汉防己甲素抑制自由基眼损伤的实验研究

目的 搪塞汉防己甲素对自由基眼损伤的影响。方法 将２４只实验兔随机分为汉防己甲素组及对照组。术后动态测定房水中丙醛含量。结果 汉防己甲素丙二醛含量明显低于对照组。结论 汉防己甲素能够显著抑制自由基引起的眼损伤。     

汉防己甲素对兔结膜成纤维细胞超微结构和兔眼内组织毒性作用

目的　观察汉防己甲素 (Tet)对兔结膜成纤维细胞超微结构的影响及对兔眼内组织的毒性作用。方法　用含 2、4mg·L-1的Tet作用于体外培养的兔结膜成纤维细胞(RCF) 4 8h ,观察Tet对其超微结构的影响 ;用含 30 0、6 0 0mg·L-1的Tet 0 1mL向兔眼玻璃体腔内注射 ,对照组玻璃体腔内仅注入 0 .1mL生理盐水。观察用药前、用药后 3、14d各组视网膜电流图 (ERG)、视觉诱发电位 (VEP)变化。结果　 2mg·L-1Tet作用RCF 4 8h后 ,电镜观察细胞超微结构无改变 ,而 4mg·L-1Tet作用RCF 4 8h后 ,细胞次级溶酶体数量增多 ,呈髓鞘样结构。向兔眼玻璃体腔内注射 30 0、6 0 0mg·L-1Tet 0 .1mL后 ,用药前及用药后 3dERG、VEP与对照组相比均无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;而 6 0 0mg·L-1Tet行玻璃体腔内注射达 14d后 ,ERG、VEP与对照组相比有高度显著性差异 (P <0 .0 0 0 1)。结论　汉防己甲素对兔结膜成纤维细胞生长有一定的毒性作用 ,但适宜浓度的汉防己甲素应用于兔眼内组织防止成纤维细胞增殖是安全的。     

汉防己甲素滴眼液抗兔眼滤过术区纤维化的疗效观察

目的观察汉防己甲素(tetrandring,Tet)滴眼液抑制兔眼滤过术区纤维化的疗效。方法实验动物共20只(40眼),随机分为单纯手术组、0.2g·L-1丝裂霉素C(mitomycinC,MMC)组、1g·L-1Tet组、赋形剂组,每组5只(10眼),均行全层巩膜切除滤过术,并用Tono-Pen眼压计检测眼压、裂隙灯观察滤过泡形态改变、免疫组织化学方法检测转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)受体蛋白表达。结果 1g·L-1Tet组在术后3d、7d、14d的滤过泡评分分别为9.25±1.53、7.81±0.37、5.69±0·53,眼压为(8.60±1.65)mmHg(1kPa=7.5mmHg)、(10.30±1.49)mmHg、(11.80±0.53)mm-Hg,与单纯手术组、赋形剂组间比较差异均有显著统计学意义(均为P<0.01),而与MMC组比较差异均无统计学意义(均为P>0·05)。术后7dTet组TGF-β2蛋白光密度值为0.440±0.045,与单纯手术组(0.655±0.049)比较差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论 Tet滴眼液可能通过抑制TGF-β2而抑制滤过泡瘢痕形成,从而提高兔眼滤过手术的成功率,可作为抑制滤过泡瘢痕形成的辅助药物之一。     

汉防己甲素抑制翼状胬肉成纤维细胞增殖的研究

目的:观察汉防己甲素对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞增殖抑制作用并探讨其机制,寻找治疗翼状胬肉和预防其复发的有效药物.方法:(1)倒置相差显微镜下观察不同浓度的Tet作用下,体外培养的翼状胬肉成纤维细胞形态的变化,并与丝裂霉素(Mitomycin,MMC)进行比较.(2)MTT比色法测定不同浓度的Tet作用48h对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞增殖的抑制作用,并与MMC进行比较.(3)流式细胞仪检测不同浓度的Tet作用48h,体外培养的翼状胬肉成纤维细胞细胞周期的变化.结果:(1) Tet作用下,细胞胞体收缩,变圆,间隙增宽,药物浓度高时,细胞碎裂,浮起.0.1,0.2g/L MMC作用下大量细胞碎裂,溶解.(2)不同浓度的Tet作用48h对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞的增殖均有明显的抑制作用(P＜0.01);0.1g/L与0.2g/L MMC、4×10-5 mol/L Tet与0.2g/L MMC对翼状胬肉成纤维细胞活性的影响无显著性差异(P＞0.05).Tet的IC50接近10-5mol/L(为0.848×10-5mol/L).(3)Tet作用下,翼状胬肉成纤维细胞周期中S期细胞增多,浓度越高,作用越明显.结论:汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞的增殖具有明显的抑制作用,呈剂量依赖性,细胞分裂被阻止在S期(DNA合成期).可望用于对翼状胬肉的治疗.     

