胰岛素样生长因子-1对氯化钴诱导的PC12细胞凋亡的抑制作用

目的 探讨胰岛素样生长因子-1（IGF-1）对氯化钴（CoCl2）诱导的肾上腺嗜铬细胞瘤 PC12细胞凋亡的作 用及机制。方法 取对数生长期的 PC12细胞,分别以 10、20、40、80 μmol/L的 CoCl2溶液和 100、200、400 μg/L的 IGF- 1溶液处理细胞,CCK-8法检测细胞活力,得出 CoCl2和 IGF-1最佳干预浓度。根据选定的实验条件,应用 CoCl2处理 PC12细胞建立 HIE细胞模型,实验分为对照组、CoCl2处理组、IGF-1+CoCl2处理组。分组处理 24 h后采用 CCK-8法 检测细胞存活率;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;Western blot检测各组细胞 Bax、Bcl-2及 Caspase-3的蛋白的表达 水平。最后在上述实验的基础上,设 CoCl2处理组、CoCl2+IGF-1处理组、HIF-1α抑制剂 2-甲氧雌二醇（2-MeOE2）+ CoCl 2组和 CoCl2+2-MeOE2+IGF-1组,Western blot观察 IGF-1、2-MeOE2及两者共用对 PC12细胞 HIF-1α及 Bax的表 达水平的影响。结果 CCK-8检测结果显示,40 μmol/L CoCl2和 200 μg/L IGF-1为最佳干预浓度。利用以上浓度分 组干预细胞 24 h后,与 CoCl2组相比,IGF-1+CoCl2处理组细胞存活率明显提升,TUNEL阳性细胞数和细胞比例降低, 同时抗凋亡蛋白 Bcl-2表达上调,促凋亡蛋白 Bax、Caspase-3,HIF-1α表达下调,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。 应用 2-MeOE2对细胞进行预处理后,CoCl2+2-MeOE2组与 2-MeOE2+IFG-1组 HIF-1α和 Bax蛋白表达差异无统计 学意义,但均较 CoCl2+IGF-1组明显下调（P＜0.01）。结论 IGF-1可抑制 CoCl2诱导的 PC12细胞凋亡,其保护作用 可能与 HIF-1α表达下调有关。     

缺氧诱导因子-1α对结直肠癌细胞上皮间质转化及 侵袭迁移的影响

摘要： 目的 探讨缺氧是否能促进不同分化程度结直肠癌细胞上皮间质转化 （EMT）, 并分析缺氧对结直肠癌细 胞侵袭、 迁移的影响。方法 分别选取 HCT116（低度分化）和 HT-29（高度分化）结直肠腺癌细胞。观察 0、 10、 25、 50、 100 及 150 mg/L 氯化钴 （CoCl2） 诱导 2 种细胞 48 h 后的形态变化。分析 0、 10、 25、 50 及 100 mg/L CoCl2 处理 48 h 后缺氧诱导因子 （HIF） -1α蛋白表达变化, 筛选出 CoCl2诱导细胞缺氧的最适合浓度。MTT 实验检测不同时间点 （0 、 24 、 48 、 72 及 96 h） CoCl2诱导 2 种结直肠癌细胞的增殖情况, 筛选出 CoCl2诱导缺氧的最佳时间。最佳浓度和时间 条件下, 对 HCT116 和 HT-29 细胞分别进行缺氧 （缺氧组） 和常氧 （常氧组） 处理, Transwell 侵袭和划痕实验检测 2 组 2 种细胞的侵袭、 迁移情况; Western blot 实验和 RT-PCR 实验检测 2 组 HIF-1α、 E-cadherin 及 Vimentin 的蛋白及 mRNA 表达水平。结果 50 mg/L CoCl2作用 48 h 时 2 种细胞均出现明显的形态改变。2 组 HCT116、 HT-29 细胞的 HIF-1α蛋白表达水平随 CoCl2浓度增加均呈先增后减趋势, 50 mg/L 为最适宜浓度 （P < 0.05）。0~96 h 时 2 种细胞不 论有无缺氧, 细胞增殖能力均呈先增后减趋势 （P＜0.05）, 48 h 为最佳作用时间。HCT116 和 HT-29 细胞系中缺氧组 穿膜细胞数和细胞迁移率均明显高于常氧组 （P＜0.05）。HCT116、 HT-29 细胞系中缺氧组 HIF-1α、 Vimentin 的蛋白 和 mRNA 表达水平均高于常氧组, 而 E-cadherin 的蛋白和 mRNA 表达水平低于常氧组（均 P＜0.05）。结论 缺氧 能诱导不同分化程度结直肠癌细胞均发生 EMT, 并能增强 2 种结直肠癌细胞的侵袭、 迁移能力。     

