFN γ、IL 12的表达 ,纠正机体细胞因子失衡状态而减少疾病的复发     

SARS患者淋巴细胞亚群和Th1/Th2细胞因子的检测与意义

为了解SARS患者糖皮质激素治疗后细胞免疫状况 ,系列观察我院 7例SARS确诊者 (5男 2女 ,2 8～ 6 8岁 )淋巴细胞亚群及细胞因子变化 ,病程 0～ 6 1d。另选 31例HIV感染者作疾病对照 ,2 4例健康献血员作正常对照。用流式细胞术检测外周血CD3、CD4和CD8细胞 ,以ELISA法检测血清Th1/Th2类细胞因子 (IFN γ/IL 4 )含量。结果是SARS组CD3、CD4、CD8均值 (5 2 9 80、 313 0 9、 195 94 /μl)都低于正常组均值 (14 2 0 95、 80 9 80、 5 30 95 /μl) ,P均 <0 0 0 1;与HIV组均值(813 2 3、 176 81、 6 0 3 10 /μl)比较 ,CD4、CD8偏低 (P <0 0 0 6、P <0 0 0 1)。SARS组CD4 /CD8比值与正常组相比 ,差异不显著。淋巴细胞亚群数目与病程密切相关。SARS组Th1/Th2类细胞因子水平 (A均值 0 0 5 8/0 0 31)均低于HIV组 (A均值0 0 79/0 0 33)和正常组 (A均值 0 111/0 0 35 ) ,细胞因子含量与病程无关。提示我们所观察的SARS患者细胞免疫功能低下。     

调节性T细胞在大鼠小肠移植急性排斥反应中的作用

目的 分析调节性T细胞在大鼠急性排斥反应中的作用。方法 采用免疫组化SABC染色法，测定BN→LEW大鼠小肠移植急性排斥反应时，外周血及移植肠浸润淋巴细胞中调节性T细胞：CD4^ ,CD8^ ,CD25^ T淋巴细胞及相关细胞因子IL－4和IFN－γ的表达，并与同基因大鼠间小肠移植（BN→BN）作比较。结果 外周血淋巴细胞分析显示，大鼠小肠移植急性排斥反应时，以CD4^ ,CD25^ ,T细胞为主，CD8^ 淋巴细胞只占少部分；分泌IL－4的细胞在术后4，7，14d分别只占14．3％，16．2％和16．9％。移植肠基底浸润的淋巴细胞以CD4^ ,CD25^＋和分泌IFN－γ的淋巴细胞为主。结论 在大鼠同种小肠移植中，急性排斥反应与CD25^ ,CD4^ T细胞及Th1相关细胞因子IFN－γ的表达增加相关。而CD8^＋T淋巴细胞和Th2相关细胞因子IL－4可能具有保护作用。     

不明原因习惯性流产患者Th1/Th2型细胞因子的检测

目的 :了解不明原因习惯性流产 (UHA)患者对滋养细胞抗原刺激产生Th1、Th2型细胞因子的水平 ,探讨其在UHA发病中的作用。方法 :选取 5 4例UHA患者 ,35例为未妊娠者 ,为UHA未孕组 ,19例为有UHA病史 ,现在确定妊娠并难免流产者 ,为UHA难免流产组。分别选取 15例正常未孕妇女及正常妊娠者作为对照组。应用酶联免疫吸附法检测未孕各组经滋养细胞抗原刺激的外周血单个核细胞 (PBMC)及妊娠各组PBMC与蜕膜单个核细胞 (DMC)培养上清液中IL 2、IFN γ、IL 4、IL 10的水平。结果 :①在最佳诱导时间下 ,UHA未孕组PBMC产生IL 2、IFN γ的水平明显高于正常未孕组 (P均 <0 0 5 ) ,而IL 4、IL 10水平明显低于正常未孕组 (P均 <0 0 5 )。②UHA难免流产组PBMC及DMC产生的IL 2、IFN γ水平均明显高于正常妊娠组 (P均 <0 0 5 ) ,而IL 4、IL 10水平则明显低于正常妊娠组 ,差异均有显著性 (P均 <0 0 5 )。两组PBMC产生的各细胞因子水平均低于同组DMC ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 :UHA患者对滋养细胞抗原产生以Th1型反应为主的免疫应答 ,产生大量Th1型细胞因子 ,导致妊娠丢失。