胃癌组织p16／MTS1基因缺失研究

应用多重ＰＣＲ技术分析了２８例胃癌组织ｐ１６基因第２外显子缺失情况。结果显示，胃癌组织ｐ１６基因第２外显子缺失率达１４．３％（４／２８），且伴有ｐ１６基因缺失的胃癌均有周围器官的转移。提示ｐ１６基因缺失与胃癌发生发展有关，ｐ１６基因缺失患者易发生周围器官转移，预后不良。     

胃癌p16基因缺失与突变的研究

目的：探讨ｐ１６抑癌基因外显子２缺失、突变与胃癌发生发展及组织学类型的关系。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）、聚合酶链反应一单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析分别检测胃癌中ｐ１６基因外显子２的缺失及突变。结果：５５例胃癌样本中ＰＣＲ扩增,８例无扩增产物,２例产物明显减少,１０例均可能为ｐ１６基因缺失,缺失率为１８．１８％（１０／５５）,其余４５例胃癌、癌旁及正常胃组织均有ＰＣＲ扩增产物出现;但所有胃癌标本ＳＳＣＰ分析均未见异常泳动带,无ｐ１６基因突变。结论：ｐ１６基因外显子２缺失可能与胃癌发生发展有关;而ｐ１６基因突变可能与胃癌发生无关。     

白血病p16基因纯合子缺失的研究

为探讨白血病ｐ１６基因缺失的发生率及其与疾病预后的关系。对４８例初发的白血病患者用多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法扩增ｐ１６基因外显子１及外显子２，进行ｐ１６基因缺失研究。４８例患者中有ｐ１６基因缺失者４例，分别为：Ｍ２２例，非何杰金淋巴瘤（ＮＨＬ）并发急性Ｂ淋巴细胞白血病（Ｂ ＡＬＬ）、慢性髓性白血病（ＣＭＬ）急淋变各１例。有ｐ１６缺失的４例患者均病情进展迅速，治疗效果差，患者在短期内死亡。提示：ｐ１６基因缺失在部分白血病的发生、发展中起重要作用；有ｐ１６基因缺失者预后较差     

p16/MTS1基因缺失在骨髓增生异常综合征发病中作用的研究

目的 探讨多肿瘤抑制基因缺失（ｍｒｌｔｉｐｌｅ ｔｕｍｏｒ ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ ｇｅｎｅ １,ｐ１６／ＭＴＳ１）与骨髓增生异常综合征（ｍｙｅｌｏｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ ｓｙｎｄｒｏｍｅ,ＭＤＳ）发病的关系。方法 采用ＰＣＲ方法,对２９例ＭＤＳ的ｐ１６／ＭＴＳ１基因的缺失情况进行分析,讨论其与疾病发生的关系。结果 ２９例ＭＤＳ患者未见有ｐ１６基因缺失。结论 ｐ１６基因缺失和ＭＤＳ的发病关系不大。     

P16基因改变与脑胶质瘤生物学特性相关性的研究

目的 研究ｐ１６基因改变与脑胶质瘤恶性程度分级及肿瘤细胞增殖活性之间的关系。方法检测４１例不同级别脑胶质瘤标本和７例正常脑组织ｐ１６基因改变和ＰＣＮＡ蛋白表达情况。结果 实验组ｐ１６基因缺失和突变２２例（５３．７％）,ｍＲＮＡ和蛋白表达缺失分别为２３例（５６．１０％）、２７例（６５．８５％）,三者改变非一对一关系。ｐ１６基因改变和ＰＣＮＡ指数随脑胶质瘤恶性程度级别增高呈上升趋势（Ｐ〈０．０５）。Ｐ     