氯化钴对乳鼠心肌细胞凋亡的影响

目的确定萌化钴(CoCl2)对乳鼠心肌细胞凋亡的影响。方法采用达氏修正依氏(DMEM)/F12(1∶1)培养基原代培养乳鼠心肌细胞,3d后分别给予浓度200、400、600μmol/L的CoCl2培养24h,对照组不加CoCl2。锥虫蓝染色检测细胞存活力,Hochest33258荧光染色检测细胞凋亡,用Western Blot检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白水平。结果与对照组比较,CoCl2培养组细胞存活率明显下降(P<0.01),凋亡率明显增加(P<0.01),且心肌细胞存活率下降程度及细胞凋亡率睁加程度均随着氯化钴浓度增加而升高。HIF-1α蛋白水平亦随CoCl2浓度升高而增加。结论CoCl2可模拟缺氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡。     

五味子乙素对HK-2细胞缺氧损伤的保护作用

卢爱龙 1, 谭小月 2, 张勉之 3△, 吴银娜摘要： 目的 探讨五味子乙素 （Sch B） 对氯化钴 （CoCl2） 诱导的人类近端肾小管上皮 （HK-2） 细胞缺氧损伤的保护作用及其可能机制。方法 取离体培养 HK-2 细胞, 随机分为 4 组。对照 （C） 组： 细胞未经任何处理。CoCl2组 （化学乏氧组）： 加入 600 μmol/L 的 CoCl2 处理 24 h。Sch B 预保护（CoCl2+ Sch B）组： 分别加入终浓度为 1 μmol/L 和 10 μmol/L Sch B 预处理 2 h 后, 其余操作同 CoCl2 组。Sch B 组： 分别加入终浓度 1 μmol/L 和 10 μmol/L Sch B 处理 2 h。CCK-8 试剂盒检测各组细胞活性; AnnexinV-FITC/PI 双标记流式细胞仪检测各组细胞凋亡率; Western Blot 检测各组缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）蛋白表达; RT-PCR 检测各组 HIF-1α和诱导型一氧化氮合酶（iNOS） mRNA 表达。结果 与对照组相比, CoCl2组细胞活性明显降低, 细胞凋亡率、 HIF-1α蛋白表达量和 iNOS mRNA 表达量显著增加, HIF-1α mRNA 表达量差异无统计学意义; Sch B 预保护组较 CoCl2组细胞活性显著增加, 细胞凋亡率、 HIF-1α蛋白表达量、 HIF-1α及 iNOS mRNA 表达量均显著减少; Sch B 组与对照组细胞活性、 细胞凋亡率差异无统计学意义, Sch B 组几乎不表达 HIF-1α蛋白。结论 Sch B 可能通过抑制 HIF-1α蛋白和 iNOS mRNA 的表达减少 HK-2 细胞的凋亡, 从而对 HK-2 细胞缺氧损伤起保护作用。     

噪声性听力损伤药物防治的研究进展

噪声是一种常见的严重危害人类身心健康的环境因素,噪声危害在不断增加,其危害范围也在不断扩大。关于噪声引起的听力损伤的研究一直是一项重要的研究内容。噪声性听力损伤的产生有多种机制,耳蜗内大量氧自由基的形成和与Ca2+失衡引起的血管微循环障碍可能是重要原因。目前用于防治噪声性听力损伤的药物主要是神经营养剂、血管调节剂、抗氧化剂等。本文对噪声性听力损伤药物防治方面的一些研究进展进行了综述。     

