胚胎干细胞的增殖分化及应用

胚胎干细胞是从早期胚胎中发现的一种能在体外培养的高度未分化细胞,具有自我增殖能力和多向分化潜能。按组织来源分为由早期胚胎内细胞团（inner cell mass,ICM）分离的胚胎干细胞和胚胎生殖细胞（embryonic germ cell,EGC）。通常所说胚胎干细胞即ESC,     

造血干细胞的可塑性及临床应用

干细胞是一类具有自我复制和多分化潜能的细胞 ,根据其发育阶段不同 ,分为胚胎干细胞和成体干细胞。胚胎干细胞具有多分化潜能 ;而成体干细胞的分化潜能则较为局限 ,只能定向分化为特化细胞。但新近的研究表明 ,成体干细胞在一定条件下可分化为与其所在组织不同的其他组织类型细胞 ,这种干细胞的可塑性被称为成体干细胞的横向分化(ｔｒａｎｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ)。其中造血干细胞 (ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌｓ,ＨＳＣ)作为人们认识最深入 ,其临床应用也最为广泛的一类成体干细胞 ,目前已成为成体干细胞可塑性…     

骨髓间充质干细胞与组织修复

干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞群体，根据发生的来源，干细胞可被分为两类：胚胎干细胞和成体干细胞。胚胎干细胞和成体干细胞除了来源不同，其最大的区别在于增殖能力和分化潜能的不同。胚胎干细胞可无限增殖，而成体干细胞的增殖能力则有限。骨髓中除含有能分化发育成各种血细胞的造血干细胞之外，     

胚胎干细胞的定向心肌分化及其调控机制

胚胎干细胞是具有分化为各种类型组织细胞潜能的全能干细胞,可在体外大量扩增,细胞因子、激素、诱导剂和细胞内转录因子等可诱导和调控胚胎干细胞进行心肌细胞定向分化,这将使干细胞移植治疗心肌损伤性疾病成为可能.探讨胚胎干细胞向心肌细胞的定向分化及其调控机制,进而可在体内外调控干细胞向心肌细胞的定向分化,这将为临床应用干细胞分化新生心肌细胞以治疗心肌损伤性疾病提供理想的细胞来源和可靠的理论依据.     

人脐带血间充质干细胞的研究现状与展望

干细胞是具有自我更新能力且在适宜微环境下具有多向分化潜能的原始细胞。根据其发育阶段，干细胞分为胚胎干细胞（Embryonicstemsell）和成体干细胞（Adultstemcell）。人类间充质干细胞（Mesenchymal stemcells，MSCs）是唯一来源于同一原始胚层的成体多能干细胞，存在于由三个胚层发育而来的组织器官中，并可分化形成三个胚层的终末分化细胞，故被称为“各种组织的种子细胞”，且MSC的应用避免了胚胎干细胞所带来的伦理问题，故MSCs是目前干细胞研究中的一个重要环节。MSCs可来源于骨髓；外周血；脐血；脂肪等。因脐血有更充足的来源，脐血的免疫原性较弱，能耐受更大程度上的HLA配型不服，其MSC更为原始，扩增能力更强，故脐血干细胞的作用越来越突出，可作为一种新的替代细胞来源用于各系统疾病的细胞移植及基因治疗。现将人脐血干细胞的研究现状综述如下。     

胚胎干细胞的定向心肌分化及其调控机制

胚胎干细胞是具有分化为各种类型组织细胞潜能的全能干细胞,可在体外大量扩增,细胞因子、激素、诱导剂和细胞内转录因子等可诱导和调控胚胎干细胞进行心肌细胞定向分化,这将使干细胞移植治疗心肌损伤性疾病成为可能。探讨胚胎干细胞向心肌细胞的定向分化及其调控机制,进而可在体内外调控干细胞向心肌细胞的定向分化,这将为临床应用干细胞分化新生心肌细胞以治疗心肌损伤性疾病提供理想的细胞来源和可靠的理论依据。     

