钙拮抗剂及其在心血管疾病中的应用

钙离子在人体内的作用极为广泛,生命的许多活动,诸如信号传递、各类肌肉的收缩、凝血过程、细胞运动、糖原代谢等,钙离子均起着极为重要的作用。1　钙通道及钙拮抗剂的药理学基础1.1　胞内外钙离子浓度的调节　细胞外液中的钙离子浓度远较胞内钙离子浓度高,胞内外钙离子经常处于流动状态,正常情况下,在钙离子流动过程中,起主要作用的是钙通道,钙泵(Ca2 -Mg2 -ATP酶),Na -Ca2 交换体,以及在细胞器上的钙离子转运装置,其中当细胞受到刺激时,钙离子可通过钙通道进入细胞内,与胞内的第二信使钙调蛋白(Calmodulin,GM)相结合而发挥生理作用[1]…     

茜草素激活Wistar大鼠肾叶间动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道

目的研究茜草素对大电导钙激活钾通道(large conductance calcium activated potassium channels,BKCa)的调节作用。方法在快速分离的Wistar大鼠肾叶间动脉平滑肌细胞上,应用膜片钳技术研究茜草素对BKCa介导的外向电流的调节情况。结果BK_(Ca)特异性抑制剂伊比利亚毒素(ib TX)抑制茜草素的增强作用(P<0.01);去除细胞外液中的钙离子,L-钙通道抑制剂尼莫地平(nimodipine)、钙离子螯合剂BAPTA-AM和ryanodine均能抑制茜草素对肾叶间动脉平滑肌细胞外向电流的增强作用(P<0.05)。结论茜草素通过激活L-钙通道,促进钙离子由细胞膜外进入胞质,内流的钙离子进一步激活ryanodine受体,引起胞质中钙离子浓度快速升高,激活平滑肌细胞膜BK_(Ca)通道。     

β-抑制蛋白在AT_1受体信号通路中的作用及意义

血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)是肾素-血管紧张素系统的重要活性物质,广泛参与心血管活动的调节。AngⅡ通过与其受体结合,诱导激活复杂的胞内信号通路,是其参与多种病理生理过程的基础。β-抑制蛋白(β-arrestins)是一类负反馈调节G蛋白偶联受体的多功能蛋白,广泛存在心血管系统,是近期的研究热点。该文主要综述β-抑制蛋白在AngⅡ诱导的AngⅡ一型受体(AT1受体)信号通路中的作用及意义。     

钙结合蛋白-D28K在神经退行性疾病中的作用

维生素D依赖型钙结合蛋白-D28K(calbindin-D28K)是一种具有较高钙离子亲和力的钙调蛋白,可调节胞内钙离子浓度,通过上调calbindin-D28K在神经细胞中的表达对神经退行性疾病有积极作用。本文综述了国内外calbindin-D28K在阿尔采末病、帕金森病、亨廷顿病等神经退行性疾病中相关作用的研究进展,旨在为研究以calbindin-D28K为靶点治疗神经退行性疾病提供线索。     

N-型神经系统电压依赖性钙通道在脊髓痛觉传递及调控中的作用研究

钙离子作为机体内重要的信使物质,广泛参与各种生命活动的调节。胞内钙离子浓度的升高在神经系统的很多过程中都发挥着重要的作用,例如递质在突触部位的释放、神经元兴奋性的调节、激素的分泌及突触可塑性和基因转录等过程。神经系统电压依赖性钙通道（Voltage- dependent calcium channels, VDCCs）是胞内钙离子浓度升高的途径之一,     

黄芪提取物保护Aβ致海马神经元损伤

目的探讨黄芪提取物在Aβ所致海马神经元损伤中的作用。方法通过对孕18d胎鼠的海马神经细胞培养,观察Aβ对神经细胞的毒性及黄芪提取物的保护作用。采用LDH法和MTT法检测细胞活力,LSCM测胞质钙离子浓度的变化及TUNEL法测细胞凋亡。结果Aβ与细胞孵育后,细胞活力明显下降,并呈时间和剂量依赖性,同时细胞内钙显著上升,细胞出现凋亡的典型的形态学特征。20、40μg·L-1黄芪提取物能明显提高细胞活力、降低胞质钙离子浓度、减少凋亡的细胞数。结论黄芪提取物对Aβ所致海马神经元损伤具有一定的保护作用,可能与其降低海马神经元胞质钙离子有关。     

G蛋白信号调节因子在心血管系统中的作用

G蛋白偶联受体（G-Protein-Coupled-Receptors,GPCRs）在体内分布广泛,几乎参与所有生理活动的调节。G蛋白调节因子（Regulator of G protein Signaling,RGS）参与了G蛋白失活的调节。目前研究已证明,参与心血管系统生理和病理活动的很多递质和激素都是通过GPCR信号转导通路发挥作用的。RGS蛋白通过调节GPCR通路信号转导和非GPCR依赖性途径影响多种心血管疾病的发生,其在心脏血管结构和功能中的地位已逐渐引起重视,有望成为相关疾病治疗的新靶点。本文将就RGS蛋白及其在心血管系统中的作用作一综述。     

