HPLC对盐酸安妥沙星含量及有关物质测定的研究

目的 建立盐酸安妥沙星含量及其有关物质检查的高效液相色谱法.方法 采用YMC-Pack ODS-AM(4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,0.05 mol·L-1磷酸二氢钾(含0.005 mol·L-1己烷磺酸钠,0.007%EDTA,pH 2.4±0.1)-乙腈(84:16)为流动相,检测波长:297 nm,流速1 mL·min-1.结果 实验表明,安妥沙星在20.0～3 000.6 mg·L-1内,峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=0.999 9),检出限为0.06 ng.结论 方法准确、简便、专属,能有效控制盐酸安妥沙星的质量色谱法.     

高效液相色谱法测定酚麻美敏口腔崩解片中对乙酰氨基酚、氢溴酸右美沙芬、盐酸伪麻黄碱和马来酸氯苯那敏4组分的含量

目的 建立高效液相色谱法测定酚麻美敏口腔崩解片中对乙酰氨基酚、氢溴酸右美沙芬、盐酸伪麻黄碱和马来酸氯苯那敏4组分的含量.方法 采用两个条件下测定上述4种成分,测定对乙酰氨基酚时,采用LiChroCART(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱;甲醇-0.75%醋酸溶液(25∶75)为流动相;检测波长为280 nm.测定氢溴酸右美沙芬、盐酸伪麻黄碱和马来酸氯苯那敏时,采用Luna SCX 100A(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;乙腈-0.05 ml·L-1磷酸二氢钾溶液(68∶32)为流动相;检测波长为265 nm.结果 质量浓度依次为对乙酰氨基酚10.0～100.0 mg·L-1、氢溴酸右美沙芬5.161～25.80 mg·L-1、马来酸氯苯那敏0.978～4.890 mg·L-1、盐酸伪麻黄碱14.93～74.64 mg·L-1内与各自的峰面积呈良好的线性关系,r分别为1.000 0,1.000 0,0.998 8,1.000 0.平均回收率依次为对乙酰氨基酚99.7%,RSD为1.53%;氢溴酸右美沙芬100.4%,RSD为1.09%;马来酸氯苯那敏99.2%,RSD为1.93%;盐酸伪麻黄碱97.6%,RSD为1.21%.结论 本方法精密度好,结果准确可靠,适用于该复方制剂的质量控制.     

人血浆中霉酚酸浓度测定方法研究及药物监测应用

目的 建立用高效液相色谱快速测定人血浆中霉酚酸浓度的方法,对我院肾移植病人霉酚酸血药浓度进行监测.方法 血浆样品加20 μLH3PO4酸化,乙醚提取,萘啶酸为内标,采用Kromasil(R)100-5C8(4.6mm×150mm,5 μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-0.05 mol·L-1KH2PO4(用磷酸调pH 2.8)(12:38:50)为流动相,流速0.5 mL·min-1,柱温25℃,检测波长254 nm.结果 霉酚酸在0.191～24.45 mg·L-1内线性关系良好(r=0.999 8),最低定量限为0.191 mg·L-1(S/N=10).高、中、低3个质控样品的平均方法学回收率为89.7%～101.5%,提取回收率大于85%,日内、日间精密度的RSD均小于10%.监测肾移植患者环孢霉素或他克莫司的谷浓度同时,测定其MPA血药浓度,82.3%的患者MPA浓度小于2 mg·L-1,低于有效治疗谷浓度.结论 本法简便、灵敏、重现性好,可用于肾移植病人服用霉酚酸酯后霉酚酸血药浓度监测和霉酚酸酯药动学研究.     

不同包装对甲钴胺注射剂光稳定性影响的研究

目的 比较不同的包装条件对甲钴胺注射液和注射用甲钴胺两种制剂光稳定性的影响.方法 上述两种制剂分别采用直接照射、透过内层包装棕色安瓿瓶照射和在完整包装条件下照射,以光照度4 000 lx进行破坏试验,分别间隔一定时间取样,应用高效液相色谱法测定甲钴胺含量及其有关物质的变化.色谱条件:采用Agilent Zorbax SB-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以含0.47%己烷磺酸钠的0.03 mol·L-1的磷酸二氢钠溶液-乙腈(81:19)为流动相,流速为0.8 mL·min-1,检测波长为266 nm,进样量10 μL.结果 甲钴胺含量测定在90.70～634.90 mg·L-1内呈良好的线性关系,r=1.000 0,有关物质测定在1.124～35.984 mg·L-1内呈良好的线性关系,r=1.000 0,最低检测限为0.1 mg·L-1.结论 完整的包装可以保证两种甲钴胺注射剂对光稳定,采用合适的包装材料的甲钴胺注射液光稳定性可优于某些包装的甲钴胺粉针刺.     