人胚胎干细胞不同传代方法的比较

目的探讨不同传代方法对人胚胎干细胞生长和分化情况的影响。方法用1mg/mlⅣ型胶原酶和机械切割两种不同的方法传代人胚胎干细胞,比较这两种方法传代的人胚胎干细胞克隆生长和分化情况。结果 1.机械切割法传代的人胚胎干细胞克隆较传统酶消化法生长快速且不易分化。2.传代后的人胚胎干细胞仍然维持胚胎干细胞的特有形态：表达胚胎干细胞表面标记,具有正常核型和多潜能分化能力（在体外形成拟胚体在体内形成畸胎瘤）。结论采用机械切割法传代人胚胎干细胞更利于细胞的培养扩增,且传代后细胞在继续培养中仍可保持干细胞的所有特性。     

诱导胚胎干细胞向软骨细胞分化研究进展

胚胎干细胞因其具有体外无限增殖能力和体内外分化发育的全能性,有望为细胞治疗或组织工程化组织构建提供可靠的种子细胞来源.如何诱导胚胎干细胞向目的细胞分化是目前面临的一大难题.首先回顾软骨细胞的体内发生、发育过程,继而对目前已知的能在体外培养环境中影响胚胎干细胞向软骨细胞分化的各类因素进行分析综述,并探讨进一步的研究方向.     

人诱导性多潜能干细胞系的建立

背景：诱导性多潜能干细胞与肿瘤干细胞的发生过程极其相似,而且具有的干细胞特性极其接近人胚胎干细胞。因此,研究诱导性多潜能干细胞有利于人们进一步认识并了解人类发育以及肿瘤的发生过程。 目的：掌握建立人诱导性多潜能干细胞系的技术,以便为特异性疾病细胞的重编程建立技术平台,从而利用重编程技术研究疾病的发病机制。 方法：将含有Oct4、Sox2、Klf-4和c-Myc 4个转录因子的反转录病毒感染人皮肤成纤维细胞(HS27细胞),在人胚胎干细胞培养条件下诱导产生人胚胎干细胞样的克隆。挑取并进一步扩增,通过克隆形态、碱性磷酸酶活性、免疫荧光检测是否有人胚胎干细胞标记物Oct4、Sox2、c-Myc、Klf-4的表达,悬滴法检测HS27细胞来源的克隆形成畸胎瘤的能力和验证向3个胚层的分化能力。 结果与结论：经病毒感染诱导产生的胚胎干细胞样克隆呈绿色荧光蛋白阴性,克隆在细胞形态方面与人胚胎干细胞克隆相似,进一步扩增经碱性磷酸酶检测克隆呈阳性,免疫荧光检测克隆表达Oct4、Sox2、c-Myc、Klf-4,并且HS27细胞来源的克隆注入免疫缺陷小鼠体内可以形成畸胎瘤并经苏木精-伊红染色显示具有向三胚层分化能力。实验成功构建了人诱导性多潜能干细胞系,为下一步开展疾病细胞特异性重编程研究奠定了良好的实验基础。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

人孤雌胚胎干细胞与正常胚胎干细胞分化能力的比较

目的 比较人类孤雌胚胎干细胞(pESCs)系与正常胚胎干细胞(nESCs)系的分化能力,探讨pESCs是否和nESCs一样具有多向分化潜能.方法 将pESCs和nESCs分别注射到重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠体内形成畸胎瘤,瘤体组织切片和HE染色后进行组织学分析;将pESCs和nESCs体外悬浮培养形成拟胚体(EB),利用RT-PCR检测3个胚层主要器官以及滋养层细胞发育关键基因的表达;将pESCs和nESCs定向诱导分化为滋养层细胞,通过流式细胞仪测定人绒毛膜促性腺激素-β(hCG-β)阳性细胞比例以及通过酶联免疫吸附测定(ELISA)进行hCG-β的定量分析.结果 在体内生长和体外培养过程中,pESCs和nESCs均能够向3个胚层的细胞类型分化.在SCID小鼠体内可形成畸胎瘤,有神经上皮、软骨、腺上皮等3个胚层的衍生物产生;pESCs和nESCs来源的EB在体外自发分化5~21d后,均检测到3个胚层主要器官以及滋养层细胞发育关键基因的表达;pESCs定向分化为滋养细胞后,可以检测到hCG-β的表达,但其阳性细胞比例和分泌量均低于nESCs.结论 pESCs具有向3个胚层以及滋养层细胞分化的能力,但是向滋养层细胞分化的能力仍低于nESCs.     

