囊胚玻璃化冷冻的研究进展

随着序贯培养液的出现，囊胚移植被认为是提高胚胎种植率、降低多胎妊娠率的有效方法．因此囊胚冷冻愈显重要。囊胚的玻璃化冷冻因其简化了冷冻过程；避免细胞内冰晶形成所引起的一系列物理及化学损伤：并且在冷冻过程中可迅速通过临界温度区，减轻了胚胎冷冻中常见的冻伤现象，使存活率提高等优点，近几年得到逐步发展。现对囊胚玻璃化冷冻（vitrification）的原理、要领、现状及应用前景进行综述。     

囊胚玻璃化冷冻的研究进展

随着序贯培养液的出现,囊胚移植被认为是提高胚胎种植率、降低多胎妊娠率的有效方法,因此囊胚冷冻愈显重要.囊胚的玻璃化冷冻因其简化了冷冻过程;避免细胞内冰晶形成所引起的一系列物理及化学损伤;并且在冷冻过程中可迅速通过临界温度区,减轻了胚胎冷冻中常见的冻伤现象,使存活率提高等优点,近几年得到逐步发展.现对囊胚玻璃化冷冻(vitrification)的原理、要领、现状及应用前景进行综述.     

人类囊胚玻璃化冷冻研究进展

1985年Rail和Fahy首次应用玻璃化法冷冻保存小鼠胚胎以来，玻璃化冷冻技术以其简单、有效、经济受到关注。在人类辅助生殖技术中，囊胚的培养和移植对于提高妊娠率、减少多胎妊娠的发生具有重要意义．因此需要将剩余囊胚有效冷冻保存，玻璃化法可望成为有效冷冻保存多余囊胚的新技术。在玻璃化冷冻技术中．不同的冷冻装置、冷冻保护剂的类型和浓度、解冻方法的不同、囊胚冷冻前的不同处理。都是影响囊胚冷冻后复苏的关键因素。     

人类囊胚玻璃化冷冻研究进展

1985年Rall和Fahy首次应用玻璃化法冷冻保存小鼠胚胎以来,玻璃化冷冻技术以其简单、有效、经济受到关注.在人类辅助生殖技术中,囊胚的培养和移植对于提高妊娠率、减少多胎妊娠的发生具有重要意义,因此需要将剩余囊胚有效冷冻保存,玻璃化法可望成为有效冷冻保存多余囊胚的新技术.在玻璃化冷冻技术中,不同的冷冻装置、冷冻保护剂的类型和浓度、解冻方法的不同、囊胚冷冻前的不同处理,都是影响囊胚冷冻后复苏的关键因素.     

超高速玻璃化冷冻人类囊胚获得妊娠成功

随着体外培养体系的不断优化，增加了人类胚胎的囊胚形成率。囊胚期移植不仅提高妊娠率，而且减少移植胚胎数，最大限度的降低多胎妊娠的风险。因此有效的冷冻保存多余囊胚具有很高的临床应用价值。但是常规慢速及常规玻璃化冷冻人囊胚结果并不理想，目前采用冷冻环加上-205℃液氮的超高速玻璃化冷冻牛囊胚，实验结果令人满意。此研究以小鼠及人类囊胚为研究对象，进一步应用于临床，旨在评估此种超高速玻璃化冻融人囊胚的发育潜能。     

玻璃化冷冻法保存人类囊胚的临床应用

目的:探讨玻璃化冷冻法保存人类囊胚的临床应用效果。方法:回顾性分析在某医院生殖中心行玻璃化冷冻解冻囊胚患者共12个周期的结局。结果:玻璃化冷冻解冻共21枚胚胎,存活21枚(存活率100%),共解冻12个周期,均有胚胎移植,获得临床妊娠5例(妊娠率41.67%),着床率23.81%(5/21)。结论:玻璃化冷冻法是保存人类囊胚的一种有效方法。     