甾醇类新药NSC67657诱导的HL60细胞单核系分化中β-catenin/ICAT蛋白差异表达及相互作用研究

目的分析甾醇类新药NSC67657诱导HL60细胞单核系分化中,β-catenin/ICAT蛋白的差异表达及相互作用,探讨NSC67657诱导细胞分化的作用机制。方法应用10μmol·L~(-1)NSC67657诱导HL60细胞分化,采用细胞化学染色和流式细胞技术评估细胞的分化方向和分化程度;通过RT-PCR和Western blot方法验证药物作用细胞前后β-catenin和ICAT基因和蛋白的表达差异;采用免疫共沉淀技术分析β-catenin与ICAT蛋白的相互作用情况;采用激光共聚焦技术协同分析目的蛋白的差异表达及细胞内定位。结果NSC67657可诱导HL60细胞向单核系分化。在10μmol·L~(-1)NSC67657作用5d后,CD14的表达可达到90%以上,细胞化学染色支持细胞单核系分化结论。分化后ICAT基因和蛋白表达明显升高(P<0.01),而β-catenin基因和蛋白表达明显下降(P<0.05)。免疫共沉淀结果显示,ICAT与β-catenin蛋白在细胞分化前后都存在相互作用,药物诱导细胞分化后两者蛋白相互作用条带吸光度明显增加。激光共聚焦结果显示,ICAT蛋白和β-catenin蛋白在胞质和胞核均有荧光,药物诱导HL60细胞分化后,ICAT蛋白胞质和胞核荧光均明显增加,β-catenin蛋白在核内荧光明显减弱,但胞质荧光强度增加,有蛋白胞质转位现象。结论 NSC67657能够诱导HL60细胞向单核系分化,且引起ICAT蛋白和β-catenin蛋白的表达差异;ICAT蛋白与β-catenin蛋白的相互作用增强及β-catenin蛋白从胞核向胞质的转位现象,提示NSC67657可能通过下调并阻止β-catenin蛋白入核,从而导致HL60细胞单核系分化。     

内质网应激与肝脏脂质代谢关系的研究进展

内质网是细胞内负责蛋白合成、折叠、修饰和转运的细胞器,在钙离子稳态和调节固醇类、脂质和糖类的生物合成中发挥重要作用[1]。在内质网中有大量的蛋白被合成,但并不是所有的这些蛋白都可被正确的折叠和处理加工,在正常的生理状态时,非折叠或未折叠蛋白可通过活化未折叠蛋白反应(Unfolded Protein Response,UPR)直接被降解。UPR活化后可清除未折叠蛋白并恢复细胞内稳态,或者可活化一系列的细胞     

胞外酸性与细胞内钙离子相关通道的研究进展

胞外酸性环境已被报道能够通过质子感知的G蛋白偶联受体或质子感知的离子通道诱导成纤维细胞、神经胶质细胞、内皮细胞和平滑肌细胞胞内Ca~(2+)浓度的增加。就胞内增加的Ca~(2+)从何而来,其分子机制可归为两大类:⑴胞外酸性→激活细胞膜离子通道→胞外Ca~(2+)内流;⑵胞外酸性→激活G蛋白偶联受体(GPCRs)→通过G蛋白/PLC/IP3通路→内质网释放Ca~(2+)。本文首先综述了具有质子感知功能的G蛋白偶联受体和离子通道,然后介绍细胞膜上及内质网膜/肌质网膜上存在的一些钙离子相关通道,最后总结了胞外酸性引起细胞内钙离子浓度升高的分子机制,以期对相关科研人员的研究工作提供参考和借鉴。     

胞质HuR在卵巢上皮性癌的表达及意义

目的检测HuR在卵巢上皮性癌中的表达及与临床病理参数的关系,寻求卵巢癌的预后因素。方法采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接（SP）法和逆转录RT-PCR技术,检测胞质和胞核HuR在正常、交界性、恶性卵巢组织中的表达;分析胞质HuR的表达与预后的关系。结果胞质和胞核HuR在恶性卵巢肿瘤组织的表达明显高于交界性卵巢肿瘤和正常卵巢组织,胞质和胞核HuR在交界性卵巢肿瘤的表达与正常卵巢组织比较无显着性差异;胞质HuR的表达随组织学分级、临床分期增高,阳性表达率逐渐增高,胞核HuR的表达与临床病理参数无关。结论 HuR的过表达可能在卵巢癌的发生发展中起重要作用,检测胞质HuR在卵巢癌中的表达可预测该肿瘤生物学行为特征,可作为独立的预后指标。     