胃癌组织中多种癌基因变异的观察

目的 探索胃癌癌变过程中多种癌基因和抑癌基因变异的规律。方法用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、ＰＣＲ／ＳＳＣＰ和ＤＮＡ测序技术，检测３３例胃癌手术标本中原癌基因ｃ－ｍｅｔ、ＥＧＦＲ、ｃ－Ｈａ－ｒａｓ、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＡＫＴ-２的扩增和重排，以及抑癌基因ｐ５３、ｐ１６、ｎｍ２３－Ｈ１的突变和缺失。结果大多数胃癌组织（７０％）存在１个或１个以上的基因改变。不同个体基因异常的种类和方式不同。其中ｃ－ｍｅｔ基因重排２／３３例（６％），扩增８／３３例（２４％）。ｃ－ｅｒｂＢ－２扩增１／３３（３％），ＡＫＴ－２扩增２／１８例（１１％）。抑癌基因ｐ１６的纯合性缺失６／３３例（１８％），ｎｍ２３－Ｈ１和ｐ５３的杂合性缺失分别是５／１７例（２９％）和２／１３例（１６％）。ｐ５３第５～８外显子点突变的检出率为２０／３３例（６１％）。癌基因的扩增和重排多发生于胃癌进展期，而ｐ５３基因的点突变可发生于癌变各期。结论胃癌癌变是多基因异常累积所引起的渐进性过程，基因改变的数目、种类及方式与肿瘤的恶性表型密切相关。     

胃癌组织中p16基因mRNA和p16蛋白的表达及临床病理意义

目的 探讨ｐ１６基因在胃癌发生发展及预后判断上的意义。方法 应用原位杂交和免疫组化方法检测６１例胃癌组织和４９例癌旁正常胃粘膜的ｐ１６ｍＲＮＡ和ｐ１６蛋白的表达。结果 （１）胃癌组织中ｐ１６ ｍＲＮＡ和ｐ１６蛋白的阳性率分别为５０．８％（３１／６１）,７０．５％（４３／６１）,而癌旁正常胃粘原阳性率均为１００％（４９／４９）,１０例早期胃癌均有ｐ１６ ｍＲＮＡ的蛋白,而分化较差、浸润深层的癌细胞则     

抑癌基因p16在胃癌中的表达分析

目的探讨胃癌中ｐ１６基因蛋白的表达及其临床病理意义。方法用免疫组织化学法检测８７例胃癌ｐ１６的表达,结合临床病理资料进行分析。结果８７例胃癌中ｐ１６蛋白阳性表达率４４．８％,阳性反应以胞核分布为主,阳性表达与胃癌组织类型、浸润深度及淋巴结转移无明显相关性,但与分化程度明显相关,高、中分化组的阳性率为５３．１％,低分化组阳性率为３４．２％（Ｐ＜０．０１）。结论胃癌存在较高比例的ｐ１６蛋白阴性表达,提示在胃癌的发生发展中,ｐ１６基因失活起着重要作用。ｐ１６蛋白的高表达,可作为胃癌分化良好的指标。     

非小细胞肺癌组织p16基因缺失及突变的临床意义

目的 探讨人类非小细胞肺癌组织中ｐ＾１６基因缺失及突变情况及其与临床病理的关系。方法 应用控制模板ＤＮＡ量的银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术检测４０例非小细胞肺癌手术切除标本中ｐ＾１６基因第２外显子。结果 ４０例中有１３例发生纯合缺失,３例发生突变,缺失及突变率为４０％,其缺失及突变率与肺癌的临床病理分期有密切关系（Ｐ〈０．０５）。结论 ｐ＾１６基因的缺失及突变可能在非小细胞肺癌的发生、发展及转移中起重要     

人胰腺腺癌细胞系中p16基因、cyclin D1基因和pR6蛋白的改变

目的：研究胰腺腺癌细胞系ｐＲｂ－ｐ１６细胞调节途径相关因子的异常情况。方法：用ＰＣＲ及单链构象多态性（ＳＳＣＰ）的方法检测５株人胰腺腺癌细胞系ｐ１６基因的缺失和突变;用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因的扩增;用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析检测ｐＲｂ基因的表达。结果：２株胰腺腺癌细胞系存在ｐ１６基因第１外显子纯合性缺失,未发现第１、２外显子的基因突变;１株细胞系有ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因的扩增;ｐＲｂ基因在５株细胞系中均呈高磷酸化的表达。结论：胰腺腺癌细胞系中存在ｐＲｂ－ｐ１６细胞调节途径的异常,主要表现为ｐ１６和ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因的改变。     