电子技术企业噪声作业工人听力损失特点分析

目的了解电子技术企业噪声作业工人听力损失的特点,为采取控制和消除职业性噪声聋的发生提供依据。方法对两家电子技术企业进行职业卫生调查,以噪声作业车间495名工人为噪声组,以150例无职业危害作业工人为对照组,用常规方法测量每个工人的左右耳气导听阈,按照GBZ47—2007计算平均听阈和判定听力状态,比较两组工人听力状况,并对噪声组听力损失进行统计学分析。结果噪声组、对照组听力损失检出率分别为14．9％和1．3％,两组比较,差异有极显著性（P〈0．01）。噪声组中,接触非稳态噪声、稳态噪声工人的听力损失检出率分别为15．3％、12．5％,冲压、打磨和粉碎工种工人的听力损失检出率分别为15．3％、13．3％和11．8％,工龄为〈5、5～、10-年组工人的听力损失检出率分别为8．2％、28．4％和38．3％,年龄为〈25、25～、39-岁组工人的听力损失检出率分别为0．0％、17．9％和29．6％;不同工种、不同类型噪声接触工人的听力损失检出率比较,差异均无显著性（P〉0．05）;χ^2趋势检验示,随着噪声作业工龄的增加、年龄的增加,听力损失检出率增加（P〈0．01）;逐步多因素Logistic回归分析显示,工龄、年龄是听力损失的独立危险因素。结论电子技术行业高强度噪声引起作业人员听力损失,加强职业病防治管理措施,对降低职业性噪声聋的发生有重要意义。     

Genistein inhibited hypoxia-inducible factor-1alpha expression induced by hypoxia and cobalt chloride in human retinal pigment epithelium cells

The time-dependent changes of hypoxia-inducible factor-1alpha (HIF-1alpha) expression induced by hypoxia and CoCl2 treatment and the effects of genistein on the level of HIF-1alpha expression in human retinal pigment epithelium cells were examined. Judging by relative fluorescence using a confocal scanning laser microscope coupled to a computer, HIF-1alpha expression was determined. It was found that hypoxia could markedly increase the expression of HIF-1alpha. The highest expression of HIF-1alpha was detected at 1 h, which was 313.9% +/- 38.2% of the control level. After pretreatment with genistein (50, 100, and 200 micromol/l), the hypoxia-evoked HIF-1alpha expression was concentration-dependently inhibited. CoCl2 treatment could significantly elevate the level of HIF-1alpha expression. At 0.5 h after CoCl2 treatment, the highest level was observed, which was 141.4% +/- 14.1% of the control level. Genistein 50, 100, 200 micromol/L could also suppress HIF-1alpha expression in a concentration-dependent manner. These results suggested that the inhibition of HIF-1alpha protein expression by genistein may partly account for its effect on retinal neovascularization in vivo.     

Promotion of noise-induced hearing loss by chemical contaminants

Recent studies have underscored the ability of a wide range of chemical agents to potentate noise-induced hearing loss. Given the ubiquitous nature of noise exposure particularly in many work settings, the high rate of noise-induced hearing loss, the limited degree to which auditory function can recover following damage to the inner ear, and the disparate chemical structures that appear capable of impairing hearing, this issue appears to have great public health significance. A compendium of chemicals known to potentiate noise induced hearing loss is presented along with a hypothesis that might explain at least one basis for potentiation of noise-induced hearing loss by certain chemical toxicants. The use of benchmark dose analysis to undertake a risk assessment for promotion of noise-induced hearing loss by both carbon monoxide and hydrogen cyanide is described.     

Potentiation of noise-induced hearing loss by low concentrations of hydrogen cyanide in rats.