去甲肾上腺素引起C6胶质瘤细胞中钙的动员

目的:研究去甲肾上腺素引起大鼠C6神经胶质瘤细胞中钙离子浓度([Ca~(2 )])增加的机理.方法:以荧光染料fura-2为指示剂,采用双波长荧光比值成像 的方法测定细胞中钙离子浓度.结果:通过激活细胞上的α_1肾上腺素能受体,去甲肾上腺素剂量依赖地使C6细胞中钙离子浓度增加.这种反应不依赖细胞外钙,且不受百日咳毒素(PTX)处理的影响.将细胞与磷酯酶C(PLC)抑制剂U73122或内质网Ca~(2 )-ATP酶抑制剂thapsigargin预孵育,去甲肾上腺素引起的胞内钙反应则消失;蛋白激酶C激动剂佛波醉酯(PMA)预处理细胞可以使去甲肾上腺素引起的胞内钙离子浓度升高幅度降低,而佛波醇酯的效应能够被蛋白激酶C抑制剂Ro31-8220或GF-109203X完全阻断.但是,改变胞内蛋白激酶A活性的药物对去甲肾上腺素的作用没有影响.结论:通过激活胞内的磷酯酶C,去甲肾上腺素使C6细胞的胞内钙库释放钙离子.去甲肾上腺素引起的细胞内钙离子浓度增加受蛋白激酶C的负性调节.     

SARI基因真核表达载体的构建及稳定转染HeLa细胞系的建立

目的构建人SARI基因真核表达载体,并建立稳定转染的HeLa细胞系。方法采用RT-PCR技术从正常人外周血单个核细胞cDNA文库中扩增SARI基因序列,连接插入至pCMV-N-Flag真核表达载体,并对重组质粒进行酶切及测序鉴定;阳离子聚合物介导重组质粒转染HeLa细胞后,用G418抗生素筛选稳定转染的细胞系。间接免疫荧光检测Flag-SARI融合蛋白在HeLa细胞系中的表达定位。RT-PCR及Western blot检测SARI mRNA及蛋白的表达变化。结果双酶切和DNA测序表明pCMV-Flag-SARI真核表达质粒构建成功。经G418筛选后,RT-PCR和Western blot表明,转染重组质粒的HeLa细胞系中SARI mRNA及蛋白的表达明显升高。间接免疫荧光结果显示,Flag-SARI融合蛋白在HeLa细胞系的胞质和胞核中均有表达,且胞质荧光信号强于胞核。结论成功构建pCMV-Flag-SARI真核表达载体,表达的FlagSARI蛋白主要定位于HeLa细胞系的胞质中。     

受体的生物化学和生理学特性

细胞表面受体通过介导细胞间通信，促进蛋白运输，实际上是调节所有胞内过程而在细胞和系统生理活动中起核心作用。     

RGS蛋白对阿片受体-腺苷酸环化酶的调节及阿片受体对钾通道调节的研究进展

本文介绍了RGS蛋白对阿片受体-腺苷酸环化酶活性的调节;阿片受体长期激活对细胞内钙离子、细胞浆酸碱度以及线粒体膜电势的影响;以及阿片受体不通过G蛋白对细胞膜外向整流钾通道的调节机理。     

重组蛋白在大肠杆菌分泌表达的研究进展

长期以来,大肠杆菌是表达外源蛋白的首选表达系统,重组蛋白分泌表达与胞内表达相比有很大优越性,在细胞周质腔不仅能促进重组蛋白二硫键的形成及正确折叠,还能促进分泌蛋白的N-端加工。本文综述了近年来在大肠杆菌中表达可溶性外源蛋白的进展,目的是为了提高外源蛋白的生物活性。     

钙与高血压的预防

动脉血压的变化由二个心血管参数所决定,即心输出量和外周血管阻力。而钙在影影响和调节这二个参数中起着极为重要的作用。构成心输出量的三个部份——左室射血功能、心率和血管容量,直接受细胞浆中钙离子浓度的调节。与外周血管阻力调节有关的生物活性物     

钙通道阻滞剂与心血管免疫炎症的关系

近年来发现钙离子活动与心血管免疫和炎症有密切关系,钙通道阻滞剂对心血管免疫炎症的影响正逐渐受到研究者的关注。该文分别阐述了心血管免疫炎症机制、钙离子在免疫炎症中的作用、钙通道阻滞剂对心血管免疫炎症的影响及其未来在心血管病应用中新的意义。     

全麻机制研究——细胞内钙离子信号通路研究进展

全身麻醉药物的分子作用机制及细胞作用机制虽不明确,但是其对神经递质释放的影响已经达到共识:一方面全身麻醉药物分子与离子通道蛋白或突触蛋白直接作用可以改变神经递质的释放,另一方面也可能通过改变细胞内信号通路而影响神经递质的释放。作为细胞内的重要信使,钙离子浓度([Ca2+]i)受到钙内流系统、钙外流系统及内质网等多方面调节,而存在于这些调节通路的蛋白受体大多数被证明是全身麻醉药物的潜在作用位点。细胞内钙离子最终影响细胞兴奋性和神经递质的释放的重要作用,使得全身麻醉药物调节[Ca2+]i成为研究全麻机制的重要方面。     

药物不良反应：硝苯地平在心血管系统的不良反应

硝苯地平是临床上主要用于治疗心血管系统疾病的钙离子拮抗剂。以它的效果显和价格低廉深受基层医疗单位的欢迎。但是作为心血管系统的治疗药在心血管系统的不良反应屡见不止。这不禁引起人们的重视。