反相高效液相色谱法测定人血浆和尿中丹皮酚浓度

目的 建立测定血浆、尿样本中丹皮酚含量的反相高效液相色谱法.方法 血浆样品经沉淀蛋白,尿样经稀释后,以乙腈-0.1%磷酸pH 3.5(55:45)为流动相,经Diamonsil C18柱分离,进行色谱分析.结果 本方法丹皮酚的血浆浓度在20～1 000μg·L-1,尿中浓度在20～800μg·L-1内线性关系良好,方法回收率在81.0%～85.0%之间,日内、日间RSD均小于11.0%.结论 本方法简便、快速、灵敏度高,可用于丹皮酚的药动学研究.     

大鼠口服菊花提取物后血浆中木犀草素及芹菜素测定方法的研究

目的 建立大鼠血浆中木犀草素和芹菜素总浓度的HPLC测定方法,并研究大鼠口服菊花提取物(CME)后其效应成分--木犀草素、芹菜素的药动学参数.方法 大鼠血浆在2 mol·L-1盐酸酸性条件下于80℃水浴水解1.5 h,水解液经乙酸乙酯萃取,萃取液减压抽干后溶解,经HPLC分析.采用Diamonsil ODS C18色谱柱,以甲醇-0.2%磷酸(55:45)为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长350 nm,柱温30 ℃.应用建立的方法测定大鼠口服200 mg·kg-1菊花提取物后血浆中木犀草素及芹菜素质量浓度,并以3P87软件计算其药动学参数.结果 本法木犀草素和芹菜素的定量下限(LOQ)分别为0.045 5和0.145 mg·L-1;两者分别在0.045 5～8.09和0.145～25.7 mg·L-1内呈良好线性关系,r分别为0.995 7及0.997 4;两者低、中、高质量浓度的绝对回收率及方法回收率均在89%～107%内.日间及日内精密度RSD均小于＜11%.大鼠口服CME后木犀草素与芹菜素的Ka分别为1.72和0.237 h;t1/2(Ka)分别为0.440和3.21 h;t1/2α分别为0.774和4.82 h;t1/2β分别为6.64和8.65h;tmax分别为0.730和2.91 h;ρmax分别为2.43和9.00 mg·L-1;AUC分别为21.40和143 mg·h·L-1.结论 本研究建立的方法准确可靠、,操作简便重复性好,适用于测定血浆中木犀草素及芹菜素浓度.     

Beagle犬血浆中齐墩果酸浓度的测定

目的 建立测定Beagle犬血浆中齐墩果酸的HPLC-MS测定法,以进行齐墩果酸滴丸的生物利用度和药动学研究.方法 采用HPLC-MS,以Hypersil GOLD(2.1 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,流动相为20 mmoL·L-1醋酸铵-乙腈(24∶76),流速0.3 mL·min-1,检测波长为210 nm.结果 Beagle犬血浆内源性物质不干扰样品的测定,血浆中齐墩果酸浓度在3.88～240.00 μg·L-1内线性关系良好(r=0.999 3);最低检测浓度为3.88 μg·L-1;方法平均回收率大于85%;平均提取回收率大于80%;日内和日间RSD均小于10%.结论 所建立的测定方法准确可靠,符合生物样品分析要求.     

GC测定砷(Ⅲ)在小鼠血浆和血细胞中的浓度及药动学研究

目的 建立血浆和血细胞中砷(Ⅲ)的气相色谱测定方法,考察小鼠静脉注射砷(Ⅲ)溶液后血浆和血细胞中的药动学情况.方法 血浆样品经6%高氯酸去蛋白,二巯基丙醇(BAL)衍生化后,苯萃取,浓缩后用苯溶解后进样,血细胞样品则直接衍生化后经苯萃取、浓缩、再溶解后进行GC分析.采用该方法测定给小鼠静脉注射砷(Ⅲ)后血浆和血细胞中砷(Ⅲ)浓度,计算主要的药动学参数.结果 血浆和血细胞中砷(Ⅲ)分别在0.037 5～2.40和0.031 25～1.00 mg·L-1内线性关系良好,两者的t1/2α分别是7.178和2.531 min,t1/2β分别为108.731和146.236 min,AUC0-∞则分别为72.334和112.239 mg·min·L-1.结论 本实验建立的小鼠血样中砷的气相色谱测定法设备简单方便、方法灵敏可靠,砷在小鼠血浆和血细胞中的消除很快,没有蓄积的倾向,而血细胞中砷的浓度要高于血浆中的浓度.     