Noise-induced hearing loss is the most prevalent occupational injury in the United States despite the adoption of clear permissible exposure limits and protocols for hearing conservation. This study identifies low-level chemical asphyxiant exposure as a risk factor capable of potentiating noise-induced hearing loss. Rats were exposed to 10, 30, and 50 ppm hydrogen cyanide (HCN) alone for 3.5 h (n = 28) or in combination with 2 h octave band noise exposure (100 dB(lin); n = 28). Additional groups received noise exposure alone (n = 16) and no treatment other than placement in an inhalation chamber with clean air and quiet (n = 16). Pure tone compound action potential (CAP) thresholds were determined 4 weeks following the exposure in order to assess pure tone auditory sensitivity and permanent threshold impairment. Cochleae from an additional 13 subjects were processed for light microscopy to permit assessment of hair cell loss. The results demonstrate that the noise exposure alone impaired CAP threshold by about 10 dB, averaged between 12-40 kHz, and produced a 5% loss of outer hair cells at the base of the cochlea, but no inner hair cell loss. The combined exposure to noise and HCN caused a cyanide dose-dependent CAP threshold impairment that exceeds the noise exposure alone. This effect reached statistical significance at a HCN level of 30 ppm. Combined exposure also produced more outer hair cell loss than noise alone. HCN alone did not cause significant hearing loss or hair cell loss. A risk assessment analysis was conducted for the auditory threshold data using benchmark dose software published by the U. S. EPA (BMDS version 1.3). A continuous model showed that the data could be described by a linear function. For a benchmark response corresponding to a 5 dB increase in auditory threshold above the effect of noise alone, the lower bound on the 95% confidence interval for the benchmark dose was 9 ppm. The benchmark dose that impaired auditory threshold 10% above the effect of noise alone had a lower bound of 2 ppm. The lower bound to the HCN dose that produced a 1 SD elevation in noise-induced hearing loss was 16 ppm. These exposure levels provide a range of concentrations below to slightly above the short-term exposure limit for HCN. However, if these levels are adjusted for an 8 h time-weighted average (TWA), the resulting levels are below the permissible exposure level (PEL) for HCN.     

3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α在OSAHS合并高血压检测中的意义

目的 观察3-硝基酪氨酸(3-NT)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和8-异前列腺素(8-iso-PGF-2α)在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)合并高血压检测中的意义.方法 选择2010年1月至2015年12月就诊的OSAHS 患者149例,根据是否合并高血压分为单纯OSAHS组(43例)和OSAHS合并高血压组(106例).选择同时期行健康体检者35例为健康对照组.观察各组血清3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平,OSAHS合并高血压患者3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平与呼吸暂停低通气指数(AHI)的关系,治疗后水平的变化及其各指标的相关性分析.结果 OSAHS合并高血压组和单纯OSAHS组3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平明显高于健康对照组(P<0.01),而OSAHS合并高血压组明显高于单纯OSAHS组(P<0.01).OSAHS合并高血压患者的3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平随着AHI升高而升高(P<0.01),有效治疗后机体的3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平较治疗前明显下降(P<0.01).OSAHS合并高血压患者的3-NT水平与HIF-1α(r=0.594,P<0.05)和8-iso-PGF-2α(r=0.647,P<0.05)水平呈正相关,HIF-1α与8-iso-PGF-2α水平呈正相关(r=0.781,P<0.05).结论 3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平参与了OSAHS疾病的发生发展过程,可以作为OSAHS合并高血压的重要预测因子.     