两种冷冻载体在囊胚玻璃化冷冻复苏中的对比分析

目的对比分析两种商品化的冷冻载体,冷冻麦管(JY Straws)和冷冻环(Crystal Cap)在囊胚玻璃化冷冻复苏中的效果。方法 2013年7月-2016年1月,在该中心进行的囊胚复苏移植周期1 153例。囊胚均采用玻璃化冷冻复苏移植,冷冻麦管组449例,其中D5单囊胚移植142例、D5双囊胚移植174例、D6单囊胚移植69例、D6双囊胚移植64例;冷冻环组704例,其中D5单囊胚移植123例、D5双囊胚移植330例、D6单囊胚移植90例、D6双囊胚移植161例。对比分析两种冷冻载体各分组的临床妊娠情况。结果 D5单囊胚复苏移植中,冷冻麦管组的临床妊娠率和种植率均高于冷冻环组,57.75%vs.46.34%,但差异无统计学意义(P0.05);D5双囊胚复苏移植中,冷冻麦管组的临床妊娠率、种植率均高于冷冻环组,74.71%vs.68.18%、58.62%vs.53.03%,但差异无统计学意义(P0.05);D6单囊胚复苏移植中,冷冻麦管组的临床妊娠率和种植率均高于冷冻环组,42.03%vs.32.22%,但差异无统计学意义(P0.05);D6双囊胚复苏移植中,冷冻麦管组的临床妊娠率、种植率均略低于冷冻环组,51.56%vs.52.17%、33.59%vs.36.65%,但差异无统计学意义(P0.05)。结论两种冷冻载体均可以获得不错的临床结局,冷冻麦管作为新采用的冷冻载体可以放心使用。     

胚胎玻璃化冷冻复苏存活率影响因素分析

目的 探讨影响卵裂期胚胎玻璃化冷冻复苏后存活的相关因素,以期提高冻融胚胎存活率。方法 回顾性分析2013年1月—2019年12月在泰安市中心医院行卵裂期胚胎玻璃化冷冻复苏移植的3 795个周期,所有患者每次均解冻2枚胚胎,共解冻7 590枚胚胎。按照胚胎复苏后存活程度分为3组,其中A组：2枚胚胎均完整存活;B组：2枚胚胎中有1枚胚胎非完整存活(一半以上卵裂球存活);C组：2枚胚胎中有1枚未存活(一半以下卵裂球存活)。按照新鲜培养周期时的受精方式分为常规体外受精组(IVF组)和单精子卵胞浆内显微注射组(ICSI组)。按照胚胎分级分为优质胚胎组(Ⅰ、Ⅱ级胚胎)和非优质胚胎组(Ⅲ级胚胎)。按照冷冻液和复苏液是否使用同一种品牌分为同种品牌组和不同品牌组。结果 C组患者的年龄、不孕年限显著高于A、B两组,差异有统计学意义(P<0.05),3组的冻融移植周期数及冷冻保存时间比较,差异均无统计学意义(P>0.05),C组的临床妊娠率显著低于A、B两组,差异有统计学意义(P<0.01)。ICSI组患者胚胎复苏后完整存活率显著低于IVF组患者,差异有统计学意义(P<0.05),未...     

囊胚玻璃化冷冻对子代发育行为和生殖能力评价

目的 通过观察囊胚玻璃化冷冻对复苏移植后小鼠的生长发育、神经功能、行为学和生殖能力的影响,评估该技术的长期安全性. 方法 通过促排卵收集性成熟期前C57BL/6雌鼠囊胚,玻璃化冷冻,复苏移植到ICR代孕鼠.仔鼠出生后,观察产仔数和有无外观畸形,记录新生鼠不同时期的生理指标;以正常C57BL/6小鼠为对照,通过转轮、水迷宫和社交试验检测小鼠的运动协调、学习记忆和社交习性;8周龄后检测生殖力. 结果 囊胚玻璃化冷冻鼠发育指标和行为学各项测试结果与对照小鼠对比差异没有统计学意义;囊胚冷冻雄鼠的生殖力(37.5％)和每胎产仔数[(6.7±2.5)只]与对照组[35.0％,(6.5±1.9)只]差异没有统计学意义. 结论 囊胚玻璃化冷冻出生的小鼠在生长发育、行为学特征和生殖力等方面和对照鼠无明显差异,表明小鼠囊胚玻璃化冷冻技术是安全和可靠的.     