汉防己甲素的兔眼内药代动力学研究

目的 研究汉防己甲素(Tet)滴眼液单次滴眼后在兔眼内的药代动力学行为.方法 采用0.3%Tet滴眼液单次滴眼后,利用高效液相色谱法(HPLC)检测其在兔眼内各组织中的药物浓度变化过程,并计算其在眼内各组织中的药代动力学参数.结果 Tet在眼内各组织中的浓度变化均符合血管外给药一室模型一级动力学过程.其在角膜组织中的浓度最高,消除半衰期为115.140min,消除速率常数为0.060/min.Tel在角膜中的AUC为2336.294μg/(g·min),约为房水中AUC的8倍,虹膜睫状体的5倍,晶状体的15倍,玻璃体的25倍.结论 Tet滴眼液单次滴眼后,在角膜中能够达到较高的浓度,Tet在眼内的药代动力学参数为其临床应用以及用药方案选择提供了实验依据.     

汉防己甲素滴眼液防治大鼠角膜移植排斥反应的实验研究

目的:探讨汉防己甲素滴眼液防治角膜移植排斥反应效果及最佳用药浓度。方法:建立大鼠角膜移植排斥反应模型,随机分5组:A、B、C、D、E组为SD-Wistar大鼠行同种异体角膜移植术,SD鼠为受体,Wistar鼠为供体,其中A组为空白对照组,B～D组分别为0.3%、0.5%、1.0%汉防己甲素滴眼液治疗组,E组为0.1%地塞米松治疗组。术后不同时间裂隙灯显微镜记录及比较各组角膜植片新生血管情况,并观察植片病理学改变。结果:植片内主要为淋巴细胞及巨噬细胞浸润。B、C、D组术后7d、14d、21d、28d时角膜植片水肿、淋巴细胞及巨噬细胞浸润及新生血管明显少于A组(P<0.05)。术后2周不同Tet浓度组间比较C组排斥指数最低,与E组无统计学差异(P>0.05)。结论:0.5%浓度汉防己甲素滴眼液可有效抑制角膜移植排斥反应。     

汉防己甲素缓释系统对兔眼滤过术后瘢痕化的抑制作用

背景滤过泡瘢痕化是抗青光眼滤过性手术失败的主要原因,研究表明汉防己甲素（Tet）可抑制体外培养的人Tenon囊成纤维细胞的增生,从而具有抗滤过术后瘢痕化的潜在作用。目的了解兔眼滤过性手术中植入Tet缓释系统（DDS）抑制瘢痕形成的作用。方法将18只新西兰白兔36只眼行滤过性小梁切除术,按随机数字表法将白兔随机分为3组,每组12只眼,术中按照分组将含0．3mgTet、0．2mgTet的DDS及无药物的空白DDS分别植入各组兔眼结膜瓣下。术后l、4、7、10、14d在裂隙灯下依据邻近角膜厚度标准的滤过泡面积对滤过泡进行评分;术后7d、14d行活体滤过泡组织的共焦显微镜检查,然后制备滤过泡组织学标本行常规组织病理学检查。结果各组的平均滤过泡得分显示,术后4～14dTetDDS组兔眼的滤过泡评分明显高于空白DDS组,差异有统计学意义（P〈0．01）;术后7～14d,0．3mgTet组兔眼的滤过泡评分高于0．2mgTet组,差异有统计学意义（P〈0．05）。光学显微镜下及共焦显微镜下滤过泡形态学观察显示,术后7d、14dTetDDS组兔眼均可见清晰的滤过泡腔隙,滤过泡上皮下平均囊腔数量值及囊腔面积均大于空白DDS组（P〈0．01）,0．3mgTet组兔眼滤过泡上皮下平均囊腔数量值及囊腔面积均大于0．2mgTet组,差异有统计学意义（P〈0．05）。组织病理学研究还表明,0．3mgTet组兔眼滤过泡组织中炎性细胞浸润明显轻于0．2mgTet组和空白DDS组。结论研究结果表明TetDDS能有效抑制滤过性手术后成纤维细胞的增生,提高兔眼滤过性手术的成功率。     

汉防己甲素对离体兔角膜基质细胞抑制机制的实验研究

目的探讨汉防己甲素（Tet）对离体兔角膜基质细胞的抑制作用及其作用机制。方法 选用原代及传代兔角膜基质细胞，实验组加入含不同质量浓度Tet的培养液，对照组加入含等量PBS的培养液，同时用不同质量浓度氟美童作比较。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测对细胞增生的抑制；流式细胞仪（FCM）测定细胞周期和凋亡率的变化；透射电子显微镜观察其超微结构变化；免疫细胞化学检测其凋亡指标的改变。结果 Tet质量浓度为1～10μg／ml时，作用24、48、72h均明显抑制角膜基质细胞的增生（P〈0．01），并具有剂量-反应关系，其各时间点IC50均低于氟美童；FCM结果显示，实验组G0／G1期细胞增加，并可见细胞凋亡峰和凋亡率的升高；免疫细胞化学显示，实验组bax、bcl-2表达均增加，但bax增加更为明显。结论 Tet对角膜基质细胞的增生具有明显抑制作用，并呈现剂量-反应关系，其抑制作用强于氟美童。Tet可能通过诱导细胞凋亡和使细胞周期停滞在G0／G1期而发挥其抗增生作用。     

汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞抑制作用的实验研究

目的观察汉防己甲素对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞的抑制作用，寻找治疗翼状胬肉和预防其复发的有效药物。方法用MTT比色法测定不同浓度的汉防己甲素对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞增生的抑制作用，并与丝裂霉素C（MMC）进行比较；用荧光定量PCR检测10^-5mol／L的汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞基质金属蛋白酶（MMP）MMP-3 mRNA的表达的影响。结果不同浓度的汉防己甲素对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞的增生均有明显的抑制作用（P〈0．01）；10^-5mol／L的汉防己甲素作用24h其MMP-3 mRNA的表达量下降了27．12％。结论汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞具有明显的抑制作用，可望用于对翼状胬肉的治疗。     

汉防己甲素对PRK术后Ⅲ型胶原的影响

目的 探讨汉防己甲素(Tet)对兔PRK术后细胞外基质(ECM)的抑制作用并探讨其机制.方法 健康新西兰大耳白兔60只,雌雄不限.随机分为Tet实验组(0.05%、0.1%、0.2%),艾氟龙(FML)阳性对照组,生理盐水阴性对照组.于PRK术后l周、2周、1个月、2个月用免疫组织化学法检测角膜基质Ⅲ型胶原的表达,并应用计算机图像分析系统进行定量分析.结果 Tet各质量浓度组角膜基质Ⅲ型胶原表达减弱,均低于FML和生理盐水组,差异有统计学意义(P<0.01).结论 Tet可能是通过减少ECM-Ⅲ型胶原的生成而发挥其对haze的抑制作用.     

汉防己甲素滴眼液抑制角膜移植术后排斥反应及植片细胞学改变

目的 探讨0．5％汉防己甲素（Tet）滴眼液抑制角膜移植排斥反应及植片病理细胞学变化。方法 建立大鼠角膜移植排斥反应模型，随机分2组，A组为对照组、B组为0．5％Tet滴眼液组。术后比较各组植片排斥指数（RI）及植片排斥发生时间，并对植片内细胞进行分类并记数、分析。结果 术后各组RI及植片排斥时间，A组与B组相比差异均有显著统计学意义（P〈0．01）。A组和B组炎性细胞数比较差异均有显著统计学意义（P〈0．01）。结论 0．5％Tet滴眼液可有效抑制角膜移植排斥反应。     

汉防己甲素滴眼液治疗大鼠角膜移植排斥反应及植片变化

目的:探讨汉防己甲素(Tet)滴眼液治疗实验性角膜移植排斥反应效果及植片变化。方法:建立大鼠角膜移植排斥反应模型,随机分4组:A、B、C、D组为SD-Wistar大鼠行同种异体角膜移植术,SD鼠为受体,Wistar鼠为供体,其中A组为空白对照组,B～D组分别为3,5,10g/L汉防己甲素滴眼液治疗组。术后不同时间裂隙灯显微镜记录及比较各组角膜植片新生血管情况,并观察植片病理学改变。结果:植片内主要为淋巴细胞及巨噬细胞浸润。B、C、D组术后7,14,21,28d时角膜植片水肿、淋巴细胞及巨噬细胞浸润及新生血管明显少于A组(P<0.05)。不同Tet浓度组间比较C组排斥指数最低(P<0.05)。结论:高浓度(10g/L)Tet治疗角膜移植排斥反应时可出现角膜基质水肿及角膜大泡,但5g/L浓度Tet滴眼液可有效抑制角膜移植排斥反应,且无明显毒副作用。     

Inhibitory effect of tetrandrine eye drops on corneal allograft rejection in rats

To observe the effect of tetrandrine (Tet) eye drops of different concentrations on corneal graft and on allograft rejection in rats. · METHODS: Models of allograft rejection were set up in 64 SD rats and they were then randomly divided into 3, 5, 10g/L tetrandrine eye drops-treated and control groups. At different times postoperatively, neovascularization and inflammation of corneal graft were observed using slit-lamp microscopy, HE staining, light microscopy and microphoto-analysis. · RESULTS: The graft was infiltrated mainly with lymphocytes and mononuclear-macrophages. Corneal neovascularization and inflammation were significantly inhibited in the 5g/L Tet-treated group (P <0.05), compared with control group on day 7, 14, 21, 28 postoperatively. · CONCLUSION: Corneal edema and corneal epithelial bubble appear when the graft is treated with tetrandrine of higher concentration (10g/L), but 5g/L Tet eye drops significantly inhibit corneal allograft rejection in rats without serious side-effects.     

Retinal toxicity of intravitreally injected steroids on the rabbit eye]

The retinal toxicity of intravitreally injected steroids, fluorometholone and tetrahydrocortisol, was examined. The concentration of the steroids was 20 mg/ml, and 0.05 ml of each solution were injected into the rabbit vitreous cavity. An equal volume of saline solution was injected as a control. In addition to ophthalmoscopy, intraocular pressure was measured and electroretinography, light microscopy and electron microscopy were performed. The results showed no remarkable changes in all eyes. Fluorometholone and tetrahydrocortisol seem to have neither toxicity to the retina nor adverse effect of elevating intraocular pressure when intravitreally injected with this amount.