RP-HPLC测定黄芩素及其代谢产物黄芩苷大鼠血浆浓度

目的 建立用HPLC测定黄芩素/HP-β-CD包合物经大鼠尾静脉快速注射给药后,黄芩素及其代谢产物黄芩苷血浆浓度的方法.方法 采用Agilent 1100 HPLC系统,DiamonsilTMODS色谱柱,以甲醇和磷酸溶液组成的流动相梯度洗脱分离,以对羟基苯甲酸丙酯为内标,流速1.0 mL·min-1,检测波长270 nm,柱温40 ℃,进样20 μL检测.结果 在本色谱条件下黄芩素、黄芩苷及其他代谢产物与杂峰分离良好;黄芩素和黄芩苷在0.05～15 mg·L-1内呈线性关系;两者日间和日内精密度均低于11.6%;黄芩素和黄芩苷的最低检测浓度分别为0.03和0.05 mg·L-1.结论 该方法可在同一条件下同时检测黄芩素和黄芩苷,且简便、准确、可靠,可用于黄芩素/HP-β-CD包合物静注给药后,其主药黄芩素及其主要代谢产物黄芩苷的血药浓度测定.     

静脉滴注头孢哌酮/他唑巴坦复方制剂的健康人体药动学

目的 研究静脉滴注头孢哌酮/他唑巴坦复方制剂在健康人体内的药动学.方法 16名健康男性志愿者静脉滴注头孢哌酮2000mg/他唑巴坦500 mg复方制剂,采用反相高效液相色谱法同时测定血浆中头孢哌酮和他唑巴坦浓度,并用DAS1.0程序处理药-时数据.结果 头孢哌酮的ρmax为(194.94±40.04)mg·L-1,t1/2β为(2.23±0.41)h,AUC0-∞为(364.41±71.77)mg·h·L-1,AUC0-s为(326.73±62.84)mg·h·L-1,CLs为(5.76±1.2)L·h-1;他唑巴坦的ρmax为(26.58±4.07)mg·L-1,t1/2β为(0.87±0.12)h,AUC0-∞为(18.89±4.23)mg·h·L-1,AUC0-3为(16.91±4.43)mg·h·L-1,CLs为(27.80±6.6)L·h-1.结论 健康志愿者静脉滴注头孢哌酮2 000 mg/他唑巴坦500 mg复方制剂,头孢哌酮和他唑巴坦均符合一级消除二室模型,其主要药动学参数与文献报道接近,为临床合理用药提供了参考资料.     

RP-HPLC测定硝酸益康唑不同给药途径的血药浓度

目的 采用RP-HPLC测定硝酸益康唑口服和阴道给药后比格犬不同时刻体内的血药浓度.方法 采用RP-HPLC以乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢铵溶液(70∶44)为流动相,ODS色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),紫外检测波长为230 nm.结果 硝酸益康唑在0.04～20 mg·L-1内呈良好线性关系(r=0.998 3).结论 本分析方法简单,结果准确.     

高效毛细管电泳法测定注射用水溶性维生素的含量

目的 采用高效毛细管电泳法(HPCE)的胶束毛细管色谱(MECC)模式分离和测定注射用水溶性维生素的含量.方法 未涂层熔融石英毛细管67 cm(有效长度55 cm)×50 μm;运行缓冲液为50 mmol·L-1 SDS-50 mmol·L-1的硼酸钠溶液(pH 8.33);6.89 KPa×10 s压力进样;运行电压15.0 kV;检测波长214 nm;毛细管柱温25℃.结果 注射用水溶性维生素中的九种成分分离完全,烟酰氨、维生素B6、D-生物素、核黄素磷酸钠、维生素B12、维生素C、泛酸钠、叶酸、维生素B1的线性范围分别为4.16～520.0 mg·L-1(r=0.999 1),0.40～50.0 mg·L-1(r=0.999 7),0.42-52.0 mg·L-1(r=0.999 3),0.40～50.0 mg·L-1(r=0.998 2),0.39-49.0 mg·L-1(r=0.999 6),8.00～1 000.0 mg·L-1(r=0.992 0),0.83-104.0 mg·L-1(r=0.999 5),0.42～53.0 mg·L-1(r=0.999 0),0.41～51.0 mg·L-1(r=0.999 8),n=5;精密度(RSD)分别为1.75%,1.04%,1.6%,2.84%,1.85%,3.26%,1.58%,2.5%,1.92%(n=5);最低检测质量浓度分别为0.60,0.16,0.24,0.23,0.21,0.45,0.41,0.20,0.18 mg·L-1.结论 采用HPCE测定注射用水溶性维生素的方法简便、结果可靠.     