胚胎小鼠纹状体神经干细胞的体外培养和分化

目的：探索胚胎小鼠纹状体神经干细胞(striatum-neural stem cells，^strNSC)的体外培养和分化鉴定方法。方法：无菌条件下分离E15天胚胎小鼠纹状体，制成单细胞悬液，在bFGF和B27存在的培养基中培养扩增，通过免疫细胞化学显色鉴定神经干细胞及其子代细胞的分化方向。结果：培养的部分细胞在B27和bFGF存在的无血清培养基中可以在体外分裂增殖，同时表达神经干细胞特异性抗原nestin，并在撤出B27和bFGF的有血清培养基中向神经细胞和神经胶质细胞分化。结论：胚胎小鼠纹状体存在具有多分化潜能的神经干细胞，它们能在体外培养、传代和自然分化．     

人羊膜间充质干细胞生物学特征及向多巴胺能神经元样细胞的分化

背景：羊膜间充质干细胞具有类似胚胎干细胞多潜能的特点,在再生医学等多种领域的临床应用具有广泛的实用性和明确的良好前景。 然而,目前对于羊膜间充质干细胞的生物学特性和分化潜能的认识仍然了解甚少。目的：建立体外分离和纯化人羊膜间充质干细胞的方法,检测羊膜间充质干细胞的体外分化特点,确定羊膜间充质干细胞在体外诱导条件下向多巴胺能神经元样细胞分化的潜能。方法：采用胰蛋白酶和胶原酶Ⅱ分步消化法从羊膜中分离羊膜间充质干细胞和羊膜上皮细胞;采用percoll梯度离心方法对羊膜间充质干细胞和羊膜上皮细胞进行纯化;流式细胞术检测羊膜间充质干细胞的表面标志,确定羊膜间充质干细胞细胞表面抗原的表达特征;对体外培养的羊膜间充质干细胞进行成脂肪和成骨诱导,确定其多向分化的潜能;采用神经细胞条件培养体系诱导羊膜间充质干细胞向多巴胺神经细胞分化,通过免疫荧光染色和激光共聚焦荧光显微镜观察和鉴定诱导后多巴胺神经元样细胞的生成。结果与结论：从羊膜组织成功分离、纯化和培养出羊膜间充质干细胞和羊膜上皮细胞。羊膜来源的间充质干细胞不仅具有典型的间充质干细胞标志,而且保留了一些胚胎干细胞的OCT-4,SOX-2和KLF4等特有干细胞标志,可以诱导分化成为脂肪细胞和骨细胞,显示羊膜间充质干细胞保持了较为原始的胚胎干细胞的特点,具有多向分化的潜能。诱导分化之前的原代羊膜间充质干细胞表达固有的多种神经细胞标记,体外诱导后羊膜间充质干细胞可分化成为β-微管蛋白Ⅲ、神经元特异性核蛋白、酪氨酸羟化酶、胶质纤维酸性蛋白、髓鞘碱性蛋白和巢蛋白等阳性表达的多巴胺能神经元样细胞。结果表明人羊膜来源的间充质干细胞所保留的多向分化潜能和有效分化成为多巴胺能神经元样细胞的特性。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

大鼠神经干细胞的分离培养、鉴定和诱导分化

近年研究发现，哺乳动物无论在胚胎发育期还是在成年，其中枢神经系统内都存在具有自我增殖和多向分化潜能的神经干细胞，这一发现为神经损伤修复的研究提供了一条新思路。分离培养神经干细胞，并在体外稳定的增殖与分化，为研究神经干细胞的增殖、分化特性、干细胞移植以及建立细胞系等，提供了细胞来源和保证。本研究利用胎鼠和乳鼠的大脑皮层和海马，用含EGFP和bFGF的NSC培养基培养、分离了具有自我增殖和多向分化潜能的神经干细胞，并观察其生长、增殖和分化特点，以期为神经干细胞的基础研究奠定基础。     

人和几种常用实验动物胚胎干细胞体外培养的研究进展

胚胎干细胞（embryonic stem cell,ES cell）也称ES细胞,是一种存在于着床前早期胚胎中的具有全能性的细胞,其具有无限增殖、全向分化和嵌合生殖的能力。近年来动物实验受动物来源及动物饲养与实验条件的限制和各国动物保护主义的意识的约束,因此寻找动物实验替代模型已成为各国研究的当务之急。而胚胎干细胞则是实验动物模型的最佳替代模型。使胚胎干细胞能成为实验动物替代模型的首要问题是如何在体外培养出在促进胚胎干细胞增殖的同时,又能维持其未分化二倍体状态的胚胎干细胞。本综述主要陈述人和几种常用实验动物胚胎干细胞的体外培养建系的研究进展。     

