丹参组织培养研究

本文介绍中药丹参组织培养研究简况,包括愈伤组织的诱导发生,通过诱变、驯化与选择,获得含丹参酮的红色愈伤组织的新无性系,及其试验培养的初步结果。     

农杆菌转化后丹参植株再生

用发根农杆菌15834,LBA9402株和根癌农杆菌C58株感染丹参无菌苗,完成质粒转化后诱导出毛状根和冠瘿瘤。毛状根和冠瘿组织在无激素的培养基上于光照条件下分化出转化后的丹参再生植物,再生植物移植到土壤中能够成活。用发根农杆菌转化后的再生植物的具有节间缩短,植株矮化、地下部毛状须根发达等特征。用根癌农杆菌转化后的再生植物生长旺盛,地上部分较原植物高大,根系发达,根产量和丹参酮含量都高于原植物。     

丹参组织培养物中二萜类成分的研究

从丹参组织培养物中首次分离得到２个二萜类成分。经理化常数测定、光谱分析，确定为丹参新醌乙和Ｒｏ-０９-０６８０。     

刺五加组织培养与细胞工程进展

综述了国内外对刺五加组织培养与细胞工程研究的现状。分别从体细胞胚胎发生的影响因素外植体的发育程度和类型、培养基、植物生长调节剂的种类和浓度以及作用特点、体细胞胚胎的形态发生过程与解剖学和人工种子的包埋与萌发;茎尖外植体的离体培养与快速繁殖;根癌农杆菌和发根农杆菌对愈伤组织和新生体胚的遗化转化;毛状根培养生产刺五加次生代谢产物的研究现状进行了评述,并进一步分析了其中存在的问题,提出了一些建议。     

丹参组织和细胞培养研究概况

概述国内外丹参组织和细胞培养的研究、包括丹参的器官发生和试管苗的快速繁殖，丹参细胞的悬浮培养和固定化培养以及丹参的不定根培养。重点概述丹参悬浮和固定化培养细胞生产其有效成分的能力及其次生代谢的调节。     

小叶丹参快繁技术初探

目的:研究小叶丹参组织培养技术,建立快速繁殖技术体系。方法:以小叶丹参为材料,分别在不同的培养基中培养。结果与结论:以MS+6-BA5mg·L-1+NAA1.0mg·L-1为芽增殖培养基,30～40d后,芽增殖系数达4～6倍;生根培养基以MS+IAA0.5ms·L-1为宜,生根率100%,根系粗壮,移栽易于成活。     

丹参毛状根的诱导及培养条件的优化

为了建立丹参毛状根的诱导方法及液体培养体系,以发根农杆菌A4,LBA9402,15834为试验菌株分别侵染丹参无菌苗叶片,诱导丹参毛状根,PCR扩增筛选阳性株系,HPLC测定丹酚酸含量并在此基础上进一步优化毛状根的液体培养条件。结果显示：3种发根农杆菌A4,LBA9402,15834均诱导出丹参毛状根,经PCR鉴定证明其Ri质粒T-DNA均已整合到丹参基因组中,其中发根农杆菌LBA9402和A4诱导的丹参毛状根丹酚酸含量较高,质量分数分别为（3.27±0.37）%,（3.17±0.20）%;由发根农杆菌LBA9402诱导MSOH液体培养基培养的丹参毛状根丹酚酸含量较高,质量分数为（4.56±0.36）%;由发根农杆菌LBA9402诱导,pH为4.81的MSOH液体培养基培养的丹参毛状根丹酚酸含量最高可达4.85%。因此,以发根农杆菌LBA9402和A4诱导的丹参毛状根在pH为4.81的MSOH液体培养基中培养的丹酚酸含量较高。为进一步利用基因工程技术改良中药丹参的品质奠定了基础。     

石斛组织培养研究进展

目的 :综述国内外对石斛组织培养进行的深入研究。方法 :系统查阅国内外近 10年来的有关文献 2 0余篇。结果与结论 :介绍了石斛组培的多种方法 ,对培养基、激素及多种条件对组培的影响作了论述 ,并提出了存在的问题及对策。     

丹参提取物药理作用研究进展

丹参又名赤参、紫丹参、红根等,为临床常用中药,始载于《神农本草经》并列为上品。其为唇形科鼠尾属植物丹参（ Saivia miliorrhiza Bunge ）的干燥根及根茎。丹参具有祛瘀止痛,活血通经,清心除烦的功效。临床常用于治疗瘀血诸证,疮痈肿毒,热病烦躁神昏和心悸失眠等。其有效成分包括脂溶性的丹参酮I、丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡB、隐丹参酮、二氢丹参酮;以及水溶性的丹参素、丹酚酸等［1］。近年来丹参提取物的药理作用研究不断深入,本文就其研究进展作一简单综述。     

丹参化学成分转化及药代动力学研究进展

丹参是一种传统的中药,在临床治疗上发挥着积极作用。近年来,对丹参的化学成分、成分转化及其药代动力学等方面的研究均取得了较大进展。但中药含多种成分,各成分间存在着拮抗、协同或转化等作用,有关丹参有效成分间的相互转化和药代动力学方面缺乏相关总结综述。文章就近年来丹参有效成分间的相互转化及药代动力学研究进行综述,为丹参的开发提供参考价值。     

丹参的毛细管电泳指纹图谱研究

目的 :利用毛细管电泳技术建立丹参中药材的指纹图谱。方法 :采用 5 0 μm× 5 0cm未涂渍毛细管柱 ,2 0mmol/L硼砂溶液作缓冲液 ,运行电压为 15kv ,检测波长为 2 10nm。结果 :建立的指纹图谱中共有 11个共有峰 ,且方法学考察符合规定的标准。结论 :该法准确简便 ,可作为控制丹参药材内在质量的有效手段。     

丹参授粉特性研究

目的探讨丹参的授粉特性。方法调查自然传粉及不同方式的人工辅助授粉,通过丹参结实率、千粒重等性状,研究丹参的授粉特性。结果自然传粉条件下丹参结实率62.2%,整个花序套硫酸纸袋后的平均结实率49.4%,单花套袋结实率为0,若辅以人工授粉结实率可达到80%。结论自然条件下,自花无法授粉的原因是花药和柱头的空间距离较远所致,而不是由于时间上雌雄蕊花期不遇或自交不亲和造成。     

丹参在眼科的应用

作者综述了丹参的药理研究概况及在眼科的临床应用.     