不同体外受精方式对胚胎玻璃化冷冻复苏的影响

目的:观察常规体外受精和卵胞浆内单精子注射两种不同体外受精方式对胚胎玻璃化冷冻复苏的影响。方法:将移植冷冻复苏胚胎的患者(均为玻璃化法)分为两组。IVF组:新鲜周期采取常规体外受精方式而获得的胚胎;ICSI组:新鲜周期采取卵胞浆内单精子注射方式受精而得到的胚胎;比较两组的不孕类型、不孕原因以及冷冻复苏周期的复苏率、着床率、临床妊娠率和流产率等。结果:IVF组和ICSI组的复苏率、着床率、临床妊娠率差异无统计学意义(P>0.05),ICSI组的流产率明显高于IVF组但差异无统计学意义(P>0.05),IVF组和ICSI组原发不孕所占比例、继发不孕所占比例差异有统计学意义(P<0.05),IVF组和ICSI组男方因素不孕所占比例、输卵管因素不孕所占比例差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ICSI不影响胚胎玻璃化冷冻周期的复苏率、着床率及临床妊娠率,ICSI后胚胎玻璃化冷冻复苏流产率有升高的趋势,ICSI体外受精方式主要用于原发不孕患者以及男方因素导致的不孕患者。     

激光人工皱缩在玻璃化冷冻法保存人类囊胚中的效果分析

目的:评估囊胚玻璃化冷冻前用激光对囊胚腔进行皱缩的临床效果。方法:激光打孔使囊胚腔皱缩后将囊胚玻璃化冷冻(皱缩组)或直接将囊胚玻璃化冷冻(对照组),比较两组的临床效果。结果:317个囊胚解冻周期均进行了移植。其中对照组178例和皱缩组139例,两组年龄、不孕年限、内膜厚度、平均移植胚胎数、优质囊胚率、流产率、多胎妊娠率和异位妊娠率比较未见差异(P0.05);对照组的临床妊娠率(44.9%)、种植率(34.4%)均低于皱缩组(66.9%、48.5%)(P=0.001)。结论:囊胚玻璃化冷冻前使用激光打孔人工皱缩可显著提高临床妊娠和着床率,值得临床探索应用。     

中低强度激光人工皱缩在扩张期囊胚玻璃化冷冻复苏中的应用研究

目的通过中低强度激光人工皱缩囊胚腔联合快速玻璃化冷冻在囊胚冻融周期中的应用,为囊胚冷冻复苏周期提供稳定的技术基础。方法选取2015年9月-2017年3月在该院常规体外受精培养至第3天移植和或冷冻后剩余的可利用胚胎在三气培养系统中进行囊胚培养,参照Gardner囊胚评分标准,将发育至第5天或第6天的4CB以上的囊胚分成试验组和对照组。试验组采用中低强度激光打孔,使囊胚腔皱缩后行玻璃化冷冻,对照组直接行玻璃化冷冻。分析177例解冻囊胚周期,比较解冻囊胚周期两种方法冷冻复苏的复苏率、临床妊娠率、种植率、多胎妊娠率及流产率等。结果试验组解冻囊胚复苏率高于对照组,流产率、多胎率低于对照组,但差异无统计学意义(P0.05);试验组临床妊娠率、胚胎着床率显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.01);单囊胚移植多胎率显著低于双囊胚移植(P0.05)。结论应用中低强度激光人工皱缩囊胚腔联合玻璃化冷冻技术,能够提高囊胚冻融周期的胚胎复苏率、妊娠率、着床率,降低流产率、多胎率。     

玻璃化冷冻技术的研究进展

玻璃化冷冻技术是一种快速冷冻细胞或组织的方法,随着辅助生殖技术的发展而受到广泛关注.该项技术具有冷冻速度快、冻融损伤小,操作简单等优点,能够提高冷冻复苏后的存活率和妊娠成功率.玻璃化冷冻技术在临床应用中主要受到冷冻保护剂的类型和浓度、冷冻温度、冷冻速度及冷冻承载工具等一系列因素的影响.由于冷冻对象的不同,所实施的具体方法也不尽相同.该技术目前尚未成熟,如何优化人卵母细胞、胚胎及卵巢组织的玻璃化冷冻方案仍需要进行深入的研究.     

玻璃化冷冻技术的研究进展

玻璃化冷冻技术是一种快速冷冻细胞或组织的方法,随着辅助生殖技术的发展而受到广泛关注。该项技术具有冷冻速度快、冻融损伤小,操作简单等优点,能够提高冷冻复苏后的存活率和妊娠成功率。玻璃化冷冻技术在临床应用中主要受到冷冻保护剂的类型和浓度、冷冻温度、冷冻速度及冷冻承载工具等一系列因素的影响。由于冷冻对象的不同,所实施的具体方法也不尽相同。该技术目前尚未成熟,如何优化人卵母细胞、胚胎及卵巢组织的玻璃化冷冻方案仍需要进行深入的研究。     

三例造血干细胞移植术的护理体会

造血干细胞移植(HSCT)是通过大剂量放化疗预处理,清除受者体内的肿瘤或异常细胞,再将自体或异体造血干细胞移植给受者,使受者重建正常造血及免疫系统的一种治疗方法.按照采集造血干细胞的来源不同分为:骨髓移植、脐血移植、外周血造血干细胞移植等.造血干细胞迄今仍然是一种高风险、高费用、高难度的治疗方法.目前主要用于恶性血液病和非血液系统疾病.现对我科三例造血干细胞移植术的护理体会总结如下.     