HIF-1α在肾缺血-再灌注损伤及高压氧、丹参酮Ⅱ_A治疗中的表达及意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在肾缺血-再灌注损伤及其治疗中的表达及意义。方法:选用Wistar大鼠84只,随机分为空白对照组、缺血组、缺血-再灌注组(1,3,5 h)、高压氧组(1,3,5 h)、丹参酮ⅡA组(1,3,5 h)及假手术组(1,3,5h)。空白对照组和缺血组及其余各组的每一时间点各6只。各组均先切除右肾,取左肾研究。取左肾部分皮髓质用4%的多聚甲醛固定并制作蜡块,行石蜡切片免疫组化检测各组肾HIF-1α蛋白的表达,另一部分提取总RNA,采用荧光定量PCR检测各组肾HIF-1αmRNA的表达。取肾后通过下腔静脉采血,检测MDA、TNF-α、Urea及Scr。结果:(1)Urea、HIF-1α蛋白表达及HIF-1αmRNA表达分别在假手术组5,3,1 h增高与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Urea、Scr、MDA、TNF-α在缺血-再灌注组(1,3,5 h)增高与空白对照组、缺血组比较,其差异有统计学意义(P<0.05)。HIF-1αmRNA在缺血组呈高表达,缺血-再灌注组呈低表达,HIF-1α蛋白在缺血组和缺血-再灌注组均呈高表达。(3)经高压氧、丹参酮ⅡA治疗后,Urea、Scr、MDA、TNF-α降低,HIF-1αmRNA增高,与缺血-再灌注组比较,差异有统计学意义(P<0.05),HIF-1α蛋白的表达经丹参酮ⅡA治疗后降低,差异有统计学意义(P<0.05),而经高压氧治疗后变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)手术本身的创伤对BUN的含量和HIF-1α的表达有影响。(2)HIF-1α在肾缺血-再灌注损伤中其基因的表达水平与蛋白的表达水平不同步。肾缺血-再灌注后,MDA和TNF-α含量增高以及肾组织中HIF-1α蛋白的过度表达是加重肾功能损害的重要原因。(3)抑制再灌注后氧自由基和致炎因子的产生是丹参酮ⅡA和高压氧产生肾保护效应的共同通路。丹参酮ⅡA对肾组织中HIF-1α蛋白的表达具有明显的抑制作用,这可能是肾缺血-再灌注后丹参酮ⅡA产生肾保护效应的另一重要机制。而高压氧对肾组织中HIF-1α蛋白的表达无明显的抑制作用,表明再灌注后高压氧可能没有通过HIF-1α环节发挥肾保护作用。     

工业脉冲噪声对冲压工听力影响的调查

目的研究工业脉冲噪声对冲压工听力的影响。方法选择442名冲压工、128名研磨工分别为脉冲噪声组和稳态噪声接触组,另选择208名非噪声作业的装配工为对照组;对其纯音气导听阈测试结果进行统计分析。结果44．3％冲压工被检出高频听力损失,4．1％冲压工被检出观察对象,2．0％冲压丁被检出疑似噪声聋,脉冲噪声对听力损害高于稳态噪声组（P〈0．01）。冲压工累积噪声暴露量（CNE）每增加1dB（A）·年,出现听力损失的风险相应增加12．3％（P〈0．01）;研磨工累积噪声暴露量（CNE）每增加1dB（A）·年,听力损失的风险相应增加9．3％（P〈0．05）。结论工业脉冲噪声对听力的损害大于稳态噪声。     

Role of PGE-type receptor 4 in auditory function and noise-induced hearing loss in mice

This study explored the physiological roles of PGE-type receptor 4 (EP4) in auditory function. EP4-deficient mice exhibited slight hearing loss and a reduction of distortion-product otoacoustic emissions (DPOAEs) with loss of outer hair cells (OHCs) in cochleae. After exposure to intense noise, these mice showed significantly larger threshold shifts of auditory brain-stem responses (ABRs) and greater reductions of DPOAEs than wild-type mice. A significant increase of OHC loss was confirmed morphologically in the cochleae of EP4-deficient mice. Pharmacological inhibition of EP4 had a similar effect to genetic deletion, causing loss of both hearing and OHCs in C57BL/6 mice, indicating a critical role for EP4 signaling in the maintenance of auditory function. Pharmacological activation of EP4 significantly protected OHCs against noise trauma, and attenuated noise-induced hearing loss in C57BL/6 mice. These findings suggest that EP4 signaling is necessary for the maintenance of cochlear physiological function and for cochlear protection against noise-induced damage, in particular OHCs. EP4 might therefore be an effective target for cochlear disease therapeutics.     