反相高效液相色谱法测定桑枝中1-脱氧野尻霉素的含量

目的 建立测定桑枝中1-脱氧野尻霉素(DNJ)含量的方法.方法 采用9-芴基氯甲酸甲酯标记、配有荧光检测器的反相高效液相色谱法,色谱柱为DIAMONSIC C18柱(4.60 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%醋酸(1:1),流速为1.0mL·min-1,柱温为室温,检测波长为激发光254 nm与发射光322 nm,正交法考察反应温度、缓冲液pH值、反应时间3个因素对DNJ衍生化的影响.结果 DNJ在3.6～36 mg·L-1内具有良好的线性关系(r=0.999 9,n=5),检测限为0.08 mg·L-1(S/N=3),平均回收率为99.2%,RSD=3.5%(n=5),在30℃,pH 7下反应50 min,为DNJ衍生化的理想条件.桑枝富含DNJ,其含量在桑品种、生长季节和老嫩程度间存在显著差异.结论 方法准确灵敏、快速简便,可用于桑枝及其制品中DNJ含量的大数量样本测定.DNJ在桑枝中具有一定的累积作用.     

反相高效液相色谱法测定盐酸帕洛诺司琼注射液的含量

目的 建立盐酸帕洛诺司琼注射液含量测定的高效液相色谱方法.方法 采用Alltima C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.02 mol·L-1磷酸二氢钠溶液(含0.25%的三乙胺与0.01 mol·L-1己烷磺酸钠,用磷酸调节pH值至3.0)-乙腈(40∶60)为流动相;检测波长为254 nm,流速为1.5 mL·min-1.结果 线性范围为10.3～103.1 mg·L-1,r=0.999 9;平均回收率为100.4%,RSD为0.95%(n=9).结论 本方法简便、可靠,可用于盐酸帕洛诺司琼注射液的含量测定.     

盐酸莫雷西嗪片剂人体生物等效性研究

目的 评价两种盐酸莫雷西嗪片剂的生物等效性.方法 18名健康男性志愿者分别单剂量po受试制剂和参比制剂200 mg,采用高效液相色谱一质谱联用法测定血浆中莫雷西嗪的浓度.结果 受试制剂和参比制剂在受试者体内的药动学参数如下:血浆中莫雷西嗪的tmax分别为(1.4±0.4)和(1.4±0.5)h,pmax分别为(595±318)和(589±283)μg·L-1,t1/2分别为(2.4±0.9)和(2.7±1.5)h,用梯形法计算,AUC0-t分别为(1.60±0.89)和(1.57±0.76)mg·h·L-1,AUC0-∞分别为(1.66±0.90)和(1.63±0.76)mg·h·L-1,以AUC0-t计算,莫雷西嗪的相对生物利用度平均为(103.6±28.8)%.结论 两种制剂生物等效.     

反相高效液相色谱法同时测定人血浆中替米沙坦、氢氯噻嗪含量

目的 建立可同时检测人血浆中替米沙坦、氢氯噻嗪含量的反相高效液相色谱方法.方法 色谱条件:色谱柱为Zorbax80(A) Extend-C18(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相为乙腈-四丁基氢氧化铵磷酸盐缓冲液(24:76);流速:1.0 mL·min-1;检测波长:230 nm(替米沙坦),272 nm(氢氯噻嗪);柱温:20℃.结果 本法替米沙坦的线性范围为31.8～1 591.2μg·L-1,r=0.999 4,方法回收率为98.68%,RSD=3.09%,最低检测质量浓度为20 μg·L-1.氢氯噻嗪的线性范围为30～240 μg·L-1,r=0.9991,方法回收率为100.32%,RSD=5.11%,最低检测质量浓度为20μg·L-1.结论 本法可以同时测定血浆中替米沙坦和氢氯噻嗪的浓度,具有样品处理简单、方法稳定、有较好的实用性,易于开展药动学及药效学研究.     

