磷脂酶A2激活在急性缺血性脑损伤中的作用机制及尼莫地平的保护作用

目的 探讨磷脂酶A2(PLA2)激活在急性缺血性脑损伤中的作用机制及尼莫地平的保护作用。方法 将局灶性脑缺血模型大鼠分为假手术组、缺血组及尼莫地平干预组，测定PIA活力、脑细胞游离ca^2 浓度、脑含水量及脑组织PLA2表达量的改变。结果 尼莫地平可使缺血后脑细胞游离ca^2 浓度、PIA2活性及脑组织含水量明显降低，但对脑缺血后脑组织PIA2mRNA表达降低不明显。结论 PIA2激活参与了急性脑损伤的病理过程，尼莫地平能抑制PLA2活性、降低细胞游离ca^2 浓度，减轻脑水肿的病理改变，对缺血性脑细胞损害有一定的保护作用。     

磷脂酶A_2激活在大鼠急性缺血性脑损伤中的作用机制

脑缺血后出现一系列病理生化改变 ,包括ＡＴＰ匮乏、膜去极化、离子泵衰竭、游离脂肪酸及兴奋性氨基酸神经递质大量释放、细胞内酸中毒等 ,而最终改变是细胞内钙离子浓度 ([Ｃａ2 ]ｉ)升高[1] 。脑缺血后脑组织内Ｃａ2 明显积聚 ,且与组织损害、脑水肿程度一致 ,同时磷脂酶Ａ2 (ＰＬＡ2 )活性升高[1,2 ] 。因此 ,本研究探讨急性脑缺血后脑组织内ＰＬＡ2 活性及脑细胞内 [Ｃａ2 ]ｉ与脑损伤的关系 ,阐明急性脑缺血后脑细胞损伤的机制 ,为进一步预防和治疗缺血性脑损伤提供理论基础和新的思路。材料与方法一、实验动物分组及急性缺血性脑损伤模型的建立　 1.大鼠局灶性脑缺血模型 :参照蔡　杰的栓线法大鼠局灶性脑缺血模型[3 ] 。 2 .实验动物分组 :健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 2 5只 ,体重 2 0 0～ 2 5 0ｇ(重庆医科大学实验动物中心提供 )。随机分为假手术组 (大鼠仅在麻醉状态下分离右侧颈总动脉 ,不予阻断血流 )及缺血 30、6 0、90、12 0ｍｉｎ等 5组。 3.标本采集 :在各时间点处死动物 ,取缺血侧脑 ,称重 ,按重量体积比1:4加入ＰＢＳ液 ,制备匀浆测定脑组织ＰＬ...     

大鼠急性感染性脑水肿神经元突触体钙离子浓度与线粒体酶活性的研究

目的探讨感染性脑水肿神经细胞钙通道变化,神经元细胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）和Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性变化及其之间的关系。方法采用急性感染性脑水肿模型,测定神经元突触体胞浆内［Ｃａ２＋］ｉ和线粒体Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性变化,并选用Ｃａ２＋通道阻滞剂尼莫地平进行治疗,观察其对突触体［Ｃａ２＋］ｉ和线粒体Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性的影响。结果在注菌后３０分钟４、２４小时感染性脑水肿突触体［Ｃａ２＋］ｉ分别为３０５±２７、３５２±２１、４１３±４８ｎｍｏｌ／Ｌ,线粒体Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性分别为０５２±０１２、０３５±００８、０２４±０１２μｍｏｌ／（ｇ·ｈ）;电镜检查结果亦表明,菌液组突触体和线粒体明显肿胀,内有空泡形成。应用尼莫地平治疗后［Ｃａ２＋］ｉ明显下降,而Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性明显恢复,脑水肿减轻。结论感染性脑水肿神经细胞钙离子通道开放,细胞内Ｃａ２＋超载,突触体［Ｃａ２＋］ｉ与线粒体Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性变化呈负相关关系;尼莫地平通过降低突触体胞浆中［Ｃａ２＋］ｉ和恢复线粒体Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性,从而减轻脑水肿     