贲门癌中p16和Rb基因表达的研究

目的探讨与细胞周期调节相关的基因p06和Rb基因在贲门癌中的表达及其意义。方法用SP免疫级化法对58例贲门癌进行p16和Rb基因蛋白的检测。结果随着贲门癌恶性程度的加重和浸润的加深，p16基因蛋白的阳性表达率逐渐降低，而Rb基因蛋白的阳性表达率逐渐升高（P＜0．05）。p16和Rb基因蛋白的表达呈显著负相关（P＜0．05）。结论p16和Rb基因蛋白的表达异常在贲门癌的发生发展中起重要作用。p16基因蛋白对Rb基因蛋白的表达具有负性调节作用。     

p21WAF1基因多态性与胃癌的关系

目的探讨p21 WAF1基因缺失与多态性及其在胃癌发生中的意义.方法采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)法检测胃癌中p21 WAF1基因缺失与多态性.结果 PCR扩增显示, 30例胃癌和45例非胃癌标本均无p21 WAF1第2外显子缺失.PCR-RFLP 发现,胃癌和非胃癌p21 WAF1第2外显子多态性分别为27%(8/30)和9%(4/45), 差异有显著性(χ2=4.23,P<0.05) ,且8例具多态性胃癌标本中的正常胃粘膜亦具有这种多态性.结论胃癌中p21 WAF1基因无缺失,而存在多态性,p21 WAF1基因多态性与胃癌发生有关.     

卵巢癌p16基因的纯合性缺失、突变及表达异常的研究

目的：研究p16基因的纯合性缺失，突变及表达异常与卵巢癌的发生是否存在相关关系。方法：采用PCR-SSCP检测卵巢癌p16基因的纯合性缺失和突变；采用RP-PCR定性及半定量分析p16基因；采用免疫组化技术检测p16蛋白。结果：32例卵巢癌中检测到1例外显子1突变，未检测到p16基因的纯合性缺失；RT-PCR分析卵巢癌中p16基因mRNA均有表达，半定量分析卵巢癌与正常卵巢组织中p16基因mRNA表达水平无差别；免疫组化检测9例卵巢癌中的p16蛋白为阴性（28.2%)。结论：卵巢癌的发生与p16基因的纯合性缺失和突变无相关关系，与p16基因异常表达有相关关系。     

胰腺癌MTS1／p16基因纯合性缺失和突变的研究

目的：研究人胰腺癌组织及正常胰腺组织中p16基因第1外显子和第2外显子的纯合性缺失和突变情况。探讨p16基因异常与胰腺癌的关系。方法：应用聚合酶链式反应－单链构象多态性分析（PCR－SSCP）技术检测51例胰腺癌组织中p16基因第1外显子和第2外显子的纯合性缺失和突变频率,以正常胰腺组织15例为对照。结果：全部被检胰腺癌组织中有23例发生p16基因第2外显子缺失,缺失率45％,有1例发生第1外显子的突变,未发现第1外显子缺失和第2外显子突变。正常胰腺组织中均未发生第1外显子和第2外显子的缺失及突变。结论：p16基因缺失与胰腺癌的发生关系密切,p16基因的突变可能与胰腺癌的发生关系不大。     

胃癌中p16基因甲基化及其与胃癌临床病理特征的关系

目的：检测胃癌(GC)p16基因的启动子CpG岛甲基化状态,探讨p16基因甲基化在胃癌发生发展中的作用及其与胃癌临床病理特征的关系。方法：应用甲基化特异性PCR(MSP)检测胃癌组织和正常胃粘膜组织p16基因的启动子CpG岛的甲基化状态。并对胃癌中p16基因的甲基化与临床病理特征之间的关系进行分析。结果：胃癌组织中p1...     