骨髓基质干细胞体外诱导分化为施旺细胞的研究进展

骨髓基质干细胞是一种具有多向分化潜能的细胞,除了分化为间充质细胞谱系外,还具有向非间充质细胞谱系如神经细胞分化的潜能,在体外适宜的条件下可以诱导分化为施旺细胞。多种抗氧化剂可以诱导骨髓基质干细胞分化为施旺细胞,分化所需时间较短;多种生长因子亦有同样的作用,诱导的施旺细胞传代时寿命延长;抗氧化剂和生长因子合用,分化施旺细胞的数量更多,传代时寿命更长。     

干细胞技术市场前景广阔

英国近日建立全球首个国家胚胎干细胞库的消息，对于业界人士来说，无疑是振奋人心的。干细胞即起源细胞，是指尚未发育成熟的细胞，它具有多分化潜能和自我复制的功能。在特定条件下，可以分化成不同的功能细胞，形成多种组织和器官。医学界期望能够用干细胞来修复那些坏损的组织或器官，因此称其为“万能细胞”。干细胞技术作为一种新兴的医疗技术，正逐渐展现出其诱人魅力，市场应用前景非常广阔。     

人胚胎干细胞建系、培养及体外诱导分化研究现状

胚胎干细胞具有体外无限增殖和分化成三胚层细胞的潜能,它已被视为治疗多种疾病的一种新兴策略。目前胚胎干细胞常规的建系和培养技术已很成熟,并有一套国际公认的鉴定标准。但常规方法存在异源病原体污染的可能,急需研究适于标准化、无动物源性污染及可大量培养胚胎干细胞的培养体系。在现阶段,通过不同的体外诱导途径可将胚胎干细胞诱导成为胚外和三胚层来源的各种细胞,但定向分化的问题仍亟需解决。     

成体干细胞

在胎儿、儿童和成人组织中存在的多潜能干细胞统称成体干细胞.成体干细胞具有自我更新的能力,并且可以分化成与其来源不同的其他组织类型的细胞.一种组织来源的干细胞可分化成各种类型的细胞,即干细胞可塑性.成体干细胞可塑性是成体干细胞应用于临床的基础,但对干细胞可塑性机制的认识学术界仍存在较大的争议,先后有学者提出脱分化、异质细胞群体和细胞融合等学说,但都不能完全解释成体干细胞的可塑性.近年来的研究提示,成体组织中存在多潜能干细胞,我们发现在胚胎发育后的多种组织中都存在一类原始干细胞群体,在体内、外的特殊环境下,这类原始干细胞可分化为不同胚层的组织细胞,我们称其为亚全能干细胞.亚全能干细胞是存在于人体多种组织中的分化潜能介于从人体胚胎干细胞逐渐形成组织多能干细胞的发育过程中的一种原始干细胞亚群.     

成体干细胞与胚胎干细胞融合转化机制的研究进展

近年来的研究认为一些组织中的成体细胞同样具有多潜能性 ,能够转化为多种细胞作为替代治疗和基因治疗的载体。然而关于细胞转化机制尚有许多疑问。新近研究表明 ,当成体细胞与胚胎干细胞在体外一起培养时 ,胚胎干细胞诱导成体干细胞转化为形似胚胎干细胞的一种新型细胞 ,而且成体干细胞能与胚胎干细胞自发地融合表现出自己的特征 ,在对干细胞分化、增殖及肿瘤细胞增殖的研究方面给予很大启示     

干细胞的研究现状及应用前景

干细胞是一种具有全能性(totipotency)或多向性(pluripotentiality)分化潜能的细胞。根据不同的来源，干细胞的种类是多样的，如胚胎干细胞、神经干细胞、造血干细胞、癌干细胞等。虽然类型不同，但都具有共同的特性及分化的多潜能性、干细胞的自我更新能力。干细胞特性的揭示说明了干细胞在发育生物学、临床医学、家畜育种、分子遗传学等方面有着非常重要的作用，展示了诱人的应用前景。