大鼠急性感染性脑水肿神经元突触体钙离子浓度与线粒体酶活性的 …

目的 探讨感染性脑水肿神经细胞钙通道变化,神经元细胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性变化及其之间的关系。方法 采用急性感染性脑水肿模型,测定神经元突触体胞浆内［Ｃａ＾２＋］ｉ和线粒体Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性变化,并选用Ｃａ＾２＋通道阻滞剂尼莫地平进行治疗,观察其对突触体［Ｃａ＾２＋］ｉ和线粒体Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性的影响。结果 在注菌后３０分钟４、２４小时感染性脑水     

高压氧对缺氧缺血性脑损伤的保护作用及机制研究概述

缺氧缺血性脑损伤(HIBD)是由于脑组织血氧供应不足引起的脑代谢变化导致的脑组织损害。高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)治疗后可降低脑损伤后的伤残率和病死率。一、HBO对HIBD的保护作用1.HBO预处理诱导缺血耐受:Xiong等[1]和Prass等[2]都发现HBO预处理能减轻脑缺血动物模型脑组     

尼莫地平对新生猪缺氧缺血性脑损伤的防治作用

为探讨莫尼地平对新生儿缺氧缺血性脑病的防治作用，将８６只新生猪分为正常对照组，缺氧缺血性脑损伤（ＨＩＥ）１小时（１ｈｒ）、２４ｈｒ、７２ｈｒ组，尼莫地平０．５μｇｋｇ－１ｍｉｎ－１治疗后１ｈｒ、２４ｈｒ、７２ｈｒ组，尼莫地平１μｇｋｇ－１ｍｉｎ－１治疗后１ｈｒ、２４ｈｒ、７２ｈｒ组。检测各组红细胞胞浆总钙（ＲＢＣＴＣａ）及游离钙（ＲＢＣＣａ２＋ｉ）的浓度变化。结果：ＨＩＥ１ｈｒ组ＲＢＣＴＣａ和Ｃａ２＋ｉ均明显高于正常组对照（Ｐ＜０．０１），随着缺氧缺血状态的改善，ＲＢＣＴＣａ和Ｃａ２＋ｉ含量逐渐下降，ＨＩＥ７２ｈｒ组接近正常对照组（Ｐ＞０．０５）。两种剂量尼莫地平各治疗组ＲＢＣＴＣａ和Ｃａ２＋ｉ均明显低于ＨＩＥ１ｈｒ和２４ｈｒ组（Ｐ＜０．０１），与正常对照组比较，差异无显著意义（Ｐ＞０．０５）。提示：窒息后细胞内钙的沉积与新生猪ＨＩＥ的发生有关，尼莫地平能阻止Ｃａ２＋内流，有效地保护神经细胞。     

脑组织对缺血的反应及脑保护策略(二)

(接本刊 2 0 0 3年第 1期第 4 2页 )6　神经元内钙超载的毒性作用神经元内钙总含量和细胞外液浓度相似 (1ｍｍｏｌ/Ｌ) ,但静息状态细胞内游离钙浓度 ([Ｃａ2 + ]ｉ)仅 10 0ｎｍｏｌ/Ｌ左右。比细胞内总钙和细胞外钙低10 0 0 0倍。这是因为大多数钙储存在细胞器内 ,细胞膜对Ｃａ2 + 通透性很低 ,而且神经元具有强大的排出、封存和缓冲Ｃａ2 + 的能力[2 2 ] 。局部或全脑缺血后数分钟 ,神经元的 [Ｃａ2 + ]ｉ即明显升高 ,其主要机制为 :①通过电压敏感型钙通道内流 ;②通过Ｎ 甲基 Ｄ 天冬氨酸 (ＮＭＤＡ)受体及其它兴奋性氨基酸受体内流 ;…     