盐酸左氧氟沙星眼用即形凝胶在兔眼房水内的药动学

目的 研究盐酸左氧氟沙星即形凝胶在兔眼内的药动学行为,考察该制剂的释药特征.方法 以高效液相色谱法测定盐酸左氧氟沙星即形凝胶给药后不同时间兔眼房水中的药物浓度,绘制药-时曲线,计算药动学参数.结果 盐酸左氧氟沙星即形凝胶在兔眼内的吸收和消除过程呈线性动力学特征,其t1/2(ke),MRT,tmax,ρmax,AUC0-T和AUC0-∞分别为(118.76±7.21)min,(208.40±13.46)min,(34.07±5.02)min,(2.56±0.14)mg·L-1,(432.05±13.55)mg·min·L-1及(501.52±25.24)mg·min·L-1.结论 盐酸左氧氟沙星眼用即形凝胶显著延长药物在眼部的滞留时间,可用之实现长效治疗的目的.     

RP-HPLC测定人血浆中卡托普利浓度及其药动学

目的 建立测定人血浆中卡托普利的反相高效液相色谱法,研究其在人体内的药动学规律及特点.方法 采用美国Waters公司高效液相色谱仪.色谱柱Hypersil柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水-冰醋酸(45:55:0.2),流速1.0mL·min-1;检测波长:257 nm.结果 卡托普利血药浓度线性范围为6.25～800μg·L-1,最低检出浓度为6.25μg·L-1;方法回收率为105.8%;日内、日间RSD分别为4.40%～7.88%和2.87%～9.34%.结论 本法灵敏、准确,可用于卡托普利临床药动学研究.     

LC-MS/MS测定人血浆中依折麦布和总的依折麦布含量及其药动学研究

目的 建立测定人血浆中依折麦布和总的依折麦布浓度的LC-MS/MS方法,进行依折麦布片po给药的药动学研究.方法 22名志愿者血样经叔丁基甲醚萃取吹干重组后进样测定依折麦布浓度,另取血样经β-葡萄糖苷酸酶水解后叔丁基醚萃取吹干重组后进样测定总的依折麦布浓度.分析柱:Capcell C18柱(2 mm×50 mm,5μm),内标(IS)13 C6-依折麦布.流动相:5mmol·L-1醋酸铵水溶液(A泵)和乙腈(B泵)组成,梯度洗脱.采用电喷雾去质子化三重四极杆二级串联质谱,多反应监测方式(MRM)测定样品浓度,依折麦布的监测离子对为m/z 408.5→m/z 270.8,内标为m/z 414.5→m/z 276.8.结果 依折麦布在0.020～20μg·L-1内线性关系良好,相关系数r=0.999 4(n=9).总的依折麦布在0.25～250μg·L-1内线性关系良好,相关系数r=0.999 8(n=9).最低定量线(LLOQ)、低、中、高浓度的依折麦布和总的依折麦布质控样品的日内、日间精密度均小于12%,方法回收率在97%～104%内.志愿者口服10 mg依折麦布后采血72 h,依折麦布和总的依折麦布的药动学参数分别为AUC0-inf(121.9±41.7)和(536.8±182.7)μg·h·L-1;AUC0-t(102.1±31.4)和(478.8 4±170.0)μg·h·L-1;ρmax (4.9±1.6)和(48.46±17.3)μg·L-1;tmax(5.2±6.4)和(1.5±0.9)h;t1/2(26.4±28.8)和(22.5±11.0)h;MRT(23.6±3.8)和(19.7±3.8)h.结论 该方法符合生物样品分析要求,可用于依折麦布血浆浓度的测定,依折麦布和总的依折麦布的药动学参数与文献相近.     

HPLC测定注射用13种复合维生素中维生素H、叶酸及维生素B12含量

目的 建立应用高效液相色谱同时测定注射用水溶性维生素中的维生素H、叶酸及维生素B12含量的方法.方法 采用Intersil(ODS-2)C18(4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱;以0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH到3.0)-乙腈(10:90)为流动相;流速为1 mL·min-1;检测波长为210 nm;进样量为10 μL;柱温为30 ℃.结果 谱图中维生素H、叶酸和维生素B12检测限分别为0.50,1.10和0.82 μg·L-1;维生素H、叶酸和维生素B12分别在9.49～14.23,96.74～145.1和0.746～1.118 mg·L-1内呈线性关系;平均回收率分别为100.96%(RSD=1.72%)、101.77%(RSD=0.14%)和101.27%(RSD=1.71%).结论 该方法简单、快速、灵敏度高、重复性好.