丹参功能基因组学研究Ⅰ——cDNA芯片的构建

目的：构建丹参cDNA芯片,为基因表达谱研究提供条件。方法：采用CTAB法提取丹参根总RNA,采用Pharmacia公司Quichprep^TM Micro mRNA PurifiCation Kit分离mRNA后,通过在 cDNA 分子两端加上 EcoRⅠ/NotⅠ接头,在 T4 多核苷酸激酶的作用下磷酸化,与表达载体λZAP Express Predigested Vector 连接,然后用包装蛋白在体外包装连接产物,感染E.coli XL1-Blue MRF’构建成cDNA 文库。挑取分离良好的噬菌斑进行PCR扩增,经过电泳检测、纯化、再次电泳检测后得到的克隆用于芯片点制。以丹参actin基因作为阳性对照,不含DNA的点样液和PolyA为阴性对照。结果：cDNA 文库插入片段长度为500~2 500 bp。共得到4 354个克隆用于芯片点制。单色荧光（Cy3）杂交显示,阳性对照均出现杂交信号,阴性点没有杂交信号。整张芯片背景清晰,漏点少,杂交点为完整的圆形,芯片质量完好。结论：该芯片的制作为首张有关道地药材的cDNA芯片,为丹参功能基因组的研究提供了强有力的工具。     

丹参种子特性研究△

本文研究了丹参种子不同采收部位和采收时间对种子数量和质量的影响,以及温水、高锰酸钾溶液、氯化钙溶液浸种等前处理方法对提高种子发芽率的作用。研究表明：主果穗的种子质量总体上好于侧果穗,果穗中下部的种子质量好于果穗上部,果穗上1/2~2/3果壳枯黄时进行采收才能收获的较多优质的种子。温水、高锰酸钾溶液和氯化钙溶液浸种处理对提高丹参种子发芽率都具有一定的效果,但最佳处理时间略有不同。因此,为提高收获丹参种子的质量,应尽可能在果壳半数以上至三分之二果壳枯黄时采收主果穗种子,并对果穗上端的种子进行去除。为提高陈化种子发芽率以温水浸种24 h或0.3%的高锰酸钾溶液浸种6 h处理为宜。     

丹参功能基因组学研究I——cDNA芯片的构建

目的：构建丹参cDNA芯片，为基因表达谱研究提供条件。方法：采用CTAB法提取丹参根总RNA，采用Pharmacia公司Quichprep^TM Micro mRNA PurifiCation Kit分离mRNA后，通过在cDNA分子两端加上EcoR I／Not I接头，在T4多核苷酸激酶的作用下磷酸化，与表达载体λZAP Express Predigested Vector连接，然后用包装蛋白在体外包装连接产物，感染E．coli XLl-Blue MRF’构建成cDNA文库。挑取分离良好的噬菌斑进行PCR扩增，经过电泳检测、纯化、再次电泳检测后得到的克隆用于芯片点制。以丹参actin基因作为阳性对照，不含DNA的点样液和PolyA为阴性对照。结果：cDNA文库插入片段长度为500～2500bp。共得到4 354个克隆用于芯片点制。单色荧光（Cy3）杂交显示，阳性对照均出现杂交信号，阴性点没有杂交信号。整张芯片背景清晰，漏点少，杂交点为完整的圆形，芯片质量完好。结论：该芯片的制作为首张有关道地药材的cDNA芯片，为丹参功能基因组的研究提供了强有力的工具。     

丹参的不同鉴别方法

通过检索相关的文献,分别从植物形态、植物分类,显微特征,以及薄层层析法、紫外光谱鉴别法及指纹图谱、分子生物学等方面对丹参进行鉴别区分,进而对丹参进行质量控制。     

丹参生殖生物学特性研究

目的　本文通过对大田丹参开花习性、花粉形态、花粉活力、传粉方式等生殖生物学特性的研究观察 ,弄清楚了丹参开花动态特性及其传粉方式 ,为中药材规范化生产质量管理 (GAP)建立丹参规范化栽培(SOP)提供理论依据。方法　在丹参花期定株定点观察其小花、整个花序开放时间 ,及小花花序开放时间对结实率的影响。取新鲜花粉粒用 0 .5 % TTC染色观察各个时期花粉活力 ;在花期对田间丹参分 10点、13点、17点三个时间点进行人工授粉 ,统计结实率 ;大田套袋计数自交结实率和自然结实率。结果　丹参的花粉活力在 80 %以上 ,授粉时间对丹参的结实率影响不大 ;丹参的自然杂交结实率为 75 .4 % ,自交结实率为 4 6 .16 % ,表明丹参为常异花授粉植物。结论　这些规律的研究 ,为丹参规范化栽培及良种繁育提供了理论依据     

不同丹参种质田间比较试验

目的　筛选具有优良性状的丹参种质。方法　用统计学方法比较各丹参种质的生物学性状和生物学产量的差异。结果　矮茎丹参在生产性状上均优于其它种质 ;圆叶丹参单果产籽率最高 ;高茎丹参易感染病害。结论　筛选出了在生产上具有优良性状的矮茎丹参