卵子玻璃化冷冻的临床应用

目的探讨卵子玻璃化冷冻的临床应用可行性。方法选择2011年7月至2016年5月,于江苏省苏北人民医院生殖医学中心采用玻璃化冷冻技术保存的卵子,进行卵母细胞胞质内单精子注射(ICSI)的13例患者,共计15个冷冻卵子ICSI周期为研究对象,纳入冷冻卵子组。选择同期于本院生殖医学中心进行新鲜卵子ICSI的252例患者,共计288个新鲜卵子ICSI周期作为对照,纳入新鲜卵子组。回顾性分析2组ICSI周期的临床病例资料,统计学比较2组受试者一般临床资料,受精情况及胚胎质量,以及临床妊娠结局。本研究遵循的程序符合江苏省苏北人民医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试者知情同意,并与之签署临床研究知情同意书。结果 (1)2组患者的年龄、不孕年限、人体质量指数(BMI)、ICSI卵子数比较,差异均无统计学差异(P0.05)。(2)冷冻卵子组中,卵子解冻后复苏存活率为87.1%(108/124)。冷冻卵子组卵裂率、优质胚胎率,均较新鲜卵子组显著降低,2组卵裂率与优质胚胎率分别为89.0%比98.2%与35.4%比50.7%,2组比较,差异均有统计学意义(χ~2=27.274,P0.001;χ~2=5.871,P=0.016)。2组正常受精率、可利用胚胎率比较,差异均无统计学意义(P0.05)。(3)2组平均移植胚胎数比较,差异无统计学意义(P=0.822)。冷冻卵子组体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期的胚胎种植率、活产率,均显著低于新鲜卵子组IVF-ET周期,并且差异均有统计学意义(χ~2=5.534,P=0.017;χ~2=7.005,P=0.011);2组IVF-ET周期的临床妊娠率、自然流产率分别比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论卵子玻璃化冷冻、解冻后,再进行IVF-ET,可获得一定临床妊娠率,但卵子玻璃化冷冻技术仍会对卵子质量产生影响,进而影响胚胎质量和临床妊娠结局,此技术有待进一步改善。因本研究纳入样本量相对较小,卵子玻璃化冷冻技术保存的有效性,仍有待多中心、大样本、随机对照研究进一步证实。     

卵巢组织玻璃化冷冻的研究进展

冷冻保存胚胎、卵母细胞或者卵巢组织是目前保存女性生殖内分泌功能的可选途径。相比之下，卵巢冷冻的优越性是卵母细胞或胚胎冷冻无可比拟的。传统的冷冻技术已经在临床推广应用，但由于操作过程复杂、医疗仪器昂贵、耗费时间长等，使其在一般的实验室无法推广应用。玻璃化冷冻操作简单、省时省力、且能减小传统慢冻所造成的冰晶组织损伤，注定其必将为人所关注并将渐渐被推广。但迄今为止，玻璃化冷冻尚未形成一个完整的标准体系。综合近几年玻璃化冷冻研究进展，展望其研究前景和目前存在的问题，努力思考如何建立卵巢组织的玻璃化冷冻。     

人类卵母细胞玻璃化冷冻的研究进展

玻璃化冷冻技术已逐渐成为辅助生育技术中重要的应用技术之一,玻璃化冷冻可避免冻融过程中细胞内冰晶的形成,降低细胞损伤,在人类配子、胚胎的冷冻保存中取得了不少进展。近十几年来,玻璃化冷冻技术已成功应用于成熟卵母细胞、未成熟卵母细胞等方面的冷冻保存并取得成功。该技术操作简单、迅速快捷,正逐渐成为人类辅助生殖技术中重要的应用技术之一。本文综述了玻璃化冷冻技术在保存人类不同发育阶段卵细胞方面的研究进展。