原发性胰腺癌中p16基因突变及其蛋白表达的研究

目的：探讨p16基因与胰腺癌发生的关系。方法：采用PCR基础缺失分析，PCR－SSCP及免疫组织化学方法检测28例胰腺癌组织，相应癌旁组织和4例正常胰腺组织中p16基因缺失，突变及其蛋白表达状况，并结合临床病理资料进行分析，结果：28例原发性胰腺癌组织中4例发生p16基因纯合缺失。5例发生p16基因突变，p16基因变异频率为32．1％，28例癌旁组织和4例正常胰腺组织中未发现纯合缺失及突变。p16基因变异频率与淋巴结转移（P＜0．025），转移淋巴结个数（P＜0．01）及临床分期（P＜0．05）密切相关。28例原发性胰腺癌的癌组织，癌旁组织和4例正常胰腺组织p16蛋白阳性表达率分别为57．1％（16／28），85．7％（24．28）和100％（4／4），癌组织中p16蛋白阳性表达率与组织学分化（P＜0．05），淋巴结转移（P＜0．05），转移淋巴结个数（P＜0．05）及临床病理分期（P＜0．05）密切相关。结论：p16基因变异及其蛋白失表达可能是胰腺癌发生发展过程中重要因素之一，而且二者均可作为评估胰腺癌恶性程度及其侵袭能力的有用指标，存在p16基因变异及蛋白失表达的原发性胰腺癌具有更强的恶性潜能。     

人类乳头瘤病毒16,18型,p53基因与胃癌

３０例新鲜胃癌标本，采用多聚酶链反应技术检测人类乳头瘤病毒１６、１８感染、并采用多聚酶链反应－单链构象多态性技术对ｐ５３基因突变进行检测。结果：ＨＰＶ１５阳性率为４０．０％，未发现ＨＰＶ１８感染：Ｐ５３基因突变率为５０．０％，ＨＰＶ１６感染和Ｐ５３基因突变同时存在者为１６．７％。     

p16、p53和c-erbB-2蛋白在胃癌的表达及临床意义

目的　研究抑癌基因 p16、p5 3和癌基因 c- erb B- 2在胃癌和癌前病变中的表达及其与胃癌临床病理学特征的关系 ,进一步探讨胃癌发生发展的机制。　方法　运用免疫组织化学方法检测 p16、p5 3和 c- erb B- 2蛋白在胃癌和癌前病变中的表达。　结果　 p16蛋白在正常胃粘膜、肠上皮化生、异型增生和胃癌中表达呈下降趋势 ,异型增生和胃癌中 p16蛋白表达显著低于正常胃粘膜 (P<0 .0 5 ) ,p16蛋白表达降低与胃癌分化程度、浸润深度及有无淋巴结转移均无明显相关性 ;p5 3蛋白在胃癌中表达显著高于异型增生 (P<0 .0 5 ) ,并且与胃癌分化程度和淋巴结转移关系密切 (P<0 .0 5 ) ;c- erb B- 2蛋白阳性表达与胃癌浸润深度以及淋巴结转移关系密切 (P<0 .0 5 )。　结论　p16、p5 3和 c- erb B- 2在胃癌的发生发展过程中起着协同促进的作用。检测 p5 3和 c- erb B- 2对判断胃癌的恶性程度和预后有重要意义     

大肠癌p53基因突变及p16基因缺失检测及临床意义

目的：探讨本地区散发性大肠癌p53、p16蛋白表达、临床病理因素的关系。方法：SSCP－PCR检测p53基因突变、p16基因缺失,免疫组化检测p53,p16蛋白表达,结果p16基因缺失率48％（19／40例）,未见突变,p16蛋白缺失率为55％（22／40）。p53基因突变率30％,p53蛋白阳性表达率为68％（27／40例）。组织学分组Ⅱ,Ⅲ级p16基因缺失率明显高于Ⅰ级（P＜0．01）,临床分期D期p53估变明显高于临床分期B,C期（P＜0．05）,结论p16基因缺失、53基因突变与大肠癌的发生、发展有关。     

CDKN2/p16基因在四种原发恶性肿瘤中存在状态的研究

目的 :研究CDKN2 /p16基因缺失和蛋白丢失在非小细胞肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌 4种原发恶性肿瘤中的作用。方法 :采用免疫组织化学法和多重PCR技术对 68例 (非小细胞肺癌 3 1例 ,食管癌 15例 ,胃癌 13例 ,乳腺癌 9例 )原发肿瘤组织标本进行CDKN2 /p16基因第一、第二外显子纯合缺失和p16蛋白表达丢失分析研究。结果 :第一或 (和 )第二外显子总缺失率为 13 .2 % ( 9/68) ,蛋白丢失率为 44% ( 3 0 /68) ,不同肿瘤组织标本的p16基因缺失率和蛋白丢失率差别很大。结论 :CDKN2 /p16基因是重要的多肿瘤抑制基因 ,在不同肿瘤组织中其失活方式不完全相同。