心肌转染缺氧诱导因子-1α对大鼠心肌梗死的影响

目的评价心肌内注射缺氧诱导因子(HIF)-1α进行基因转染对大鼠心肌梗死的影响,包括HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)的基因表达、血中VEGF水平、心肌毛细血管密度以及心肌梗死面积的变化。方法选择体质量在250~350 g的雄性大鼠72只进行实验,分为3组,第1组为转染腺病毒HIF-1α的Ad-HIF-1α组;第2组为转染空质粒的Ad-null组(转染空质粒组);第3组为假手术组。每组以术后的不同时间处死取材分3,7,14 d 3个亚组,每个亚组8只。建立心肌梗死模型。当左前降支被结扎后,在室游离壁的3个不同部位分别注射50μg Ad-HIF-1α和50μg的Ad-dull,然后关胸缝合。假手术组不结扎左前降支。分别在转染3、7及14d后观察HIF-1α和VEGF的基因表达、血中VEGF水平、心肌毛细血管密度以及心肌梗死面积的变化。结果转染腺病毒HIF-1α基因的心肌组织中第3天即可测出478 bp的HIF-1α及291 bp VEGF部分转录产物,第7、14天检测仍有表达,而Ad-dull组的心肌组织有表达,但相对于转染腺病毒HIF-1α基因的心肌组织表达明显较弱;血中VEGF水平在Ad-HIF-1α组比Ad-null组在37、d升高更显著(P<0.01);心肌转染组的毛细血管密度与未转染组相比明显增加(P<0.01);转染14 d后的心肌梗死面积在转染组为(23.8±2.2)%,明显小于对照组的(38.7±3.1)%(P<0.01)。结论心肌内注射HIF-1α进行基因转染可以增加HIF-1α和VEGF的基因表达,血中VEGF水平升高,心肌毛细血管密度明显增加,心肌梗死面积明显减少。     

HIF-1α反义寡核苷酸对肝癌细胞增殖凋亡的影响及机制

目的：本研究通过应用 HIF-1α反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotide,ASODN）处理 SMMC-7721肝癌细胞,观察其对 SMMC-7721肝癌细胞增殖的作用和对细胞周期及凋亡率的影响及其机制。方法肝癌细胞系SMMC-7721分对照组和试验组。对照组细胞常规培养,试验组细胞施加 HIF-1α的 ASODN 干预,设浓度梯度和时间梯度。检测不同药物浓度、不同时间对 SMMC-7721细胞的增殖的作用及对细胞周期和凋亡率的影响。对 bcl-2、bax、surviving mRNA 表达产物相对定量,并对 SMMC-7721细胞胞浆 bcl-2、bax、survivin 蛋白进行相对定量分析。结果与对照组相比,各处理组 OD 值均有显著下降,细胞数量降低,且各实验组相比呈明显的时间-剂量依赖效应,差异有统计学意义（ P <0.05）。不同浓度 HIF-1α的 ASODN 处理细胞后,均可使各处理组 G0/ G1期细胞增多,S 期细胞减少,且呈时间-剂量依赖效应,差异有统计学意义（ P <0.05）。不同浓度 HIF-1α的 ASODN 处理细胞不同时间后,与对照组相比,各实验组 bcl-2 mRNA 和 survivin mRNA 表达均有显著下降,差异有统计学意义（ P <0.05）。而 bax 的 mRNA无明显变化趋势（ P >0.05）。不同浓度 HIF-1α的 ASODN 处理细胞不同时间后,与对照组相比,各实验组 bcl-2和survivin 的蛋白表达显著下降,bax 的蛋白表达显著增加,差异有统计学意义（ P <0.05）。结论 HIF-1α的 ASODN可以将 SMMC-7721肝癌细胞株阻滞于 G0/ G1期,影响细胞周期进程,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。HIF-1α促进增殖抑制凋亡的可能机制是上调肝癌细胞 Survivin 和 bcl-2的表达,下调 bax 的表达。针对 HIF-1α抑制剂的应用为肝癌的治疗提供了新思路。     