镁对缺氧缺血性脑损伤保护作用的研究进展

镁对缺氧缺血引起的脑损伤有保护作用 ,但作用机制尚未阐明。现就镁对缺氧缺血性脑损伤保护作用的研究进展、作用机制以及新生儿临床应用中存在的问题综述如下。一、镁对缺氧缺血性脑损伤的保护作用人和啮齿类动物脑对缺氧缺血都非常敏感 ,受损区域常为皮质、海马ＣＡ1区、纹状体。动物实验已证实镁能抑制缺氧缺血性脑损伤。Ｎｉｓｈｉｋｉ等[1] 在脑缺血处理前给新生鼠腹膜内注射硫酸镁 ,发现注射 6 0ｍｉｎ后即能减少脑皮质梗塞面积。Ｍａｒｉｎｏｖ等[2 ] 研究表明 ,脑缺血前给鼠颈动脉内注射硫酸镁 ,对暂时性脑缺血有强大的神经保护作用…     

银杏叶提取物对宫内缺氧新生大鼠神经细胞凋亡的保护效应

目的 探讨银杏叶提取物(EGb)对宫内缺氧新生大鼠急性脑缺血损伤的保护作用。方法 夹闭妊娠大鼠子宫血管，制成急性脑缺血损伤新生鼠模型，治疗组给予腹腔注射EGb，在生后不同时间比较两组仔鼠脑组织含水量、NO的变化,神经型一氧化氮合酶(nNOS)的表达及神经细胞凋亡情况变化。结果 急性脑缺血后，脑组织含水量明显增加，NO的含量迅速上升，同时凋亡细胞数增加，两者成直线正相关。EGb治疗后NO含量显著低于未治疗组，同时观察到治疗组的nNOS表达明显降低，凋亡细胞数量减少。结论EGb对急性缺血引起的脑损伤有保护作用。     

银杏叶提取物对宫内缺氧新生大鼠神经细胞凋亡的保护效应

目的探讨银杏叶提取物(EGb)对宫内缺氧新生大鼠急性脑缺血损伤的保护作用.方法夹闭妊娠大鼠子宫血管,制成急性脑缺血损伤新生鼠模型,治疗组给予腹腔注射EGb,在生后不同时间比较两组仔鼠脑组织含水量、NO的变化,神经型一氧化氮合酶(nNOS)的表达及神经细胞凋亡情况变化.结果急性脑缺血后,脑组织含水量明显增加,NO的含量迅速上升,同时凋亡细胞数增加,两者成直线正相关.EGb治疗后NO含量显著低于未治疗组,同时观察到治疗组的nNOS表达明显降低,凋亡细胞数量减少.结论EGb对急性缺血引起的脑损伤有保护作用.     

1,6-二磷酸果糖对大鼠缺血性心脑损伤的保护作用

目的　探讨口服 1,6 二磷酸果糖 (FDP)对大鼠缺血性心脑组织损伤的保护作用及其作用机制。方法　采用异丙肾上腺素 (Iso)致大鼠实验性心肌缺血模型。随机分为 3组 :对照组、Iso组 [5mg/(kg·d) ,7d]和Iso +FDP组 [Iso ,5mg/(kg·d) ,7d ;FDP ,6 g/(kg·d) ,2 1d],每组 8只。用光镜、电镜观察心、脑组织病理形态学改变。测定心肌肌浆网钙泵 (SERCA)活性、超氧化物歧化酶 (SOD)活性。结果　Iso组大鼠心肌组织病理可见大量纤维化病灶 ,病灶多呈片状、多灶性 ,还可见少许凝固坏死灶 ;亦可见脑组织病理损害、海马神经元密度较对照组降低。心肌SERCA活性 [0 .2 5 0± 0 .0 6 3μmol/(min·g·wetweight) ]较对照组 [0 .334± 0 .0 6 1μmol/(min·g·wetweight) ]降低。脑组织匀浆SOD活性 [2 3.2 2± 3.0 7U/(mg·pro) ]低于对照组 [4 4 .89± 2 .771U/(mg·pro) ]。FDP使心肌组织纤维化病灶减少 ,脑组织损害也明显减轻 ;FDP使心肌SERCA活性 [0 .312± 0 .0 6 7μmol/(min·g·wetweight) ]和SOD活性 [39.70± 3.4 4 1U/(mg·pro) ]增高。结论　口服FDP可减轻大鼠心肌和脑组织病理改变 ,从而起到心脑保护作用     

新生鼠缺氧缺血性脑损伤脑组织S-100β蛋白、脑细胞内钙改变及尼莫地平的保护作用

目的探讨新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)脑组织S-100β蛋白、脑细胞内钙的改变及尼莫地平的神经保护作用。方法45只7日龄SD大鼠,采用随机区组设计分为尼莫地平治疗组、缺氧组及正常对照组。尼莫地平治疗组于HIBD模式后给予尼莫地平0.2 mg/(kg.d) 生理盐水2 ml,腹腔内注射,连续3 d,而缺氧组与正常对照组每天给予2 ml生理盐水腹腔内注射,连续3 d。三组分别于同一时间断头取脑。采用免疫组化法测定脑组织中S-100蛋白的含量,应用钙荧光指示剂Fura-ZAM法测定脑细胞胞浆游离钙离子浓度。结果缺氧组脑组织中S-100β蛋白阳性细胞数及细胞内钙含量均高于正常对照组(P<0.01),而尼莫地平治疗组上述指标均低于缺氧组(P<0.01),且与正常对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论L-型钙离子通道阻滞剂尼莫地平能抑制新生鼠缺氧缺血性脑损伤S-100β蛋白及细胞内钙的释放,提示S-100β蛋白参与新生鼠HIBD,其机制可能与细胞内钙增高有关,尼莫地平具有神经保护作用。     

钙通道阻滞剂对缺血再灌注兔脑皮层NO和含水量及细胞内游离钙的影响

目的　探讨一氧化氮 (NO)在缺血再灌注脑损伤中的作用 ,比较两类钙通道阻滞剂的脑保护作用。方法　采用四血管夹闭法制作兔脑缺血再灌注模型。首先测定假手术及再灌注不同时间兔脑皮层NO及含水量。并将动物分为假手术组、安慰剂组、尼莫地平组、氯胺酮组、尼莫地平 +氯胺酮治疗组 ,于再灌注 30min开始持续静脉给药至再灌注 6h。测定脑皮层NO、含水量、细胞内游离钙([Ca2 + ]i)相对荧光强度。结果　再灌注后脑皮层NO、含水量逐渐升高 ,于再灌注 6h达较高水平 [分别为 (14 7± 1 7) μmol/g ,(86 7± 1 9) % ,P <0 0 5 ],NO与含水量间具有相关性 (P <0 0 1)。尼莫地平、尼莫地平 +氯胺酮组NO明显降低 [分别为 (5 1± 0 9) μmol/g、(5 1± 1 1) μmol/g ,P <0 0 1],尼莫地平、氯胺酮以及尼莫地平 +氯胺酮组含水量明显降低 [分别为 (76 3± 4 0 ) %、(81 0± 1 9) %、(78 2± 1 4 ) % ,P <0 0 1],尼莫地平组较氯胺酮组降低更明显 (P <0 0 1)。安慰剂组 [Ca2 + ]i 较假手术组明显升高 [分别为 (2 6 8± 1 4 )、(5 0± 0 4 ) ,P <0 0 1],尼莫地平、氯胺酮及尼莫地平 +氯胺酮治疗后 [Ca2 + ]i 明显降低 [分别为 (7 7± 1 1)、(13 3± 2 0 )、(9 0± 2 0 ) ,P <0 0 1]。尼莫地平组较氯胺酮     

一氧化氮合酶基因表达在新生鼠缺氧性脑损伤中的作用

新生儿缺氧性脑损伤可导致永久性神经功能损害。我们测定新生鼠缺氧性脑损伤模型服组织内诱生型一氧化氮合酶（ｉｎＯＳ）ｍＲＮＡ表达变化,以阐明它在发病中的作用。取新生ＳＤ鼠随机分组制作模型并行病理鉴定;采用ＲＴ－ＰＣＲ测定脑缺氧时脑组织细胞内ｉＮＯＳｍＲＡＮ表达的变化,深度度扫描获取数值。实验显示,缺氧２小时后损伤脑组织的ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达显著升高（Ｐ〈０．００１）。结果表明,新生鼠缺氧后神经系统诱生     