灌胃α-硫辛酸对豚鼠噪声性听力损伤的防护作用研究

目的 观察自由基清除剂α-硫辛酸对噪声性听力损伤的保护作用。方法 24只体重为250~300 g的雄性纯白色豚鼠,按体重随机分为α-硫辛酸低、中、高剂量组(n=3×6)、噪声对照组(n=6)。各组动物暴露倍频程噪声(4 kHz中心频率)115 dB SPL(sound pressure level,声压级) 4 h。α-硫辛酸组动物暴露前2 d、暴露当天至暴露后7 d连续灌胃给予α-硫辛酸30 mg/(kg·d)(低剂量组)、60 mg/(kg·d)(中剂量组)、120 mg/(kg·d)(高剂量组);对照组动物相应时间灌胃给予等量的生理盐水。暴露后不同时间(3、7、10 d)测试各组动物在不同频率(8、16、24、32 kHz)下的听觉脑干反应(auditory brainstem response,ABR)值,组织学检查内外毛细胞缺失和损伤程度,以测试时的听阈值与暴露前听阈差值(听阈偏移)反映听力受损情况。结果 暴露后3 d,低、中、高剂量组在8、16 kHz频率下,与噪声对照组相比较具有显著性差异;低、高剂量组在24、32 kHz频率下与噪声对照组相比较具有显著性差异;暴露后7 d,中、高剂量组在8、16、24 kHz频率下与噪声对照组相比较具有显著性差异;低、高剂量组在32 kHz频率下与噪声对照组相比较具有显著性差异;暴露后10 d,高剂量组与噪声对照组比较具有显著性差异。组织学检查,α-硫辛酸组动物无明显内外毛细胞缺失,毛细胞形态结构破坏较轻。对照组动物内耳外毛细胞显示水肿、空泡变性等病变。结论 高、中、低剂量的α-硫辛酸对噪声性听力损伤均有一定的预防作用;高剂量的α-硫辛酸对噪声性听力损伤具有很好的预防和治疗作用。     

葛根素对噪声性耳聋的防治效果分析

目的对葛根素预防和治疗噪声性耳聋效果进行分析。方法将54例研究对象随机分为观察组32例和对照组22例。给予研究对象相同程度噪声,观察组予以葛根素注射液防治,对照组予以复方丹参防治。比较2组临床疗效及预防效果。结果观察组总有效率为96.9%,高于对照组的72.7%;听力受损率和耳聋率分别为15.6%、12.5%,低于对照组的50.0%、54.5%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论葛根素应用于预防和治疗噪声性耳聋,效果较好,耳聋率较低,有效率较高。     

低氧对HTR-8/SVneo细胞增殖及HIF-1α、VEGF、MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的 采用二氯化钴（CoCl2）模拟体外低氧环境,探讨低氧状态对滋养细胞株HTR-8/SVneo细胞增殖及缺 氧诱导因子（HIF）-1α、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶（MMP）-9、基质金属蛋白酶组织抑制因子 1 （TIMP-1）蛋白表达的影响。方法 采用0、50、100、200、400、800、1 000、1 200 μmol/L的CoCl2处理HTR-8/SVneo细 胞,建立化学缺氧模型,CCK8法检测以上浓度培养24 h、48 h后对HTR-8/SVneo细胞增殖的影响;根据CCK8实验结 果拟定 CoCl2低、中、高浓度组,Western blot 检测 CoCl2低、中、高浓度组作用 48 h 对 HTR-8/SVneo 细胞中 HIF-1α、 VEGF、MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响。结果 CCK8实验提示低氧状态激活HTR-8/SVneo细胞增殖,CoCl2作用于 HTR-8/SVneo细胞48 h后,OD值随浓度增加而上升;同一CoCl2浓度作用下,作用48 h较作用24 h的OD值均上升。 选择100、200、400 μmol/L的CoCl2作为CoCl2低、中、高浓度组。与空白组对比,CoCl2低、中、高浓度组HTR-8/SVneo 细胞中HIF-1α、MMP-9蛋白表达水平上调（P＜0.05）,MMP-9/TIMP-1比例上升,呈浓度依赖性（P＜0.05）,CoCl2中、 高浓度组的VEGF的蛋白表达水平上调（P＜0.05）,CoCl2低、中、高浓度组的TIMP-1蛋白表达水平下降,但随CoCl2浓 度增加而呈上升趋势。结论 低氧状态可增强 HTR-8/SVneo 细胞的增殖能力,并可能通过 HIF-1α 的介导上调 VEGF的表达与MMP-9/TIMP-1比值。