缺血后处理对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的影响

目的探讨缺血后处理(IPostc)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)可能的神经保护作用及其机制。方法以7日龄SD大鼠为研究对象,随机分为假手术组、HIBD组、IPostcⅠ组(15 s再灌注/15 s夹闭×3个循环)及IPostcⅡ组(30 s再灌注/10 s夹闭×3个循环),每组根据缺氧缺血后时间分为0、6、12、24 h及48 h 5个亚组,每个亚组15只。应用右侧颈总动脉夹闭联合低氧(8%O2+92%N2)建立HIBD模型,监测脑组织形态学变化,比较超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、脑组织含水量及水通道蛋白4(AQP4)mRNA相对表达量随时间的变化规律。结果经缺氧缺血处理的大鼠均出现典型的神经行为学异常、形态学和生化指标的变化。IPostcⅠ组SOD活性显著改善,MDA含量降低,脑组织含水量及AQP4 mRNA相对表达量降低,在6 h以后作用显著,差异有统计学意义(P<0.05)。而IPostcⅡ组无明显改善作用。结论缺血后处理对新生大鼠HIBD具有一定的神经保护作用,其机制与减轻氧化应激损伤及脑水肿有关。     

环加氧酶—2在脑缺氧缺血再灌注损伤中的作用

环加氧酶 (ＣＯＸ)是催化花生四烯酸 (ＡＡ)合成前列腺素(ＰＧ)和血栓素 (ＴＸ)的限速酶[1] ,具有ＣＯＸ 1和ＣＯＸ 2两种亚型。ＣＯＸ 1亚型在体内广泛分布 ,其含量和活性也保持相对稳定。ＣＯＸ 2亚型的生成则受多种致病因子的诱导调节 ,故称为诱导型ＣＯＸ。近来研究证实 ,ＣＯＸ 2在新生儿脑缺氧缺血再灌注损伤的过程中扮演了重要的角色 ,本文就此进行综述。一、ＣＯＸ 2与脑缺氧缺血再灌注损伤　在全脑缺血2 0ｍｉｎ的成年大鼠模型中 ,缺血处理 4ｈ后 ,在大脑皮质及海马部位可见ＣＯＸ 2ｍＲＮＡ的生成 ,8ｈ左右达到高峰。海马ＣＡ1区…     

miRNA-210在新生大鼠缺氧缺血性脑水肿中的作用

目的 探讨miRNA-210在新生大鼠缺氧缺血性脑水肿中的作用。方法 将80只新生大鼠随机分为对照组、生理盐水组、miRNA-210表达抑制组及miRNA-210过表达组,每组20只;各组大鼠再随机分为假手术组及缺氧缺血 （HI） 组,每组10只。HI组新生大鼠结扎左侧颈总动脉后,置于8% O2和92% N2的混合气体缺氧舱中持续2h;假手术组仅游离左侧颈总动脉,但不予结扎和缺氧处理。HI或假手术术后,分别向生理盐水组、miRNA-210表达抑制组和miRNA-210过表达组大鼠颅内注射生理盐水 （2.5mg/kg）,miRNA-210 incubitor （2.5mg/kg） 和miRNA-210 minic （2.5mg/kg）,对照组大鼠不予任何处理。3d后断头,取左侧脑组织,采用荧光定量PCR方法检测miRNA-210的表达;采用干湿质量法检测脑组织含水量;苏木精-伊红染色观察脑组织形态学改变。结果 各组HI新生大鼠脑组织中miRNA-210的表达较相应假手术组均显著下调,脑组织含水量显著上调 （P < 0.05）。与生理盐水HI组比较,miRNA-210表达抑制HI组中miRNA-210的表达显著下调,脑组织含水量显著上调 （P < 0.05）;miRNA-210过表达HI组中miRNA-210的表达显著上调,脑组织含水量显著下调 （P < 0.05）。苏木精-伊红染色结果提示miRNA-210表达抑制HI组水肿改变明显;miRNA-210过表达HI组水肿改变明显改善。结论 新生大鼠脑HI后miRNA-210表达下调,可能参与了新生大鼠缺氧缺血性脑水肿的发生发展。     

白细胞介素6在病毒性心肌炎发病中的作用

目的 探讨白细胞介素６（ＩＬ－６）在病毒性心肌炎发病中的作用。方法 用脑心肌炎病毒（ＥＭＣＶ）诱发小鼠急性心肌炎，使用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）及ＥＬＩＳＡ法测定了心肌组织内ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达及蛋白含量的变化，使用抗ＩＬ－６抗体体现人投入观察其作用。结果 ＥＭＣＶ感染后ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达明显增强，蛋白含量增加．抗ＩＬ－６抗体投入后导致生存率降低（Ｐ〈０．０５），心肌内病毒滴定度增高     

黄芩甙对大鼠感染性脑水肿NF-κB活性的影响

目的探讨核因子－κＢ（ＮＦ－κＢ）及其抑制蛋白（ＩκＢ）在百日咳菌液所致的大鼠感染性脑水肿模型中的变化及黄芩甙对感染性脑水肿的保护作用是否与抑制ＮＦ－κＢ活化和ＩκＢ降解有关。方法健康ＳＤ大鼠４５只随机分成三组：生理盐水对照组（ＮＳ组）;百日咳菌感染性脑水肿模型组（ＰＢ组）;黄芩甙治疗组（ＢＣ组）。ＢＣ组动物从注菌后 １ｈ起每４ ｈ腹腔注射黄芩甙一次。用电泳迁移率改变法（ＥＭＳＡ）检测各组动物脑组织的 ＮＦ－κＢ与靶基因 ＤＮＡ的结合活性,用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析法检测各组动物脑组织的 ＩκＢα表达。结果在 ＮＳ组、ＢＰ１ｈ组 ＮＦ－ κＢ活性较弱,ＢＰ ２ ｈ组 ＮＦ－ κＢ活性增加,以后持续升高,并以 ＰＢ ２４ ｈ组活性最强;ＰＢ ２ ｈ组 ＩκＢα表达开始减少,２４ ｈ降到最低。 ＢＣ ２ ｈ,４ ｈ,８ ｈ,２４ ｈ组 ＮＦ－ κＢ活性低于相应 ＰＢ组。黄芩甙组ＩκＢα表达比相应 ＰＢ组增多。结论百日咳菌所致的大鼠感染性脑水肿模型中ＮＦ－κＢ的活性明显增强,ＮＦ－κＢ活化可能参与了感染性脑水肿发病机制。黄芩甙对感染性脑水肿的保护作用可能是通过抑制ＮＦ－κＢ异常活化和ＩκＢα降解起作用的。     

高氧液对心肺复苏后急性脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨高氧液对心肺复苏后急性脑缺血-再灌注损伤的保护作用。方法随机将23例心肺复苏后患儿分为高氧液组11例(高氧液 常规综合治疗)和常规组12例(单纯常规综合治疗)。分别于治疗前后不同时间点检测患儿血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平以及血氧分压(PaO2)、血氧饱和度(SaO2)变化,并以格拉斯哥昏迷评分(GCS)量表判断临床疗效。结果与常规组比较,高氧液组PaO2和SaO2明显升高(P<0.01);GCS评分显著增高(P<0.05或0.01);血清SOD活性显著升高(P<0.01)、MDA含量显著降低(P<0.05或0.01)。结论早期使用高氧液治疗有助于改善脑组织缺血缺氧,减轻脑组织脂质过氧化损害程度,对心肺复苏后急性脑缺血-再灌注损伤具有保护作用。